透明质酸的提取工艺研究3稿

提取法制备透明质酸的研究

１２．
ห้องสมุดไป่ตู้原理
近年来在高级化妆品中显示出重要用途；带中脐含有透明质酸，过脱水、解可以除去其中的蛋通酶
白质及核酸，而提取并制得透明质酸产品。从关键词：明质酸；取；蛋白酶；透提链氯仿；乙醇
１将脐带加适量丙酮进行脱水处理；）
文章编号：０８７１（０２０一Ｏ６ｏ１ — ４９２０）ＯＯ一１０３
２脱水后的干燥脐带，去血管、碎，水）抽剪加
浸泡，拌成匀浆；搅
透明质酸（ｙｌｒｎｃＡｉ，写Ｈ是一种Ｈａｏｉｃｄ简ｕＡ）
置，絮状沉淀析出，滤，淀溶于ＮＣ溶液，有过沉ａ１
构和理化性质，有机体内显示出多种重要的生在理功能，有特殊的保水、湿作用；子量大的具保分可成膜于皮肤表面，到强的保湿、滑作用，起润分子量小的可渗入真皮层，进血液循环、善中间促改代谢，而使皮肤光滑、嫩，此近年来成为新从柔因型高级化妆品用新型保湿剂。天然透明质酸广泛存在于人和动物的各种组织中，脐带、乳动物血浆、眼球、鱼皮肤如哺牛鲨等。本文以易得的脐带为原料，提取法制备透用明质酸，实验方法及实验条件进行了初步探讨，对并制得纯度较高的透明质酸产品。

透明质酸生产工艺

透明质酸生产工艺透明质酸（hyaluronic acid, HA）是一种在生物体内广泛存在的高分子聚糖，也是一种天然保湿因子。

透明质酸具有良好的保湿性能和生物相容性，因此被广泛应用于医药、化妆品和食品等领域。

下面将对透明质酸的生产工艺进行简要介绍。

透明质酸的生产可以通过两种途径进行：微生物发酵法和从鸡冠骨中提取法。

微生物发酵法是目前应用较广泛的生产透明质酸的方法。

此法首先需要选择适合发酵生产的微生物菌种，常用的包括链球菌属、肺炎球菌属、乳酸菌属等。

接种菌种后，培养基中添加适量的碳源、氮源和一些辅助物质，促进菌种的生长和透明质酸的合成。

发酵周期通常为3-7天，菌体生长后通过离心分离，获得含有透明质酸的菌体。

得到含有透明质酸的菌体后，需要将菌体溶解或微生物发酵粉未经溶解经部分酶解液化后进行提取。

提取透明质酸时，常用的方法包括水解提取法和碱液提取法。

水解提取法是先将菌体经过水解反应，使透明质酸脱落出来，然后通过离心或过滤等方式分离出透明质酸。

碱液提取法则是将菌体溶解于碱液中，然后经过沉淀、洗涤和离心等步骤获得透明质酸。

从鸡冠骨中提取透明质酸是另一种获得透明质酸的方法。

鸡冠骨中富含透明质酸，通过一系列的化学处理，可以将透明质酸从鸡冠骨中提取出来。

主要步骤包括去脂处理、酸解、碱化、沉淀和精制等过程。

无论是微生物发酵法还是从鸡冠骨中提取法，获得的透明质酸都需要经过后续的精制和纯化处理。

这些处理包括沉淀、过滤、离心、洗涤、浓缩和干燥等步骤，以获得高纯度的透明质酸产品。

总结起来，透明质酸的生产工艺包括微生物发酵法和从鸡冠骨中提取法。

微生物发酵法通过选择适合的菌种进行发酵，然后进行提取和纯化，得到透明质酸。

从鸡冠骨中提取法则是通过一系列化学处理步骤将透明质酸从鸡冠骨中提取出来，然后经过精制和纯化处理，得到高纯度的透明质酸产品。

以上是透明质酸生产的主要工艺简介。

论文：透明质酸的研究进展

论文：透明质酸的研究进展透明质酸的研究进展摘要：透明质酸(Hyaluronic Acid简称HA)是一种国际上公认的生物大分子保湿剂，用于眼科显微手术、关节炎治疗、高级化妆品等领域。

目前，透明质酸的生产方法逐渐由动物组织提取法转向微生物发酵法.。

采用微生物发酵法生产透明质酸，培养条件选择pH6．5、摇速100次/分、培养温度37℃、培养时间48小时，添加生产因子，透明质酸产量增加近一倍。

关键词：透明质酸，微生物发酵法，培养条件，生产因子，影响微生物发酵的因素，透明质酸的应用前景透明质酸（HA）又称玻璃酸钠，由β–D葡萄糖醛酸和β–D–N–乙酰氨基葡萄糖的双糖单位反复交替连接而成的高分子物质，是一种具有特殊功能的胞外酸性粘多糖，是构成皮肤真皮层的物质，广泛应用于脊椎动物的各种组织间质中。

自20世纪30年代Mayer首次从动物眼玻璃体中提取得到HA后，HA的生产和应用研究至今已有70余年的历史。

HA有独特的黏弹性和生理功能，是细胞外基质的主要成分，具有保水、润滑、调节渗透压等作用，可保护正常细胞免受毒性细胞、自由基等的侵袭，并可影响细胞增生、分化等。

因此，HA广泛用于骨科、眼科、妇科、外科手术后防粘连、整形美容及保健食品等领域。

近年的研究结果展示了HA有许多新的应用领域，并出现了新的衍生物，为开发HA的新用途奠定了基础。

１．目前HA的工业生产有两种方法:即提取法和发酵法。

提取法主要利用鸡冠、人脐带、牛眼的玻璃体等为原料，进行生产，而且组织必须是新鲜采集，这样不但动物组织来源困难，且价格昂贵，成本高，这给HA的生产带来了一定的困难。

发酵法生产HA，是利用链球菌将廉价的葡萄糖转化为HA，不依赖于动物器官，产量不受限制，成本也低，发酵液中的HA易于分离纯化，产品纯度高，但发酵法HA的产量不高。

为此，我们对发酵法制备HA的工艺条件进行了实验研究，旨在提高HA产量，降低生产成本。

（１）．透明质酸的动物组织提取方法：以公鸡鸡冠为原料、以黄牛眼睛为原料和以人脐带为原料提取透明质酸。

透明质酸的分离纯化工艺的研究

透明质酸的分离纯化工艺的研究近年来，随着经济和科技的发展，人们对于生物活性物质的需求量也越来越大。

透明质酸是一种重要的生物活性物质，它不仅能促进植物根部的发育，还能促进植物的逆境耐受能力。

此外，它还用作植物生长调节剂。

因此，透明质酸的分离纯化工艺的研究一直受到科学家们的关注。

一、透明质酸的组成透明质酸是一种多糖体，主要由半乳糖、糖类、半糖、芳香糖、醛糖、醇糖、交联糖、硫醇等组成。

其中，主要由葡萄糖、果糖、半乳糖、酰乙酸、林糖和半乳糖组成。

这些糖类结构形式不一，配体结构也不同，大体可分为普通糖和交联糖两大类。

二、透明质酸的分离纯化工艺1、液体色谱法采用液体色谱技术可以对不同类型的透明质酸进行分离纯化。

液体色谱技术采用不同浓度的氯仿溶液，在不同梯度条件下沉淀葡萄糖、果糖、半乳糖等糖类。

这种方法不仅可以从葡萄糖中有效地分离出半乳糖、糖类和半糖，而且可以分离出高纯度的交联糖的浓缩物。

2、层析法层析法是一种分离纯化透明质酸的有效方法，主要采用不同溶剂和不同浓度的饱和醇溶液来分离纯化作物中的透明质酸。

在这种方法中，根据不同的溶解度，将葡萄糖、半乳糖、糖类和醇糖分为不同的层，再分别纯化。

3、反渗透膜法反渗透膜法是一种常用的分离纯化透明质酸的方法。

通过改变温度、压力和浓度，通过反渗透膜将葡萄糖、半乳糖、糖类和半糖分离出来，从而实现质量高的透明质酸的分离纯化。

三、结论随着科学技术的发展，透明质酸的分离纯化工艺也得到了改善。

目前，液体色谱法、层析法和反渗透膜法是三种常用的分离纯化透明质酸的方法。

以上三种方法在分离纯化透明质酸中都取得了良好的研究成果，但仍需要深入研究，更好地服务于精细化工领域。

蛋壳膜中透明质酸的提取及部分特性研究

食品工业科技S cience and Technology of Food Industry研究与探讨2008年第06期172　蛋壳膜中透明质酸的提取及部分特性研究赵玉红1,2,迟玉杰1,3(11东北农业大学食品学院,黑龙江哈尔滨150030;21东北林业大学林学院,黑龙江哈尔滨150040)摘　要:分别采用胰蛋白酶和胃蛋白酶降解蛋壳膜,从中提取透明质酸。

通过正交实验考察酶解温度、pH 、酶用量、料液比和酶解时间对透明质酸提取量的影响,确定采用胰蛋白酶酶解的最佳条件为:温度为50℃,时间为7h,料液比为1∶40,酶用量为8000U /g,pH 为815,提取率为131294mg/g;采用胃蛋白酶酶解的最佳条件为:温度为37℃,时间为5h,料液比为1∶40,酶用量为11000U /g,pH 为310,提取率为241494mg/g 。

结果表明,胃蛋白酶提取透明质酸的效果好于胰蛋白酶,且壳膜中含有重要数量的透明质酸。

通过红外光谱分析和测定葡萄糖醛酸、氨基葡萄糖的含量,对提取的透明质酸进行分析鉴定。

关键词:蛋壳膜,透明质酸,提取,酶,特性Extrac ti o n and p a rti a l cha rac te ri za ti o n o f hya l u r o n i c ac i d fr om egg she ll m em b raneZHAO Y u -hong 1,2,CH IY u -ji e1,3(11Food College,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China;21Forestry College,Northeast Forestry University,Harbin 150040,China )Ab strac t:Hya lu ron ic a c i d (HA )w a s e xtra c te d from e g g s he llm em b ra ne w ith tryp s in a nd p ep s in,re sp e c ti ve ly 1The e ffe c ts of e xtra c ti on tem p e ra tu re,p H,the am oun t of e nzym e,the ra tio of m a te ria l -fl u i d,a nd e xtra c tion ti m e w e re i nve s tig a te d w ith o rthog ona l e xp e ri m e n t 1The op ti m ize d p a ram e te rs of tryp s i n w e re ob ta i ne d a nd s how n a s fo llow s:e xtra c tion tem p e ra tu re 50℃,p H 815,am oun t of e nzym e 8000U /g,the ra tio of m a te ria l -flu id in 1∶40,e xtra c ti on ti m e 7h,the yi e l d ing ra te of hya lu ron ic a c id w a s 131294m g /g (e g g s he ll m em b ra ne )1The op ti m i ze d p a ram e te rs of p ep s in w e re ob ta i ne d a nd s how n a s fo ll ow s:e xtra c tion tem p e ra tu re 37℃,p H 310,am oun t of e nzym e11000U /g,the ra tio of m a te ria l -flu id in 1∶40,e xtra c tion ti m e 5h,the yi e l d ing ra te of hya lu ron ic a c i d w a s 241494m g /g (e g g s he llm em b ra ne )1Th i s i nd ic a te d tha t the e ffe c t of the yie ld ing ra te w ith p ep s in w a s b e tte r tha n tryp s in 1A nd i nd ic a te d tha t the re w e re s i g n ifi c a n t q ua n titie s of HA c ou ld b e e xtra c te d in e g g s he ll m em b ra ne 1The c on te n t a nd p u rity w e re te s te d b y infra c tion sp e c trum ,g luc u ron i c a c i d a nd N -a c e tylg luc os am ine 1Ke y wo rd s:e g g s he llm em b ra ne;hya lu ron i c a c i d;e xtra c tion;e nzym e;c ha ra c te ri za ti on中图分类号:TS25311 文献标识码:A 文章编号:1002-0306(2008)06-0172-03收稿日期:2008-04-11　3通讯联系人作者简介:赵玉红(1968-),女,副教授,博士研究生,研究方向:食品深加工及综合利用。

鸡冠中透明质酸提取工艺条件的研究

ＨａｒｂｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｏｍｍｅｒｃｅ，Ｈａｒｂｉｎ１５００７６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＡｓｔｈｅｒａｗｍａｔｅｒｉａｌｏｆｆｒｅｓｈｃｏｃｋｓｃｏｍｂｗｈｉｃｈｉＳｄｒｉｅｄｔｏｃｏｍｂｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｅｘ．ｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｅｔｈａｎｏ１ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ，ｃｈｏｉｃｅｏｆｅｔｈａｎｏｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｓｏｌｉｄ．１ｉｑｕｉｄｒａｔｉｏ．ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅａｓｉｎｌｆｕｅｎｔｉａｌｆａｃ — ｔｏｒｓ．Ｔｈｒｏｕｇｈｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒｓａｎｄｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ：ｈｙａｌｕｒｏｎ．ｉＣａｃｉｄｅｘｔｒａｃｔａｎｄｅｔｈａｎｏｌｏｆ１：２ｖｏｌｕｍｅｒａｔｉｏ。ｔｈｅｅｔｈａｎｏｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗａｓ８５％．ｅｘｔｒａｃ．ｔｉｏｎｔｉｍｅｗａｓ２６ｈ，ＨＡｈａｖｅｂｅｅｎｐｒｅｐａｒｅｄｂｙｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗａｓ４．８４％．Ｄｅｔｅｃｔｅｄ

兽疫链球菌的改良及其发酵生产透明质酸论文

兽疫链球菌的改良及其发酵生产透明质酸论文摘要透明质酸作为一种重要的生物高分子化合物，具有广泛的应用价值。

然而，其传统的生产方法存在一些问题，如成本高、产量低等。

因此，本论文旨在研究兽疫链球菌的改良及其在透明质酸生产中的应用。

通过优化兽疫链球菌的培养条件、改良发酵工艺等方法，提高透明质酸的产量并降低生产成本，从而推动透明质酸产业的发展。

引言透明质酸是一种多糖酸，是由葡萄糖和N-乙酰葡萄糖胺通过β-(1,3)和β-(1,4)的糖苷键连接而成。

它具有很高的黏性和保水性，被广泛应用于医药、化妆品和食品等领域。

传统的透明质酸生产主要依赖于动物组织的提取，这种方法成本高昂且资源有限。

因此，寻找更加经济、高效的透明质酸生产方法具有重要意义。

兽疫链球菌是一种常见的细菌，广泛存在于土壤、水体等环境中。

它具有很强的代谢能力和适应性，可以利用多种底物产生透明质酸。

因此，通过改良兽疫链球菌的生理特性和发酵工艺，可以提高透明质酸的产量和质量，并降低生产成本，从而推动透明质酸产业的发展。

兽疫链球菌的改良兽疫链球菌的改良主要包括改良菌种、优化培养条件和遗传工程改造等方面。

改良菌种传统的透明质酸生产菌种主要为野生兽疫链球菌，但其透明质酸产量较低且生长较慢。

因此，研究人员通过随机诱变和遗传工程等方法，改良了菌种的生理特性。

例如，选育出透明质酸高产菌株，能够在较短时间内产生大量的透明质酸。

优化培养条件透明质酸的产量受到兽疫链球菌的培养条件的影响较大。

研究人员通过优化培养基的组成、调节培养条件等方式，提高透明质酸的产量。

例如，添加适当的氮源和碳源可以促进兽疫链球菌的生长和代谢，从而提高透明质酸的产量。

遗传工程改造通过遗传工程改造兽疫链球菌，可以大幅提高其透明质酸产量。

研究人员利用基因工程技术，将透明质酸合成相关基因导入兽疫链球菌中，从而增强其透明质酸合成能力。

此外，通过基因敲除、基因表达调控等方法，也可以调控透明质酸产生相关基因的表达水平，提高透明质酸的产量。

透明质酸的提取工艺研究3稿

透明质酸的提取工艺研究摘要：论述了透明质酸的结构和理化性质，各种提取方法以及各方面的应用和发展前景。

关键词：生化药物，透明质酸 (HA),提取工艺生物技术是21世纪技术的核心，它是利用生物体或其组织部分发展产品的技术体系，利用生物技术研究和开发的。

生物技术药物与生化药物没有严格的界限，可以利用现代生化技术生产，还可以用化学方法合成或修饰，这些药物均具有疗效高、安全性强、生产污染小、原料取自天然、可生物利用等优点。

在人类面临健康资源、环境、人口危机的今日，更显出其独有的魅力，在制药业已异军突起，而且生物技术制药市场方兴未艾。

透明质酸是一种性能优良的生化物质，应用极其广泛，它的应用开发和生产是目前生化药界比较热门的课题。

引言透明质酸（Hyaluronicacid简称HA）又名玻尿酸，是一种酸性粘多糖类高分子化合物，基本结构由两个双糖单位D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺组成的大型多糖类。

分子式：（C14H20NNaO11）n，其结构式如下如所示：与其它粘多糖不同，它不含硫。

广泛存在于人和动物的结缔组织、眼球玻璃体、细胞间质、关节滑膜液、脐带、角膜、鸡冠、鸡胚及细菌壁中。

由于其具有特殊的生理作用、独特的流变学特性和极强的持水保湿能力,在化妆品工业、医学研究、临床治疗等领域得到了广泛的应用。

它的透明质分子能携带500倍以上的水分，为目前所公认的最佳保湿成分，目前广泛的应用在保养品和化妆品中。

1 结构及理化性质HA高聚物的结构单元由一分子D-一葡萄糖醛酸与一分子N-乙酸氨基葡萄糖以β-1，3糖苷键连接而成，此单元的N-乙酸胺基葡萄糖又以β-1，4 糖苷键与另一单元的D- 葡萄糖醛酸相连分子量通常为数十万。

HA 具有以下理化特征：1）无定形物质；2）水溶液带负电；3）分子链间成紊乱的网状结构；4）水溶液有较好的粘弹性和渗透压；5）分子存在大量的羟基2透明质酸的提取方法、ＨＡ的生产工艺主要分为两大类：以动物组织为原料的提取法和细菌发酵法。

发酵法生产透明质酸的工艺研究

间大１０１０倍，国际上公认的最好的保湿剂。透明３是质酸具有保湿、养、营润肤等作用，因而广泛地用于
１材料与方法
１１材料．１１１供试菌株．．ＮＣＡＦ一０６株由本实验室保存。３菌
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发酵法生产透明的质酸工艺研究
罗瑞明
（宁夏农学院食品科学系，宁夏永宁，００）７１５５
摘要本文主要研究兽疫链率茵（ＡＦ一０６产透明质酸的条件及其特性。正交实验表ＮＣ３）
明，产透明质酸的最合适培养基是：淀粉３，２酵母膏１蛋白胨２轻质碳酸钙０１％蔗糖％，％，％，、％，磷酸氢二钾０２硫酸镁０１．％，．％。在３，７ｒ发酵４７１ｐ０￣，０小时，酵液中透明质酸的含量达发
１１３权器与设备、、
显微镜
可控硅控温水种，已报道的有溶血性链球菌，如骧脓链球菌（Ａ群）兽疫链球菌（、ｃ群）、马链球菌（ｃ群）类马链球菌（、ｃ群）缺乳链球菌（、ｃ群）鸡霍烂杆菌等。Ａ群链球菌系人体致病菌．、不宜作为生产菌种，ｃ群链球菌为非人体致病菌，比较适合于工业生产。国际近年来利用ｃ群链球菌生

透明质酸的研究

透明质酸的生物研究及其应用王丹丹学号：D1*******摘要：粘多糖是广泛存在于动物体内的一类多糖,动物体内的多糖除了作为能量代谢的糖元外,基本上都属于粘多糖。

透明质酸是粘多糖中最具代表性的一种,因为透明质酸被认为是唯一几乎存在于从细菌到人类所有动物体之中的粘多糖。

透明质酸具有多样的生理功能和优良的物化性质,同时也是我国卫生部公布的第一批新资源食品之一,已被广泛应用于医药、食品、化妆品等领域。

随着对透明质酸研究的深入,透明质酸在组织工程、纳米材料等领域也显示出了巨大的应用潜力。

关键词：透明质酸；化妆品工业；医药；物理凝胶；纳米材料；研究进展ABSTRACT:Mucopolysaccharide is a kind of polysaccharides that widely exists in the animal’s body. Except the glycogen that is metabolized as the energy, all the polysaccharides in the animal’s body belong to the mucopolysaccharide. Among then hyaluronan(HA) is the most representative mucopolysaccharide, because the HA was supposed to the only polysaccharides that exists in all animal species, from bacteria to human being. HA has the multiple physiological functions and excellent physicochemical properties.Moreover, HA has been permitted to be used in food by China’s Ministry of Health.Nowadays, HA is widely used in medicine, food and cosmetic industry. With the deepening of the research on HA, it also shows a great application potential of HA in the areas of tissue engineering, naomaterials, etc.Keywords:hyaluronan; cosmetic industry; medicine；physical cross-linking gelatin gel; naomaterials ; research progress1.透明质酸的化学结构以及性质透明质酸,又名玻璃酸或玻尿酸,是一种非常重要的直链聚阴离子粘多糖,由（1→4）β葡萄糖醛酸（1→3）β乙酰氨基葡萄糖双糖重复单元组[1]。

发酵液中透明质酸的分离纯化方法

发酵液中透明质酸的分离纯化方法摘要: 微生物发酵法是生产透明质酸的主要方法，透明质酸微生物发酵液中往往都含有蛋白质、核酸等杂质[1],分离纯化是发酵法制备高分子量、高纯度透明质酸的关键环节，因此需要分离纯化。

只有高纯度的透明质酸才能更好的发挥其工业效用,但是分离纯化的方法却多种多样。

目前主要方法有过滤法、凝胶层析法、离子交换层析法等,而不同的方法又将导致操作、成本、和纯度的不同。

因此本文将从多方面多角度综合分析各种透明质酸分离纯化方法。

本文探讨了透明质酸发酵液的特性和分离纯化过程中工艺条件对透明质酸分子量和结构的影响[2]，对预处理、分离、纯化各阶段的工艺方法进行了系统比较和分析[3]，指出了透明质酸分离纯化工艺中存在的问题，并提出了今后分离纯化研究的重点关键词:透明质酸;发酵液;分离纯化工艺一、透明质酸介绍透明质酸(Hyaluronic acid,简称HA)又名玻璃酸,是一种由D-N-乙酰氨基葡萄糖和D-葡萄糖醛酸为结构单元的酸性高分子粘多糖。

HA具有许多天然多糖共有的性质:呈白色,为无定形固体,无臭无味,有强吸湿性,溶于水,不溶于有机溶剂。

它是一种国际上公认的生物大分子保湿剂,用于眼科显微手术、关节炎治疗、高档化妆品、食品添加剂等领域。

二、透明质酸的作用1、在临床医学方面(1)眼科由于透明质酸分子为高分子化合物,不具抗原性,不致敏,不发生免疫反应,无热原性,无色透明,无胶质渗透作用,具有高赫性和高弹性,理化性质稳定透明质酸可广泛的应用于滴眼液、干眼病的治疗、青光眼的手术、白内障的手术、泪道探通术和一些眼外伤手术[4]。

(2)骨科HA在骨科领域主要应用在关节疾病中。

[5]HA是构成关节软骨和滑液的主要成分,关节中的HA主要是由滑膜细胞及单核吞唆细胞合成[6]。

(4)药物透明质酸与甲壳素制成缓释、控释材料既具有透明质酸的豁膜薪附作用,同时有甲壳素的渗透促进效果[7,8]。

它们联合使用在体外试验中表现出缓释和促进药物吸收利用的特点[9,10,11]2、在化妆中的应用透明质酸具有特殊的保水作用,高分子量的透明质酸最多可以持水6L/g,因而是一种理想的天然保湿因子。

发酵液中分离提纯透明质酸

发酵液中分离提纯透明质酸摘要:透明质酸微生物发酵液中往往都含有蛋白质、核酸等杂质,因此需要分离纯化。

只有高纯度的透明质酸才能更好的发挥其工业效用,但是分离纯化的方法却多种多样。

目前主要方法有过滤法、凝胶层析法、离子交换层析法等,而不同的方法又将导致操作、成本、和纯度的不同。

因此本文将从多方面多角度综合分析各种透明质酸分离纯化方法。

关键词:透明质酸多糖发酵分离提纯过滤凝胶层析离子交换透明质酸(Hyaluronic acid,简称HA)又名玻璃酸,是一种由D-N-乙酰氨基葡萄糖和D-葡萄糖醛酸为结构单元的酸性高分子粘多糖。

HA 具有许多天然多糖共有的性质:呈白色,为无定形固体,无臭无味,有强吸湿性,溶于水,不溶于有机溶剂。

它是一种国际上公认的生物大分子保湿剂,用于眼科显微手术、关节炎治疗、高档化妆品、食品添加剂等领域[1]。

1 分离提纯透明质酸发酵法生产的HA具有分离精制容易,保湿性强,品质稳定,产量大等优点,目前已得到广泛使用,并已成为研究HA生产的主要方向。

由于微生物发酵液中提取的透明质酸粗品都含有菌体,杂蛋白、核酸等杂质,需要进一步分离纯化。

以下简单介绍几种工业上常用的发酵液中透明质酸的分离提纯的方法。

1.1 过滤法过滤法分离纯化发酵液中的HA是一种简单有效并可以规模化生产HA的分离纯化方法,可以有效地除去菌体和杂蛋白,对分子量的影响相对较小。

邓禹等[2]采用25g/L三氯乙酸灭活菌体并使蛋白质变性沉淀,以发酵液质量 1.2%的混合硅藻土为过滤助剂,过滤温度为60℃,pH为7.0的透明质酸发酵液预处理工艺,完全去除了透明质酸发酵液中的菌体和蛋白质等杂质。

采用这一工艺得到的成品透明质酸中葡萄糖醛酸含量达46.39%,蛋白质含量仅为0.047%,分子量为190万,提取收率为91.3%。

这种方法利用三氯乙酸灭活菌体并使蛋白质变性沉淀,然后以硅藻土作为过滤助剂吸附、截留蛋白质和菌体的透明质酸发酵液预处理方法。

透明质酸论文

透明质酸在化妆品中的应用前言透明质酸（玻璃酸）（hyaluronicacid，HA）具有独特的分子结构和理化性质，在机体内显示出多种重要的生理功能，如润滑关节，调节血管壁的通透性，调节蛋白质、水、电解质扩散及运转，促进创伤愈合等。

它具有特殊的保水作用，是目前发现的自然界中保湿性最好的物质，被称为理想的天然保湿因子。

目前透明质酸的生产主要有两种方法，一种是从动物组织中提取，另一种是微生物发酵法。

1．透明质酸的来源透明质酸是Meyer和Palmer于1934年首次从牛眼睛的“Vitreous humor”(玻璃状液)中发现的。

目前常用的透明质酸技术有三种：动物组织提炼，微生物发酵，化学合成。

发酵法生产时HA工业的一场革命，而现在基因重组生产HA是比较新颖的一种方法，至于人工合成HA是正处于研发阶段。

从人和动物的结缔组织可提取得到透明质酸，如公鸡冠中透明质酸含量为每公斤7.5克。

其它一些动物组织如猪皮、牛眼、牛鼻软骨、人脐带中都含有一定量的透明质酸。

由于原料有限，从动物组织中提取透明质酸的方法很难形成大规模生产。

在20世纪80年代，Kendall 等，在链球菌等菌株中采用发酵法或酶解法得到HA。

它是利用某些种属的链球菌在生长繁殖过程中，向胞外分泌以HA为主要成分的荚膜而形成的，即为微生物发酵法得到HA。

微生物发酵法与动物组织提取法相比，成本低，生产规模不受动物原料限制。

发酵液中HA 以游离状态存在，易于分离、纯化和形成规模化工业生产，无动物来源的致病病毒污染等优点。

特别是欧洲及其它一些地区牛病盛行的今天，用微生物发酵法生产的透明质酸,更显它的优越性。

2.透明质酸的应用及功效经过半个多世纪的研究，人们对透明质酸的结构、理化性质和生理功能已有了明确的认识，其应用范围也越来越广。

在化妆品领域，它是优良的保湿剂及营养成分的渗透剂，并能修复受损细胞，使其得以恢复。

特别注意的是，透明质酸的护肤功能取决于分子量和用量，透明质酸的分子量越大，则分子间的相互缠绕作用越大，形成更广的分子网络，在皮肤表面形成的黏弹性膜具有更有效地保湿护肤功能。

发酵法生产透明质酸的工艺研究

第 23 卷第1期宁夏农学院学报 Vol . 23 No. 1 2002 年 Journal of Ningxia Agricultural College 2002
文章编号 :1004 - 5260 (2002) 01 - 0033 - 04
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咔唑法试剂 : (1) 0. 025M 的四硼酸钠浓硫酸 :4. 77g Na2B4O7 ・ 10H2O + 500mlH2 SO4 ( CR)
1. 1. 2. 2 种子培养基
MgSO40. 5g 水 1000ml pH7. 0～7. 5 琼脂 20g
葡萄糖 20g 胰蛋白胨 8g 酵母膏 2g 牛肉膏 4g
1. 1. 2. 3 发酵液成分
Na2 HPO40. 5g MgSO40. 5g 水 1000ml
葡萄糖 ; 蔗糖 ; 酵母膏 ; 蛋白胨 ; 碳酸钙 ; 磷酸二氢钾 ; 硫酸镁。 1. 1. 3 仪器与设备显微镜可控硅控温水浴锅恒温振荡仪超净工作台数显电热培养箱电热手提压力蒸汽消毒器 721 分光光度计 , 电热鼓风干燥箱 1. 1. 4 药品与试剂可调移液器生物显微镜高速冷冻离心机 MP200B 电子天平 IPT - 5 架盘天平
最后 ,在每个摇瓶 ( 50ml ) 中加入 0. 05 克硫酸镁调节 pH 在 7. 0 - 7. 5 的范围内 ,每个实验重复 1 次 , 接种量为 2 % ,置于 37. 0 ℃,170rpm 的摇床上培养 24 小时 ,测试其结果。 1. 2. 3 测试方法 1. 2. 3. 1 HA 含量的检测方法 ( 咔唑法) 咔唑法检测透明质酸含量的原理是因为透明质酸水解后 ,产生 1/ 2mol 的糖醛酸 ,其与浓硫酸反应 , 生成络合物 ,此络合物与咔唑形成玫瑰红颜色 ,根据其颜色的深度可以判断透明质酸含量的多少。咔唑步骤 : (1) 取 5ml 浓硫酸溶液 ( 4 ℃ 预冷) ,然后加入 1ml 试样 ( 在冰浴中) ,摇匀。 (2) 加热试管 ( 在沸水浴中 ) 10min , 然后冷却至室温。 (3 ) 加入 0. 2ml 咔唑溶液 , 摇匀 , 在沸水浴中加热 15min ,再冷至室温。 ( 4) 在 530nm 处测定其 OD 值。如果出现玫瑰红 , 则证明含有 HA , 再把测得的值对照标准曲线 ,就得到透明质酸含量的多少 1. 2. 3. 2 还原糖的测定方法 - DNS 法步骤 : 取待测样品和蒸馏水 ( 对照 ) 各 1ml , 分别加 DNS 试剂 3ml ,沸水浴煮沸 15 分钟显色 ,冷却后用蒸馏水稀释至 25ml , 用 721 分光光度计在 550nm 测其

透明质酸论文

透明质酸的分离纯化摘要：1934年美国哥伦比亚大学眼科教授Meyer等首先从牛眼玻璃体中分离出该物质。

透明质酸以其独特的分子结构和理化性质在机体内显示出多种重要的生理功能，如润滑关节，调节血管壁的通透性，调节蛋白质，水电解质扩散及运转，促进创伤愈合等。

尤为重要的是，透明质酸具有特殊的保水作用，是目前发现的自然界中保湿性最好的物质，被称为理想的天然保湿因子，对于其的利用越来越多，为此通过改善其提取纯化方法成为众多微生物科学家研究的课题方向。

关键字：透明质酸，分离提取，纯化1．透明质酸介绍透明质酸是一种酸性粘多糖，是一种高分子的聚合物。

白色絮状或无定形固体，无臭无味，具有吸湿性。

溶于水不溶于有机溶剂。

是由单位D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺组成的高级多糖。

D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺之间由β-1,3-配糖键相连，双糖单位之间由β-1,4-配糖键相连。

分子量具有不均一性，一般平均为500—2000kD，结构式为广泛存在于人或动物的各种组织中，已从结缔组织、脐带、皮肤动脉等材料中分离得到，在哺乳动物体内，以玻璃体、脐带和关节滑液含量最高。

透明质酸是一种多功能基质，透明质酸HA广泛分布于人体各部位。

其中皮肤也含有大量的透明质酸。

人类皮肤成熟和老化过程也随着透明质酸的含量和新陈代谢而变化，它可以改善皮肤营养代谢，使皮肤柔嫩、光滑、去皱、增加弹性、防止衰老，在保湿的同时又是良好的透皮吸收促进剂。

与其他营养成分配合使用，可以起到促进营养吸收的更理想效果。

具有特殊生理功能和作用，如润滑作用、保水作用等，临床上作为黏弹剂用作眼科手术辅助剂，作为润滑剂用于治疗关节病，还用于促进创伤愈合,用作化妆品中的保湿剂等。

2.透明质酸种类透明质酸的生产过程和技术决定了质量优劣的差异,所以在使用上一定要是正确来源生产的产品才能有治疗的功效.一般而言,提炼的方法有三种:1、动物组织:主要原料是鸡冠和牛眼玻璃体等.用丙酮或乙醇将原料脱脂、脱水,用蒸馏水浸泡、过滤,然后以氯化钠水溶液和氯仿溶液处理,之后加入胰蛋白酶保温后得到混合液,最后用离子交换剂进行处理、纯化得到精制的透明质酸.这种方法提取率极低,仅1%左右,分离过程复杂,致使透明质酸价格昂贵,达5000美元/公斤,限制了在化妆品中大的量使用.2、微生物发酵:以葡萄糖作为碳源发酵液.在培养基中发酵48小时,发酵结束后,过滤除去菌丝体和杂质,然后用醇沉淀法等简单操作即得到高纯度的产物.采用发酵法制造的透明质酸,优点是能按商品设计来设定分子量大小.发酵法的关键在于菌种的选择,多选用链球菌、乳酸球菌类等.3、化学合成:采用天然酶聚合反应;首先使用多糖类聚合物合成“透明质酸氧氮杂环戊烯衍生物”,然后添加水分解酶,制造出衍生物和酶的复合体,最后在90度摄氏反应液中清除其中的酶,就合成了透明质酸.采用人工合成法可大大降低透明质酸的制造成本,但结构较不精纯.同样是透明质酸的产品,因为原料来源及制成技术的差别,对效果有明显的影响.产品的浓度不能作为选择产品的参考,纯度、分子量、3D立体结构才会直接影响透明质酸的吸水效果.通常分子量愈大、网状结构愈完整,有最好的吸水效果.坊间保养品、化妆品盛行,但许多业者自制的透明质酸,便宜,可是不一定有效果.甚至有人推行的口服的透明质酸,经过肠胃吸收之后会分解成醣类及氨基酸的小单位分子,还是必须透过自体合成等复霒步骤才能生成在皮肤、结镳组织中,其效果也必须要打折扣.3.透明质酸功能透明质酸的主要功能有如下三点：1、改善关节功能2、天然的保湿润滑剂3、防止动脉硬化、脉搏紊乱和脑萎缩等病症的发生。

透明质酸的分离纯化工艺的研究

透明质酸的分离纯化工艺的研究透明质酸（ hyaluronic acid，HA）是在动物界中普遍存在的一种水溶性多糖，它有着特殊的生物活性特点，是目前最有前景的生物活性聚合物之一，具有广泛的制药、医疗、农业、食品和个人护理等领域的应用前景。

随着人们对透明质酸的应用范围的不断扩大，对高纯度的透明质酸产品的需求也在日益增加。

分离纯化是HA的高度纯化工艺的一部分。

HA的分离纯化具有很大的技术难度，主要包括抗凝剂提取法、膜分离法以及色谱分离技术等。

抗凝剂提取法是HA的传统分离纯化技术，其工艺程序主要包括：（1）对拆解物进行水解，以产生透明质酸；（2）把生产的HA水悬液与一定浓度的乙醇混合；（3）使用静电分离技术将水悬液和乙醇混合物中的不同物质分离开，产生两种截然不同的双相混合物；（4）收集上层的固态及溶解性HA混合物；（5）对质量进行检测，以确保含量符合要求。

膜分离技术是HA的传统分离纯化技术，其工艺程序主要包括：（1）将HA水悬液中的不同物质进行析出，以使得HA水悬液中的HA比例增加；（2）在分离室中建立压力差，将杂质融性物质吸附在膜表面，HA聚集在较大的反渗透浓缩面板对面；（3）一次通过膜表面大量收集HA，然后用冷冻离心分离技术对HA进行细化；（4）冷冻离心出液收集后经过评估，确定HA收集量。

色谱分离技术是一种新型的分离纯化工艺，其工艺程序主要包括：（1）将带有粘性的HA水悬液通过柱式色谱柱，以产生不同导化物分子量的HA分子；（2）色谱柱通过流动梯度调节系统将不同导化物与HA分子分离；（3）使用HPLC检测仪测量纯度，以确定不同导化物的筛选分布；（4）使用高纯度组分进行纯化，最终得到所需组分。

以上是透明质酸分离纯化工艺的基本流程，以满足不同客户的需求，其中抗凝剂提取法和膜分离法是HA的传统分离纯化技术；色谱分离技术是一种分离纯化技术，其特点更加精细，纯度也更高。

根据特定应用的要求，利用这些分离纯化技术可以制备高品质和高性能的透明质酸产品。

透明质酸研究进展及应用

透明质酸研究进展及应用透明质酸（Hyaluronic Acid，简称HA）是一种存在于人体组织中的天然多糖，广泛分布于皮肤、软骨、关节液等处。

近年来，随着科学技术的进步和研究的深入，透明质酸在医学、美容等领域的研究和应用也逐渐展开。

本文将从透明质酸的研究进展和应用两方面进行阐述。

一、透明质酸的研究进展1. 透明质酸的来源：透明质酸可以从多种来源获得，如动物组织提取、微生物发酵等方式。

目前，大多数商业化的透明质酸产品是通过发酵得到的，具有较高的纯度和稳定性。

2. 透明质酸的结构与性质：透明质酸是一种由重复的N-乙酰-D-葡糖胺和D-葡糖醛酸链接而成的高分子物质，具有极强的保水能力和黏弹性。

其分子量的大小决定了其物理和生物学性质的不同，如大分子量透明质酸具有较强的保湿效果，小分子量透明质酸则有更好的渗透性。

3. 透明质酸的降解与代谢：透明质酸在人体内会被降解为较小的分子，再由体内酶类或细胞摄取，并参与生理功能的调节。

其降解产物对皮肤的保湿和修复具有一定作用。

4. 透明质酸与皮肤健康：透明质酸通过保湿、促进胶原蛋白的合成等作用，具有滋润皮肤、提升皮肤弹性、改善皱纹等功效。

研究表明，透明质酸可以有效保湿皮肤，减少水分流失，提高皮肤屏障功能，从而改善干燥、脱屑等皮肤问题。

5. 透明质酸在医学领域的应用：透明质酸在医学领域有着广泛的应用，如关节液置换、眼科手术、软骨修复等。

透明质酸作为一种生物材料，具有良好的生物相容性和生物可降解性，对组织没有明显的毒副作用。

二、透明质酸的应用1. 美容领域：透明质酸作为一种保湿剂和填充剂，广泛应用于美容领域。

透明质酸可以通过注射或外用的方式，改善皮肤问题，如细纹、皱纹、皮肤松弛等。

2. 医学领域：透明质酸在医学领域的应用包括软骨修复、关节液置换、眼科手术等。

透明质酸可以用于软骨修复的支架材料，能够促进软骨细胞的生长和分化，加速软骨的再生。

在关节液置换中，透明质酸可以有效润滑关节，减少疼痛和炎症反应。

发酵液中透明质酸提取纯化工艺的研究

发酵液中透明质酸提取纯化工艺的研究作者：宋磊孟国庆郭燕风王传宝王宜磊来源：《山东农业科学》2017年第03期摘要：本研究利用乙醇初步提取发酵液中透明质酸，确定最佳提取方案为乙醇体积分数60%，洗涤次数为两次。

然后，以透明质酸含量为指标，在单因素试验的基础上，采用根据Box-Behnken原理设计的响应面法优化透明质酸纯化工艺。

方差分析和交互作用分析表明，最佳纯化工艺为NaCl浓度45 g/L，温度55℃，pH值9.6，在此工艺条件下，透明质酸含量为93.71%。

本工艺所生产的透明质酸纯度較高，符合化妆品、医药行业标准，具有广泛的应用价值。

关键词：透明质酸；发酵液；分离纯化；响应面中图分类号：TS218文献标识号：A文章编号：1001-4942（2017）03-0134-06AbstractIn this research， the hyaluronic acid was preliminarily extracted from fermentation broth using alcohol. The best extraction parameters were ethanol volume fraction of 60% and washing for two times. Using the content of hyaluronic acid as indicator， single-factor experiments were performed. Then the response surface analysis based on Box-Behnken experimental design was carried out to optimize the purification process of hyaluronic acid. Through analysis of variance and interaction， the optimal purification process was NaCl additive amount of 45 g/L， temperature of 55℃ and pH value of 9.6. Under the optimized conditions， the actual content of hyaluronic acid reached up to 93.71%. By this process， the content of hyaluronic acid was higher， which conformed to the stands of cosmetic and pharmaceutical industries， so it had extensive applicationvalue.KeywordsHyaluronic acid； Fermentation broth； Separation and purification； Response surface透明质酸（hyaluronic acid，HA）是一种高分子量的酸性黏多糖，由N-乙酰葡萄糖胺和葡萄糖醛酸通过β-1，4和β-1，3糖苷键反复交替连接而成[1]，由于其独特的流变学特性、黏弹性、保湿性以及良好的生物相容性，透明质酸在化妆品、医学领域都有广泛的应用[2]。

矿产

矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。

如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。

㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。

(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。

如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。

对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。

二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。

2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。

㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。

2、矿产品价格稳定性及变化趋势。

三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。

2、矿区矿产资源概况。

3、该设计与矿区总体开发的关系。

㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。

2、矿床开采技术条件及水文地质条件。