临床微生物学检验-PPT课件

（一）医院感染标本的采集和 运送的基本原则




发现医院感染应及时采集微生物标本 作病原学检查，二、三级医院微生物 标本送检率不应低于70%。 尽量在抗菌药物使用之前采集标本。 标本采集时应严格执行无菌操作，减 少或避免机体正常菌群及其他杂菌污 染。 标本采集后应立即送至实验室，床旁 接种可提高病原菌检出率。
标本送检方法 --血液与骨髓
① 通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时，以 肘动脉或股动脉采血为宜。切忌在静滴抗菌药物的静 脉处采取血标本。 ② 采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入 血培养基前，应过火消毒针头，最新资料显示更换针 头容易造成新的污染。血培养瓶应在避光室温中保存， 不必置冰箱保贮。 ③ 每次采血量成人5-10ml，婴幼儿l-5ml，培养基与血 液之比以 10：1为宜，以稀释血液中的抗生素、抗体 等杀菌物质。为提高阳性率，我们一般要求成人采血 不少于8 ml，儿童不少于3 ml，婴儿1-2 ml。
三、分析前的质量控制
分析前质量控制是我国目前临床实验室 诊断质量保证中较为薄弱的环节，严重影 响临床微生物学实验室对感染样本中致病 菌的分离培养的阳性率和医院感染病原体 监控，也影响临床诊断，合理选用抗菌药 物，降低耐药菌的产生和提高感染的治愈 率，而且对预测或及时发现医院感染的暴 发流行、杜绝感染蔓延、研究医院感染的 发病机制和环节、制定有效的医院感染控 制措施等，均具有十分重要的意义。严格 实施正确的微生物标本送检和检验方法， 是做与
脓液
① 无菌生理盐水擦洗病灶表面后用棉拭子取病 灶深部的脓液和分泌物，置运送培养基内送 检。 ② 对未渍破的脓肿宜用碘酒、酒精消毒皮肤后， 以无菌注射器抽取脓液送检：也可于切开排 脓时用无菌棉拭子采样。
标本送检方法 --粪便
① 排便后，挑取有脓血、粘液部分的粪便约 2—3g(液状粪便则取絮状物)，盛于灭菌广口 瓶或蜡纸盒送检。用棉拭挑取粪便插入 Cnry—BLair运送培养基或PH7．0的磷酸盐甘 油中送检，可提高病原菌检出率． ② 对不易获取粪便者或婴幼儿，可用肠拭于(又 称肛拭)采集。将拭子前端用无菌甘油水湿润 然后插入肛门约4—5cm(幼儿约2—3cm)处， 轻轻旋转擦取肠表面粘液后退出置运送培养 基内送检。
标本送检方法 --血液与骨髓
④ 怀疑菌血症应尽早采血，体温上升阶段采血 可提高阳性率，但要防止因等待而延误时机。 对已用抗菌药物而又不能停药者，可在下次 用药前采血。 ⑤ 每例至少采血两次，间隔0.5-1h，以利于提 高阳性率和区分感染菌与皮肤污染菌。感染 性心内膜炎在24小时内采血三次做血培养。 ⑥ 对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶部 位或髂前(后)上棘处严格消毒后抽取骨髓lml 作增菌培养。
临床微生物学检验的 全程质量控制
一、临床微生物学检验的意义
对一个感染病人来说，细菌培 养无疑是非常必要的，有一个准确 的培养结果能很好地帮助临床医生 用药有的放矢，避免盲目用药给病 人带来沉重的经济负担，同时也可 以减少盲目用药造成的大量耐药菌 株的产生。
二、细菌室开展的业务范围
临床微生物包括细菌、真菌、 病毒等一大类微小生物。但象衣 原体、螺旋体及病毒等不能在无 生命活性的人工培养基中生长繁 殖，只能通过细胞培养才能达到 目的。细菌室应该能开展能在无 生命活性培养基中生长的所有细 菌，还有真菌。
标本送检方法 --痰液
① 咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从呼吸道 深部咳出新鲜痰液于无菌容器送检。痰量极少 者可用45℃lO％氯化钠液雾化吸入导痰。 ② 对咳嗽乏力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔 或口腔抵达气管腔内吸引痰液。用纤维支气管 镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌， 但不能完全避免咽喉部正常菌群污染。 ③双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插 管思者，可用吸痰管经人工气道估插至肺支气 管水平吸引痰液。
标本送检方法 --痰液
④ 对重症、难治、或伴免疫抑制、或疑似厌氧 菌引起的医院内肺部感染可采用环甲膜穿刺 经气管吸引(TTA)、经胸壁穿刺肺吸引(LA)、 经纤维支气管镜或人工气道作防污染双套管 毛刷(PSB)或防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)采 集无口咽部菌群污染的痰液，进行精确的感 染病原学诊断。 ⑤ 痰标本不能及时送检者，可暂存4℃冰箱。 室温下延搁数小时，定植于口咽部的非致病 菌呈过度生长，而肺炎球菌、葡萄球菌和流 感杆菌检出率则明显下降。
标本送检方法 --尿液
① 中段尿：女性采样前应先用肥皂水或0.1％高 锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口；男性须翻 转包皮冲洗，用O.1％新洁尔灭消毒尿道 口．灭菌纱布擦干后收集标本。 ② 导尿管导尿采样可减少污染。对留置导尿者， 可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用空针 细针头斜穿管壁抽吸尿液。或消毒后解开接 口，弃去导尿管前段尿被、留无污染的膀胱 内尿液数毫升送检。不可从集尿袋的下端管 口留取标本。
以棉拭子采集的标本如：咽拭、肛 拭或伤口拭子，立即送检。 盛标本容器须经灭菌处理，但不得 使用消毒剂。 送检标本应注明来源和检验目的， 使实验室能正确选用相应的培养基 和适宜的培养环境，必要时应注明 选用何种抗菌药物。

（二）常见医院感染标本送检 方法

血液与骨髓 尿液 痰液 伤口、烧伤创面与脓液 粪便
标本送检方法 --尿液
③ 尿厌氧菌培养，或婴幼儿中段尿采集困难， 或培养结果与病情不符时，可经耻骨上皮肤 穿刺采集无污染的膀肮内尿液。 ④ 送检标本以晨起第一次尿液为佳。 ⑤ 室温下尿标本耽搁稍久，可致尿内细菌浓度 明显增加而影响病原菌与污染菌的区分。不 能立即送检者，可暂存4℃冰箱，一般不存放。


咽拭、口腔拭子 浆膜腔积液、脑脊 液 生殖道标本 组织标本 静脉导管
标本送检方法 --血液与骨髓
如怀疑病人患有感染性系统性炎症反 应综合征，需要采血进行培养，另外当 新生儿出现原因不明的黄疸时，应想到 败血症的可能并早期采血做培养。如果 一次血培养阴性又高度怀疑败血症时， 应反复做血或感染灶的渗出物的细菌培 养以提高阳性率。