组织培养基础

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接种室
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
培养室
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
培养室
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
培养架
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
温室
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
二、仪器设备和器皿用具
1、超净工作台或接种箱

2、空调
一 )
3、除湿机或加湿器 4、恒温培养箱 5、高压灭菌锅
第二章 培养基及其配制
生长素作用强弱顺序:
2,4—D(2,4—二氯苯氧乙酸) 强

6、冰箱
见 仪
7、天平 8、显微镜 9、水浴锅

10、摇床与转床
设 备
11、蒸馏水发生器 12、酸度计 13、离心机
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
电子天平
灭菌锅
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
超净工作台
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
酸度计
PHS-802中文台式酸度计
第二章 培养基及其配制
(2)维生素(vitamin)
在细胞里主要是以各种辅酶的形式参与多种代谢活动。 种类:VBl(盐酸硫胺素)、
VB6(盐酸吡哆醇)、 Vpp(烟酸)、 Vc(抗坏血酸)、 VH(生物素)、 VB11(叶酸)、 VB12(钴胺素)等。 使用浓度:一般用量为0.1—1.0mg/L。
1、培养器皿的清洗; 2、培养基的配制、分装和高压灭菌; 3、无菌操作——材料的表面灭菌和接种; 4、将培养物放到培养室培养; 5、试管苗的驯化、移栽和初期管理。
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
一、设计:
准备室 温室
洗涤室 组成
驯化室
无菌操作室 培养室
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
第二章 培养基及其配制
本节目的要求: (1)一般掌握培养基的种类、特点; (2)掌握基本培养基的配方; (3)一般掌握培养基的组成成分和适宜的剂量; (4)掌握培养基母液和常用培养基的配制方法; (5)熟练掌握培养基的灭菌方法; (6)一般掌握培养基的筛选办法。
第二章 培养基及其配制
培养基(culture medium) :是植物组织培 养的重要基质。在离体培养条件下,不同种 植物的组织对营养有不同的要求,甚至同一 种植物不同部位的组织对营养的要求也不相 同。因此,没有一种培养基能够适合一切类 型的植物组织或器官,在建立一项新的培养 系统时,首先必须找到一合适的培养基,培 养才有可能成功。
第二章 培养基及其配制
2、有机化合物(organic compound)
(1)碳水化合物
最常用的碳源是蔗糖,葡萄糖和果糖也是较好的碳源。 使用浓度在1%—5%,常用3% 在大规模生产时,可用食用的绵白糖代替。
若只含有大量元素与微量元素和碳水化合物的 培养基,称为基本培养基。 需要添加各种各样的附加物如维生素、氨基酸、 生长调节物质 的培养基叫完全培养基。
第二章 培养基及其配制
4、植物生长调节物质(hormone)
生长素类(auxin) 细胞分裂素类 ( cytokinin ) 赤霉素(gibberellic acid)
第二章 培养基及其配制
(1)生长素类
*作用:主要被用于诱导愈伤组织形成,促进细
胞伸长生长和促进生根。 在促进生长方面,根对生长素最敏感。在极 低的浓度下,(10-5—10-8mg/L)就可促进生 长,其次是茎和芽。
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
显微镜
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
培养箱
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
电融合仪
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
(二)各类玻璃器皿
1、培养器皿:试管、三角瓶、培养皿、 圆形培养瓶、果酱瓶
2、分注器 3、离心管 4、刻度移液管 5、细菌过滤器 6、实验器皿:量筒、烧杯、容量瓶、
作用:是很好的有机氮源,可直接被细胞吸 收利用。
种类:最常用的是甘氨酸,其他的如精氨酸、 谷氨酸,谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙 氨酸等。
使用浓度:为10—200mg/L。
第二章 培养基及其配制
3、有机附加物 (天然复合物)
有机附加物 椰乳 香蕉 马铃薯
酵母提取液
浓度: 10%—20% 150-200ml/L 150—200g/L 0.01%-0.05%
第二章 培养基及其配制
*生长素种类:
➢ 吲哚乙酸:IAA(indo acetic acid) ➢ 萘乙酸:NAA(naphthalene acetic acid) ➢ 吲哚丁酸:IBA(indolebutyri acid) ➢ 2,4-二氯苯氧乙酸:2,4—D
(2,4-dichlorophenoxybutyric acid)
植物组织培养技术
第1章 植物组织培养实验室
构建及一般技术
植物组织培养技术
第1章 植物组织培养实验室
构建及一般技术
第1章 植物组织培养实验室 构建及操作技术
本章主要内容
商业性组织培养实验室和小工厂的 设计与主要设备
第1章 植物组织培养实验室 构建及操作技术
商业性组织培养实验室和小工厂的 设计与主要设备
第二章 培养基及其配制
一、培养基的成分
其它添加物
无机营养物
培养基组成
有机营养物
碳水化合物
植物生长调节物质
第二章 培养基及其配制
1、无机营养元素(inorganic element)
1)大量元素:指浓度大于0.5mmol/L的元素。 [N、P、K、Mg、S和Ca]。
2)微量元素:指小于0.5mmol/L的元素。 [Fe,B,Mn,Cu,Mo,Co等]。
第Biblioteka Baidu章 培养基及其配制
(3)肌醇
又叫环己六醇,在糖类的相互转化中起重要作用。 使用浓度:一般为lOOmg/L, 作用:适当使用肌醇,能促进愈伤组织的生长以
及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、分 化有促进作用,对细胞壁的形成也有作用。
第二章 培养基及其配制
(4)氨基酸 (almino acide)
试剂瓶、塑料瓶、酒精灯等。
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
培养瓶
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
细菌过滤器
第一节 组织培养实验室的 设计与主要设备
(三)器械用具
1、镊子:尖头镊子、枪形镊子 2、剪子 3、解剖刀 4、接种针 5、钻孔器
植物组织培养技术
第2章 培养基及其配制
第2章 培养基及其配制
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