甘薯病毒病害SPVD抗性鉴定方法及产量损失估计

第41卷第2期2014年4月植物保护学报ACTA PHYTOPHYLACICA SINICAVol．41No．2Apr．2014基金项目：国家甘薯产业技术体系建设项目（CAＲS-11-B-07），河南省农业科学院科研发展专项作者简介：王爽，女，1980年生，助理研究员，研究方向为植物病毒病害，E-mail ：wangshuang 9981@126．com *通讯作者（Author for correspondence ），E-mail ：zhangzhenchen@126．com 收稿日期：2013－07－25甘薯病毒病害SPVD 抗性鉴定方法及产量损失估计王爽1刘顺通2乔奇1张德胜1秦艳红1张振臣1*（1．河南省农业科学院植物保护研究所，河南省农作物病虫害防治重点实验室，农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室，郑州450002；2．洛阳市农林科学院，洛阳471022）摘要：为了建立规范、有效的甘薯病毒病害（sweet potato virus disease ，SPVD ）抗性鉴定方法，于2011—2012连续两年，利用田间人工嫁接病毒接穗的方法对12个甘薯品种进行抗性鉴定和产量损失测定。

结果显示，嫁接接种后，接穗成活率接近100%，12个品种都有不同程度发病，病情指数在51．0 95．2之间；感染SPVD 的甘薯植株叶绿素含量降低、蔓长缩短；单株薯块产量损失范围在55．1% 97．8%之间。

研究表明，供试的12个甘薯主栽品种感染SPVD 后均可引起严重的产量损失，且田间人工嫁接病毒接穗是一个有效的SPVD 抗性鉴定方法。

关键词：甘薯病毒病害；抗性鉴定方法；产量损失估计Methodology for identification of disease resistance of sweet potatocultivars to sweet potato virus disease and yield loss estimationWang Shuang 1Liu Shuntong 2Qiao Qi 1Zhang Desheng 1Qin Yanhong 1Zhang Zhenchen 1*（1．Institute of Plant Protection ，Henan Academy of Agricultural Sciences ；Henan Key Laboratory of Crop Pest Control ；IPM Key Laboratory in Southern Part of North China for Ministry of Agriculture ，Zhengzhou 450002，Henan Province ，China ；2．Luoyang Academy of Agricultural and Forestry Sciences ，Luoyang 471022，Henan Province ，China ）Abstract ：An effective method was developed for identification of sweet potato virus disease （SPVD ）resistance using artificial grafting virus scions in the field．The resistance of 12sweet potato varieties was evaluated and the yield losses were estimated from 2011to 2012．The results showed that survival of the scions was 100%，and 12sweet potato cultivars were infected with diseases to different degrees after graft inoculation with SPVD and the disease index was between 51．0and 95．2．The leaf chlorophyll content and vine length of sweet potato plants infected with SPVD decreased compared with those of healthy sweet potato plants ，and grafting virus scions in the field was an effective method for identification of SPVD resistance．The tuber yield loss was in the range of 55．1%－97．8%．It showed that the 12sweet potato cultivars tested were susceptible to SPVD．Key words ：sweet potato virus disease （SPVD ）；resistance identification method ；yield loss estimation 甘薯是重要的粮食、饲料、工业原料和新型能源块根作物，我国是世界上最大的甘薯生产国［1］，每年因病毒病害造成严重的产量损失。

目前，已报道侵染甘薯的病毒有30余种［2］，其中甘薯病毒病害（sweet potato virus disease，SPVD）是甘薯上严重的病毒病害之一［3］，对甘薯产量影响较大，严重时产量损失达90%以上，甚至绝收。

SPVD是由毛形病毒属Crinivirus的甘薯褪绿矮化病毒（sweet potato chlorotic stunt virus，SPCSV）和马铃薯Y病毒属Poty-virus的甘薯羽状斑驳病毒（sweet potato feathery mot-tle virus，SPFMV）共同侵染甘薯引起的［3］，当SPCSV 和SPFMV共同侵染甘薯时，SPCSV的含量变化不明显，而SPFMV的含量会比其单独侵染时增加600倍［4］。

感染SPVD的甘薯表现叶片扭曲、畸形、褪绿、明脉以及植株矮化等症状［5］。

我国广东、江苏、四川、安徽和福建等甘薯产区均已有SPVD发生，说明SPVD在我国已有较广泛的分布并呈逐年上升趋势［6］，有必要加强对SPVD的防控。

目前，对SPVD 的防治尚无特别有效的化学药剂，筛选和种植抗病品种是最经济有效的防治手段，加快抗SPVD甘薯品种的筛选与培育已是当务之急。

常用的SPVD抗性鉴定方法是利用感病的巴西牵牛作为接穗进行嫁接接种，但巴西牵牛感染SPVD后往往植株严重矮化，死亡率较高，因此，巴西牵牛不是理想的接穗［7］。

Mwanga等［7］2012年研究发现，以感染SPVD的甘薯材料作为接穗，利用改进的劈接（cleft-grafting）技术进行嫁接，可使感病接穗的成活率从5%提高到100%，可快速鉴定甘薯群体对SPVD的抗性。

由于SPVD在我国是一个新发生的病害，目前国内还缺乏统一、规范的SPVD抗性鉴定方法，无法对我国生产上的主栽甘薯品种进行抗性鉴定和评价。

因此，有必要建立一个有效的SPVD抗性鉴定方法。

本试验尝试以感病甘薯植株为接穗，在田间利用侧接的方法进行嫁接接种，对我国12个主栽甘薯品种进行抗性评价和产量损失测定，以期筛选出抗（耐）病品种，为甘薯品种的合理利用提供依据。

1材料与方法1．1材料供试甘薯品种：济薯18、北京553、商薯19、徐薯25-2、梅营8号、徐薯25、豫薯8号、郑薯20、运红宝、豫薯12号、徐薯18、栗子香，均由本实验室保存。

病毒接穗：田间采集的感染SPVD的甘薯植株，经血清学和分子生物学鉴定后繁殖薯块保存［6］，每年3月份，将保存的感染SPVD的薯块在防虫网室内进行育苗、快繁，将其茎蔓作为接穗供嫁接接种。

1．2方法1．2．1病毒接种以感染SPVD甘薯植株的茎蔓作为接穗，待鉴定的健康甘薯品种植株为砧木，采用侧接的方式进行嫁接。

2011年和2012年嫁接时间分别为6月2日和5月30日，大田移栽时间分别为6月10日和6月8日。

每个品种共嫁接30株。

以嫁接接种的植株为处理，每10株种1行，邻近行种10株未嫁接的健康植株作为对照，重复3次，每个品种共种植30株，采用随机区组排列。

田间试验在洛阳市农林科学院试验田进行。

1．2．2发病情况调查于2011年7月15日和2012年7月12日进行病情调查。

以株为单位，每小区调查全部植株，记载发病株率和严重度，并计算病情指数。

病情指数=∑（各级病株数ˑ相对级值数）/（调查总株数ˑ7）ˑ100。

SPVD病情分级标准：0级：无症状；1级：有轻微的症状，包括轻微的褪绿或紫斑；3级：有中度症状，包括褪绿斑、脉明、中脉褪绿、斑驳和花叶；5级：植株没有矮化，但表现严重的明脉、斑驳、褪绿斑和花叶等症状；7级：植株严重矮化、叶片变小畸形和严重褪绿等症状。

1．2．3叶绿素含量、蔓长及生物产量测定采用叶绿素测定仪进行相对叶绿素含量（SPAD）测定，每小区取30片叶进行测定，取其平均值作为该小区的SPAD值。

2011年和2012年测定时间分别为8月29日和7月31日。

在甘薯生长期间，2011和2012年分别于7月15日和7月31日测量供试品种主茎的蔓长，每小区测量全部植株，取其平均值作为该小区的蔓长。

甘薯收获时调查全部小区的地上部鲜重和薯块产量，并计算产量损失率，产量损失率（%）=（对照小区产量－处理小区产量）/对照小区产量ˑ100。

2011年和2012年收获时间分别为10月19日和10月22日。

1．3数据分析采用SAS8．2软件中的最小显著差数法（LSD）进行方差分析（ANOVA）。

2结果与分析2．1不同甘薯品种的发病严重度比较嫁接接种后，供试的12个甘薯品种均出现了SPVD症状，不同品种间的严重度有明显差异。

2011年各品种的病情指数在51．0 95．2之间，济7712期王爽等：甘薯病毒病害SPVD抗性鉴定方法及产量损失估计薯18病情指数最低；2012年病情指数在56．7 85.5之间，栗子香的病情指数最低。

各品种两年的发病严重度并不一致，但病情指数都在50．0以上，说明供试的12个甘薯品种均不抗SPVD（表1）。

表112个甘薯品种的发病严重度比较Table1Comparison of disease severities of12sweet potato varieties品种Variety病情指数Disease index20112012品种Variety病情指数Disease index20112012济薯18Jishu1851．0ʃ3．0fE76．7ʃ5．8abAB豫薯8号Yushu886．7ʃ2．6bB63．3ʃ5．8cdBC北京553Beijing55366．6ʃ4．5deD73．3ʃ5．8abcAB郑薯20Zhengshu2069．0ʃ4．6deD80．0ʃ10．0abAB商薯19Shangshu1977．1ʃ1．1cC75．9ʃ5．2abcAB运红宝Yunhongbao71．4ʃ0．9cdCD71．5ʃ7．9bcABC徐薯25-2Xushu25-265．1ʃ2．8eD80．0ʃ10．0abAB豫薯12Yushu1295．2ʃ4．4aA80．0ʃ10．0abAB梅营8号Meiying853．0ʃ5．5fE70．0ʃ10．0bcABC徐薯18Xushu1892．9ʃ1．9aAB70．0ʃ10．0bcABC 徐薯25Xushu2591．9ʃ4．6abAB85．5ʃ4．8aA栗子香Lizixiang92．4ʃ2．2abAB56．7ʃ5．8dC 表中数据为平均数ʃ标准差。