致病性大肠埃希氏菌及其检验

C-枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
• 利用枸橼酸盐生长 +
• 不能利用
-
•
一、埃希氏菌属生物学特性
• 抵抗力 • 该菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，55℃经60
分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。 • • 在自然界的水中可存活数周至数月，在温度较低
的粪便中存活更久。对磺胺类、链霉素、氯霉素 等敏感，青霉素对它的作用弱, 易产生耐药菌株.
•
I-吲哚（indol）试验
色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚 ↑
吲哚试剂 •
M-甲基红（methyl red）实验 葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇 葡萄糖→丙酮酸
甲基红 甲基红 +
V-VP（Voges-Proskauer）试验 葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇→二乙酰→红色化合物+
胍基化合物 葡萄糖→丙酮酸 × × 乙酰甲基甲醇
白质,加热65℃经30min即被破坏. LT与霍乱菌肠 毒素作用相似,都是刺激小肠上皮细胞的腺苷环化 酶,使ATP转变为CAMP,促进肠黏膜细胞的分泌功能, 使肠液大量分泌,引起腹泻;耐热肠毒素(ST)无免 疫性,耐热,100℃经10-20min不被破坏,也可使肠 道细胞的CAMP水平升高,引起腹泻.
• 在麦康基培养基上培养的大肠埃希杆菌 大肠埃 希杆菌产生粉红色乳糖发酵菌落。麦康基培养基 是肠道细菌的选择培养基，含胆盐、乳糖和pH指 示剂中性红。乳糖发酵菌落产生酸，将指示剂变 红。（麦康基琼脂，18小时，37℃）
革兰氏阴性杆菌
革兰氏阳性杆菌
大肠杆菌扫描电镜照片
大肠杆菌透射电镜照片
大肠杆菌革兰氏染色照片
大肠杆菌平板菌落照片
一、埃希氏菌属生物学特性
• 生化特性 1）可发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇产酸
产气，有些不典型的菌株不发酵或迟缓发酵乳 糖； 2）不同菌株对蔗糖，卫矛醇、水杨苷发酵结果 不一致; 3）本菌可使赖氨酸脱鞍、不能使苯丙氨酸脱羧。 4）不产生H2S，不液化明胶，不分解尿素;
5）、不能在氰化钾培养基上生长，靛基质试验阳性， V-P试验阴性，不利用枸橼酸盐。后四项生化特性 是典型的大肠埃希氏菌，与此不一致的即为非典 型大肠埃希氏菌菌。 IMViC试验：如IMViC试验 为+、+、-、-，且乳糖发酵，表明被检物已有粪 便污染，有发生肠道传染病的危险，这是卫生细 菌中常用的检测指标。（I：吲哚形成试验，M： 甲基红试验，Vi：V-P试验，C：枸橼酸盐利用试 验）
致病性大肠埃希氏菌及其检验
大肠埃希氏菌,俗称大肠杆菌,是人 类和动物肠道中正常菌群的主要 成员,每克粪便中约含109个.大肠 埃希氏菌随粪便排出后,广泛分布 于自然界.水、牛乳及其他食品一 旦检出大肠埃希氏菌，即意味着 这些物品直接或间接被粪便污染。
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• 正常情况下，大肠埃希氏菌不致病，而且还能合 成维生素B和维生素K,生产大肠菌素，对机体有利。 但当机体抵抗力下降或大肠埃希氏菌侵入肠外组 织或器官时，可作为条件致病菌而引起肠道外感 染。有些血清型可引起肠道感染。致病性大肠埃 希氏菌属主要分为五大类，首先根据发病机理分 为三大类， 1、产毒素型大肠埃希氏菌(ETEC)， 2、侵袭型大肠埃希氏菌(EIEC) 3、肠道致病性大肠埃希氏菌(EPEC) 近来又提出另外两类 4、出血性大肠埃希氏菌(EHEC)
一、埃希氏菌属生物学特性
致病性：（1）致病因素
• 侵袭力:大肠杆菌具有抗原和菌毛,抗原有抗吞噬 作用,有抵抗抗体和补体的作用,菌毛能帮助细菌 黏附于黏膜表面.有侵袭力的菌株可以侵犯肠道表 皮层引起炎症.
• 内毒素:大肠杆菌细胞壁具有内毒素的活性 • 肠毒素:有两种,不耐热肠毒素(LT),成分可能是蛋
5）在鲜血琼脂平板上生长，有些菌株可见β溶血环。 6）在远藤琼脂上长成带金属光泽的红色菌落 7）在S．S琼脂平板上多不生长，少数生长的细菌，
也因发酵乳糖产酸而形成红色菌落； 8）在伊红美兰琼脂上形成紫黑色具有金属光泽的菌
落 9）在麦康凯琼脂上培养24小时后孤立菌落呈红色
•
埃希氏菌在S．S琼脂平板上形成红色菌落
泻
泻
一、埃希氏菌属生物学特性
致病性：（2）所致疾病 • 肠外感染：泌尿系统感染最常见病原菌。还可引
• 5、肠粘附性大肠埃希氏菌(EAEC)
• 致病性大肠埃希氏菌中，一般认为能产生耐热{ST) 和不耐热(LT)肠毒素的两种菌株均可引起人的食 物中毒。引起大肠埃希氏菌中毒的主要是一些动 物性食品，如乳与乳制品、肉类、水产品等，牛 和猪是传播这种病菌、引起中毒的主要原因。
•
• 1996年7月在日本就发生了大肠杆菌0157 型引起的食物中毒，造成9017多人中毒， 10人死亡，其原因与生食萝卜苗有关，其 中92例并发出血性肠炎及出血性尿毒症。 2001年，再江苏、安徽等地爆发的肠出血 性大肠杆菌0157:H7食物中毒，造成177人 死亡，中毒人数超过2万人。
• 如仔猪黄、白痢、猪水肿病、牛腹泻和败 血症等均可由大肠杆菌引起。
一、埃希氏菌属生物学特性
形态与染色 本属细菌为革兰氏阴性 两端钝圆、中等大小的 无芽孢杆菌，绝大多数 周生鞭毛，能运动，周 身还有菌毛，不产生荚 膜，某些菌株有荚膜。
普通大肠埃希氏菌Escherichia Coli
一、埃希氏菌属生物学特性
• 培养特性 1)需氧及兼性厌氧菌 2)对营养的要求不高，在普通琼脂上就生长良好，
在15C-45℃范围内均可生长，但最适生长温度为 37℃，最适pH为7.2-7.4。 3)在普通琼脂平板上培养24小时，可形成圆形、凸 起、光滑、湿润、半透明、边缘整齐、中等大小 的菌落．其菌落与沙门氏菌比较相似，但是，大 肠杆菌菌落对光(45角折射)观察可见荧光。 4)在肉汤培养基中生长18-24小时变为均匀浑，而后 底部出现粘性沉淀物，并伴有臭味。 •
LT与ST的比较
特性
不耐热肠毒素
分子量
较大，73000
耐热性
不耐热
免疫原性 有
B亚单位受体 肠黏膜GM1神经节苷酯
耐热肠毒素
较小，1500-5000
耐热 无 肠黏膜GM1神经节苷酯
致病机理
活化细胞腺苷酸环化酶，活化细胞鸟苷酸环化酶，
细胞内cAMP含量升高， 细胞内cGMP含量升高，
分泌功能亢进，引起腹 分泌功能亢进，引起腹