不同轮作年限三七总皂苷含量分析
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北农业学报，2009 18(1) .
摘要 ：目的 通过对文山三七产区不同轮作年限三七总皂Baidu Nhomakorabea的含量测定，分析不同轮作年限土壤对
三七皂苷的影响。方法 甲醇超声提取 60 min，香草醛 - 高氯酸法测定总皂苷的含量，采用 UV2450 紫外
分光光度计光度法测定，检测波长为 560 nm。结果 三七总皂苷在 0.33~3.3 ug/uL 范围内呈良好的线性关
—4—
现代中药研究与实践2011年第25卷第3期 Chin Med J Res Prac,2011 May.,Vol.25 No.3
市奥特赛恩斯仪器有限公司）；常规玻璃仪器等。 1.3 试剂 三七总皂苷对照品 ( 国家标准物质研究 中心，纯度 98.1±0.7%)，甲醇为色谱纯，水为重蒸水， 其他试剂均为分析纯。 1.4 分析方法及步骤 1.4.1 提取纯化 将三七粉碎成粗粉，精密称定三七 粉适量，置 100 mL 量瓶内，加提取溶剂适量，超声 处理，取出放冷至室温，补足溶剂至刻度，摇匀， 静置取上清液作为供试品溶液。取已处理待用的大 孔吸附树脂，装入内径 1 cm 的层析柱至 5 cm 高度左 右，用适量蒸馏水冲洗干净，加 1.0 g 氧化铝。取上 述提取液 10 mL 过柱，用适量蒸馏水洗脱水溶性糖 份等杂质，用 70% 的乙醇溶液适量洗脱，收集洗脱 液，将溶剂挥干，然后将洗脱物用甲醇溶解定容至 10 mL，待测。 1.4.2 样品测定 取过柱后的待测液 30 μL，挥干溶 剂，加入 0.2 mL 0.5% 的香草醛冰醋酸溶液和 0.8 mL 高氯酸溶液，于 60 ℃水浴中显色，冷却后加 5 mL 冰醋酸，摇匀，用分光光度计测定。 1.4.3 线性关系 精密称取三七总皂苷对照品适量， 用甲醇溶解，配制成 0.2 mg/mL 的对照品溶液，分别 取 10、20、40、80、100 μL 对 照 品 溶 液， 按 “1.4.2” 项下方法测定。得回归方程为 ：Y=5.553 3 X-0.014 1 (r2=0.998 1)， 三 七 总 皂 苷 在 0.33~3.3 μg/μL 范围内 线性关系良好。 1.4.4 精密度试验 取配制成 0.2 mg/mL 的三七总皂 苷溶液 20 μL，按 “1.4.3” 项下方法测定。RSD 为 1.8%， 表明方法精密度良好。 1.4.5 稳定性试验 取已知含量的同一三七样品， 按 “1.4.3” 项下方法处理，测定，分别于 1、2、4、8、 12 h 测定。得 RSD 为 1.8%，表明三七皂苷在 12 h 内 稳定。 1.4.6 重 现 性 试 验 取 已 知 含 量 的 同 一 份 三 七 样 品，分别做 6 个平行，按 “1.4.3” 项下方法处理，测定。 得 RSD 为 1.1%，表明方法重现性好。 1.4.7 回收率试验 取已知含量的三七样品 3 份，分 别加入 0.2 mg/mL 的三七总皂苷溶液 60 μL，按 “1.4.3” 项下方法处理，测定，得平均回收率为 97.8% ，平 均 RSD 为 1.3%，方法满足分析要求。 2 结果与分析
现代中药研究与实践2011年第25卷第3期 Chin Med J Res Prac,2011 May.,Vol.25 No.3
—3—
·药材生产·
不同轮作年限三七总皂苷含量分析
黄天卫 1,2，张文斌 1,2，孙玉琴 1,2, 韦美丽 1,2，杨建忠 1,2*
(1. 文山三七研究院，云南 文山 663000 ；2. 云南三七农业工程实验室，云南 文山 663000)
不同生长时期的 24 份三七样品测定结果表明， 新地生长的三七总皂苷含量明显高于轮作 0~3 年生 长的三七，而轮作 5~7 年的三七总皂苷含量与新地 接近。本研究结果与游佩进等 [2] 进行三七连作土壤 对三七、莴苣的化感作用研究结果相同，即三七连作 土壤水提液对三七根长、苗高、鲜质量均有不同的 化感作用，三七连作土壤水提液中存在着化感物质， 影响三七种子及幼苗的正常生长。
三 七 为 五 加 科 人 参 属 植 物 三 七 Panax notogin seng(Burk)F.H.Chen 的根及根茎 , 具有散瘀止血、消 肿定痛的功效。三七在栽培过程中经常出现连作障碍 现象，致使云南当地土地利用率降低，影响三七的产 量和质量。连作障碍发生的原因主要为土壤有害微生 物增加、土传病害加重、土壤次生盐渍化及酸化以及 植物自毒作用 [1]。本试验对不同轮作年限土壤种植的
收稿日期： 2010-05-18 基金项目：云南省重点产业创新工程计划（2008IF025）。 作者简介：黄天卫（1972.3-），实习研究员，主要从事三七栽培技术研
究。 *通讯作者：杨建忠，副研究员。Tel：0876-8881537，E-mail：wsyjzh@163.
com
三七进行三七总皂苷含量测定，分析不同轮作年限土 壤对三七质量的影响，以期为三七连作障碍研究提供 科学依据。 1 材料和方法 1.1 供试材料
系 (r=0.999 8, n=5)，平均回收率 ：97.8% ，RSD ：1.3%，结论 新地三七总皂苷含量较高，随着轮作年限
的增加，三七总皂苷含量呈上升趋势，说明三七生长地在 5 年以内不宜轮作。
关键词 ：轮作年限 ；三七总皂苷 ；含量测定
中图分类号 ：S567.23+6
文献标识码 ：A
文章编号 ：1673-6427(2011)03-0003-02
5.500 4.027 4.418
9.393 7.916 8.311
马关3年 马关5年 马关7年 砚山新地 砚山0年
4.609 5.220 5.194 4.737 4.663
8.872 9.165 9.511 8.411 6.227
砚山1年 砚山3年 砚山5年
4.965 5.098 5.286
6.316 6.966 7.649
Content Determination of Sanqi (Panax notoginseng) Total Saponins Planted with
Different Rotation Years
HUANG Tian-wei1,2, ZHANG Wen-bin1,2,SUN Yu-qin1,2,WEI Mei-li1,2, YANG Jian-zhong1,2 (1.Wenshan Research Institute of Sanqi, Wenshan 663000, China; 2. Yunnan Engineering Laboratories of
不同轮作年限土壤种植的三七样品 24 个，产地 分别为文山古木、马关马鞍山、文山马塘、砚山基地 4 个点的新地，采集时间分别为生长年限间隔 0、1、 3、5、7 年。
仪器设备：UV2450紫外分光光度计(日本岛 津)；小型中草药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公 司）；恒温水浴锅（上海医疗仪器五厂）；恒温干 燥箱（上海跃进医疗器械厂）；超声清洗机（天津
different rotation years
产地轮作年限
6月份
总皂苷（%） 12月份
古木新地 古木0年 古木1年
4.563 3.689 3.628
7.373 5.892 5.921
古木3年 古木5年 古木7年
3.053 3.921 4.391
6.074 7.359 7.524
马关新地 马关0年 马关1年
Sanqi, Wenshan 663000, China) Abstract: Objective To determine the content of Sanqi (Panax notoginseng) total saponins from Wenshan region planted with different rotation years and analyze the influence of soil with different rotation years on Sanqi total saponins. Methods Ultrasonic extracted with methanol for 60 min, using vanilla aldehyde-high chlorine acid method to determine content with UV2450 ultraviolet spectrophotometer photometry and wavelength was set at 560 nm. Results The calibration curve was linear in the range of 0.33~3.3 μg/μL, and the average recovery rate was 97.8% with RSD=1.3%.Conclusion Content of Sanqi total saponins planted in new land was higher, as the increase of rotation year, content shows a rising trend, indicating that it’s unsuitable for rotation plant in old land in 5 years. Key words: rotation years; Sanqi (Panax notoginseng) total saponins; content determination
2.1 结果 取 不 同 轮 作 年 限 栽 培 的 三 七 样 品 24 份， 按
“1.4.3” 项下条件操作，测定三七总皂苷含量。结果
见表 1。
表1 不同轮作年限三七总皂苷含量 Tab. 1 Content of Sarqil (Panax notoginseng) total saponins planted with
从 连 作 土 壤 对 三 七 总 皂 苷 含 量 变 化 趋 势 看， 三七生长地轮作以 5 年以后为好，这与传统的三七种 植经验轮作年限至少 5 年以上的结论是一致的。 参考文献
[1] 游佩进 . 连作三七土壤中自毒物质的研究 [D]. 北京中医药大学，2009. [2] 游佩进，王文全，张 媛，等 . 三七连作土壤对三七、莴苣的化感作用 [J] . 西
砚山7年 马塘新地 马塘0年
5.163 4.765 4.689
8.009 8.227 6.145
马塘1年 马塘3年 马塘5年
4.958 4.972 5.055
6.931 7.227 8.546
马塘7年
5.112
8.670
2.2 小结 表 1 结果表明，6 月份开花期三七总皂苷的累
积 含 量 为 12 月 份 采 收 期 的 2/3 左 右， 说 明 三 七 以 10~12 月份为最佳采收期有效成分含量最高，质量最 好。
摘要 ：目的 通过对文山三七产区不同轮作年限三七总皂Baidu Nhomakorabea的含量测定，分析不同轮作年限土壤对
三七皂苷的影响。方法 甲醇超声提取 60 min，香草醛 - 高氯酸法测定总皂苷的含量，采用 UV2450 紫外
分光光度计光度法测定，检测波长为 560 nm。结果 三七总皂苷在 0.33~3.3 ug/uL 范围内呈良好的线性关
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现代中药研究与实践2011年第25卷第3期 Chin Med J Res Prac,2011 May.,Vol.25 No.3
市奥特赛恩斯仪器有限公司）；常规玻璃仪器等。 1.3 试剂 三七总皂苷对照品 ( 国家标准物质研究 中心，纯度 98.1±0.7%)，甲醇为色谱纯，水为重蒸水， 其他试剂均为分析纯。 1.4 分析方法及步骤 1.4.1 提取纯化 将三七粉碎成粗粉，精密称定三七 粉适量，置 100 mL 量瓶内，加提取溶剂适量，超声 处理，取出放冷至室温，补足溶剂至刻度，摇匀， 静置取上清液作为供试品溶液。取已处理待用的大 孔吸附树脂，装入内径 1 cm 的层析柱至 5 cm 高度左 右，用适量蒸馏水冲洗干净，加 1.0 g 氧化铝。取上 述提取液 10 mL 过柱，用适量蒸馏水洗脱水溶性糖 份等杂质，用 70% 的乙醇溶液适量洗脱，收集洗脱 液，将溶剂挥干，然后将洗脱物用甲醇溶解定容至 10 mL，待测。 1.4.2 样品测定 取过柱后的待测液 30 μL，挥干溶 剂，加入 0.2 mL 0.5% 的香草醛冰醋酸溶液和 0.8 mL 高氯酸溶液，于 60 ℃水浴中显色，冷却后加 5 mL 冰醋酸，摇匀，用分光光度计测定。 1.4.3 线性关系 精密称取三七总皂苷对照品适量， 用甲醇溶解，配制成 0.2 mg/mL 的对照品溶液，分别 取 10、20、40、80、100 μL 对 照 品 溶 液， 按 “1.4.2” 项下方法测定。得回归方程为 ：Y=5.553 3 X-0.014 1 (r2=0.998 1)， 三 七 总 皂 苷 在 0.33~3.3 μg/μL 范围内 线性关系良好。 1.4.4 精密度试验 取配制成 0.2 mg/mL 的三七总皂 苷溶液 20 μL，按 “1.4.3” 项下方法测定。RSD 为 1.8%， 表明方法精密度良好。 1.4.5 稳定性试验 取已知含量的同一三七样品， 按 “1.4.3” 项下方法处理，测定，分别于 1、2、4、8、 12 h 测定。得 RSD 为 1.8%，表明三七皂苷在 12 h 内 稳定。 1.4.6 重 现 性 试 验 取 已 知 含 量 的 同 一 份 三 七 样 品，分别做 6 个平行，按 “1.4.3” 项下方法处理，测定。 得 RSD 为 1.1%，表明方法重现性好。 1.4.7 回收率试验 取已知含量的三七样品 3 份，分 别加入 0.2 mg/mL 的三七总皂苷溶液 60 μL，按 “1.4.3” 项下方法处理，测定，得平均回收率为 97.8% ，平 均 RSD 为 1.3%，方法满足分析要求。 2 结果与分析
现代中药研究与实践2011年第25卷第3期 Chin Med J Res Prac,2011 May.,Vol.25 No.3
—3—
·药材生产·
不同轮作年限三七总皂苷含量分析
黄天卫 1,2，张文斌 1,2，孙玉琴 1,2, 韦美丽 1,2，杨建忠 1,2*
(1. 文山三七研究院，云南 文山 663000 ；2. 云南三七农业工程实验室，云南 文山 663000)
不同生长时期的 24 份三七样品测定结果表明， 新地生长的三七总皂苷含量明显高于轮作 0~3 年生 长的三七，而轮作 5~7 年的三七总皂苷含量与新地 接近。本研究结果与游佩进等 [2] 进行三七连作土壤 对三七、莴苣的化感作用研究结果相同，即三七连作 土壤水提液对三七根长、苗高、鲜质量均有不同的 化感作用，三七连作土壤水提液中存在着化感物质， 影响三七种子及幼苗的正常生长。
三 七 为 五 加 科 人 参 属 植 物 三 七 Panax notogin seng(Burk)F.H.Chen 的根及根茎 , 具有散瘀止血、消 肿定痛的功效。三七在栽培过程中经常出现连作障碍 现象，致使云南当地土地利用率降低，影响三七的产 量和质量。连作障碍发生的原因主要为土壤有害微生 物增加、土传病害加重、土壤次生盐渍化及酸化以及 植物自毒作用 [1]。本试验对不同轮作年限土壤种植的
收稿日期： 2010-05-18 基金项目：云南省重点产业创新工程计划（2008IF025）。 作者简介：黄天卫（1972.3-），实习研究员，主要从事三七栽培技术研
究。 *通讯作者：杨建忠，副研究员。Tel：0876-8881537，E-mail：wsyjzh@163.
com
三七进行三七总皂苷含量测定，分析不同轮作年限土 壤对三七质量的影响，以期为三七连作障碍研究提供 科学依据。 1 材料和方法 1.1 供试材料
系 (r=0.999 8, n=5)，平均回收率 ：97.8% ，RSD ：1.3%，结论 新地三七总皂苷含量较高，随着轮作年限
的增加，三七总皂苷含量呈上升趋势，说明三七生长地在 5 年以内不宜轮作。
关键词 ：轮作年限 ；三七总皂苷 ；含量测定
中图分类号 ：S567.23+6
文献标识码 ：A
文章编号 ：1673-6427(2011)03-0003-02
5.500 4.027 4.418
9.393 7.916 8.311
马关3年 马关5年 马关7年 砚山新地 砚山0年
4.609 5.220 5.194 4.737 4.663
8.872 9.165 9.511 8.411 6.227
砚山1年 砚山3年 砚山5年
4.965 5.098 5.286
6.316 6.966 7.649
Content Determination of Sanqi (Panax notoginseng) Total Saponins Planted with
Different Rotation Years
HUANG Tian-wei1,2, ZHANG Wen-bin1,2,SUN Yu-qin1,2,WEI Mei-li1,2, YANG Jian-zhong1,2 (1.Wenshan Research Institute of Sanqi, Wenshan 663000, China; 2. Yunnan Engineering Laboratories of
不同轮作年限土壤种植的三七样品 24 个，产地 分别为文山古木、马关马鞍山、文山马塘、砚山基地 4 个点的新地，采集时间分别为生长年限间隔 0、1、 3、5、7 年。
仪器设备：UV2450紫外分光光度计(日本岛 津)；小型中草药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公 司）；恒温水浴锅（上海医疗仪器五厂）；恒温干 燥箱（上海跃进医疗器械厂）；超声清洗机（天津
different rotation years
产地轮作年限
6月份
总皂苷（%） 12月份
古木新地 古木0年 古木1年
4.563 3.689 3.628
7.373 5.892 5.921
古木3年 古木5年 古木7年
3.053 3.921 4.391
6.074 7.359 7.524
马关新地 马关0年 马关1年
Sanqi, Wenshan 663000, China) Abstract: Objective To determine the content of Sanqi (Panax notoginseng) total saponins from Wenshan region planted with different rotation years and analyze the influence of soil with different rotation years on Sanqi total saponins. Methods Ultrasonic extracted with methanol for 60 min, using vanilla aldehyde-high chlorine acid method to determine content with UV2450 ultraviolet spectrophotometer photometry and wavelength was set at 560 nm. Results The calibration curve was linear in the range of 0.33~3.3 μg/μL, and the average recovery rate was 97.8% with RSD=1.3%.Conclusion Content of Sanqi total saponins planted in new land was higher, as the increase of rotation year, content shows a rising trend, indicating that it’s unsuitable for rotation plant in old land in 5 years. Key words: rotation years; Sanqi (Panax notoginseng) total saponins; content determination
2.1 结果 取 不 同 轮 作 年 限 栽 培 的 三 七 样 品 24 份， 按
“1.4.3” 项下条件操作，测定三七总皂苷含量。结果
见表 1。
表1 不同轮作年限三七总皂苷含量 Tab. 1 Content of Sarqil (Panax notoginseng) total saponins planted with
从 连 作 土 壤 对 三 七 总 皂 苷 含 量 变 化 趋 势 看， 三七生长地轮作以 5 年以后为好，这与传统的三七种 植经验轮作年限至少 5 年以上的结论是一致的。 参考文献
[1] 游佩进 . 连作三七土壤中自毒物质的研究 [D]. 北京中医药大学，2009. [2] 游佩进，王文全，张 媛，等 . 三七连作土壤对三七、莴苣的化感作用 [J] . 西
砚山7年 马塘新地 马塘0年
5.163 4.765 4.689
8.009 8.227 6.145
马塘1年 马塘3年 马塘5年
4.958 4.972 5.055
6.931 7.227 8.546
马塘7年
5.112
8.670
2.2 小结 表 1 结果表明，6 月份开花期三七总皂苷的累
积 含 量 为 12 月 份 采 收 期 的 2/3 左 右， 说 明 三 七 以 10~12 月份为最佳采收期有效成分含量最高，质量最 好。