突变体获得方法
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其中形成嘧啶二聚体的生物学效应研究的比较清楚。由于 二聚体的出现会减弱双链间氢键的作用，引起双链结构扭曲变 形。 同时又会妨碍双链的解开，阻碍碱基正常的互补配对，影响 DNA的复制和转录，从而导致突变或死亡。
尽管不断有新型的诱变技术产生，紫外诱变技术因其操作 简单，效果显著，在很多领域仍然发挥重要作用。
物 理 方 法
1.紫外 2.电离辐射 3.离子注入 4.微波
5.其它
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紫外
紫外线是诱发微生物突变的一种非常有用的工具。DNA和 RNA的嘌呤和嘧啶有很强的紫外吸收能力，最大的吸收峰在 260 nm 。
因此，波长在200-300 nm的紫外光才有诱变作用。紫外 线可引起生物体形成嘧啶(主要是胸腺嘧啶)二聚体、嘧啶水 合物和引起DNA分子交联。
以一株绿色木霉F1为出发菌株，经紫外线、亚硝基胍、 硫酸二乙酯三种因素依次处理，以每一轮诱变处理筛选到 的酶活最高的突变株作为下一轮诱变的出发菌株。
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基因工程方法:
1.DNA标签法 2.基于载体构建的突变体 3.基因打靶技术 4.RNA干扰技术
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化学
诱变
方式
0.化学诱变 1.烷化剂
2.其它诱变剂及复合诱变
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化学诱变剂是一类能和DNA起作用， 进而改变DNA的空间结构或者结构组成， 导致DNA产生变异的物质。按其诱变机 制可分为碱基类似物诱变剂、直接诱变 DNA结构的诱变剂和诱发移码突变的诱 变剂3类。利用化学诱变剂进行的化学诱 变具有使用方便，特异性较强和诱变后 代较易稳定遗传等特点。
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微波辐射
微波辐射属于一种非电离性高频电磁波，在300 MHz 一300 GHz范围内有较强的生物效应，主要对生物体产生 热效应和非热效应。在微波作用下，生物体会产生局部温 度上升(热效应)以及非温度关联的各生理生化反应(非热效 应)，进而产生一系列突变效应。
除上述的方法之外，还有利用其它物理因素进行的诱变，如利用激光、太 空条件等，或多种方法联合使用构建生物突变体。
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来源：生物技术通报 2010年第2期 构建微生物突变体的方法综述 张念章 逯忠新
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定义1：
一般指带有已经发生突 变的基因的细胞、病毒或细菌， 有时也指发生突变的基因。
定义2：
携带突变基因的细 胞或个体。
突 变 体
(mutant)
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该方法已培育出许多具有生产 利用价值的微生物新品种，给生产带来 了巨大的经济效益和社会效益.
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烷化剂
烷化剂又称生物烷化剂，是一类能形成碳正离子或其它亲 电性基团的化合物。常用的烷化剂包括亚硝基胍(NTG)、甲基磺 酸乙酯(EMS)、硫酸二乙醋(DMS)和硫酸二乙酯(DES)。其中Ems 是目前公认的效果最好和应用最广的一种化学诱变剂。其诱变 作用主要发生在鸟嘌呤N·7位置上，烷基取代H离子后，使之 成为一个带正电的季铵基团，从而发生两种遗传效应：一是烷 化的鸟嘌呤与胸腺嘧啶配对，代替胞嘧啶，发生转换突变(即G： C变为A：T)；二是由于鸟嘌呤的N-7烷基活化，糖苷键断裂造 成脱嘌呤，鸟嘌呤的位置成了一个空位，复制时其互补位置上 的碱基就不受严格的配对限制，4种碱基都有机会进入，从而造 成置换现象。此外，EMS还可以造成糖．磷酸骨架断裂，引起 染色体缺失。与其它诱变剂相比，EMS诱变后产生的突变频率 高，且多为显性突变体，易于突变体的筛选。
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其它诱变剂及复合诱变
除了烷化剂外，平阳霉素(PYM)、秋水仙素、5-溴尿 嘧啶(5-BU)、2-氨基嘌呤(AP)等也常用于诱变工作。
将两种或多种诱变剂的联合应用于突变育种工作中 就形成了复合诱变。该诱变过程包括：两种或多种诱变剂 的先后使用；两种或多种诱变剂的同时使用；同一种诱变 剂的交替重复作用等。普遍认为，如果将两种或两种以上 诱变剂合理搭配使用，诱变剂间的协同效应会产生较单一 诱变更好的效果。
在离子注入过程中，生物分子将会吸收能量，经历复 杂的物理和化学的变化，产生各类自由基。这些活性自由 基，不但可以引起正常生物分子的损伤，致使细胞中的染 色体畸变，DNA链断裂，也可使质粒DNA形成断裂点。产 生染色体重复、易位、倒位，碱基缺失等多种生物学效应。 离子注入技术与目前其它的诱变源相比，具有LET值高，射 程可控，集束性好，能量沉积和质量沉积区域集中等优点， 在不同的作物及菌种的诱变育种中发挥出巨大的作用.
基因标签法
当一段特定的DNA序列插入到基因组目的因的内部或 其附近位点时，便会诱发该基因发生突变，形成突变体。
根据这一作用原理，用已知的插入DNA分子做探针， 发展出来一种分离未知基因的方法。由于插入的DNA序列， 相当于人为的给目的基因加上一段已知的序列标签，因此称 DNA插入突变分离基因的技术为DNA标签法，亦叫基因标 签法。
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离子注入技术
离子注入技术最早用于农作物育种，近几年来因其在 微生物诱变育种中的高效性，得到了越来越广泛的应用。 离子注入生物体内会在动量、能量和
质量的三重作用下产生不同的生物学效应。因此，与 生物体的相互作用存在峰值，在峰值范围内，注入离子与 生物体的相互作用是局部的、双重的和不易修复的。
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电离辐射
电离辐射是指一切能引起物质产生电离作用的辐射总 称。生物学上常用γ射线进行辐射，此外还有Χ射线、β射 线和快中子等。这些射线可直接将能量传递给生物分子， 使细胞中有序排列的生物大分子处于激发和电离状态。引 起遗传物质的变化主要是碱基的氧化作用，糖苷键及DNA 单链键或双链键断裂。伴随着生物大分子化学键的断裂， 有机体内产生大量的离子和自由基。这些自由基与细胞中 的溶质分子相互作用，诱发酶的释放，导致代谢的方向性 和协调性紊乱，促使开始的生物化学损伤进一步发展，引 起了机体内环境的进一步变化。
尽管不断有新型的诱变技术产生，紫外诱变技术因其操作 简单，效果显著，在很多领域仍然发挥重要作用。
物 理 方 法
1.紫外 2.电离辐射 3.离子注入 4.微波
5.其它
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紫外
紫外线是诱发微生物突变的一种非常有用的工具。DNA和 RNA的嘌呤和嘧啶有很强的紫外吸收能力，最大的吸收峰在 260 nm 。
因此，波长在200-300 nm的紫外光才有诱变作用。紫外 线可引起生物体形成嘧啶(主要是胸腺嘧啶)二聚体、嘧啶水 合物和引起DNA分子交联。
以一株绿色木霉F1为出发菌株，经紫外线、亚硝基胍、 硫酸二乙酯三种因素依次处理，以每一轮诱变处理筛选到 的酶活最高的突变株作为下一轮诱变的出发菌株。
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基因工程方法:
1.DNA标签法 2.基于载体构建的突变体 3.基因打靶技术 4.RNA干扰技术
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化学
诱变
方式
0.化学诱变 1.烷化剂
2.其它诱变剂及复合诱变
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化学诱变剂是一类能和DNA起作用， 进而改变DNA的空间结构或者结构组成， 导致DNA产生变异的物质。按其诱变机 制可分为碱基类似物诱变剂、直接诱变 DNA结构的诱变剂和诱发移码突变的诱 变剂3类。利用化学诱变剂进行的化学诱 变具有使用方便，特异性较强和诱变后 代较易稳定遗传等特点。
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微波辐射
微波辐射属于一种非电离性高频电磁波，在300 MHz 一300 GHz范围内有较强的生物效应，主要对生物体产生 热效应和非热效应。在微波作用下，生物体会产生局部温 度上升(热效应)以及非温度关联的各生理生化反应(非热效 应)，进而产生一系列突变效应。
除上述的方法之外，还有利用其它物理因素进行的诱变，如利用激光、太 空条件等，或多种方法联合使用构建生物突变体。
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来源：生物技术通报 2010年第2期 构建微生物突变体的方法综述 张念章 逯忠新
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定义1：
一般指带有已经发生突 变的基因的细胞、病毒或细菌， 有时也指发生突变的基因。
定义2：
携带突变基因的细 胞或个体。
突 变 体
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该方法已培育出许多具有生产 利用价值的微生物新品种，给生产带来 了巨大的经济效益和社会效益.
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烷化剂
烷化剂又称生物烷化剂，是一类能形成碳正离子或其它亲 电性基团的化合物。常用的烷化剂包括亚硝基胍(NTG)、甲基磺 酸乙酯(EMS)、硫酸二乙醋(DMS)和硫酸二乙酯(DES)。其中Ems 是目前公认的效果最好和应用最广的一种化学诱变剂。其诱变 作用主要发生在鸟嘌呤N·7位置上，烷基取代H离子后，使之 成为一个带正电的季铵基团，从而发生两种遗传效应：一是烷 化的鸟嘌呤与胸腺嘧啶配对，代替胞嘧啶，发生转换突变(即G： C变为A：T)；二是由于鸟嘌呤的N-7烷基活化，糖苷键断裂造 成脱嘌呤，鸟嘌呤的位置成了一个空位，复制时其互补位置上 的碱基就不受严格的配对限制，4种碱基都有机会进入，从而造 成置换现象。此外，EMS还可以造成糖．磷酸骨架断裂，引起 染色体缺失。与其它诱变剂相比，EMS诱变后产生的突变频率 高，且多为显性突变体，易于突变体的筛选。
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其它诱变剂及复合诱变
除了烷化剂外，平阳霉素(PYM)、秋水仙素、5-溴尿 嘧啶(5-BU)、2-氨基嘌呤(AP)等也常用于诱变工作。
将两种或多种诱变剂的联合应用于突变育种工作中 就形成了复合诱变。该诱变过程包括：两种或多种诱变剂 的先后使用；两种或多种诱变剂的同时使用；同一种诱变 剂的交替重复作用等。普遍认为，如果将两种或两种以上 诱变剂合理搭配使用，诱变剂间的协同效应会产生较单一 诱变更好的效果。
在离子注入过程中，生物分子将会吸收能量，经历复 杂的物理和化学的变化，产生各类自由基。这些活性自由 基，不但可以引起正常生物分子的损伤，致使细胞中的染 色体畸变，DNA链断裂，也可使质粒DNA形成断裂点。产 生染色体重复、易位、倒位，碱基缺失等多种生物学效应。 离子注入技术与目前其它的诱变源相比，具有LET值高，射 程可控，集束性好，能量沉积和质量沉积区域集中等优点， 在不同的作物及菌种的诱变育种中发挥出巨大的作用.
基因标签法
当一段特定的DNA序列插入到基因组目的因的内部或 其附近位点时，便会诱发该基因发生突变，形成突变体。
根据这一作用原理，用已知的插入DNA分子做探针， 发展出来一种分离未知基因的方法。由于插入的DNA序列， 相当于人为的给目的基因加上一段已知的序列标签，因此称 DNA插入突变分离基因的技术为DNA标签法，亦叫基因标 签法。
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离子注入技术
离子注入技术最早用于农作物育种，近几年来因其在 微生物诱变育种中的高效性，得到了越来越广泛的应用。 离子注入生物体内会在动量、能量和
质量的三重作用下产生不同的生物学效应。因此，与 生物体的相互作用存在峰值，在峰值范围内，注入离子与 生物体的相互作用是局部的、双重的和不易修复的。
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电离辐射
电离辐射是指一切能引起物质产生电离作用的辐射总 称。生物学上常用γ射线进行辐射，此外还有Χ射线、β射 线和快中子等。这些射线可直接将能量传递给生物分子， 使细胞中有序排列的生物大分子处于激发和电离状态。引 起遗传物质的变化主要是碱基的氧化作用，糖苷键及DNA 单链键或双链键断裂。伴随着生物大分子化学键的断裂， 有机体内产生大量的离子和自由基。这些自由基与细胞中 的溶质分子相互作用，诱发酶的释放，导致代谢的方向性 和协调性紊乱，促使开始的生物化学损伤进一步发展，引 起了机体内环境的进一步变化。