自身抗体检测及临床应用新进展-仲人前

自身抗体产生是自身免疫疾病（AID）的基本特征 自身抗体成为绝大多数AID的血清学标记物 自身抗体检测用于AID的定义和分类 自身抗体检测是AID诊断和鉴别诊断的重要依据之一 某些自身抗体可用于AID活动度监测和治疗效果评价 某些自身抗体可用于AID预后或累及器官的估计 某些自身抗体对AID发病有预警价值 自身抗体检测新的应用领域（肿瘤、感染、血栓）
38.9 29.6 19.8 14.1 11.7 11.6 11.1
心肌梗死
55
5.5
Cervera, R., et al. Autoimmun Rev, 7: 174 (2008)
抗磷脂抗体与血栓性疾病
发病率 N=385
LA aCL aβ2-GPI
+ + +
+ -
+ +
+ -
+
+ + -
+ +
Galli, M., et al. J Thromb
器官特异性自身免疫病
糖尿病
5
新的自身抗体的临床应用
疾病
系统性红斑狼疮(SLE)
自身抗体
抗载脂蛋白-A-I抗体、抗HDL抗体 HEp-2细胞高密度细颗粒荧光模式 (DFS)或抗DFS70抗体 抗氨基甲酰蛋白(CarP)抗体
临床意义
狼疮并发心血管疾病和疾病活动度相关 排除系统性自身免疫风湿病 抗瓜氨酸化蛋白抗体阴性的疑似RA患者 诊断，与预后不良相关 与侵蚀性关节炎相关，可能作为PAD抑 制剂治疗的指征 克罗恩病特异性标记物 抗组织转谷氨酰胺酶(tTG)抗体阳性者 确认；作为IgA缺乏的疑似CD患者血清 学诊断依据；2岁以下疑似CD患儿的诊 断 IMN标志性抗体 边缘性脑炎诊断血清学标记物
(BCR/HCV E2-CD81/CD21-CD19)
Direct infection of B-cell
(GAGs, LDL receptor,CD81)
自身抗体与干扰素治疗慢性丙型肝炎疗效
例数 100
63.9%
P=0.416
P=0.013
95.8%
SVR non-SVR
80 60
36.1%
40 20

检出率
20% 1% 19% 9% 3% 6% 6% 30%
IIF(1:40稀释血清)检测290名慢性丙肝患者血清中自身抗体 HCV相关自身抗体阳性率：SMA(20%)>ANA(9%)>LKM-1(6%) SMA-AA和ANA-H双阳的情况不存在
Cassani F., et al. Hepatol.,26: 561 (1997)
诊断和分类标准
2010 ACR-EULAR classification criteria 1997 ACR classification criteria 2013 ACR-EULAR classification criteria 2012 ACR classification criteria 1996 diagnostic criteria 1997 preliminary classification criteria 2006 consensus classification criteria 2007 consensus classification criteria
抗核抗体(ANA)
nRNP/Sm、RNP70，RNP-A, RNP-C, Sm、SS-A、Ro-52、SS-B、 Scl-70、PM-Scl、Jo-1、着丝点蛋白B、PCNA、dsDNA、核小体、 组蛋白、核糖体P蛋白、AMA M2 ANA，抗dsDNA，抗Sm，抗cardiolipin，Lupus anticoagulant（LA)，抗 Nucleosomes，抗rRNP，抗β2GPⅠ ANA, 抗SS-A，抗SS-B，抗α-Fodrin，抗M3R，抗AMA-M2? ACA? ， Anti-CCP? 抗Scl-70，ACA，ANA，抗RNAP-Ⅲ，抗U1RNP， 抗PM-Scl，抗Ku ACA，LA，抗β2GPⅠ，抗phosphotidyl serine antibody 抗phosphtidil acid，AECA CRP， ESR，抗CCP，IgM RF，ANA，AKA，APF，RA33/36 抗Sa， 抗MCV，GPI 抗Jo-1，ANA，抗PL-7，抗PL-12，抗Mi-2，抗SRP，抗PM-Scl 抗U1RNP, ANA
KRAVITZ MS, et al. J Clin Immunol 2005; 25(6):582-591
自身抗体检测在肿瘤疾病中的应用
副瘤综合症 小细胞肺癌
Hu, Ri, CV2, VGCC, PCA-2, amphiphysin
抗NMDAR脑炎 卵巢畸胎瘤
Anti-NMDAR
系统性硬化症与肿瘤 乳腺癌 肺癌 卵巢肿瘤 结直肠癌 B细胞淋巴瘤 … Anti-RPC1 v
Protective Molecules—C-Reactive Protein, Serumyloid P, Pentraxin3 , Mannose-Binding Lectin, and Apolipoprotein A1 and Their Autoantibodies: Prevalence and Clinical Significance in Autoimmunity
自身免疫性肾病相关自身抗体谱
特发性膜性肾病 狼疮性肾炎 肺-肾综合征 血管炎性肾病
Anti-PLA2R
Anti-C1q Anti-dsDNA Anti-nucleosome
Anti-GBM
Anti-PR3 Anti-MPO
国内历年自身抗体诊断正确率(%)
年度 2002年 2003年 2004年 2006年 2008年 2009年 ANA 47.0 85.0 86.0 92.0 70.0 81.8 dsDNA 70.0 82.0 75.0 89.0 88.0 81.2 ENA 46.0 37.0 63.0 75.0 72.0 95.9 AMA 95.0 67.0 100 96.0 93.0 86.3 ASMA 40.0 50.0 61.0 67.0 85.0 76.3 CCP N/A N/A N/A 72.0 79.0 93.1
Haemost, 8: 234 (2009)
Biblioteka Baidu
自身抗体检测技术发展趋势

检测流程全自动化 多指标检测技术平台(multiplexing test) 探针特异性和可辨识度更高 荧光显微镜成像系统的跨越式发展 检测指标越来越多(“自身抗体组”) 检测项目的“模块化”设计 需要建立多参数分析的新算法
类风湿关节炎(RA)
抗肽酰基精氨酸脱亚氨酶(PAD)抗体
炎症性肠病(IBD)
抗胰腺酶原颗粒糖蛋白(GP2)抗体
麸质敏感性肠病(CD)
抗去酰胺基麦角蛋白肽(DGP)抗体IgG
特发性膜性肾病(IMN) 自身免疫性脑炎
抗磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体 抗电压门控性钾离子通道(VGKC)抗体
Characteristic staining pattern of anti-DFS70 antibodies
丙型肝炎自身抗体产生机制
HLA A1-B8DRB1*0401/DRB1*0301 BAFF↑ CD4+CD25+Treg↓
HCV infection
Molecular mimicry
(HCV polyprotein-CYP2D6 )
NOSA production
B-cell activation threshold↓
自身抗体检测及临床应用新进展
第二军医大学长征医院 仲人前 全军临床免疫研究所
自身免疫疾病的发生和发展
自身免疫易感个体
诱发因素
自身抗体谱 致病性自身抗体 女性 自免疾病家族史 HLA 特异性免疫缺陷
特异性自身抗体
干预措施
系统性
自免疾病临床表现
组织器官特异性
为什么要作自身抗体检测

李丽君等, 中华检验医学杂志, 2012, 35: 265
自身抗体检测的质量保证
检测前

检测中

检测后

适应症 患者的生理和病 理状况 v 样本信息 样本处理和储存 样本运输条件
全自动化解决方案
Automated digital ANA reading systems
Mahler M, et al. Current Concepts and Future Directions for the Assessment of Autoantibodies to Cellular Antigens Referred to as Anti-Nuclear Antibodies. Journal of Immunology Research 2014, Article ID 315179
Mahler M, et al. Current Concepts and Future Directions for the Assessment of Autoantibodies to Cellular Antigens Referred to as Anti-Nuclear Antibodies. Journal of Immunology Research 2014, Article ID 315179
80.0% 66.7% 20.0% 33.3% 4.2%
0 HCV-1 ANA(+) HCV-1 ANA(-) HCV-non 1 ANA(+) HCV-non 1 ANA(-)
Hsieh M. Y., et al. Kaohsiung J. Med. Sci., 28: 86 (2012)
APASL关于丙性肝炎的共识声明
ANCA，抗PR3，抗MPO，抗GBM，AECA ANA， HLA-B27
SLE
SS 硬皮病 APS
自 身 抗 体 检 测 平 台
系统性自身免疫病
类风关 PM/DM MCTD 血管炎 脊柱炎 肝炎 肠炎 甲状腺
ANA，ASMA，抗SLA，抗LKM-1，抗LC-1，抗AMA/M2，抗F-肌动蛋白， 抗ASGPR， ACA，抗gp210，抗Sp100，ANCA 抗内因子、抗肌内膜、抗麦胶蛋白 、抗组织转谷氨酰胺酶、ASCA 抗TG、抗TPO 、抗TSH，抗TSH-R ,抗TBG 抗GAD、抗IA-2，抗IAA AchR、抗神经节苷脂、抗Yo、抗Hu、抗Ri 抗Dsg-1、抗Dsg-3、抗BP180
SARD诊断和分类标准中的自身抗体
疾病
类风湿关节炎 系统性红斑狼疮 系统性硬化症 干燥综合征 混合性结缔组织病 未分化结缔组织病 抗磷脂综合征 ANCA相关血管炎
自身抗体
RF, ACPA ANA, dsDNA, Sm, Ro, La, aCL Centromere, Topo-I, RNAP-III Ro, La, RF, ANA U1-RNP ANA LA, aCL, aβ2GPI ANCA, PR3, MPO
乳腺癌
Yo, Ri, amphiphysin
v 胸腺瘤
GAD65, AChR, VGCC, CV2
v
卵巢肿瘤
Yo
...
PBC and risk of liver cancer
Forest Plot
A total of 16368 PBC patients
The risk of liver cancer in PBC patients was 18.8-fold higher than that of the general population
J. Gastroenterol. and Hepatol., 22：615（2007）
抗磷脂抗体与心血管疾病相关性
临床表现
深静脉血栓 血小板减少(<105/μl) 中风 肺栓塞 腿部浅表部位血栓性静脉炎 心瓣膜疾病 一过性脑缺血发作
病例数
389 296 198 141 117 116 111
发病率(%)
Galbraith plots
Liang Y, Hepatology, 2012
10
免疫蛋白组学鉴定肿瘤相关抗原自身抗体
Zhu Q, et al. Autoimmunity Reviews 12 (2013) 1123–1128
11
自身抗体检测与慢性丙型肝炎
自身抗体
SMA anti-actin (AA) non-anti-actin (non-AA) ANA homogenous (H) non-homogenous (non-H) LKM1 Any antibody