机能学实验设计[1]

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机能学实验设计

【实验名称】

甜菊苷的降压作用

【实验目的和原理】

评价甜菊苷的抗高血压作用。

甜菊苷(stevioside)为甜叶菊中所含有的主要强甜味成份,又称斯替维苷,是一种双萜配糖体,属于四环二萜类化合物,在c_4位的α一羧基上连接一个葡萄糖,C一13位上连接有二糖。甜菊苷常态下为白色或微黄色松散粉末或结晶,常温下稳定,甜度约为蔗糖的300倍,味感与蔗糖相似,甜味纯正,无异味,残味存留的时间比蔗糖长,热量仅为蔗糖的三分之一,非醇解,热稳定性好,毒性低而且适用范围广。被称为是继蔗糖、甜菜糖之后的第三种天然糖源。它具有降低血压的作用,对糖尿病和高脂血症也有很好疗效,还具有某种程度的抑制细菌和防腐的作用。

甜菊苷是从甜叶菊的叶中提取的天然成分,采用插管直接测压法观察了该药静脉注射对清醒和麻醉自发性高血压大鼠的降血压作用,以评价其抗高血压意义。甜菊苷可剂量依赖性地降低清醒自发性高血压大鼠(SHR)的收缩压和舒张压。一次静脉注射,收缩压和舒张压立即下降,作用均于5 min内达高峰,且作用持续时间也剂量依赖性地延长,较大剂量的甜菊苷作用持续时间大于60min。清醒自发性高血压大鼠给予甜菊苷50—200mg·kg~,iv,麻醉自发性高血压大鼠给予甜菊苷25~398 mg·kg~,iv,均可剂量依赖性地降低收缩压和舒张压,降压持续时间延长,且降舒张压的作用较收缩压明显。说明其降压作用可能主要是降低外周阻力所致。而且甜菊苷对麻醉自发性高血压大鼠的降压作用较清醒自发性高血压大鼠强,提示其可能有一定的反射性兴奋交感神经的作用。

【实验对象】大鼠

【实验仪器和药品】

LMS-2B型二道生理记录仪、哺乳类动物手术器械、压力换能器、玻璃分针、

注射器及注射针头、静脉输液管、动脉插管、三通、动脉夹、丝线、小烧杯、万能支架;0.9%氯化钠、100U/ml肝素、乙醚、3.5%戊巴比妥钠1mg/kg、甜菊苷50mg/kg

【实验方法】

1.清醒SHR血压的测定

清醒ILM血压的测定ILM均为雄性,体重(260±30)g,共10只,每组5只。乙醚吸入麻醉后,仰卧固定于恒温鼠台上。颈部腹面正中线切开皮肤,分离一段长约1.5㎝的颈总动脉和颈外静脉,分别插入管径约1㎜的PE50导管,作测压和给药用。导管内充有100U/ml肝素的0.9%氯化钠溶液。离体端用不锈钢针塞住,由近体端向近心端推进2㎝,再用000号丝线结扎固定,检查两导管回血良好后,一并固定于附近的肌肉上,在颈部背侧纵向切开皮肤及皮下组织,长约0.5㎝,用组织分离器从该切口插入,在皮下经颈部右侧从颈部腹侧切口穿出,再将上述两导管经此皮下隧道从颈部背侧切口引出,将两导管扎成一束,以荷包式缝合切口,用胶布将导管固定于背部皮肤上,以免脱落。缝合颈部腹侧皮肤切口,将大鼠置于长、宽、高分别为25 15 15㎝的有机玻璃盒内。动脉导管接CYSY型压力换能器,联LMS-2B型二道生理记录仪记录收缩压(SBP)和舒张压(DBP)。待动物清醒后,稳定3h,再分别记录给药前后不同时间各指标的变化。

2.麻醉SHR血压的测定

SHR均为雄性,体重(240±35)g,共10只,每组5只,以3.5%戊巴比妥钠1mg/kg,麻醉后,仰卧固定于恒温鼠台上,行右颈总动脉和颈外静脉插管术,静脉导管给药,动脉导管接换能器,记录仪记录SBP和DBP。手术完毕,稳定10min 后再行药物试验。以累加剂量给药法观察甜菊苷对麻醉SHR降血压作用的量效关系。每次在给药后血压下降至峰值时行累加剂量给药,平均给药间隔时间为4min,以甜菊苷等容积的0.9%氯化钠溶液作阴性对照。累加给药的总容积在SHR为3,.98ml/kg。整个药物试验均在30min内完成。

【观察项目】

观察并记录甜菊苷对清醒及麻醉SHR血压的影响。

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