第八章色谱法概论精品PPT课件
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2021/2/5
三、色谱流出曲线与术语
色谱峰的定义 由检测器输出的电信号强度对时间作图， 所得曲线称为色谱流出曲线。曲线上突起 部分就是色谱峰。 如果进样量很小，浓度很低，在吸附等温 线（气固吸附色谱）或分配等温线（气液 分配色谱）的线性范围内，则色谱峰是对 称的。
2021/2/5
1.基线
无试样通过检测器时， 检测到的信号即为基线。
二、气相色谱分离来自百度文库程
separation process of gas chromatograph
三、色谱流出曲线与基 本术语
Chromatogram and name words
2021/2/5
一、 色谱法的特点、分类和作用
1.概述
混合物最有效的分离、分析方法。 俄国植物学家茨维特（Tswett)在1906年使用 的装置：色谱原型装置，如图。 色谱法是一种分离技术。 试样混合物的分离过程也就是试样中各组 分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的 分配过程。 其中的一相固定不动，称为固定相； 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流 体（气体或液体），称为流动相。尽管“色谱” （动画） 已经失去原来含义，但仍沿用到今。
A
B
2021/2/5
3.色谱法的特点
（1）分离效率高 复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。
（2） 灵敏度高 可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。
（3） 分析速度快 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。
（4） 应用范围广 气相色谱：沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。
• 利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透 而达到分离的方法，称为凝胶色谱法或尺寸排阻 色谱法。
• 最近，又有一种新分离技术，利用不同组分与固 定相（固定化分子）的高专属性亲和力进行分离 的技术称为亲和色谱法，常用于蛋白质的分离。
2021/2/5
按固定相的外型分类
• 固定相装于柱内的色谱法，称为柱色谱。 • 固定相呈平板状的色谱，称为平板色谱，
2021/2/5
色谱法原理
当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发 生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异， 与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相 的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各 组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序从色谱柱中 流出。
2021/2/5
(2)液相色谱：流动相为液体（也称为淋洗液）。 按固定相的不同分为：液固色谱和液液色谱。 离子色谱：液相色谱的一种，以特制的离子交换树脂
为固定相，不同pH值的水溶液为流动相。
2021/2/5
(3)其他色谱方法
薄层色谱和纸色谱： 比较简单的色谱方法
凝胶色谱法：测聚合物分子 量分布。 超临界色谱: CO2流动相。 高效毛细管电泳:
与适当的柱后检测方
法结合，实现混合物中各
组分的分离与检测。 两相及两相的相对运 动构成了色谱法的基础
（动画）
2021/2/5
2.色谱法分类
按流动相的状态不同主要分为两类： (1)气相色谱：流动相为气体（称为载气）。 按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱； 按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱
不足之处： 被分离组分的定性较为困难。
2021/2/5
二、色谱分离过程
色谱分离过程是在色谱柱内完成的。以气相色谱为例。 气固(液固)色谱和气液(液液)色谱，两者的分离机理不同。
气固(液固)色谱的固定相: 多孔性的固体吸附剂颗粒。 固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同。 气液(液液)色谱的固定相: 由 担体和固定液所组成。 固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。 气固色谱的分离机理: 吸附与脱附的不断重复过程； 气液色谱的分离机理： 溶解与挥发的反复多次分配过程。
2.色谱峰
当某组分从色谱柱流出时， 检测器对该组分的响应信号 随时间变化所形成的峰形曲 线称为该组分的色谱峰。
3.峰高(h)
色谱峰顶到基线的垂直距离
2021/2/5
（动画）
4.保留值
表示试样中各组分在色谱 柱中滞留时间的数值 。
（1）时间表示的保留值 保留时间（tR）：组
它又可分为薄层色谱和纸色谱。
按照展开程序分类
按照展开程序的不同，可将色谱法分为 洗脱法、顶替法、和迎头法。
2021/2/5
• 洗脱法也称冲洗法。工作时，首先将样品加到 色谱柱头上，然后用吸附或溶解能力比试样组 分弱得多的气体或液体作冲洗剂。由于各组分 在固定相上的吸附或溶解能力不同，被冲洗剂 带出的先后次序也不同，从而使组分彼此分离。 流出曲线见下图。这种方法能使样品的各组分 获得良好的分离，色谱峰清晰。此外，除去冲 洗剂后，可获得纯度较高的物质。目前，这种 方法是色谱法中最常用的一种方法。
2021/2/5
气相色谱分离过程
当试样由载气携带进入色谱柱与固
定相接触时，被固定相溶解或吸附; 随着载气的不断通入，被溶解或吸 附的组分又从固定相中挥发或脱附; 挥发或脱附下的组分随着载气向前 移动时又再次被固定相溶解或吸附; 随着载气的流动，溶解、挥发， 或吸附、脱附的过程反复地进行； 较难被吸附（溶解）的组分随载气 较快地向前移动，较易被吸附（溶解 ）的组分则随载气较慢地移动。经过 一定时间后，各组分就彼此分离。
第八章 色谱分析基础
fundamental of chromatograph analysis
第一节 色谱法概述
generalization of chromatograph analysis
一、 色谱法的特点、 分类和作用
characteristic ,classification actuation of chromatograph
九十年代快速发展、特 别适合生物试样分析分离的 高效分析仪器。
2021/2/5
按分离机理分类
利用组分在吸附剂（固定相）上的吸附能力强弱不 同而得以分离的方法，称为吸附色谱法。
• 利用组分在固定液（固定相）中溶解度不同而达 到分离的方法称为分配色谱法。
• 利用组分在离子交换剂（固定相）上的亲和力大 小不同而达到分离的方法，称为离子交换色谱法。
三、色谱流出曲线与术语
色谱峰的定义 由检测器输出的电信号强度对时间作图， 所得曲线称为色谱流出曲线。曲线上突起 部分就是色谱峰。 如果进样量很小，浓度很低，在吸附等温 线（气固吸附色谱）或分配等温线（气液 分配色谱）的线性范围内，则色谱峰是对 称的。
2021/2/5
1.基线
无试样通过检测器时， 检测到的信号即为基线。
二、气相色谱分离来自百度文库程
separation process of gas chromatograph
三、色谱流出曲线与基 本术语
Chromatogram and name words
2021/2/5
一、 色谱法的特点、分类和作用
1.概述
混合物最有效的分离、分析方法。 俄国植物学家茨维特（Tswett)在1906年使用 的装置：色谱原型装置，如图。 色谱法是一种分离技术。 试样混合物的分离过程也就是试样中各组 分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的 分配过程。 其中的一相固定不动，称为固定相； 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流 体（气体或液体），称为流动相。尽管“色谱” （动画） 已经失去原来含义，但仍沿用到今。
A
B
2021/2/5
3.色谱法的特点
（1）分离效率高 复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。
（2） 灵敏度高 可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。
（3） 分析速度快 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。
（4） 应用范围广 气相色谱：沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。
• 利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透 而达到分离的方法，称为凝胶色谱法或尺寸排阻 色谱法。
• 最近，又有一种新分离技术，利用不同组分与固 定相（固定化分子）的高专属性亲和力进行分离 的技术称为亲和色谱法，常用于蛋白质的分离。
2021/2/5
按固定相的外型分类
• 固定相装于柱内的色谱法，称为柱色谱。 • 固定相呈平板状的色谱，称为平板色谱，
2021/2/5
色谱法原理
当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发 生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异， 与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相 的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各 组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序从色谱柱中 流出。
2021/2/5
(2)液相色谱：流动相为液体（也称为淋洗液）。 按固定相的不同分为：液固色谱和液液色谱。 离子色谱：液相色谱的一种，以特制的离子交换树脂
为固定相，不同pH值的水溶液为流动相。
2021/2/5
(3)其他色谱方法
薄层色谱和纸色谱： 比较简单的色谱方法
凝胶色谱法：测聚合物分子 量分布。 超临界色谱: CO2流动相。 高效毛细管电泳:
与适当的柱后检测方
法结合，实现混合物中各
组分的分离与检测。 两相及两相的相对运 动构成了色谱法的基础
（动画）
2021/2/5
2.色谱法分类
按流动相的状态不同主要分为两类： (1)气相色谱：流动相为气体（称为载气）。 按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱； 按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱
不足之处： 被分离组分的定性较为困难。
2021/2/5
二、色谱分离过程
色谱分离过程是在色谱柱内完成的。以气相色谱为例。 气固(液固)色谱和气液(液液)色谱，两者的分离机理不同。
气固(液固)色谱的固定相: 多孔性的固体吸附剂颗粒。 固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同。 气液(液液)色谱的固定相: 由 担体和固定液所组成。 固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。 气固色谱的分离机理: 吸附与脱附的不断重复过程； 气液色谱的分离机理： 溶解与挥发的反复多次分配过程。
2.色谱峰
当某组分从色谱柱流出时， 检测器对该组分的响应信号 随时间变化所形成的峰形曲 线称为该组分的色谱峰。
3.峰高(h)
色谱峰顶到基线的垂直距离
2021/2/5
（动画）
4.保留值
表示试样中各组分在色谱 柱中滞留时间的数值 。
（1）时间表示的保留值 保留时间（tR）：组
它又可分为薄层色谱和纸色谱。
按照展开程序分类
按照展开程序的不同，可将色谱法分为 洗脱法、顶替法、和迎头法。
2021/2/5
• 洗脱法也称冲洗法。工作时，首先将样品加到 色谱柱头上，然后用吸附或溶解能力比试样组 分弱得多的气体或液体作冲洗剂。由于各组分 在固定相上的吸附或溶解能力不同，被冲洗剂 带出的先后次序也不同，从而使组分彼此分离。 流出曲线见下图。这种方法能使样品的各组分 获得良好的分离，色谱峰清晰。此外，除去冲 洗剂后，可获得纯度较高的物质。目前，这种 方法是色谱法中最常用的一种方法。
2021/2/5
气相色谱分离过程
当试样由载气携带进入色谱柱与固
定相接触时，被固定相溶解或吸附; 随着载气的不断通入，被溶解或吸 附的组分又从固定相中挥发或脱附; 挥发或脱附下的组分随着载气向前 移动时又再次被固定相溶解或吸附; 随着载气的流动，溶解、挥发， 或吸附、脱附的过程反复地进行； 较难被吸附（溶解）的组分随载气 较快地向前移动，较易被吸附（溶解 ）的组分则随载气较慢地移动。经过 一定时间后，各组分就彼此分离。
第八章 色谱分析基础
fundamental of chromatograph analysis
第一节 色谱法概述
generalization of chromatograph analysis
一、 色谱法的特点、 分类和作用
characteristic ,classification actuation of chromatograph
九十年代快速发展、特 别适合生物试样分析分离的 高效分析仪器。
2021/2/5
按分离机理分类
利用组分在吸附剂（固定相）上的吸附能力强弱不 同而得以分离的方法，称为吸附色谱法。
• 利用组分在固定液（固定相）中溶解度不同而达 到分离的方法称为分配色谱法。
• 利用组分在离子交换剂（固定相）上的亲和力大 小不同而达到分离的方法，称为离子交换色谱法。