一种改进的纤维素分解菌鉴别培养基
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（ 安徽工程科技学院生化工程系， 芜湖! "3-### ）
摘! 要： 以羧甲基纤维素钠和添加少量葡萄糖作为碳源， 培养纤维素酶产生菌株， 培养一定时间后， 经刚果红染色和稀碱 液固定， 在菌落周围形成透明水解圈， 根据透明圈的大小， 快速定性鉴定纤维素酶产生菌酶活大小。与传统纤维素酶活检 测方法比较， 本方法菌丝生长快， 两天后菌落经染色， 透明圈边缘清晰， 直观性强， 与酶活力成一定的线性关系。 关键词： 纤维素酶产生菌； 鉴别培养基； 透明水解圈 中图分类号： 45/6 //文献标识码： 7 文章编号： -##8 % 5$/" （ "##$ ） #$ % ##38 % #"
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作者简介： 陈阿娜， 女， 在读硕士研究生， ’ % ()*+： ),) ##- "". -$/0 12(； 通讯作者： 汤斌， 教授。
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第 #$ 卷第 C 期 生 物 学 杂 志 b1+% #$& Z1% C & & W,: ， #??C 年 "# 月 O]>SZIG ]a X=]G]P_ #??C !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 长较快； 改良的鉴别培养基 ! 与 " 、 #、 $ 相比， 最大的特 点就是加入了葡萄糖， 将以纤维素作为唯一碳源改良 为以纤维素和葡萄糖复合型碳源， 主要考虑到纤维素 酶为诱导型酶， 产纤维素酶菌需先利用单糖生长， 然后 才能由纤维素诱导产酶。 #% #& 水解圈大小与酶活力高低的关系 为了进一步验证鉴别培养基 ! 的筛选效果， 以绿色木 霉、 康宁木霉、 ’("Baidu Nhomakorabea ’(#、 白地霉为实验菌株， 分析比较了水 解圈大小与酶活力高低的关系。实验结果见表 #。
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则将其进一步发展成为一种鉴别性
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培养基用于各种纤维素分解菌的数目测定
。本文
对几种刚果红分离法进行了比较研究。通 过 反 复 试 验， 进行方法改良， 初步研究出一种适于快速筛选丝状 真菌类纤维素分解菌的平板培养基。 -! 材料与方法 -0 -! 菌种 绿色 木 霉 （ !"#$%&’(")* +#"#’( ） 、 康宁木霉 （ !"#, $%&’(")* -&.#./##） 、 白地霉购自中国工业微生物菌种保 藏中心和本实验室筛选并保存的两株纤维素分解菌 ;E- 、 ;E" ， 其确切的种属关系有待于进一步鉴定。 -0 "! 培养基 斜面培养基： & 2 7F 麦芽汁琼脂培养基。 平板培养基 - ： G" 9HI3 #0 &#J， KJLI3 #0 "&J， 纤维 刚果红 #0 "#J， 琼脂 -30 ##J， 明胶 "0 ##J， 土 素粉 -0 88J，
长代谢需求， 生长速度快， 筛选效果与对比培养基相比 具有明显的优势， 能够作为快速筛选丝状纤维素分解 菌的鉴别性培养基。
参考文献： ［"］ 中国生物工程学会 % 中国生物技术产业发展报告 ［ D］ % 北 京： 化学工业出版社， #??$ ： B@% ［ #］ E)2F02 G， H G I2)J213/)F03% H1+07 9,70K9 :12/)0202J :).*1L69M ,/-6+:,++K+13, /1 7,/,:/ (N :,++K+)3, ):/0;0/6 15 90:.11.J)20393 ［ O］ % O P,2 D0:.1*01+， "@BB ， @Q ： "?@ R "?A% ［$］ ’,)/-,. S D， T117 U O% I44+0,7 )27 V2;0.129,2/)+ D0:.1*01+1M J6， "@Q# ， !$ （!） ： BBB R BQ?% ［!］ E,27.0:F ( T， W1+6, O W， EKJ+,6 X IY Z,[ 31+07 9,70K9 51. ,2K9,.)/02J :,++K+13, \ K/0+0802J *):/,.0) 02 310+ ［ O］ % I44+0,7 )27 V2;0.129,2/)+ D0:.1*01+1J6， "@@A ， C" （A） ： #?"C R #?"@% ［A］ 叶姜瑜 % 一种纤维素分解菌鉴别培养基 ［ O］ % 微生物通报， "@@B ， #! （!） ： #A" R #A#% ［C］ 陈& 敏 % 一种改进的纤维素分解菌鉴别培养基 ［ O］ % 杭州师 范学院学报 （ 自然科学版） ， #??" ， "Q （A） ： "" R "#% ［B］ 张宇昊， 等 % 一种改进的纤维素分解菌鉴别培养基 ［ O］ % 纤 维素科学与技术， #??! ， "# （"） ： $$ R $C% ［Q］ D)27,+3 D， I27.,1//0 S， S1:-, (% D,)3K.,9,2/ 15 3)::-).05602J :,++K+13, ［ O］ % X01/,:-21+ X01,2J H694， "@BC ， （C） ： #" R $$%
! ! 纤维素是植物细胞壁主要成分， 属于多糖类物质， 是地球上数量最大的可再生资源。如能利用微生物将 其转化为生物产品或生物能源， 即可缓解能源短缺、 解 决环境污染， 又能形成新的产业
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! ! 以绿色木霉为实验菌种。由表 - 可知， 平板 - 中 菌落生长缓慢， 水解圈小， 不易于观察和测量； 平板 " 中菌丝体较为发达， 直径可达 /0 #((， 但未见水解圈出 无水解圈， 不易判断微生 现； 平板 / 中菌落生长缓慢， 物是否在生长； 平板 3 中菌丝迅速蔓延， 生长速度较 快， 水解圈大且非常清晰。 与平板 " 、 3 相比， 平板 - 、 / 中菌落生长缓慢可能 由于碳源不足， 平板 " 、 3 加大了碳源使用量菌丝体生
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一种改进的纤维素分解菌鉴别培养基
陈阿娜， 汤! 斌
摘! 要： 以羧甲基纤维素钠和添加少量葡萄糖作为碳源， 培养纤维素酶产生菌株， 培养一定时间后， 经刚果红染色和稀碱 液固定， 在菌落周围形成透明水解圈， 根据透明圈的大小， 快速定性鉴定纤维素酶产生菌酶活大小。与传统纤维素酶活检 测方法比较， 本方法菌丝生长快， 两天后菌落经染色， 透明圈边缘清晰， 直观性强， 与酶活力成一定的线性关系。 关键词： 纤维素酶产生菌； 鉴别培养基； 透明水解圈 中图分类号： 45/6 //文献标识码： 7 文章编号： -##8 % 5$/" （ "##$ ） #$ % ##38 % #"
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则将其进一步发展成为一种鉴别性
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长代谢需求， 生长速度快， 筛选效果与对比培养基相比 具有明显的优势， 能够作为快速筛选丝状纤维素分解 菌的鉴别性培养基。
参考文献： ［"］ 中国生物工程学会 % 中国生物技术产业发展报告 ［ D］ % 北 京： 化学工业出版社， #??$ ： B@% ［ #］ E)2F02 G， H G I2)J213/)F03% H1+07 9,70K9 :12/)0202J :).*1L69M ,/-6+:,++K+13, /1 7,/,:/ (N :,++K+)3, ):/0;0/6 15 90:.11.J)20393 ［ O］ % O P,2 D0:.1*01+， "@BB ， @Q ： "?@ R "?A% ［$］ ’,)/-,. S D， T117 U O% I44+0,7 )27 V2;0.129,2/)+ D0:.1*01+1M J6， "@Q# ， !$ （!） ： BBB R BQ?% ［!］ E,27.0:F ( T， W1+6, O W， EKJ+,6 X IY Z,[ 31+07 9,70K9 51. ,2K9,.)/02J :,++K+13, \ K/0+0802J *):/,.0) 02 310+ ［ O］ % I44+0,7 )27 V2;0.129,2/)+ D0:.1*01+1J6， "@@A ， C" （A） ： #?"C R #?"@% ［A］ 叶姜瑜 % 一种纤维素分解菌鉴别培养基 ［ O］ % 微生物通报， "@@B ， #! （!） ： #A" R #A#% ［C］ 陈& 敏 % 一种改进的纤维素分解菌鉴别培养基 ［ O］ % 杭州师 范学院学报 （ 自然科学版） ， #??" ， "Q （A） ： "" R "#% ［B］ 张宇昊， 等 % 一种改进的纤维素分解菌鉴别培养基 ［ O］ % 纤 维素科学与技术， #??! ， "# （"） ： $$ R $C% ［Q］ D)27,+3 D， I27.,1//0 S， S1:-, (% D,)3K.,9,2/ 15 3)::-).05602J :,++K+13, ［ O］ % X01/,:-21+ X01,2J H694， "@BC ， （C） ： #" R $$%
! ! 纤维素是植物细胞壁主要成分， 属于多糖类物质， 是地球上数量最大的可再生资源。如能利用微生物将 其转化为生物产品或生物能源， 即可缓解能源短缺、 解 决环境污染， 又能形成新的产业
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生物的资源将是一项前提工作， 这就要求一种能够高 效鉴别微生物分解纤维素能力的培养基。刚果红染料 对鉴别多糖水解物是有效的， 9),:*, 等 @22A
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平板培养基 3 ： 纤维素粉 -#J， 葡萄糖 &J， 琼脂 "#J， K),A<+B 无机营养盐 -###(M， 自然 N9 值。 -0 /! 试剂 K),A<+B 无机营养盐， -(J P (M 刚果红染液， -(2+ P M O)I9 溶液。 -0 3! 实验方法 培养方法： 挑取孢子接种到 & 2 7F 麦芽汁琼脂培养 基上活化， "8Q 培养。待新鲜孢子生长丰满， 再通过点 "8Q 培养 38>。将平板 种法点种于平板分离培养基上， 培养基 3 中的培养物用刚果红染液染色 " 小时， 倾去 染液后再用 O)I9 溶液洗涤固定水解圈。 酶活力测定方法： 参见参考文献 ［8］ 。 "! 结果与分析 "0 -! 平板培养基筛选效果
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一种改进的纤维素分解菌鉴别培养基
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