自体髂骨复合PRF修复牙槽嵴裂的实验研究

１０ｍｌ 玻璃离心管内，以 ３０００ｒ／ｍｉｎ 转速离心 １０ｍｉｎ，之后缝 面图像叠加起来，还原成三维图像。在临床病例中，由于牙槽
合颈部切口。离心后可见试管内分为 ３ 层：最上层是无细胞 嵴裂患者的骨缺损形状不规则，重建及测量体积十分复杂。
颌
血浆层，为半透明的淡黄色液体；下层为血细胞层，含有大量 所以在制造缺损时就要考虑测量的问题，本实验中截骨方向
后在腭侧制备一裂隙将前两个裂隙连通，方向平行于颅骨长 们叠加起来，即可以算出植骨区域的体积，比较不同时间点
轴。最后在确认鼻底粘膜完整的情况下，以咬骨钳连同骨段 的植骨区体积，即可以算出植入骨质的吸收情况。分别计算
及第一、二侧切牙一同截下，得到近似矩形的骨缺损。另一侧 出每个时间点每只犬实验侧与对照侧的骨吸收率，进行配对
牙槽嵴裂二期植骨手术对于大多数牙槽嵴裂的患者，是 一种有效的治疗方法［１］，也是唇腭裂序列治疗的重要组成部 分［２］。临床上常用的办法是取自体松质髂骨，制备成骨块，游 离移植到牙槽嵴裂骨缺失的部位。这一手术很大程度上解决 了牙槽嵴裂患者牙槽嵴形态不完整、恒牙无法正常萌出、唇 鼻外形塌陷畸形等诸多问题，也能为之后的牙列修复治疗提 供必要的条件。然而，临床医生们发现植入的骨组织并不能 完全成活，或多或少的伴有骨吸收的发生。为此，学者们不断 探索加速骨生长，减少骨吸收的办法。Ｅｒｉｋｏ Ｍａｒｕｋａｗａ 等［３］ 将富血小板血浆 （ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｒｉｃｈ ｐｌａｓｍａ，ＰＲＰ）与自体髂骨
·论著·
[ 摘要] 目的：将富血小板纤维蛋白（ Ｐｌ ａｔ ｅｌ ｅｔ － ｒ ｉ ｃｈ ｆ ｉ ｂｒ ｉ ｎ，ＰＲＦ） 应用于牙槽嵴裂植骨手术，验证其是否能够减少植骨术后的 骨吸收。方法：８～１２ 月龄犬 ８ 只，以外科手术的方法制备双侧牙槽嵴裂模型，随机于两侧同期植入自体髂骨（对照组）及自体髂 骨混合 ＰＲＦ（实验组）。于术后当日、２ 个月、４ 个月时拍摄上颌骨 ＣＴ，利用三维重建软件测量植骨区体积，计算骨吸收率。结果： 术后 ２ 个月、４ 个月时实验组的骨吸收率明显小于对照组，行配对样本的 ｔ 检验，Ｐ＜０． ０１。结论：将 ＰＲＦ 加入自体髂骨进行骨移 植修复犬的牙槽嵴裂，在术后 ４ 个月的时间范围内，可以减少术后的骨吸收。 [ 关键词] 富血小板纤维蛋白；牙槽嵴裂植骨；三维重建；骨吸收率 [ 中图分类号] Ｒ７８２ [ 文献标识码] Ａ [ 文章编号] １００８－ ６４５５（２０１３）０１－ ００２４－ ０２
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中国美容医学 2013 年 1 月第 22 卷第 1 期 Chinese Journal of Aesthetic Medicine.Jan.2013.Vol.22.No.1
自体髂骨复合 ＰＲＦ 修复牙槽嵴裂的实验研究
周 龙，封兴华ห้องสมุดไป่ตู้陆 斌
（第四军医大学口腔医学院颌面整形外科 陕西 西安 ７１００３２）
面
的红细胞；两者之间的半透明浅黄色凝块即为富血小板纤维 均垂直或平行于颅骨的长轴方向，水平位上看，植骨区的形
美
蛋白（ＰＲＦ）。
状近似于一个梯形，冠状位上，每一层图像上的植骨部位近
容
１．２．２ 制备上颌双侧牙槽嵴裂：头面部及口内消毒，铺单，利 似一个矩形。拍摄 ＣＴ 行冠状位扫描，再以冠状位的平面图像
再将 ＰＲＦ 膜片剪碎，制备成直径约 １ｍｍ 的 ＰＲＦ 碎块，随机加 构已开始形成，但密度仍小于正常骨皮质密度（图 １ｂ）。术后
入一份碎骨块，充分混合。将两份骨块按照实验计划分别填 ４ 个月 ＣＴ 显示，双侧植骨区骨质吸收仍在继续，但程度已较
于两侧骨缺损，适当加压，充分填匀，保证粘膜瓣无张力的情 术后 ２ 个月时明显减少，骨皮质密度已与正常骨皮质接近，
多卡因浸润麻醉术区。沿上唇系带自龈缘至前庭沟底切开至 进行三维重建。
骨面，再沿双侧中切牙、双侧第一、二侧切牙龈缘至双侧尖牙 １．４．２ 体积测量方法：本实验使用的是 ｍｉｍｉｃｓ１０．０１ 软件。
近中侧切开粘膜至骨面，形成倒 Ｔ 形切口，翻起颊侧粘膜至 术后当日，实验犬全麻拍摄第 １ 次 ＣＴ，此时的可以确定植入
Experimental study on autologous iliac bone transplantation combined with PRF
ZHOU Long,FENG Xing-hua,LU Bin (Department of Oral and Maxillofacial Surgery,School of Stomatology,The Forth Military Medical University, Xi'an 710032,
约 ２ｃｍ×３ｃｍ，呈矩形。充分止血后，关闭切口。将取下的髂骨 伤口感染，骨块排出等情况。
制备成直径 ２～３ｍｍ 大小的碎骨块，等分成两份，待用。
２．２ ＣＴ 影像：术后当日 ＣＴ 显示，双侧骨缺损均完整充填，可
１．２．４ 牙槽嵴裂植骨：取出离心完成的玻璃离心管，将管口 清晰地分辨出移植骨与宿主骨，由于实验侧混有 ＰＦＲ 碎块，
一侧为对照组。实验组：植入 ＰＲＦ 与自体髂骨的混合物；对照 组：仅植入自体髂骨。由于杨雁等［１２］已验证这种模型制备方 法，故未设置空白对照。 １．２ 手术步骤 １．２．１ ＰＲＦ 的制备：术前髂部及颈部备皮，禁食水 ６ｈ，称重， 肌肉注射速眠新 ０．１ｍｌ／Ｋｇ 及 ３％戊巴比妥钠 ０．５ｍｌ／Ｋｇ 麻醉。 仰卧位固定，充分显露颈部，０．５％碘伏消毒颈部皮肤，常规铺 单。于甲状软骨水平，颈中线偏左 ２ｃｍ，向下行 ３ｃｍ 长切口切
制备一个裂隙，上至鼻底，深达鼻腭孔，方向与颅骨长轴方向 同时间点的图像。在 ＣＴ 图像上，我们可以很轻易地区分完整
垂直。再于第一侧切牙近中沿牙体长轴方向制备一个裂隙， 骨段与碎骨块，这样就可以利用术后当日的图像定位出植骨
深至腭侧骨壁，制备时偏远中，减少对中切牙牙根的损伤。之 的范围，利用软件选中每层图像上包含植骨区的区域，将它
个月。
２．０３）％、对照侧（２５．６０±３．６１）％，进行配对样本的 ｔ 检验，
１．４ 影像学评价与测量：在以往的研究中，对于植骨效果的 Ｐ＜０．０１（如图 ３）。
以同样方法制备，即得到了双侧牙槽嵴裂骨缺损的模型。
ｔ 检验，检验是否有统计学差异。
１．２．３ 取髂骨术：解开一侧固定的后肢，犬使下半身改为侧
卧位。沿髂前上嵴外侧缘行长约 ４ｃｍ 的切口切开皮肤，解剖 2 结果
暴露出髂前上嵴，以骨钻将髂前上嵴处骨质整块截下，大小 ２．１ 实验动物情况：所有实验动物均正常成活，术后未出现
月、４ 个月时拍摄上颌骨 ＣＴ。杨雁等［１０］在术后 ８ 周时发现宿
２．４ 体积测量：２ 个月时，实验侧吸收率（１１．３７±１．５１）％、对
主骨与移植骨完全融合，１２ 周时骨吸收趋于稳定，考虑到实 照侧（２１．８９±３．５４）％，使用 ＳＰＳＳ１３．０ 统计软件进行配对样
验动物的个体差异，故将 ＣＴ 拍摄时间定为术后 ２ 个月与 ４ 本的 ｔ 检验，Ｐ＜０．０１。４ 个月时，实验侧吸收率 （１６．１６±
消毒，以止血钳将富血小板纤维蛋白层（ＰＲＦ）连同下方的血 实验侧骨质密度低于对照侧（如图 １ｃ）。术后 ２ 个月 ＣＴ 显示，
细胞层一起夹出，剪去下方的血细胞层分离，把 ＰＲＦ 至于无 移植骨与宿主骨已无明显界限，两侧均有骨质吸收的情况发
菌干纱布上，以另一块纱布将其压成薄片，即得到 ＰＲＦ 膜片， 生，对照侧骨质吸收的情况明显大于实验侧，边缘骨皮质结
复合移植修复牙槽突裂，发现这一方法能够减少植骨术后的 骨吸收。富血小板血浆（ＰＲＰ）含有大量血小板并且能够释放 ＰＤＧＦ、ＴＧＦ－β 以及 ＶＥＧＦ 等多种生长因子促进骨形成。２００６ 年由法国学者 Ｃｈｏｕｋｒｏｕｎ 等［４－６］报道了一种新的血小板富集 方法：富血小板纤维蛋白（Ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｒｉｃｈ ｆｉｂｒｉｎ，ＰＲＦ），这 种方法与富血小板血浆（ＰＲＰ）的制备相比，不需要抗凝剂也 不需要凝血酶，使得它的应用更加安全和简便。学者们将富 血小板纤维蛋白（ＰＲＦ）应用于牙周、种植等领域的疾病治疗
Shaanxi,China)
Abstract: Objective We grafted the platelet-rich fibrin (PRF) mixed with autogenous iliac bone in the alveolar cleft and evaluated the bone resorption after operation. Methods 8 dogs (8～12 months) were created bilateral alveolar cleft by surgical operation. autogenous iliac bone(control group) and the PRF mixed with autogenous iliac bone(PRF group) were implanted into the defect of one side randomly and bone regeneration was investigated 2 months and 4 months after implantation. Results The bone resorption of the PRF group was lower than that of the control group at 2 months and 4 months,P ＜0.01. Conclusion Autogenous iliac bone grafting with PRF,which significantly reduces postoperative bone resorption on dog bilateral alveolar cleft model. Key words:platelet-rich fibrin(PRF);alveolar bone grafting;three-dimensional reconstruction;bone resorption
况下严密缝合，关闭切口。
对照侧骨质吸收明显大于实验侧（图 １ｃ）。
１．３ 术后处理：术后实验动物进半流质饮食，术后连续 ３ 日 ２．３ 三维重建图像：三维重建图像上可以直观看出对照侧的
肌注青霉素预防感染，每日观察口内切口并行颈部及髂部切 骨吸收情况大于实验侧。骨的吸收主要发生在外侧缘，远离
口换药，１０ 日后拆除颈部髂部缝线。分别于术后当日、２ 个 宿主骨的部位有更明显的吸收，呈向内凹陷的形态（如图 ２）。
通讯作者：封兴华，教授，主任医师，研究生导师：Ｅｍａｉｌ：ｆｅｎｇｘｈ＠ｆｍｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
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开皮肤，分离出颈静脉，一次性采血 ２０ｍｌ，迅速分盛于 ２ 支 １．４．１ 三维重建原理：三维重建的原理就是将连续的多张平
中，发现 ＰＲＦ 有很好的促进骨形成的特性［７－９］。本实验旨在研 究将 ＰＲＦ 引入牙槽嵴裂植骨手术是否能促进术后的骨生长、 减少骨吸收。
1 材料和方法 １．１ 实验动物及动物模型：本实验参照杨雁等［１０］犬的单侧牙 槽嵴裂即刻植骨模型的方法，设计双侧牙槽嵴裂植骨模型。 选用犬 ８ 只，性别不限，年龄 ８～１２ 月龄，体重 １０～１５Ｋｇ，所 有试验犬均体健，牙列完整，咀嚼功能正常。实验采用同体对 照的方法，随机设置同一只动物的左侧或右侧为实验组，另
鼻底部，显露骨组织。腭侧沿龈缘切开中切牙远中至尖牙近 骨质的总量，术后 ２ 个月、４ 个月的 ＣＴ 反应这两个时间点骨
中粘膜至骨面，翻起粘膜瓣与颊侧暴露位置相对应。以骨钻 生长情况。首先分别将这 ３ 个时间点的影像重建，利用
磨切，生理盐水冲淋降温，先于尖牙近中处，沿牙体长轴方向 ｍｉｍｉｃｓ 将其拟合，即重叠在一起，这时可以看到同一部位不