【名称】抗人球蛋白试验

【名称】抗人球蛋白试验
【英文名】anti-human globulin test
【别名】Coombs试验
【概述】
抗人球蛋白试验又称Coombs试验，是检查不完全抗体的一种很好的方法。

将抗人球蛋白血清加入已致敏的红细胞盐水悬液中，红细胞表面的抗体球蛋白(即使其致敏的不完全抗体)与抗人球蛋白血清中的抗体发生特异性反应，使红细胞发生凝集。

抗人球蛋白血清除了可以测定红细胞上IgG抗体外，还可以测定IgM和IgA，也可以测补体组分(C、C)。

【原理】
凝集反应。

【试剂】
(1)直接抗人球蛋白试验：
①抗人球蛋白血清(广谱及单价)。

②5%受检者红细胞。

③5%IgG致敏红细胞。

(2)间接抗人球蛋白试验：
①抗人球蛋白血清(广谱及单价)。

②受检血清(或已知抗体的血清)。

③5%已知抗原的红细胞悬液(或5%受检红细胞悬液)。

④不完全抗D血清。

⑤AB型血清。

⑥5%D阳性红细胞悬液。

【操作方法】
(1)直接抗人球蛋白试验：
①在标记好的10或12×60mm试管内加1滴5%受检者红细胞生理盐水悬液。

再用生理盐水洗涤3～4次。

末次洗涤后，将上清液全部倾出，尽量吸干，立即加入1～2滴最适广谱抗人球蛋白血清，混匀。

②以1000r/min离心15s，借助光镜检查。

从试管底部松动红细胞，轻轻地摇动试管直到松动所有的细胞，然后反复轻轻地倾斜试管，直到呈现均匀的细胞或者凝集物为止。

③若为阴性，再加1滴5%IgG致敏的红细胞，以1000r/min离心15s。

如凝集，表明原先的阴性结果是正确的。

如不凝集，则不是先前的洗涤不充分，就是抗人球蛋白试剂失效之故。

这是一个很重要的对照。

④直接抗人球蛋白试验判断为阳性者，应继续用单特异性的抗人球蛋白血清试验，以便确定红细胞是被IgG致敏，还是受补体致敏。

单价特异性抗人球蛋白血清的使用方法与广谱抗人球蛋白血清相同。

(2)间接抗人球蛋白试验：
①在标记好的10(12)×70mm试管内加3滴患者血清，再加5%红细胞悬液1滴，另外将2滴不完全抗D血清加入阳性对照管中2滴AB型血清加入阴性对照中，分别加入5%阳性红细胞悬液1滴，混合后，放37℃水浴1h。

②用生理盐水洗涤致敏后的红细胞3次，以3000r/min离心45s，倾去上清液，尽量吸干，随即加入1～2滴抗人球蛋白血清，混匀。

③以1000r/min离心15s，借助光镜检在，从试管底部松动红细胞，轻轻地摇动，直到松动所有的细胞，然后反复轻轻倾斜试管，直到呈现均匀的细胞或凝集物为止。

阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集。

④受检管若为阴性，加1滴2%～5%IgG致敏的红细胞悬液，以1000r/min 离心15s后看结果，如凝集则结果是正确的，否则是不正确的。

⑤间接抗人球蛋白试验阳性者，继续用单价特异性抗人球蛋白血清检测，方法与用广谱抗球蛋白血清一样。

【正常值】
直接法：阴性。

间接法：阴性。

【临床意义】
(1)自身免疫性溶血性贫血：温抗体型直接法阳性、间接法阴性。

(2)药物诱发的免疫性溶血性贫血：
①α-甲基多巴型：直接和间接法均阳性。

②青霉素型：直接法阳性、间接法阴性。

③福阿亭型：直接法阳性。

(3)冷凝集素综合征：直接法阳性、间接法阴性。

(4)新生儿同种免疫溶血病：直接和间接法均阳性。

(5)直接法阳性：传染性单核细胞增多症、系统性红斑狼疮、恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病、癌肿、铅中毒、结节性多动脉炎、Ev ans氏综合征(伊文斯氏综合征、特发性血小板减少性紫癜合并获得性溶血性贫血)、阵发性寒冷性血红蛋白尿症等。

(6)直接法阴性：遗传性球形细胞增多症。

【附注】
标本应新鲜、试管洁静，避免血浆蛋白污染，以防假阴性。

阴、阳性对照结果应鲜明，否则应重做。