实验四 细菌在培养基中的生长表现与生化实验
细菌的接种方法及生长现象观察实验报告
细菌的接种方法及生长现象观察实验报告实验名称：细菌的接种方法及生长现象观察实验实验目的：了解不同细菌接种方法，观察其生长现象并熟悉对不同细菌的鉴别方法。
实验原理：实验中使用的细菌主要有大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，这两种细菌的形态、生理和生化特性都有所不同，因此可以通过对其生长情况和代谢产物鉴定分离。
实验步骤：1. 准备培养基和实验用具。
将脑心涂片培养基、大肠杆菌培养基和营养琼脂培养基准备好，并消毒使用的培养器具。
2. 细菌样本预处理。
将所选的样本细菌用无菌的移液管分别接种到脑心涂片培养基和大肠杆菌培养基中。
每个细菌样本接种三个孔，并标记清楚。
3. 处理营养琼脂培养基。
制作营养琼脂培养基，分装至不同的培养皿中，并在上面像钟表一样标记12个点，以备后续接种使用。
4. 接种细菌。
分别使用病原菌的直接接触法、匀涂法和滴定法，接种到不同的培养皿中。
对于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别接种两次，每个接种方法分别接种一次，可共接种12个孔。
5. 确认培养基接种位置和标记结果。
将接种好的培养皿放入培养箱中保持适宜的培养环境，隔一段时间观察细菌生长情况，并对产生的代谢产物做出初步的鉴别。
实验结果观察：1. 直接接触法：以金黄色葡萄球菌为例，直接将其接种到营养琼脂培养基的中心，使用此方法，菌落数量较多，生长范围较窄，生长感觉较短。
2.匀涂法：以大肠杆菌为例，使用平均划线的方式涂抹菌液到琼脂平板上并再次划线，此方法效果更好，生长期较长。
3. 滴定法：以大肠杆菌为例，使用无菌的移液器抽取一定的菌液滴到琼脂平板上，此方法的生长效果也较好，但抽取的菌量要严密掌控。
实验结论：通过试验了解到使用不同接种方法得到细菌生长的结果也有所不同，每种接种方法都有其特定的优缺点，根据不同的需求可以选择最适合的方法。
细菌的生长速度和数量可以通过直接观察培养基上的菌落情况来判断，而细菌产生的代谢产物则可以用生化史实的方式作出初步鉴别，对于细胞形态和细胞结构等特征的鉴别可以通过显微镜技术进一步观察分析。
实验四微生物的纯培养
微生物纯培养的原理
01
无菌操作
在微生物纯培养过程中，无菌操作是关键。通过在无菌条件下进行样品
的采集、分离、纯化、培养等步骤，确保获得的微生物菌落是单一的、
纯净的。
02
选择性培养基
选择性培养基是根据不同微生物的特殊营养需求和生长特点设计的培养
基，通过选择性培养基能够促进所需微生物的生长，抑制其他微生物的
的微生物群体中分离出来。
纯化
通过反复的分离、移植和纯培养过 程，逐步淘汰其他杂菌，最终获得 纯种的微生物。
鉴定
对纯化的微生物进行形态学、生理 生化及遗传学等方面的鉴定，以确 认其种属和特性。
04
实验结果与分析
微生物的培养结果观察与记录
观察与记录
在实验过程中，我们观察并记录 了微生物在不同培养基上的生长 情况，包括菌落形态、颜色、大 小、生长速度等特征。
微生物纯化
通过反复划线分离或稀释分离 的方法，将微生物逐渐纯化， 获得单一的菌落。
样品采集
根据研究目的选择合适的样品， 采集具有代表性的样品。
微生物分离
通过划线分离法、稀释分离法 等方法将微生物从样品中分离 出来。
微生物培养
将纯化的微生物接种到适宜的 培养基中进行培养，观察其生 长情况并进行记录。
03
改进建议2
寻找成本较低的替代品或国产试剂， 降低实验成本。同时，合理规划实验 材料的使用，避免浪费。
实验在未来的应用前景与发展方向
应用前景
随着微生物资源的深入研究和开发，微生物的纯培养 技术在农业、工业和医疗等领域具有广阔的应用前景 。例如，某些特殊微生物可用于生物农药和生物肥料 的开发，提高农作物产量和品质；某些具有特殊功能 的微生物可用于工业发酵生产；某些药用微生物可用 于抗生素和生物药物的生产。
生态生化实验报告
一、实验目的1. 了解生态生化实验的基本原理和操作方法。
2. 掌握微生物的培养、分离和纯化技术。
3. 探究不同环境条件下微生物的生长情况。
4. 分析微生物代谢产物及其对生态系统的影响。
二、实验原理生态生化实验是研究生物在生态系统中的生长、代谢和相互作用的实验。
通过实验，可以了解微生物在不同环境条件下的生长情况，分析微生物代谢产物及其对生态系统的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基、沙氏葡萄糖培养基等。
- 实验试剂：无菌水、氯化钠、氢氧化钠、硫酸铜、磷酸二氢钾等。
- 微生物：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等。
2. 实验仪器：- 灭菌器、培养箱、显微镜、移液器、天平、无菌操作台等。
四、实验步骤1. 微生物的分离与纯化（1）制备平板：将牛肉膏蛋白胨培养基加热融化后，冷却至50℃左右，加入适量的氯化钠，混匀后倒入平板中，待凝固。
（2）接种：用无菌接种环取少量金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等菌液，分别接种于平板上。
（3）培养：将平板放入培养箱中，在适宜的温度下培养24小时。
（4）挑取单菌落：用无菌接种环挑取单菌落，接种于新的平板上，重复培养，直至获得纯菌。
2. 微生物的生长实验（1）制备培养基：按照牛肉膏蛋白胨培养基的配方，制备营养肉汤培养基。
（2）接种：将纯化的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等菌液接种于培养基中。
（3）培养：将培养基放入培养箱中，在适宜的温度下培养24小时。
（4）观察：观察菌落生长情况，记录生长速度、形态等。
3. 微生物代谢产物分析（1）提取代谢产物：将生长良好的菌液离心，收集菌体，用无菌水洗涤，再次离心，收集菌体。
（2）分析：采用纸层析法、薄层层析法等方法，分析微生物代谢产物的种类和含量。
4. 微生物对生态系统的影响实验（1）制备生态系统：将沙土、植物、微生物等放入容器中，模拟自然生态系统。
（2）接种：将纯化的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等菌液接种于生态系统中。
细菌的生化实验报告
细菌的生化实验报告细菌的生化实验报告细菌是一类微小而广泛存在于自然界中的生物体，它们在地球上的生物圈中起着重要的作用。
通过对细菌的生化实验，我们可以更深入地了解它们的生物特性和功能。
本文将介绍一系列细菌的生化实验，包括细菌的酶活性、代谢产物以及对环境的影响等方面。
实验一：酶活性研究酶是细菌体内的重要生物催化剂，它们参与了多种代谢过程。
我们可以通过测定细菌体内特定酶的活性来了解其代谢能力。
以大肠杆菌为例，我们可以使用酶活性检测试剂盒来测定其β-半乳糖苷酶活性。
实验结果显示，大肠杆菌中β-半乳糖苷酶活性较高，这表明其在代谢乳糖方面具有较强的能力。
实验二：代谢产物分析细菌的代谢过程会产生各种化合物，这些化合物可以作为细菌代谢的指标。
我们可以通过气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）来分析细菌培养液中的代谢产物。
以枯草杆菌为例，通过GC-MS分析，我们发现其培养液中存在着丰富的有机酸和氨基酸，这些代谢产物反映了枯草杆菌的代谢途径和能力。
实验三：抗生素敏感性测试细菌对抗生素的敏感性是临床治疗中的重要指标。
我们可以通过纸片扩散法来测试不同细菌株对不同抗生素的敏感性。
实验结果显示，金黄色葡萄球菌对青霉素敏感，而对庆大霉素耐药。
这些结果对于合理使用抗生素和治疗细菌感染具有重要的指导意义。
实验四：细菌对环境的影响细菌在自然界中广泛存在，它们对环境有着重要的影响。
我们可以通过测定细菌在不同环境条件下的生长情况来研究其对环境的适应性。
以耐盐菌为例，我们可以将其分别培养在不同盐浓度的培养基中，观察其生长情况。
实验结果显示，耐盐菌在高盐浓度环境中生长较好，这表明其对高盐环境具有较强的适应能力。
细菌的生化实验为我们深入了解细菌的生物特性和功能提供了重要的手段。
通过研究细菌的酶活性、代谢产物以及对环境的影响，我们可以更好地理解细菌的代谢途径、生态角色以及与人类健康的关系。
这些实验结果对于开发新的抗菌药物、改良环境治理策略以及预防细菌感染具有重要的指导意义。
细菌生理生化实验
细菌的生理、生化实验简介微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。
因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一,微生物检验中常用的生化反应介绍如下：一、糖酵解试验不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。
可用指示剂及发酵管检验。
试验方法：以无菌操作，用接种针或环移取纯培养物少许，接种于发酵液体培养基管中，若为半固体培养基，则用接种针作穿刺接种。
接种后，置36±°C培养，每天观察结果，检视培养基颜色有无改变（产酸），小倒管中有无气泡，微小气泡亦为产气阳性，若为半固体培养基，则检视沿穿刺线和管壁及管底有无微小气泡，有时还可看出接种菌有无动力，若有动力，培养物可呈弥散生长。
本试验主要是检查细菌对各种糖、醇和糖苷等的发酵能力，从而进行各种细菌的鉴别，因而每次试验，常需同时接种多管。
一般常用的指示剂为酚红、溴甲酚紫，溴百里蓝和An-drade指示剂。
二、淀粉水解试验某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。
淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。
试验方法：以18~24h的纯培养物，涂布接种于淀粉琼脂斜面或平板（一个平板可分区接种，试验数种培养物）或直接移种于淀粉肉汤中，于36±1°C培养24~48h，或于20℃培育5天。
然后将碘试剂直接滴浸于培育表面，假设为液体培育物，那么加数滴碘试剂于试管中。
当即检视结果，阳性反映（淀粉被分解）为琼脂培育基呈深蓝色、菌落或培育物周围显现无色透明环、或肉汤颜色无转变。
阴性反映那么无透明环或肉汤呈深蓝色。
淀粉水解系逐步进行的过程，因而试验结果与菌种产生淀粉酶的能力、培养时间，培养基含有淀粉量和pH等均有一定关系。
培养基pH必须为中性或微酸性，以最适。
淀粉琼脂平板不宜保存于冰箱，因而以临用时制备为妥。
三：V-P试验某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中的氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V－P（+）反应。
细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告
细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告细菌鉴定是微生物学中的一个重要分支，它是通过对细菌的形态、生理生化反应、生长特性等方面进行分析，来确定细菌种类的过程。
在细菌鉴定中，生理生化反应实验是一种常用的方法，它可以通过观察细菌在不同条件下的生长情况，来确定细菌的种类。
本文将介绍几种常用的生理生化反应实验。
1. 氧气需求实验氧气需求实验是一种常用的生理生化反应实验，它可以用来确定细菌的氧气需求量。
在这个实验中，我们需要将细菌接种到含有不同氧气浓度的培养基中，然后观察细菌的生长情况。
如果细菌只能在氧气充足的条件下生长，那么它就是一种需氧菌；如果细菌只能在氧气缺乏的条件下生长，那么它就是一种厌氧菌；如果细菌既能在氧气充足的条件下生长，也能在氧气缺乏的条件下生长，那么它就是一种兼性厌氧菌。
2. 糖类发酵实验糖类发酵实验是一种常用的生理生化反应实验，它可以用来确定细菌对不同糖类的发酵能力。
在这个实验中，我们需要将细菌接种到含有不同糖类的培养基中，然后观察培养基的酸碱度变化。
如果培养基的酸碱度发生了变化，那么说明细菌对这种糖类进行了发酵。
通过这个实验，我们可以确定细菌对哪些糖类具有发酵能力，从而进一步确定细菌的种类。
3. 氧化还原实验氧化还原实验是一种常用的生理生化反应实验，它可以用来确定细菌的氧化还原能力。
在这个实验中，我们需要将细菌接种到含有不同氧化还原剂的培养基中，然后观察培养基的颜色变化。
如果培养基的颜色发生了变化，那么说明细菌对这种氧化还原剂具有反应能力。
通过这个实验，我们可以确定细菌的氧化还原能力，从而进一步确定细菌的种类。
4. 酶活性实验酶活性实验是一种常用的生理生化反应实验，它可以用来确定细菌的酶活性。
在这个实验中，我们需要将细菌接种到含有不同底物的培养基中，然后观察底物的变化情况。
如果底物发生了变化，那么说明细菌对这种底物具有酶活性。
通过这个实验，我们可以确定细菌的酶活性，从而进一步确定细菌的种类。
细菌的生化试验
细菌的生化实验一、糖的发酵培养基：糖培养基PH7.6的蛋白胨水溶液（蛋白胨1%）（氯化钠0.5%）适量糖，1% 1.6%澳甲酚紫酒精溶液0.1% 分装10*100mm小试管，每管3-41^,内置一密闭端向上的发酵管， 10磅10分灭菌。
方法: 用接种环取少量纯培养物接种于培养基中，37摄氏度培养18-24小时后观察，一般观察2-3天。
结果: 产酸则培养基由兰紫变黄，用“ + ”表示。
产酸又产气，则培养基变黄，小管内有气泡，用“。
”表示，无变化则培养基仍为兰紫色，管内也无气泡，用“-”表示。
原理: 指示剂澳甲酚紫的指示范围为PH5.2-6.8（黄-紫）。
每一种糖（醇）培养基内只含一种糖（醇）的成分，接种进去的细菌若能发酵这种糖，则可产生乳酸，使PH下降，培养及就由兰紫色变为黄色，如果同时还产生CO2、H2、CH4等气体，则小管内留有气泡，如果不能发酵分解这种糖，则培养及不变色也无气泡。
培养基：蛋白胨水蛋白胨1%氯化钠0.5%蒸馏水适量其中的蛋白胨最好选用含色氨酸较多的多价蛋白胨。
每支小试管分装3-4ml, 10磅10分灭菌。
试剂：（欧立希氏试剂）对二甲基氨基苯甲醛 1g纯乙醇95ml浓盐酸20ml以上物品依次混合溶解方法：接种细菌于培养基中，37摄氏度培养24-48小时后，取出加乙醚约0.7cm厚，塞紧棉塞后摇震，使乙醚与培养物混匀，静置于试管架内数分钟，待乙醚浮至培养基表面，打开棉塞，沿试管壁慢慢加入靛基质试剂4-5滴，不要摇。
结果：乙醚层现红色为阳性，以“ + ”表示，不变者为阴性，以“-”表示。
原理：细菌若有色氨酸酶，就能分解蛋白胨中的色氨酸，产生靛基质（吲哚）。
靛基质无色，但遇到对二甲基氨基苯甲醛，则可以生成红色的靛基质，以肉眼可见。
三、甲基红实验：培养及：葡萄糖蛋白胨水（PH7.4）葡萄糖0.5%磷酸氢二钾0.5%蛋白胨0.5%蒸馏水适量加热溶解后，分装小试管，每管3-4ml，10磅10分灭菌试剂：0.1g甲基红溶于300ml95%乙醇中，加蒸馏水至500ml方法：接种细菌于培养液中，37摄氏度培养2-4天，取出加M、R试剂3-4 滴。
细菌的生化实验报告
细菌的生化实验报告细菌的生化实验报告细菌是微生物界中最为常见的一类生物，它们以其微小的身躯和巨大的生物活动而闻名。
在本次实验中，我们旨在探索细菌的生化特性和其在环境中的作用。
通过实验，我们对细菌的生长、代谢和适应能力有了更深入的了解。
实验一：细菌的生长曲线在这个实验中，我们选择了大肠杆菌作为研究对象。
我们将大肠杆菌接种在培养基上，并在一定时间间隔内记录细菌的生长情况。
通过测量培养液中的细菌数量，我们绘制了细菌的生长曲线。
结果显示，细菌的生长曲线呈现出典型的“S”形曲线。
在实验初期，细菌数量增长较为缓慢，这是由于适应期的存在。
随着时间的推移，细菌进入了指数增长期，细菌数量迅速增加。
然而，随着培养基中营养物质的消耗和代谢产物的积累，细菌的生长速率逐渐减缓，进入了平台期。
这是由于细菌的生长受到了环境条件的限制。
实验二：细菌的代谢特性在这个实验中，我们研究了细菌的代谢特性，特别是其对碳源的利用能力。
我们选择了葡萄糖、乳糖和蔗糖作为碳源，通过测量细菌在不同碳源下的生长情况，评估了细菌对不同碳源的利用能力。
结果显示，大肠杆菌对葡萄糖的利用能力最强，其次是乳糖，而对蔗糖的利用能力较弱。
这表明细菌对碳源的利用能力存在差异，可能与其代谢途径和酶的分布有关。
此外，我们还观察到在不同碳源条件下，细菌的生长速率和产生的代谢产物也有所不同。
这提示我们，在实际应用中，选择合适的碳源可以促进细菌的生长和代谢活性。
实验三：细菌的适应能力在这个实验中，我们研究了细菌的适应能力，特别是其对环境压力的响应。
我们将大肠杆菌分别接种在不同的培养基中，其中一组培养基中添加了抗生素，另一组培养基中添加了高温。
结果显示，添加抗生素的培养基中，细菌的生长受到了明显的抑制。
抗生素通过抑制细菌的代谢活性和细胞分裂，从而阻碍了细菌的生长。
而在高温条件下，细菌的生长速率明显减慢，部分细菌甚至无法生存。
这表明细菌对环境压力的适应能力有限，过高的温度和抗生素的存在可能对细菌产生不可逆的影响。
细菌繁殖实验报告
一、实验目的1. 观察细菌在不同生长条件下的繁殖情况。
2. 掌握细菌繁殖的形态学特征。
3. 理解细菌繁殖过程中的生理和生化变化。
二、实验原理细菌繁殖是通过二分裂的方式进行，即一个细菌分裂成两个细菌。
在适宜的条件下，细菌繁殖速度很快，大约每20-30分钟繁殖一次。
本实验通过观察细菌在不同培养基和温度条件下的繁殖情况，分析细菌繁殖的形态学特征和生理生化变化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 细菌菌种：大肠杆菌（Escherichia coli）- 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、LB培养基、营养琼脂培养基- 药品与试剂：无菌生理盐水、无菌水、酒精、苯酚红指示剂、无菌接种环、无菌培养皿、显微镜、酒精灯、恒温培养箱等2. 实验仪器：- 培养皿- 灭菌器- 高压蒸汽灭菌锅- 显微镜- 精密天平- 烧杯- 玻璃棒- 酒精灯- 恒温培养箱四、实验方法与步骤1. 细菌培养（1）将牛肉膏蛋白胨培养基和LB培养基分别置于高压蒸汽灭菌锅中，灭菌30分钟，待培养基冷却后分别倒入培养皿中，制成平板。
（2）用无菌接种环取适量细菌菌种，接种于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，37℃恒温培养24小时。
（3）用无菌接种环取适量细菌菌种，接种于LB培养基平板上，37℃恒温培养24小时。
2. 观察细菌繁殖形态学特征（1）观察牛肉膏蛋白胨培养基平板上的细菌菌落，记录菌落大小、颜色、形状等特征。
（2）观察LB培养基平板上的细菌菌落，记录菌落大小、颜色、形状等特征。
3. 细菌繁殖生理生化变化观察（1）取适量牛肉膏蛋白胨培养基和LB培养基，分别加入苯酚红指示剂，37℃恒温培养24小时，观察培养基颜色变化。
（2）取适量牛肉膏蛋白胨培养基和LB培养基，分别加入无菌生理盐水，37℃恒温培养24小时，观察培养基pH值变化。
4. 不同温度条件下细菌繁殖观察（1）将牛肉膏蛋白胨培养基和LB培养基分别置于4℃、25℃、37℃、50℃恒温培养箱中，培养24小时，观察细菌繁殖情况。
实验四++细菌的接种培养法与生长现象的观察
实验四细菌的接种培养法与生长现象的观察【目的和要求】1．掌握无菌技术，建立无菌观念；明确无菌操作时注意要点。
2．掌握细菌的接种、分离培养方法和接种环的制作方法。
3．熟悉细菌生长现象的观察方法。
【试剂与器材】1．菌种：葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌等。
2．培养基：固体、半固体、液体培养基。
3．其他：温箱、酒精灯、接种环、接种针、L形玻棒、打火机、记号笔等。
【实验内容】一、细菌的接种工具1．接种环和接种针：其结构包括环（针）、金属柄、绝缘柄三部分（见图4-1）。
其中环（针）部分最佳材料为白金丝，因其受热和散热速度快，硬度适宜，不易生锈且经久耐用，但因为价格昂贵而限制了其应用。
目前实验室常用的是经济实用的300~500W电热镍鉻丝。
一般要求接种环长5~8cm，直径为2~4mm，定量接种环的容量为0.001ml。
图4-1 接种环和接种针接种环（针）在使用之前需检查镍鉻丝是否呈直线，若有弯曲，需用吸管或接种环的另一端将其压直；若环不圆，可将镍鉻丝前端放在吸管尖部缠绕一圈，再将镍鉻丝突出的部分朝内压紧。
接种环用于固体、液体培养基的接种，接种针用于半固体培养基的接种。
2．L形玻棒：由直径2~3mm的玻璃棒弯曲成L形制成。
在使用之前用厚纸包扎后置高压蒸汽灭菌，或沾取无水乙醇后在火焰上烧灼灭菌。
主要用于液体标本涂布接种。
二、细菌的接种方法1．液体培养基的接种该法主要用于细菌的增菌培养或进行细菌的生化反应。
方法：（图4-2）（1）先将接种环在火焰上烧灼灭菌，待冷却后挑取少许细菌。
（2）左手拿试管，右手持接种环，用右手其余手指将试管塞打开，试管口通过火焰烧灼灭菌。
（3）将接种环在贴近液面的管壁上上下碾磨数次，使细菌均匀分布于培养基中。
（4）将试管口灭菌后加塞，接种环烧灼灭菌后放回原处。
（5）在试管上做好标记，经35℃培养18~24h后观察结果。
图4-2 液体培养基接种法2．半固体培养基的接种该法可用于保存菌种、观察细菌的动力或进行细菌的生化反应。
细菌培养实验报告分析
一、实验背景细菌培养是微生物学实验中一项基本且重要的技术，通过对细菌进行培养，可以观察其生长特性、分离纯化、鉴定以及进行各种生化实验等。
本实验旨在通过平板划线法分离培养细菌，并对所分离的菌落进行形态观察、生化实验和药敏试验，以分析细菌的种类和特性。
二、实验材料与方法1. 实验材料（1）菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等。
（2）培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基、琼脂平板等。
（3）试剂：酚红指示剂、葡萄糖、乳糖、靛基质、甲基红、V-P试剂、革兰氏染色液等。
2. 实验方法（1）平板划线法分离细菌：将待分离的细菌接种于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，用无菌接种环进行划线操作，重复划线直至菌落分离。
（2）观察菌落特征：观察分离的菌落形态、大小、颜色、边缘、表面等特征。
（3）进行生化实验：对分离的菌落进行葡萄糖发酵、乳糖发酵、靛基质试验、甲基红试验、V-P试验等生化实验。
（4）药敏试验：采用纸片扩散法进行药敏试验，观察细菌对多种抗生素的敏感性。
三、实验结果与分析1. 菌落特征通过平板划线法分离，我们得到了形态各异的菌落。
大肠杆菌菌落呈白色、光滑、圆形、边缘整齐；金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色、光滑、圆形、边缘整齐；枯草芽孢杆菌菌落呈白色、粗糙、圆形、边缘不整齐。
2. 生化实验结果（1）葡萄糖发酵：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均能发酵葡萄糖，产生红色沉淀；枯草芽孢杆菌不发酵葡萄糖。
（2）乳糖发酵：金黄色葡萄球菌能发酵乳糖，产生红色沉淀；大肠杆菌、枯草芽孢杆菌不发酵乳糖。
（3）靛基质试验：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均产生靛基质，使培养基呈蓝绿色；大肠杆菌不产生靛基质。
（4）甲基红试验：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均呈阴性反应；大肠杆菌呈阳性反应。
（5）V-P试验：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均呈阴性反应；大肠杆菌呈阳性反应。
3. 药敏试验结果大肠杆菌对氨苄西林、头孢噻肟、头孢曲松等抗生素敏感；金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺等抗生素敏感；枯草芽孢杆菌对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟等抗生素耐药。
细菌的生化实验报告
一、实验目的1. 了解细菌生理生化反应原理；2. 掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法；3. 了解生理生化反应在鉴别细菌中的意义。
二、实验原理细菌的生理生化反应是指细菌在生长繁殖过程中，利用各种酶类将底物分解、合成、转化等生物化学过程。
这些反应能够产生不同的代谢产物，从而为细菌鉴定提供依据。
常见的生理生化反应包括糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验等。
三、实验材料与用具1. 菌种：大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌；2. 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）、V-P试剂、甲基红试剂、吲哚试剂；3. 仪器：酒精灯、接种环、超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、试管、移液枪、滴管。
四、实验方法1. 糖发酵试验（1）将待鉴定菌种接种于糖发酵培养基中；（2）将培养基放入37℃恒温培养箱中培养24-48小时；（3）观察培养基中指示剂的颜色变化，判断细菌对糖的发酵能力。
2. 吲哚试验（1）将待鉴定菌种接种于蛋白胨水培养基中；（2）加入吲哚试剂，观察培养基中是否产生红色沉淀，判断细菌是否具有色氨酸酶。
3. 甲基红试验（1）将待鉴定菌种接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中；（2）加入甲基红试剂，观察培养基中是否产生红色沉淀，判断细菌是否具有产酸能力。
五、实验结果与分析1. 糖发酵试验实验结果显示，大肠杆菌和产气肠杆菌对葡萄糖、乳糖、蔗糖均能发酵，产生红色沉淀；普通变形菌对葡萄糖、乳糖、蔗糖均不能发酵，无红色沉淀；枯草芽孢杆菌对葡萄糖、乳糖、蔗糖均不能发酵，无红色沉淀。
2. 吲哚试验实验结果显示，大肠杆菌和产气肠杆菌在蛋白胨水培养基中加入吲哚试剂后，产生红色沉淀，说明这两种细菌具有色氨酸酶；普通变形菌和枯草芽孢杆菌在蛋白胨水培养基中加入吲哚试剂后，无红色沉淀，说明这两种细菌不具有色氨酸酶。
3. 甲基红试验实验结果显示，大肠杆菌和产气肠杆菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中加入甲基红试剂后，产生红色沉淀，说明这两种细菌具有产酸能力；普通变形菌和枯草芽孢杆菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中加入甲基红试剂后，无红色沉淀，说明这两种细菌不具有产酸能力。
实验四 细菌在培养基中的生长表现与生化实验讲解
普 通 平 板
实验四 细菌在培养基中的生长表现及细菌的生化试验
二、细菌的常用生化反应 糖发酵试验 V P 试验 甲基红试验 枸橼酸盐试验 吲哚试验 硫化氢试验 尿素酶试验
糖发酵试验 不同细菌分解糖类的能力和代谢产物不 同。例如大肠埃希菌能发酵葡萄糖和乳糖；而伤寒沙门菌可 发酵葡萄糖，但不能发酵乳糖。
在液体培养基中生长情况：大多数细菌在液体培养基生 长繁胞杆菌、结核分枝杆菌等专性需氧菌呈表面生长，常 形成菌膜。
在固体培养基中生长情况：各种细菌在固体培养基上 形成的菌落，在大小、形状、颜色、气味、透明度、表面 光滑或粗糙、湿润或干燥、边缘整齐与否，以及在血琼脂 平板上的溶血情况等均有不同表现，这些有助于识别和鉴 定细菌。
甲基红（methyl red）试验 产气杆菌分解葡萄糖产生丙 酮酸，后者经脱羧后生成中性的乙酰甲基甲醇，故培养液 pH>5.4，甲基红指示剂呈桔黄色，是为甲基红试验阴性。大 肠埃希菌分解葡萄糖产生丙酮酸，培养液pH ≤4.5，甲基红 指示剂呈红色，则为甲基红试验阳性。
枸橼酸盐利用试验 当某些细菌（如产气杆菌）利用铵 盐作为唯一氮源，并利用枸橼酸盐作为唯一碳源时，可在 枸橼酸盐培养基上生长，分解枸橼酸盐生成碳酸盐，并分 解铵盐生成氨，使培养基变为碱性，是为该试验阳性。大 肠埃希菌不能利用枸橼酸盐为唯一碳源，故在该培养基上 不能生长，是为枸橼酸盐试验阴性。
在半固体培养基中生长情况半固体培养基粘度低，有鞭毛 的细菌在其中仍可自由游动，沿穿刺线呈羽毛状或云雾状混浊 生长。无鞭毛细菌只能沿穿刺线呈明显的线状生长。
细菌在血液培养基的溶血现象
鉴别培养基中的生长特性
E。Coli 鉴别： 麦康凯培养基上形成红色菌落； 伊红美蓝平板：黑色带有金属光泽菌落 远腾琼脂平板：红色带有光泽菌落。
细菌的生化实验
细菌的生化实验一、糖的发酵培养基：糖培养基PH7.6的蛋白胨水溶液（蛋白胨1%）（氯化钠0.5%）适量糖，1%1.6%溴甲酚紫酒精溶液 0.1%分装10*100mm小试管，每管3-4ml，内置一密闭端向上的发酵管，10磅10分灭菌。
方法：用接种环取少量纯培养物接种于培养基中，37摄氏度培养18-24小时后观察，一般观察2-3天。
结果：产酸则培养基由兰紫变黄，用“+”表示。
产酸又产气，则培养基变黄，小管内有气泡，用“☉”表示，无变化则培养基仍为兰紫色，管内也无气泡，用“-”表示。
原理：指示剂溴甲酚紫的指示范围为PH5.2-6.8（黄-紫）。
每一种糖（醇）培养基内只含一种糖（醇）的成分，接种进去的细菌若能发酵这种糖，则可产生乳酸，使PH下降，培养及就由兰紫色变为黄色，如果同时还产生CO2、H2、CH4等气体，则小管内留有气泡，如果不能发酵分解这种糖，则培养及不变色也无气泡。
二、靛基质实验培养基：蛋白胨水蛋白胨 1%氯化钠 0.5%蒸馏水适量其中的蛋白胨最好选用含色氨酸较多的多价蛋白胨。
每支小试管分装3-4ml，10磅10分灭菌。
试剂：（欧立希氏试剂）对二甲基氨基苯甲醛 1g纯乙醇 95ml浓盐酸 20ml以上物品依次混合溶解方法：接种细菌于培养基中，37摄氏度培养24-48小时后，取出加乙醚约0.7cm厚，塞紧棉塞后摇震，使乙醚与培养物混匀，静置于试管架内数分钟，待乙醚浮至培养基表面，打开棉塞，沿试管壁慢慢加入靛基质试剂4-5滴，不要摇。
结果：乙醚层现红色为阳性，以“+”表示，不变者为阴性，以“-”表示。
原理：细菌若有色氨酸酶，就能分解蛋白胨中的色氨酸，产生靛基质（吲哚）。
靛基质无色，但遇到对二甲基氨基苯甲醛，则可以生成红色的靛基质，以肉眼可见。
三、甲基红实验：培养及：葡萄糖蛋白胨水（PH7.4）葡萄糖 0.5%磷酸氢二钾 0.5%蛋白胨 0.5%蒸馏水适量加热溶解后，分装小试管，每管3-4ml，10磅10分灭菌试剂：0.1g甲基红溶于300ml95%乙醇中，加蒸馏水至500ml方法：接种细菌于培养液中，37摄氏度培养2-4天，取出加M、R试剂3-4滴。
实验四细菌在培养基中的生长表现与生化实验
可以采用更先进的基因组学和蛋白质组学技术，对细菌的基 因和蛋白质表达进行分析，以更深入地了解细菌的生长机制 。
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学习并掌握生化实验的基本操作
学习并掌握生化实验的基本操作，如 细菌接种、培养基制备、菌落计数等 。
了解生化实验中常用的试剂和仪器， 并掌握其使用方法。
02
CATALOGUE
实验材料
细菌菌种
大肠杆菌
一种常见肠道细菌，可用于研究 肠道微生物生态和抗生素敏感性
。
金黄色葡萄球菌
一种常见皮肤和呼吸道细菌，可用 于研究其致病性和药物敏感性。
生长。
培养细菌
将接种后的培养基放入恒温培 养箱中，设定适宜的温度和湿
度，进行细菌培养。
观察记录
定时观察细菌的生长情况，记 录生长曲线、菌落形态等信息
。
生化实验操作
试剂准备
根据实验需求，准备所需 的生化试剂和器材。
实验操作
按照实验步骤进行生化实 验，记录实验过程中的现 象和数据。
结果分析
根据实验结果，分析细菌 的生化特性，如酶活性、 代谢产物等。
总结词
生长动力学参数
详细描述
通过生长曲线的分析，可以计算出细菌的生长速率、最大 生长量和倍增时间等生长动力学参数。这些参数对于评估 细菌的生长特性和优化培养条件具有重要意义。
总结词
生长曲线比较
详细描述
比较不同菌株或不同培养条件下细菌的生长曲线，可以分 析它们之间的差异和特点。通过比较，可以深入了解不同 菌株的生长特性和适应性，为菌株筛选和优化提供依据。
生化实验结果分析
总结词
糖发酵实验
详细描述
通过糖发酵实验，可以观察到细菌对不同糖类的利用能力 和代谢特点。分析实验结果，可以初步判断细菌的生化特 性，为菌种鉴定和分类提供依据。
细菌生化试验实训报告
一、实验目的1. 了解细菌鉴定中常用的生理生化试验反应原理。
2. 掌握测定细菌生理生化反应的技术和方法。
3. 通过实验，学会使用各种生化试剂和仪器，提高实验操作技能。
4. 培养团队合作精神和科学严谨的态度。
二、实验原理细菌的生理生化特性是细菌分类鉴定的重要依据。
各种微生物在代谢类型上表现了很大的差异，主要体现在对生物大分子糖类和蛋白质分解能力，以及最终代谢产物的不同。
通过微生物生化反应，可以测定细菌在新陈代谢过程中所产生的代谢产物，从而鉴定细菌的种类。
三、实验器材1. 菌种：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、普通变形杆菌、产气肠杆菌。
2. 培养基：固体淀粉培养基、固体油脂培养基、葡萄糖发酵培养基、乳糖发酵培养基、蛋白胨水培养基、葡萄糖蛋白胨水培养基。
3. 试剂：卢戈氏碘液、乙醚、吲哚试剂、甲基红试剂、蒸馏水。
4. 仪器：酒精灯、接种针、培养皿、试管、试管架、烧杯、量筒、德汉氏小管。
四、实验方法1. 接种：将菌种接种于固体培养基上，37℃培养24小时。
2. 观察菌落特征：观察菌落的形态、大小、颜色、边缘等特征。
3. 进行生理生化试验：a. 糖类发酵试验：将接种好的菌落接种于葡萄糖发酵培养基、乳糖发酵培养基中，37℃培养24小时，观察是否产生气泡。
b. 吲哚试验：将接种好的菌落接种于蛋白胨水培养基中，37℃培养24小时，加入吲哚试剂，观察是否产生红色沉淀。
c. 甲基红试验：将接种好的菌落接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中，37℃培养24小时，加入甲基红试剂，观察是否产生红色沉淀。
4. 结果记录与分析。
五、实验结果与分析1. 糖类发酵试验：枯草芽孢杆菌和产气肠杆菌能发酵葡萄糖，产生气泡；大肠杆菌和金黄色葡萄球菌不能发酵葡萄糖；铜绿假单胞菌和普通变形杆菌能发酵乳糖，产生气泡。
2. 吲哚试验：枯草芽孢杆菌和产气肠杆菌产生红色沉淀，为阳性；大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和普通变形杆菌不产生红色沉淀，为阴性。
细菌生化反应实验报告
细菌生化反应实验报告细菌生化反应实验报告引言：细菌是微生物界中最常见的生物之一，它们在自然界中广泛存在。
通过深入研究细菌的生化反应，我们可以更好地了解它们的生存机制和对环境的影响。
本实验旨在探究细菌的生化反应过程，并分析其对环境的影响。
实验材料与方法：1. 细菌培养基：含有适当营养成分的培养基，提供细菌生长所需的营养物质。
2. 培养皿：用于培养细菌的容器。
3. 细菌菌株：选择常见的大肠杆菌作为实验菌株。
4. 实验仪器：包括离心机、显微镜等。
5. 实验步骤：包括细菌培养、取样、离心、显微镜观察等。
实验结果与讨论：1. 细菌生长曲线：在培养基中培养细菌，我们观察到细菌的生长呈现出典型的生长曲线，即潜伏期、指数增长期、平台期和死亡期。
这表明细菌的生长过程受到多种因素的调控，包括营养物质的可利用性、环境条件等。
2. 细菌代谢产物：通过分析培养基中的代谢产物，我们发现细菌在生长过程中会产生一系列的代谢产物，如有机酸、氨气等。
这些代谢产物不仅反映了细菌的生化反应过程，还对环境产生一定的影响。
例如，有机酸的产生可能导致培养基的酸碱度变化，从而影响到其他微生物的生长。
3. 细菌形态和结构：通过显微镜观察，我们可以看到细菌的形态和结构。
大肠杆菌呈现出长条状的形态，表面覆盖着细菌鞭毛和菌毛。
这些结构对细菌的运动和附着起着重要作用，使其能够更好地适应不同的环境。
实验结论：通过本次实验，我们深入了解了细菌的生化反应过程。
细菌的生长曲线、代谢产物以及形态结构都反映了细菌的生存机制和对环境的影响。
进一步研究细菌的生化反应有助于我们更好地理解微生物界的生态系统，并为环境保护与微生物应用领域提供理论依据。
未来展望：在今后的研究中，我们可以进一步探究细菌的生化反应机制，包括细菌的代谢途径、酶的作用机制等。
此外，我们还可以研究不同菌株在不同环境条件下的生化反应差异，以及细菌与其他微生物之间的相互作用。
这些研究将有助于揭示微生物界的奥秘，为生物技术和环境保护提供更多的可能性。
细菌的生理生化鉴定
竭诚为您提供优质文档/双击可除细菌的生理生化鉴定篇一：细菌生理生化鉴定实验九细菌的生理生化试验[日期：20XX-5-30]来源：作者：孔庆学[字体：大中小]实验九细菌的生理生化试验1目的1.1了解细菌鉴定中常用的生理生化试验反应原理1.2掌握测定细菌生理生化反应的技术和方法2原理各种微生物在代谢类型上表现了很大的差异。
由于细菌特有的单细胞原核生物的特性，这种差异就表现的更加明显。
不同细菌分解、利用糖类、脂肪类和蛋白类物质的能力不同，所以其发酵的类型和产物也不相同，也就是说，不同微生物具有不同的酶系统。
即使在分子生物学技术和手段不断发展的今天，细菌的生理生化反应在菌株的分类鉴定中仍有很大作用。
3材料3.1菌种大肠埃希氏菌（escherichiacoli）、产气肠杆菌（enterobacteraerogenes）、普通变形杆菌（proteus vulgaris）、枯草芽孢杆菌（bacillussubtilis）的斜面菌种3.2培养基葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）3.3试剂40％naoh溶液、肌酸、甲基红试剂、吲哚试剂、乙醚、1.6%溴甲基酚紫指示剂。
3.4器具超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、试管、移液管、杜氏小套管。
4流程糖发酵试验→V-p试验→甲基红试验→吲哚试验5步骤(一)糖类发酵试验1目的了解不同细菌分解利用糖的能力及实验原理，并掌握其操作方法．2原理可根据细菌分解利用糖能力的差异表现出是否产酸产气作为鉴定菌种的依据。
是否产酸，可在糖发酵培养基中加入指示剂溴甲酚紫（即b.c.p指示剂，其ph在5.2以下呈黄色，ph在6.8以上呈紫色），经培养后根据指示剂的颜色变化来判断。
是否产气，可在发酵培养基中放入倒置杜氏小管观察。
3材料3.2菌种大肠埃希氏菌（escherichiacoli）、产气肠杆菌（enterobacteraerogenes）、普通变形杆菌（proteus vulgaris）的斜面菌种3.３培养基葡萄糖、蔗糖和乳糖发酵培养液试管４流程发酵液试管→标记→接种→培养→观察→记录5步骤5.1试管标记图9-1糖发酵产气取分别装有葡萄糖、蔗糖和乳糖发酵培养液试管各Ａ不产气；Ｂ产气4支，每种糖发酵试管中均分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌和空白对照。
细菌培养的实验报告
细菌培养的实验报告一、实验目的本次实验的主要目的是通过对细菌的培养，了解细菌的生长特性、培养条件以及观察细菌的形态结构，为进一步研究细菌的生理生化特性和致病性打下基础。
二、实验原理细菌在适宜的营养条件和环境下能够生长繁殖。
培养基为细菌提供了所需的营养物质，如碳源、氮源、无机盐和生长因子等。
通过在无菌条件下接种细菌到培养基中，并在一定的温度和时间内培养，可以观察到细菌的生长情况。
三、实验材料和设备1、菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌2、培养基：营养琼脂培养基、麦康凯培养基3、仪器设备：超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、移液器、接种环、酒精灯等4、其他材料：无菌生理盐水、培养皿、试管等四、实验步骤1、培养基的制备按照培养基的配方准确称取所需的营养物质。
将称好的营养物质溶解于适量的蒸馏水中，加热搅拌至完全溶解。
调整 pH 值至合适范围（通常为 72 76）。
分装培养基到培养皿和试管中，包扎好后进行高压灭菌（121℃，15 20 分钟）。
2、无菌操作准备打开超净工作台，通风 10 15 分钟。
用 75%的酒精擦拭超净工作台台面和双手。
点燃酒精灯，将接种环在酒精灯火焰上灼烧灭菌。
3、细菌的接种从保存菌种的斜面中用接种环挑取少量细菌，在酒精灯火焰附近迅速将接种环伸入装有无菌生理盐水的试管中，使细菌分散在生理盐水中，制成菌悬液。
用移液器吸取适量的菌悬液，分别接种到营养琼脂培养基和麦康凯培养基上。
接种时，将移液器的枪头在培养基表面轻轻接触，使菌液均匀分布。
接种完毕后，将接种环再次在酒精灯火焰上灼烧灭菌。
4、培养将接种好的培养基放入恒温培养箱中，设定培养温度为 37℃，培养时间为 18 24 小时。
五、实验结果1、大肠杆菌在营养琼脂培养基上，大肠杆菌形成圆形、湿润、隆起、边缘整齐、灰白色的菌落。
在麦康凯培养基上，大肠杆菌形成红色的菌落。
2、金黄色葡萄球菌在营养琼脂培养基上，金黄色葡萄球菌形成圆形、凸起、表面光滑、金黄色、有溶血环的菌落。
细菌培养的实验报告
1. 学习并掌握细菌培养的基本原理和操作步骤。
2. 掌握平板划线法分离纯种细菌的方法。
3. 观察细菌菌落特征，初步判断细菌种类。
二、实验原理细菌培养是研究微生物的基本方法之一。
通过提供适宜的生长条件，使微生物在人工控制的条件下生长繁殖，从而观察其形态、生理和生化特性。
本实验采用平板划线法分离纯种细菌，通过观察菌落特征，初步判断细菌种类。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等。
2. 试剂：牛肉膏蛋白胨培养基、无菌生理盐水、无菌棉签、无菌剪刀、无菌镊子、酒精灯、培养箱等。
四、实验步骤1. 准备工作：将牛肉膏蛋白胨培养基倒入培养皿中，待其凝固后倒置放置。
2. 接种：用无菌棉签蘸取金黄色葡萄球菌，轻轻划线于平板表面，重复此操作，直至平板表面划有多个交叉的线条。
3. 培养与观察：将接种后的平板倒置放入37℃培养箱中培养24小时，观察菌落生长情况。
4. 记录与分析：观察菌落特征，如颜色、形状、大小、边缘等，初步判断细菌种类。
五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌：菌落呈金黄色，圆形，光滑，边缘整齐，中间隆起。
2. 大肠杆菌：菌落呈乳白色，圆形，光滑，边缘整齐，中间稍凹。
3. 枯草芽孢杆菌：菌落呈白色，圆形，表面有细小绒毛，边缘不整齐。
根据菌落特征，可以初步判断金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性菌，大肠杆菌为革兰氏阴性菌，枯草芽孢杆菌为革兰氏阳性菌。
通过本次实验，我们掌握了细菌培养的基本原理和操作步骤，学会了平板划线法分离纯种细菌的方法，并初步掌握了观察细菌菌落特征、判断细菌种类的技能。
在实验过程中，应注意无菌操作，避免污染。
七、注意事项1. 操作过程中应保持无菌状态，避免污染。
2. 划线时应轻柔，避免菌落相互混合。
3. 观察菌落特征时，应注意颜色、形状、大小、边缘等方面的变化。
4. 实验过程中，如出现疑问，应及时与老师沟通。
八、实验拓展1. 探究不同温度、pH值、营养物质对细菌生长的影响。
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VP（Voges-Proskauer）试验 大肠埃希菌和产气杆菌均 能发酵葡萄糖，产酸产气，两者不能区别。但产气杆菌能 使丙酮酸脱羧生成中性的乙酰甲基甲醇，后者在碱性溶液 中被氧化生成二乙酰，二乙酰与含胍基化合物反应生成红 色化合物，为VP试验阳性。大肠杆菌不能生成乙酰甲基甲 醇，故VP试验阴性．
甲基红（methyl red）试验 产气杆菌分解葡萄糖产生丙 酮酸，后者经脱羧后生成中性的乙酰甲基甲醇，故培养液 pH>5.4，甲基红指示剂呈桔黄色，是为甲基红试验阴性。大 肠埃希菌分解葡萄糖产生丙酮酸，培养液pH ≤4.5，甲基红 指示剂呈红色，则为甲基红试验阳性。
枸橼酸盐利用试验 当某些细菌（如产气杆菌）利用铵 盐作为唯一氮源，并利用枸橼酸盐作为唯一碳源时，可在 枸橼酸盐培养基上生长，分解枸橼酸盐生成碳酸盐，并分 解铵盐生成氨，使培养基变为碱性，是为该试验阳性。大 肠埃希菌不能利用枸橼酸盐为唯一碳源，故在该培养基上 不能生长，是为枸橼酸盐试菌在液体培养基生 长繁殖后呈现均匀混浊状态；少数链状的细菌则呈沉淀生长； 枯草芽胞杆菌、结核分枝杆菌等专性需氧菌呈表面生长，常 形成菌膜。
在固体培养基中生长情况：各种细菌在固体培养基上 形成的菌落，在大小、形状、颜色、气味、透明度、表面 光滑或粗糙、湿润或干燥、边缘整齐与否，以及在血琼脂 平板上的溶血情况等均有不同表现，这些有助于识别和鉴 定细菌。
尿素酶试验 变形杆菌有尿素酶，能分解培养基中的尿 素产生氨，使培养基变碱，以酚红为指示剂检测为红色， 是为尿素酶试验阳性。
在半固体培养基中生长情况半固体培养基粘度低，有鞭毛 的细菌在其中仍可自由游动，沿穿刺线呈羽毛状或云雾状混浊 生长。无鞭毛细菌只能沿穿刺线呈明显的线状生长。
细菌在血液培养基的溶血现象
鉴别培养基中的生长特性
E。Coli 鉴别： 麦康凯培养基上形成红色菌落； 伊红美蓝平板：黑色带有金属光泽菌落 远腾琼脂平板：红色带有光泽菌落。
吲哚（indol）试验 有些细菌如大肠埃希菌、变形杆菌、 霍乱弧菌等能分解培养基中的色氨酸生成吲哚（靛基质）， 经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而 呈红色，为吲哚试验阳性。
硫化氢试验 有些细菌如沙门菌、变形杆菌等能分解培养 基中的含硫氨基酸（如胱氨酸、甲硫氨酸）生成硫化氢，硫 化氢遇铅或铁离子生成黑色的硫化物。
实验四 细菌在培养基中的生长表现及细菌的生化试验
目的要求：1、了解细菌菌落及其在各种培养基中的培养特性。 2、了解细菌菌落及其培养特性对细菌鉴别的意义。 3、掌握细菌生化反应的原理、方法和意义。
实验内容： 一、细菌培养特性观察 在液体培养基中生长 在固体培养基中生长 在半固体培养基中生长 在血液培养基溶血现象 鉴别培养基中的生长特性
普 通 平 板
实验四 细菌在培养基中的生长表现及细菌的生化试验
二、细菌的常用生化反应 糖发酵试验 V P 试验 甲基红试验 枸橼酸盐试验 吲哚试验 硫化氢试验 尿素酶试验
糖发酵试验 不同细菌分解糖类的能力和代谢产物不 同。例如大肠埃希菌能发酵葡萄糖和乳糖；而伤寒沙门菌可 发酵葡萄糖，但不能发酵乳糖。