桔梗的化学成分分析及药理活性研究

桔梗的化学成分分析及药理活性研究

桔梗为桔梗科植物桔梗Platycodon grandiflorum（Jacq.）A.DC.的干燥根,为常用中药,资源丰富,在我国有悠久的临床应用历史。桔梗性味苦、辛、平,归肺经,具有宣肺、利咽、祛痰、排脓之功效。

研究表明,桔梗含有三萜皂苷、多糖、黄酮、聚炔、甾体、酚酸、脂肪酸等类型的化合物,主要活性成分为五环三萜类双糖链皂苷,包括桔梗皂苷A、C、D、D2、D3、E,其中桔梗皂苷D是从中药桔梗中提取分离的三萜类皂苷,并且是使用最广泛的主要活性物质。本文通过对桔梗的茎叶部分和根部部分进行提取分离皂苷,深入研究其其药理作用机制,这对开发桔梗保健品及临床治疗药品具有深远的意义。

本文分别对桔梗茎叶及桔梗根部进行提取分离。将桔梗茎叶粉碎,加入无水乙醇,40℃超声提取3次,每次30min,收集提取液,减压回收蒸干溶剂,得到干燥粉末,加蒸馏水使其最大程度溶解做为上样样品,随后D101大孔树脂柱上样,12h 后,用70%乙醇冲柱,并收集5倍柱体积的洗脱液,去乙醇后,将得到的水溶液冷冻干燥,得到桔梗茎叶皂苷粉末,并做为后期实验的样品及药品使用,通过HPLC分析了桔梗茎叶皂苷中的化学成分,检测到其含有桔梗皂苷D和党参炔苷等成分;通过对桔梗粉碎,超声提取30min,提取3次后收集提取液,用旋转蒸发仪减压回收并蒸干,再水提醇沉2次,减压回收至无醇,进行冷冻干燥得到粉末,做为后期实验的样品及药品使用,通过HPLC分析了桔梗中的化学成分,检测到其含有桔梗皂苷D、去芹糖桔梗皂苷D和党参炔苷等成分,为其日后的研究开发成食品,药品等奠定了基础。

之前的研究表明,桔梗茎叶中含有丰富的皂苷,黄酮,多酚等,具有较强的抗

氧化活性。从充分利用药材资源角度,应对桔梗茎叶的化学成分及药理活性做深入研究,以期为将来入药提供必要的理论基础。

本文通过实验利用常规提取分离技术,富集桔梗茎叶皂苷,并成功建立

H₂₂移植瘤ICR小鼠动物模型,首次观察了桔梗茎叶皂苷（the stems and leaves of Platycodon grandiflorum,PSSL）对小鼠的体内抗肿瘤作用,并对其分子机制做了初步的探讨。结果表明:与模型组相比,PSSL给药组（25和

50mg/Kg）小鼠肿瘤H₂₂移植瘤的质量降低,生长明显受到抑制。

肝、脾和胸腺指数接近模型组,表现出PSSL对免疫器官具有保护作用。PSSL 各剂量组中ALT,AST指数均降低,血清中TNF-α和IFN-γ水平显著增高。

此外,H&E和Hoechst 33258染色结果表明:PSSL能明显诱导肿瘤细胞凋亡。以上结果表明,PSSL对H₂₂荷瘤小鼠的抗肿瘤功效呈剂量依赖性,其潜在的机制是由于PSSL改善了免疫功能并诱导细胞凋亡。

对乙酰氨基酚（Acetaminophen,APAP）是世界上最常用的止痛药和解热药。虽然在一定治疗剂量下是安全的,但APAP过量经常会引起严重的肝损伤和肝功能衰竭,本文基于桔梗皂苷能够显著改善氧化应激及炎症反应从而达到对肝脏的保护作用。

我们建立了对乙酰氨基酚（Acetaminophen,APAP）诱导的急性肝损伤模型,观察桔梗根部皂苷（the root of Platycodon grandiflorum,PS）对肝损伤的保护作用。结果显示:与APAP模型组（250mg/Kg）相比,PS高剂量给药组（30mg/Kg）小鼠状态明显好转,体重升高,可以明显改善由APAP导致的肝指数升高。

给药PS能显著降低血清ALT和AST的水平,TNF-α和IL-1β的水平,且以不同程度降低肝组织中MDA的含量,以不同程度的升高肝组织中GSH的含量。组织

学分析表明PS能够减弱APAP诱导的肝损伤,通过实时荧光定量PCR分析测定肝脏中的TNF-α和IL-1β的水平,发现APAP给药后TNF-α和IL-1β的表达显着增加,而PS给药后减弱了肝组织中TNF-α和IL-1β的表达。

整体结果表明PS对急性APAP诱导的肝损伤具有一定的保护作用。综上所述,本文研究表明:PSSL对H₂₂荷瘤小鼠具有抗肿瘤作用,PS对APAP诱导的急性肝损伤的保护作用。

其可能的机制主要通过改善氧化应激,调节免疫作用,减少炎症反应抑制脂质过氧化及抗细胞凋亡而实现的。