微生物实验 药物敏感实验

微生物药物敏感实验

⏹一、实验目的

⏹1、熟悉和掌握圆纸片扩散法检测细菌对抗菌药物敏感性的操作程序和结果判断方

法。

⏹2、了解药敏试验在实际生产中的重要意义

二、实验原理

⏹将含有定量抗菌药物的纸片（药敏纸片）贴在已接种待检菌的琼脂平板表面特定部

位。药物借其分子的扩散力向周围琼脂中扩散，形成了随着离纸片距离加大，琼脂中的药物浓度逐渐减少的梯度浓度。其纸片周围一定区域琼脂内的药物浓度高于抑制待检菌所需浓度时，则该区域内细胞不能生长，形成透明抑制圈。抑菌圈的大小可以反映待检对测定药物的敏感程度，抑菌圈愈大，说明该菌对此药物越敏感三、实验器材

⏹1．菌种大肠埃希菌。

⏹2．培养基牛肉膏蛋白胨培养基。

⏹3．试剂无菌生理盐水，抗菌药物纸片：

包括青霉素、氨苄西林、土霉素、链霉素等。

⏹4．其他无菌棉拭子、镊子、毫米尺、接种环。

四、实验方法和步骤

⏹1．菌液制备

菌浓合适，一般为106

⏹2．接种

细菌悬液制备后15min内接种至倒好的牛肉膏蛋白胨培养基平板中，接种量0.1-0.2mL。涂布均匀。

⏹3．贴药敏纸片

⏹涂布后的平板在室温下干燥3~5min，用纸片分配器或无菌镊子将纸片贴于琼脂表面

并轻压，使纸片与琼脂表面完成接触。各纸片中心相距应大于24mm，纸片贴上后就不能再移动位置。

⏹4．培养

⏹将平板倒置放入37℃培养箱培养，16~18h读取结果。

五、实验结果

六、思考题

⏹ 1.圆纸片药敏试验操作时应注意什么事项？

⏹ 2. 试述药敏试验的意义