实验三植物染色体标本制作

五 实验步骤（2）
脱水、透明：取三只培养皿，分别编号2、3、4， 在其中各放一根短粗玻璃棒，顺序加入下列脱水 剂：2号培养皿加2份95%酒精+1份正丁醇；3号培 养皿加1份95%酒精+2份正丁醇；4号培养皿加正 丁醇。操作时，用鸭嘴镊子把1号培养皿中已脱落 的盖玻片和载玻片从盖玻片液中取出，稍干后迅 速放入2号培养皿中。依次脱水、透明，最后放入 4号培养皿中，在各编号培养皿中分别浸泡5min左 右。整个脱水过程中，必须保持载玻片和盖玻片 原来相对的方向和位置，同时注意操作轻巧，以 免造成玻片上材料漂失。
实验三 植物染色体标本制作
来自百度文库 实验目的
学习将根尖细胞压片及花粉母细胞涂片的 临时染色体玻片改为永久片的制作方法。
二 实验原理
用植物根尖细胞压片或花粉母细胞涂抹制成的片 子，如材料染色清晰、物像符合要求，一般可用石蜡、 甘油胶冻或指甲油将盖玻片的四周封固制成临时片， 贮于冰箱中，保存观察一周左右。但时间过长，物像 收缩、颜色变深，将难以观察鉴别。因此，对一些需 要长期保存的片子，必须改制为永久片，以便进一步 观察和研究。 永久片的制作过程包括脱去临时片的盖玻片、 材料脱水、透明和封片。其中材料脱水干净和透明良 好是制成永久片的关键。为此，需选用适当的脱水剂 和透明剂。目前较理想的脱水剂是正丁醇和叔丁醇， 它们都能与最常用的脱水剂乙醇混合使用，并具有良 好的透明效果，且能与封藏剂树胶混合，有利于封片， 材料也不会发生收缩和硬化等问题。
脱盖玻片：用刀片把临时片上盖玻片周围的石蜡 刮净，用毛笔刷掉石蜡屑后，再蘸少许二甲苯擦 去残留的石蜡，或用45%乙酸除去水溶的封藏剂。 如刚作的临时片，最好过几个小时候后再进行脱 片。把临时片翻转，盖玻片朝下，放入盛有盖玻 片液（3份45%乙酸=1份95%酒精）的培养皿中， 将载玻片的一端搁在短粗玻璃棒上，呈倾斜状， 让盖玻片自然滑落。盖玻片脱落后2~3min，分别 取出盖玻片和载玻片，用吸水纸将玻片上的溶液 吸干，注意不要触动载玻片上的材料。
六 实验结果
制作清洁完整的有丝分裂永久片1张。 镜检观察制作的有丝分裂永久片，记录永 久片中出现的分裂时期。
三 实验材料
经镜检物像清晰符合要求的洋葱、大 麦、棉花或蚕豆等根尖有丝分裂，玉米或
小麦等花粉母细胞减数分裂的临时片子。
四 实验用具与药品
实验用具 显微镜 冰箱 培养皿 刀片 解剖针 鸭嘴镊子 玻璃棒 纱布 毛笔 吸水纸 标签 实验药品 正丁醇 95%酒精 冰乙酸 二甲苯 中性树胶
五 实验步骤（1）
五 实验步骤（3）
封片：从4号培养皿中取出载玻片和盖玻片置于滤 纸上吸去多余的溶剂，在载玻片中央载有材料处 滴上1~2滴中性树胶，将盖玻片盖回原来位置进行 封片。覆盖盖玻片时，要注意用鸭嘴镊子夹住盖 玻片，轻轻地倾斜覆盖，使之随着树胶的扩展自 然下滑，切不可施加压力或移动盖玻片。如发现 封片中树胶有气泡，应让其自行逸出或用针尖烧 热后烫一下，使气泡逸出。如数胶滴得过多溢出 玻片四周，应待树胶晾干后，用脱脂棉蘸二甲苯 轻轻擦净溢出的树胶。封片后平放晾干，进行镜 检，物像清晰符合要求的保存，并贴上标签，注 明标本名称、作者姓名和制作日期。