肝脏病常用实验室检测

凝血因子过筛试验
• PT(prothrombin time):II V VII X • APTT(activated partial thromboplastin time):IX X XI XII • TT(thrombin time):Fbg FDP
• AT-III(anti-thrombin III):严重肝病
• • • • •
血清蛋白电泳 （Serum protein electrophoresis）
白蛋白 0.62～0.71 或（62%-71%） α1球蛋白 0.03～0.04 或（3％～4％） α2球蛋白 0.06～0.10 或（6％～10％） β球蛋白 0.07～0.11 或（7％～11％） γ球蛋白 0.09～0.18 或（9％～18％）
%,使我国从高流行地区降到了中流行地区水平。
推测近15年我国乙肝携带者减少约3000万例。
乙肝母婴传播和水平传播减少, 1岁以下婴儿HBsAg携带率
已由1992年的9· 02%降至2006年的0· 69%; 5岁以下儿童的HBs Ag携带率已降至0· 96%,提前7年达到了WHO 5岁以下儿童携带 率降至1%以下的目标.
能。是一项敏感的肝功能试验。
胆汁酸(bile acids,BA)代谢
胆固醇
胆汁酸
肠肝循环
反映摄取、合成、分泌及胆道排泄功能
BA的生理作用
• 促进脂类吸收 • 调节胆固醇代谢
• 促进胆汁分泌
BA肠肝循环每日6~12次，弥补合成不足
胆汁酸测定的意义
灵敏反映肝实质细胞功能：摄取合成 分泌 排泄
胆道梗阻性疾病
第六章
肝脏病常用实验室检测
实验诊断教研室
曾 方 银
Tel:87588 E-mail:zengfy@126.com
中国肝病现状
每年约200万急性肝炎病例，其中甲肝50%、乙肝20-25%、
丙肝5-10%、戊肝10%。
乙肝感染者9500万，农村>城市，南方>北方。 一般人群HBsAg携带率已由1992年的9· 75%降至2006年的7· 18
临床意义
☆重症肝炎，慢性活动性肝炎、肝硬化失代偿ChE降低
☆有机磷杀虫剂中毒， ChE明显抑制
☆孕妇和口服避孕药妇女，血清ChE活性稍低
（二）胆汁淤滞为主的酶
碱性磷酸酶（alkaline phosphatase；ALP）
ALP主要来源于肝、骨、肾、小肠等，位于肝细胞的血窦
侧和毛细胆管侧的微绒毛上。同工酶ALP1~6，正常人以ALP2 为主，胆道梗阻时ALP1为主，肝硬化以ALP5为主。
中毒性肝炎与回肠病变
高脂蛋白血症：内源性胆固醇的主要代谢去路、胆 固醇的分泌、排泄通路、影响脂类吸收 、调控肝 内胆固醇的合成
三、血清酶学检测
肝酶的分类
• • • • • 肝细胞损害酶类 胆汁淤滞酶类 纤维组织增生酶类 肝细胞癌相关酶类 胰腺疾病酶类
（一）肝细胞损害主要酶
丙氨酸氨基转移酶（Alanine aminotransferase；ALT）
☆血液稀释
总蛋白增高：
☆合成增多
☆肝硬化（-球蛋白）
☆慢性感染
☆血液浓缩
球蛋白增高：
☆慢性肝脏疾病：如肝硬化、慢性肝炎等。 ☆胶原性疾病:如系统性红斑狼疮（SLE） ☆慢性感染性疾病:如亚急性感染性心内膜炎、血吸虫病、疟疾等。 ☆恶性疾病：多发性骨髓瘤，原发性巨球蛋白血症等。
减低： ☆先天性体液免疫缺陷 ☆免疫抑制剂及抗肿瘤治疗 ☆严重肝、肾病晚期
广泛分布于肾、肝、胰细胞膜和微粒体。肝细胞毛细胆管侧和 整个胆管系统，在肝活性第3（肾、胰）。
【临床意义】 ☆升高原因：合成增多（肝细胞癌、胆管癌等）；分泌增强； 排泄受阻；肝实质细胞损伤，释放增多。 ☆肝癌时γ-GT↑ ，阳性率 95% ☆阻塞性黄疸时，γ-GT↑与黄疸相关。 ☆酒精性肝损害，γ-GT较ALT、AST敏感，可作监测指标。 ☆酒精性肝硬化>胆汁性肝硬化>肝炎后肝硬化
＜0.2 ＞0.2但＜0.5 ＞0.5
胆红素测定评价
易产生光降解现象，日光照射1小时，STB可降30% 溶血有负干扰
脂浊有正干扰
室温避光保存可稳定3天
胆汁酸(Total bile acids,TBA)代谢功能检测
肝细胞将胆固醇合成胆汁酸，经肠肝循环，
可反映肝细胞合成、摄取、分泌及胆道排泄功
主要分布于肝、骨骼肌、肾、心肌，T1/2＝47h。
急性者ALT升高可达20~100倍，ALT升高更明显。 病毒感染后1~2周达高峰，3~5周逐渐下降 【参考值】
速率法 8～40 U/L （37℃）
天门冬氨酸氨基转移酶（AST）
主要分布于心肌、肝、骨骼肌、肾。 分为ASTs和ASTm， T1/2＝17h 。
胆红素的生成
部位：肝、脾、骨髓等网状内皮系统 加单氧酶、NADPH、NADPH—细胞色素P450还原酶、胆 绿素还原酶
胆红素检测的意义
判断黄疸的有无 判断黄疸的严重程度 帮助查找黄疸的原因
胆红素测定与黄疸类型
TBIL: 3.4~17.1μ mol/L
2
隐性
5
溶血性 肝前性
10
轻度 肝细胞性 肝性
CIV(collagen type IV)
HA（hyaluronidase）
层粘连蛋白（Laminin ,LN)
胞外基质中的一种重要的非胶原性糖蛋白， 与肝纤维化呈动态正相关，与HA联合检测，是早
脯氨酰羟化酶（prolyl hydroxylase,PH)
• PH是胶原纤维合成酶 • 用于肝纤维化的诊断 • 用于肝脏疾病的疗效观察和预后判断
（四）原发性肝癌相关酶测定
岩藻糖苷酶(Fucosidase, AFU)
溶酶体酸性水解酶 参与含岩藻糖苷的各种糖脂、糖蛋白、粘多糖等 的分解代谢
AFU
• 组织活检证实为PHC者，AFU阳性率为AFP的3倍
四、肝脏纤维化相关标志物
1、 酶学: MAO、PH 2、PIIIP、IV型胶原 3 、 LN、FN 4、 HA
肝纤四项检查
MAO（monoamine oxidase) PIIIP（amino terminal procollagen type III peptide)
（三）肝纤维化为主的酶
血清单胺氧化酶（Serum monoamine oxidase；MAO） • MAO的活性升高与组织的胶原纤维增生有关，当机 体有纤维化的疾病时常常有MAO升高。
临床意义
☆肝硬化时80％以上患者MAO升高 ☆肝癌时MAO升高，可能与伴有肝硬化有关。
来自百度文库
☆进行性全身性硬皮症，慢性心力衰竭，糖尿病可升高。
参考值：
成人：40~110U/L，儿童<350U/L
ALP测定结果的影响因素
脂血、溶血呈负干扰，干扰程度与溶血程度和ALP活性高低
有关。
不同试剂配方（反应原理差异）结果差异很大
不能用EDTA、枸橼酸钠、草酸盐抗凝血浆
ALP临床意义
☆60%升高由肝胆疾病引起，反映胆汁淤滞的敏感指标
静脉血2ml，不抗凝，分离血清进行测定。 血清总蛋白包括白蛋白及球蛋白。 TP-ALB=GLB A/G=1.5-2.5:1
参考区间
age TP ALB
adult neonate
3-4y >60y
60-80 46-70
62-76
40-50 28-44
38-54 34-48
总蛋白、白蛋白降低：
☆合成减少 ☆营养缺乏或不良 ☆丢失过多 ☆慢性消耗性疾病
20
>20
中度 重度 不完全梗阻 完全梗阻 肝后性
正常人和三种黄疸时胆红素测定结果
STB CB UCB CB/STB
正常
溶血性黄疸 肝细胞性黄疸 梗阻性黄疸
3.4~17.1
+ + ~ + + + + ~ + + +
0~6.8
+ + + + + +
1.7~10.2
+ + + + + +
0.2~0.4
肝性脑病的生化指标—血氨
Ammonia反映肝脏鸟苷酸循环的解毒能力。肝硬化
及暴发性肝衰竭时，80%以上肝组织损害，即可致 肝性脑病。 升高：严重肝损害、上消化道出血、尿毒症、 肝外门脉系统分流、高蛋白饮食、运动。
血氨测定
实验条件直接影响结果的可靠性： • 无氨一次性真空采血管 • 立即置冰水中 • 尽快送检，15分钟分离出血浆
AFU存在于肝、脑、肺、肾、胰、白细胞等 细胞溶酶体中。
临床意义：
岩藻糖苷蓄积病的诊断
肝癌的鉴别诊断
AFU应用的临床评价
• PHC血清AFU显著高于转移性肝癌、胆管癌、恶性间皮瘤及其它
良性肝占位性病变 • 诊断PHC Sen84%，Spe94%
• 活性和阳性率与肝癌大小无明显相关 • 活性与AFP水平无相关
【临床意义】
1.急性时相蛋白 2.可反映营养状态 3. 肝脏疾病时均降低，早于其它血清蛋白的改变
肝脏功能相关特殊蛋白
• 1-酸性糖蛋白(AAG) • 1-抗胰蛋白酶(AAT）
• 2-巨球蛋白（ 2-M)
• 铜蓝蛋白（ceruloplasmin,CP)
• 纤维结合蛋白（fibronectin,FN)

第一节 肝脏病常用的实验室检测项目
★蛋白质代谢功能检查
★胆红素代谢检查 ★血清酶及同工酶检查
胆汁酸代谢检查 脂类代谢功能检查 肝纤维化检查 肝癌实验室检查
一、蛋白质代谢功能检测
血清总蛋白(total protein,TP)、白蛋白 （albumin,ALB)、球蛋白(globulin，GLB)
慢性肝炎轻度上升，AST升高为主 肝硬化时转氨酶可偏高、正常或降低 【参考值】
速率法 5～40 U/L （37℃）
方法评价
推荐使用血清
溶血使结果偏高(Hb>2.5g/L,ALT升高10%）
肝素锂抗凝使结果偏低 冰冻贮存使结果下降 试剂中有无P-5’-P可使ALT结果相差15~32%。
• 溶血、高GGT、压迫肌肉或运动使之升高
蛋白质代谢检测小结
☆ALB是肝合成的主要蛋白质， T1/2长。低白蛋白血症是慢
性进行性肝脏疾病的特征
☆凝血酶原反映肝合成功能(T1/2短，严重肝损伤的最早指标)
☆总、球蛋白作为肝脏疾病严重性的粗略估计。 ☆AFP作为肝癌指标及胚层细胞癌的标记。 ☆铜蓝蛋白作为Wilson’s病指标
白蛋白／球蛋白比值（A／G）
【正常参考值】 1.5～2.5 【异常结果分析】
☆ A／G比值＜1提示有慢性肝实质性损害。
☆动态观察可提示病情的发展和估计预后，病情恶化 时A／G比值下降，A／G比值持续倒置表示预后较差。
评 价：
静止、空腹、卧位状态下采血，避免止血带压迫 时间过长、溶血 激烈运动数小时TP可升12% 直立位比卧位TP高3-5g/L,ALB上升5-10% 1g/L Hb致TP上升3% 脂血标本有正干扰 止血带压迫3分钟，TP可上升10%
☆阻塞性黄疸、伴黄疸的急慢性肝炎、肝硬化，肝坏死等
☆原发性和继发性肝癌 ☆骨骼系统疾病、肿瘤、佝偻病，骨折恢复期等 ☆骨骼系统疾病、甲旁亢、佝偻病、风湿病等
☆生理性增高：
妊娠3个月时胎盘产生ALP，9 个月时达高峰，分娩后1个月 左右恢复正常。正在生长发 育中的儿童，ALP活性升高。
γ-谷氨酰转移酶 (γ–glutamyltransferase,γ–GT)
血清蛋白电泳
血清蛋白电泳
★肝癌患者有时在白蛋白和α1球蛋白之间出现一条新
区带即甲胎蛋白区带。
★多发性骨髓瘤患者在β、γ之间或γ区可见M蛋白区 带。
前白蛋白( Prealbumin ，PAB)
PAB是一种肝合成维生素A载体蛋白，分子量为60kD， 电泳时处在白蛋白前方，半衰期为1.9天。 【参考值】 280～360mg/L (透射比浊法)
二、 胆红素和胆汁酸代谢检测
Serum total bilirubin(STB) Connect bilirubin(CB) Unconnect bilirubin(UCB) Urine bilirubin Total bile acids (TBA)
胆红素的来源：
衰老红细胞破坏、降解的血红蛋白 无效造血的血红蛋白或血红素 肌红蛋白、细胞色素和过氧化物酶
谷氨酸脱氢酶（glutamine dehydrogenase,GLDH )
• 主要分布于肝小叶中央区肝细胞线粒体中。反映 肝实质细胞大量坏死、缺氧性肝病或中毒性损害。 • 灵敏度47%，不适合作肝病筛选试验
胆碱酯酶（cholinesterase,ChE)
• 肝中假胆碱酯酶，反映肝脏合成能力，用于肝脏 损伤和有机磷中毒诊断