高中生物选修一：3.2月季的花药离体培养

消毒2～4min 1%次氯酸钙溶液 饱和漂白粉溶液
二. 实验操作 （三）接种和培养
阅读“（三）接种和培养”，回答下列问题： 无菌 条 1．剥取花药：消毒后的花蕾，要在______ 件下除去花萼、花瓣。 2．接种花药：剥取的花药要立刻接种到 7～10个花药。 培养基上。每个培养瓶接种______ ______
√
二.
实验操作
（三）接种和培养
阅读“（三）接种和培养”，回答下列问题： 愈伤 4．培养20－30d后，花药开裂，长出______ 组织 或 胚状体。前者还要转移到分化培养基 形成______ ________ 上 进行分化培养成再生植株；后者要尽快在花药 ____ 开裂后将幼小植株分开 ________________ __并转移到新的培养基上。
花 粉 粒
二核花粉粒
1.类别
2.花粉的全能性 三核花粉粒
花粉发育成植株，体现了细胞的哪种能力？ 花粉细胞为什么具有全能性？
全部遗传信息
花粉粒
一. 基础知识 （二）被子植物的花粉发育
2 减数 小孢子四分体 生殖 生殖 居中 有丝 有丝 营养 花粉管
靠边
1个小孢子母细胞产生几个花粉粒？最终产生几个精子？
花粉的发育时期
如何选到单核期的花药？ 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 为什么不选择单核期之前或之后的花药接种？
单核期之前的花药，质地幼嫩，极易破碎。 花瓣松动后，微生物就可能侵入 选择完全未开放的花蕾 单核期之后的花药，花瓣已有些松动，又给材料 到花药，给材料的消毒带来困难。 的消毒带来困难。
剥离花药时，要尽量不损伤花药，并要 3．培养：花药培养利用的培养基是 ______ MS 培 彻底去除花丝，为什么？
25 养基，pH 为 ______ ，温度为 ______ ℃，幼 5.8 易从受伤部位诱导出非花粉愈伤组织； 与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成 苗形成之前（需要、不需要）光照。
二. 实验操作 （二）材料的消毒
阅读“（二）材料的消毒”，填写下列流程图：
花 蕾 70%酒精） （_______ 浸泡约 30s 无菌水） （______ 清洗 无菌吸水纸） （__________ 吸干水分
无菌水 ） （_______ 冲洗3～5次
氯化汞溶液 （0.1% ______ ______）
DDTT DDtt ddTT ddtt
一. 基础知识 （一）月季
1.简介 2.花的结构
柱头 ⑧ 雄 ⑦ 蕊 花药 ⑤ 花丝 ⑥ 花柱 ⑨ 子房 ⑩ 雌 ⑪ 蕊
花托 ② 花柄 ①
④ 花瓣 萼片 ③
一. 基础知识 （一）月季
2.花的结构
花粉囊
花粉囊
花粉
花药的结构
花药的横切面结构
一. 基础知识Leabharlann （二）被子植物的花粉发育使用亲本为高杆抗病（DDTT）和矮杆感病（ddtt）的小麦， 选育出矮杆抗病（ddTT）的品种，可通过哪些方法？
单倍体育种
×
P
F1
配子
高杆抗病 DDTT
↓ ↓
矮杆感病 ddtt
第 年
1
高杆抗病 DdTt DT Dt dT
dt
花药培养→ 单倍体植株 秋水仙素→
↓
DT
↓
Dt
↓
dT
↓
dt
第 年
2
↓
↓
↓
↓
纯合体
一. 基础知识 （四）影响花药培养的因素
2.外因 1）培养基的组成
MS培养基
2) 其他外因
亲本植株的生长条件 环境理想的人工气候室 材料的低温预处理 4-10℃，10-20d
接种的密度
二. 实验操作 （一）材料的选取
阅读“（一）材料的选取”，回答下列问题： 1．选择花药时一般通过镜检 ____确定花粉发育 时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最 醋酸洋红 和___________ 焙花青-铬矾 ， 常用的染色剂是_________ 蓝黑色。 红 色和_____ 它们分别可以将细胞核染成____ 2．在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先 卡诺氏固定液 固定20min。该试 将花药用______________ 无水酒精与冰醋酸 按体 剂的配制方法是将__________________ 3 ：1 的比例混合均匀。 积比为_______
一. 基础知识 （三）产生花粉植株的两种途径
1.途径
脱分化
花粉
脱分化
胚状体 愈伤组织
分化
丛芽 生根
再分化
移栽
花粉
丛芽
再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新 愈伤组织： 细胞排列疏松而无规则，为高度液泡化的呈无定 先芽 脱分化： 由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程 形状态的薄壁细胞 分化成根或芽等器官的过程
5．通过愈伤组织形成的植株，常常会出现 染色体组数目 _的变化，因而需要鉴定和筛选。 ___________
胚 状 体
植物组织培养过程中，由体细胞转变而来的结 1.定义： 构，其形态和发育过程都与合子发育成的胚非 常相似，也称为体细胞胚。
2.结构：具有胚根、胚芽、胚轴等结构。 3.应用： 人工种子：胚状体包以人工胚乳和人工种皮 3.形成与发育：
体细胞
单倍体性细胞
花粉植株的特点？
体细胞胚
花粉胚
植株 单倍体植株
单倍体植株，植株 弱小 用于单倍体育种，通过人工诱导， 使染色体数目加倍。明显缩短育种 （弱小/高大），一般高度 周期，培育纯合新品种。 （不育/可育）。
√
后根
一. 基础知识 （三）产生花粉植株的两种途径
1.途径
脱分化
花粉
脱分化
胚状体 愈伤组织
分化
丛芽 生根
再分化
移栽
花粉
丛芽
2.产生两种途径的原因
主要取决于培养基中 激素 的种类及其 浓度 的配比。
一. 基础知识 （四）影响花药培养的因素
1.内因----材料的选择
植物的种类 亲本植株的生理状况 花期早期（初花期）
花粉管细胞核 生殖细胞核
单核期
小孢子 母细胞 （2n）
小孢子 四分体时期
减数 分裂
减数分裂过程中的四分体
单核居中期
单核靠边期
双核期
小孢子 （n）
小孢子
小孢子
有丝 生殖 精子 分裂 细胞
花粉粒
2个
（n）
营养 细胞
花 粉 粒
1.二核花粉粒：
精子 二核花粉粒 二核花粉粒的精子形成
另一类花粉粒在成熟前，生殖细胞就完成了分裂， 2.三核花粉粒： 则此类成熟的花粉粒含几个细胞核？ 3个