生物安全实验室消毒与灭菌(2015)

现场消毒
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术语
终末消毒 terminal disinfection 传染源离开疫源地后进行的彻底消毒。 预防性消毒preventive disinfection 对可能受到病原微生物污染的物品和场所进行 的消毒。 人员卫生处理 personnel decontamination 对污染或可能被污染人员进行人体、着装、 随身物品等的消毒与清洗等除污染处理。
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影响消毒效果的因素
相对湿度
湿度主要影响气体熏蒸消毒剂的作用。如甲醛等 气体熏蒸需要合适的相对湿度；但紫外线消毒则受 到湿度影响其消毒作用。
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影响消毒效果的因素
消毒剂协同作用
利用2种或以上可以配伍的消毒剂，以充分发挥各 自消毒特点，提高消毒剂的协同作用，如醇类与 季铵盐类的复配，可以使该消毒溶液具有较快的 杀菌作用，又具备延长消毒作用时间的效果。
□ 物理消毒：通风换气、流水冲洗等除菌方法； □ 化学消毒：单链季铵盐类消毒剂（如苯扎溴 铵）、双胍类消毒剂（如洗必泰）；以及中草药制 剂、银、铜等金属离子剂等。
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影响消毒效果的因素
处理剂量
□ 强度：消毒剂浓度、温度、电离辐射剂量； □ 时间：指消毒因子的作用时间。 强度与作用时间的积即为剂量， 在一定条件下，强度与时间可相互增减达到互补。
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影响消毒效果的因素
化学拮抗剂
化学消毒剂均有其独特的化学性质，其活性也会 受其性质相反物质的影响。如氧化消毒剂可被还原 物质所破坏；阳离子消毒剂受阴离子影响；蛋白质、 油脂类物质均可消耗或破坏消毒剂。 化学拮抗物质是消毒剂试验中中和剂性质的重要依 据。
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压力蒸汽灭菌器
○双扉压力蒸汽灭菌器
（double-ended autoclave）：安装在清洁区 -污染区之间，实验因子存放 专用容器，从实验区（污染） 一侧门放入压力蒸汽灭菌锅内， 实施压力蒸汽消毒后，从清洁 区一侧门取出，再送至医疗废 物存放间，统一集中回收处置。
化学消毒法
含氯消毒剂：次氯酸钠等
强
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消毒因子作用等级的分类
根据消毒作用是否能杀灭包括芽孢在 的病原微生物，将消毒水平等级分 为四大类：灭菌方法、高效(高水平） 、中效（中水平）和低效（低水平） 消毒方法。 内
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灭菌方法
可杀灭外环境中一切病原微生物的物理、化 学的方法。
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术语
有效氯 available chlorine 有效氯是衡量含氯消毒剂氧化能力的标志，是指与 含氯消毒剂氧化能力相当的氯量(非指消毒剂所含 氯量)，其含量用mg/L或%浓度表示。 中和剂 neutralizer 在微生物杀灭试验中，用以消除试验微生物与消毒 剂的混悬液中和微生物表面上残留的消毒剂，使其 失去对微生物抑制和杀灭作用的试剂。
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术语
疫源地消毒 disinfection of epidemic focus 对存在或曾经存在传染源的场所进行的消毒 措施。 随时消毒 concurrent disinfection 有传染源存在时对其排出的病原体可能污染 的环境和物品及时进行的消毒。
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过氧乙酸
过氧乙酸具有快速杀灭所有微生物的作用特征，其 作用机制通常被认为是使蛋白质变性，破坏细胞壁 通透性，并且氧化蛋白质、酶和其它代谢物中的巯 基和硫键。 仅100mg/L的过氧乙酸杀灭革兰阳性菌和革兰阴性 菌、真菌和酵母菌仅需5min；在有机物存在时则需 要200～500 mg/L的浓度。 对于金属类有腐蚀性，同时配制成应用溶液后被认 为不稳定。 适用于环境表面、空气和物品等消毒。
化学消毒剂淋浴
根据病原体抗力配制消毒剂
非接触法环境消毒装置
Rutala. Infect Control Hosp Epidemiol. 2011;32:743
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新病房净化处置方法
过氧化氢气雾（HPV） — 微量冷凝雾化器 — “干气”雾化器
McAnoy AM: Vaporous Decontamination Methods, Australian Government DSTO 2006 French GL et al. J Hosp Infect 2004;57:31 Jeanes A et al. J Hosp Infect 2005;61:85 Bates CJ et al. J Hosp Infect 2005;61:364
□ 物理灭菌：热力灭菌、微波、电离辐射、等离子 体等； □ 化学灭菌：戊二醛、邻苯二甲醛（OPA）、环氧 乙烷（EO）、过氧化氢、过氧乙酸等。
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高水平消毒
可以杀灭包括致病性芽孢、结核杆菌在内的 几乎所有的病原微生物的消毒方法。 □ 物理消毒：紫外线、臭氧等； □ 化学消毒：含氯消毒剂、强氧化剂、含 溴消毒剂等。
5min
＞5.0 ＞5.0 ＞5.0 ＞5.0
10min
＞5.0 ＞5.0 ＞5.0 ＞5.0
含氯消毒剂
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2500
5000
3.8
5.8
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＞5.0
＞5.0
＞5.0
＞5.0
＞5.0
＞5.0
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消毒湿巾disinfection wet wipes
以无纺布为载体，吸附消毒液（液体量为载 体的≥1.7倍）或消毒液+表面活性剂；利用 对环境表面的擦拭的过程，释放消毒因子， 对环境表面病原微生物实施杀灭； 载体消毒剂
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新剂型的环境消毒剂
粉剂：即配即用 碱性过氧乙酸，广谱、快速 环境友好
消毒剂 浓度 1150 2300 5000 1250
附表 不同消毒剂杀灭艰难梭菌芽胞试验
作用时间（min）下降对数值
1min
瑞可安 （过氧乙酸）
2.5 ＞5.0 ＞5.0 2.7
3min
5.8 ＞5.0 ＞5.0 4.7
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季铵盐类
季铵盐类消毒剂是广泛使用的消毒剂，季铵 盐类同时也是很好的清洁剂。季铵盐的杀菌 作用被认为是灭活细胞的产能酶，使蛋白发 生变性，并且使细胞膜破碎而死亡。季铵盐 消毒剂可杀灭真菌、细菌和亲脂类病毒 。 适用于环境表面、物品等消毒。
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影响消毒效果的因素
pH值
酸碱度影响化学消毒剂的作用。化学消毒剂因性 质不同，对于酸碱度的要求不同，含氯消毒剂在酸 性条件下作用强，戊二醛、季铵盐类在碱性条件下 消毒效果好。 有些消毒剂可以通过复方强化来改变其对酸碱度的 依赖性，如含氯消毒剂可通过碱化来改变其稳定性。
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过氧化氢
过氧化氢具有广谱杀菌作用，包括细菌、酵母菌、 真菌、病毒和芽孢。过氧化氢可直接氧化细胞外层 结构，使细胞的通透性屏障功能失去作用，结果使 细胞体内外物品平衡受到破坏导致细菌死亡。 0.5%过氧化氢在1min内可杀灭细菌和病毒，在5min 内可杀灭分枝杆菌和真菌，但完全杀死芽孢需要用 10%过氧化氢作用60min。 作用时间、相对湿度等不同程度影响其消毒效果。 适用于环境表面、空气和物品等消毒；有机物干扰 较小。
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次氯酸钠（原液5.25～6.15%)
配 制 浓度mg/L 52500～61500 5250～6150 1050～1230 105～123 举 例 原液 1:10稀释 1:50稀释 1:500稀释
有效杀灭芽孢 有效杀灭耐药TB、 诺如病毒等 细菌繁殖体
Rutala WA et al. CDC Guideline for Disinfection & Sterilization In Healthcare Facilities, 2008
品种繁多 清洁剂+消毒剂，兼容性好 单剂消毒剂/复配消毒剂协同 特殊消毒湿巾（杀孢子型、溢漏吸湿型）
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消毒干巾disinfection dry wipes
溢 出 覆 盖
吸附 ︑ 消 毒
装 袋 ︑ 丢 弃
BSL-4实验室剖面示意图
BSL--4 实验室
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消毒湿巾纸
清洁-消毒一步完成（One-step） 使用后抛弃（disposal）避免交叉污染；同时 减少复用环节，节约人力、时间； 使用方便：即取即用；可以放置床边、挂在治 疗车上、操作台面等随手可得处。
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消毒湿巾disinfection wet wipes
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消毒目的
采用物理、化学和生物等手段与技术，清 除外环境中各类表面与物品上污染的病原微 生物，以达到无害化，阻断疾病的播撒。
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微生物对消毒因子抗力的递减顺序
朊毒体 (Prions) 专用消毒程序 灭菌与高水平消毒 芽孢 (Spores) 中水平消毒 分支杆菌 (Mycobacteria) 非脂类病毒 (Non-Enveloped Viruses) 真菌 (Fungi) 低水平消毒 繁殖体 (Bacteria) 脂类病毒 (Enveloped Viruses) 弱
生物安全实验室消毒与灭菌
杭州市疾病预防控制中心 倪晓平
术语
消毒 disinfection 杀灭或清除传播媒介上病原微生物，使其 达到无害化的处理。 灭菌 sterilization 杀灭或清除传播媒介上一切微生物的处理。
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术语
高效消毒剂 high-efficacy disinfectant 指可杀灭一切细菌繁殖体、病毒、真菌及其孢子等， 对细菌芽孢（致病性芽孢菌）也有一定杀灭作用， 达到高水平消毒要求的制剂。 中效消毒剂 intermediate-efficacy disinfectant 指仅可杀灭分枝杆菌、真菌、病毒及细菌繁殖体等微 生物，达到消毒要求的制剂。 低效消毒剂 low-efficacy disinfectant 指仅可杀灭细菌繁殖体和亲脂病毒，达到消毒要求的 制剂。
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常用的消毒方法
物理消毒法
化学消毒法 生物消毒法
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物理消毒法
热力消毒 紫外线消毒 等离子体消毒 过滤除菌法 电离辐射消毒
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压力蒸汽灭菌器
○重力置换—生物安全型灭菌器：该类型灭菌器
排气通道是经过一加热容器后再排出，以避免 微生物气溶胶未经高温消毒直接排放，又称内 循环式。主要用于医疗废物、实验室感染废弃 物（液体、固体）的消毒。
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影响消毒效果的因素
作用Βιβλιοθήκη Baidu度
温度对于热力消毒而言是重要的决定因素。对于其 他消毒方法也是重要的影响因素，如适当提高温度 可以提高化学反应的活性与作用效果。
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影响消毒效果的因素
微生物污染程度
微生物污染程度越大，消毒难度越大。因为污染的 有机物可消耗消毒剂，可阻挡热力、辐射的穿透， 消毒作用时间也会因此延长。
过氧化物类：过氧乙酸等 含碘消毒剂：碘伏等； 醇类消毒剂：乙醇等； 醛类消毒剂：戊二醛等； 酚类消毒剂：石碳酸等； 杂环类消毒剂：环氧乙烷等； 季铵盐类消毒剂：苯扎溴铵等。
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含氯消毒剂
含氯消毒剂中使用是最广泛的，有液体（次氯酸钠） 和固体（次氯酸钙）两种。它们有广谱杀菌活性， 价格低廉，作用迅速，能有效清除环境与物体表面 上微生物。 对于金属类有明显的腐蚀作用，对织物类有漂白作 用，有较强的刺激作用。 适用于环境表面、污染物、污水、物品等消毒。
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中水平消毒
可以杀灭除芽孢以外的各种病原微生物的消 毒方法。 □ 干燥度：当空气中湿度为50%时，部分浮 游细菌和病毒仅存活10min； □ 化学消毒：碘类消毒剂、醇类消毒剂、 双长链季铵盐类以及某些复配的消毒剂等。
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低水平消毒
只能杀灭细菌繁殖体和亲酯类病毒（有细胞 膜）的消毒方法。