花粉生活力测定

三、实验用品
1、材料 正在开花的植株花粉（大樱桃 美早） 2、器具 盖、载玻片 凹式载玻片 培养皿 滴管 镊子 吸 水纸 恒温箱 天平 烧杯 玻棒 电炉 普通显微镜 3、药品 蒸馏水 硼酸 蔗糖 琼脂 六偏磷酸钠
四、内容与方法（花粉萌发）
（一）培养法： 1、配置培养基 取100ml蒸馏水中，加1~2g（即1%~2%）琼脂煮开， 使之溶解，然后再加入一定量的蔗糖或葡萄糖和0.01g 硼酸，制成不同浓度（5%、10%、15%、20%）的蔗 糖琼脂培养基。 2、制片 用玻棒蘸少许培养基，趁热滴入凹形载玻片，放置片 刻，待凝固后，撒上少许花粉粒。注意要均匀，不可 过多，否则，在显微镜下，不易分清数目。 3、培养 将制好的玻片放于培养皿，下面垫有滤纸，加入少量 水，以保持湿度。将培养皿盖好，置于20~25℃恒温 箱中。22 ℃
实验 一 花粉生活力的测定
一、实验目的 学习和掌握花粉 生活力测定的方 法 测定在不同温度 保存下的花粉生 活力的变化情况
花 粉
二、实验原理
作物杂交工作中，往往会遇到父母本花期不遇，必须采集 花粉短暂贮藏，经贮藏的花粉及其生活力如何，必须经过 测定，以保证杂交效果。此外，花粉的生理研究，作物雄 性不育和远缘杂交都要鉴定花粉育性和生活力。
★简便，但是一般用于要求不严格新采集的花粉
花粉发芽鉴定：配制一定浓度的蔗糖溶液
等作培养基，在人工控制条件下进行花粉发 芽试验，根据花粉发芽率的高低衡量花粉生 活力。也可以在授粉数小时后直接观察柱头 花粉萌发伸长情况。
染色鉴定：用不同的化学试剂如氯化三苯
基四氮唑（2，3，5-triphenyl tetrazolium chloride、C12H15N4Cl，简称TTC或四唑）、 联苯胺茶酚等快速鉴定花粉生活力。
同期花粉萌发率对比图
萌发率
花粉生活力变化图 80.00% 60.00% 40.00% 20.00% 0.00% 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30
常温 冰箱
时间
五 结果与数据分析
花粉萌发率变化图 0.7 0.6 0.5
花粉发芽率wenku.baidu.com
冰箱保存 常温保存
0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 5 10 15 20 25 30 35 天数
正常条件下花粉在雌蕊上萌发的能力，就是花粉的生活力。 花粉生活力的高低直接影响植物授粉、受精乃至坐果。
花粉生活力测定的方法较多，常用的有：形态鉴定、花粉 发芽鉴定、染色鉴定 。
形态鉴定： 花粉有无生活力在形态上有明显差异，即形 态是否发育正常，其内部淀粉等内含物是 否充实。发育不正常的花粉，内含物不充 实而空秕，形状也不规则，大小参差不齐。 而正常花粉内含物充实饱满，形状规则， 大小整齐。因内部含有较多淀粉粒而遇 1%I-IK溶液呈深紫色反应，遇水易吸涨而破 裂。一般适用于不育系及远缘杂交后代花 粉形态和育性的鉴定。
4、镜检 在显微镜下隔一定时间检查一次（花粉发芽快的经过 几个小时即可观察到已经发芽，慢的需24小时以上）， 若发现花粉已发芽时，就随机地在显微镜下取5个视野， 记录花粉粒总数和发芽数，算出平均值，将观察结果填入 表内。 花粉发芽的标准，以花粉管伸长超出花粉直径为准。 若花粉发芽率在5%以下，为极弱，不能采用。 （花粉发 芽率=发芽花粉总数\花粉总数）培养过程要密切观察，不 可使花粉管萌发的太长，否则难以计数。 ★ 培养基法能够统计出百分率，准确 度高，但是操作相对复杂，而且花粉 发芽条件与实际不完全相符易受培养 基配方的影响导致结果的偏差。
六 结论
柱状图：不同温度保存相同时间下，冰箱 保存的萌发率高于常温保存 随时间增长两者萌发率都呈下降趋势 折线图：3-6天内冰箱保存萌发率下降较快 出现平缓的趋势，可能是实验存在误差 没有达到预期的效果，冰箱保存应该生活 力时间更长
六 实验的不足之处
文献查阅检准率和检全率不够 试验方案不完备 存放花粉时存在外围环境影响 试验时散花粉太多，计数时误差太大 数据记录不规范
不同时间萌发率图
时间 冰箱保存 3 6 65.60% 49.60%
平均萌发率
常温保存 48.90% 39.40%
9 12
15 18 21 24 27 30
47% 45.40%
37% 30.10% 26.90% 22% 16.20% 10.20%
33.20% 29.50%
29.30% 21.50% 15.20% 10.30% 9.60% 8.23%
配置培养基（ 100ml水+1g+琼脂+0.01g硼酸+ 5-20g糖 ） 煮沸溶化 用玻棒分装与凹玻片中 播撒花粉 置于培养皿中20-25℃恒温培养数小时 保持湿度 在显微镜下镜检计数
【注意事项】 1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同，应依植物种类而改变 培养条件。 2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度，离体时间， 环境条件等因素对花粉活力的影响。 3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发，本法适用于易于萌发的(葫芦科等)植 物花粉活力的测定。
谢谢大家！