免疫耐受

2. 克隆无能及不活化
概念：克隆无能指成熟的自身反应性T/B细胞遇外周
特异性抗原时，表现为不活化状态。
转归：克隆无能的细胞部分凋亡，部分可长期存活，
在IL-2提供下，进行克隆扩增，导致自身免疫病。
克隆无能的原因
1）不能形成MHC-抗原肽复合物 某些组织细胞不表达MHC-Ⅱ类分子。 2）缺乏第二活化信号 不成熟DC( iDC )不充分表达B7和MHC -Ⅱ类 分子，不产生 IL-12； 组织细胞表达自身抗原，但不表达B7、CD40等； (炎症时可表达，感染可诱发自身免疫病) 外周组织特异抗原浓度适宜时,虽能活化自身应答B 细胞,但Th细胞不活化,不能提供B细胞扩增及分化所需 的细胞因子,B细胞呈免疫无能状态。

建立免疫耐受
治疗移植排斥反应和自身免疫病等
1.口服免疫原
口服免疫原，可致局部肠道粘膜特异免疫， 而抑制全身免疫应答。 应用： 口服 自身碱性髓鞘蛋白(MBP)→缓解EAE 口服 热休克蛋白HSP65→诱导Treg细胞→ 治疗类风湿性关节炎(RA)
5. 信号转导障碍与免疫耐受
在T及B细胞活化过程中，活化信号经信号转 导途径最终活化转导因子，启动相应基因，使细 胞增殖并分化，表达效应功能。此过程亦受负信 号分子反馈调控。如果这些负信号分子表达不足 或缺陷，会破坏免疫耐受，导致自身免疫疾病。 如：Lyn、CD5、PTEN(一种磷酸酶)、CTLA-4和 PD-1等负调控分子缺陷，均易致自身免疫病。
3. 免疫调节细胞的作用
CD4+ CD25+Foxp3+ Treg等细胞具有负调节作用， 经分泌IL-10 及TGF-β 等细胞因子，抑制iDC分化 为成熟DC，促进iDC诱导免疫耐受，抑制Th1及CD8+ T细胞功能。
与临床的关系： 具有抑制作用的T细胞经产生 TGF-β ，抑制DC、 Th / CTL功能。如瘤型麻风的患者，Treg细胞呈优 势活化，抑制Th1细胞应答，使得患者细胞免疫↓， Mφ 、CTL活性↓，不能杀菌及抑菌，患者虽有抗体， 但对细菌无抑制作用，疾病进展迅速。
② 人工建立对MBP特异识别的TCR转基因小鼠
体内有大量MBP特异性T细胞，但不发生EAE 。
因外周组织表达MBP量低，只有中枢神经组织MBP浓 度高，而该处是免疫隔离部位，初始T细胞不能进入。
③ MBP+弗氏完全佐剂注入小鼠，则诱发EAE
因外周MBP抗原浓度增高，外周APC被活化，转基 因MBP-TCR+T细胞活化，发生免疫应答，其表面所表 达的粘附分子 （ LFA-1,VLA-4）,使其穿越血脑屏障， 进入中枢神经组织 ，与表达MBP的细胞结合，致EAE。
免疫耐受
Immunological tolerance
第十五章
免疫耐受
免疫耐受（immunological tolerance ）： 在抗原刺激下，T与B细胞不能被激活产生 特异免疫效应细胞及（或）特异性抗体， 从而不能执行正免疫应答的现象。 免疫应答与免疫耐受的平衡
Ag1 → 机 → T、B细胞活化，I R ( + ) 免疫效应物→ 排斥Ag1(免疫原)
但若以适宜剂量自身抗原刺激免疫忽视 细胞，仍可致免疫正应答。 免疫忽视动物模型：
小鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE) ，是由 对自身碱性髓鞘蛋白(MBP)的多肽特异应答的 Th1 细胞被活化所致的 中枢神经组织的迟发性超敏反 应（DTH）。 ① 碱性髓鞘蛋白MBP为神经组织特异抗原 属隐蔽抗原，正常小鼠对其处于耐受状态 。
CD 3－4－8－
CD 3+ 4+ 8+ γαβδ
T 细 胞 的 中 枢 免 疫 耐 受
γ: δCD3+ CD4－8－
+
CD3+pTα: β 4+8+
&#%
DC
CD3+α: β 4+8+
+
<5%
DC CD4－ 8+ CD4+CD25+Foxp3+ CD4+ 8－
髓 质 区
CD4－ 8+
CD4+ 8－
输出胸腺
二、外周耐受
1. 克隆清除及免疫忽视
克隆清除（deletion）：T细胞克隆的TCR对 组织特异自身抗原具有高亲和力，且这种组织特 异自身抗原浓度高者，则经抗原提呈细胞（APC） 提呈，致此类T细胞克隆清除。
免疫忽视（immunological ignorance）：T 细胞克隆的TCR对组织特异自身抗原的亲和力低， 或这类自身抗原浓度很低，经APC提呈，不足以 活化相应的初始T细胞，这种自身应答T细胞克隆 与相应组织特异抗原并存，在正常情况下，不引 起自身免疫病的发生。
高带耐受：抗原剂量太高，则诱导应答细 胞凋亡，或可能诱导调节性T细胞活化，抑制免 疫应答，呈现为特异性负应答状态，致T/B细胞 耐受。
低剂量→ 低带耐受 → 仅使T细胞耐受。 高剂量 → 高带耐受 → T、B细胞均耐受。 TI-Ag 需高剂量才能诱导耐受； TD-Ag低剂量和高剂量均可诱导耐受。 T细胞耐受易于B细胞耐受。
4. 细胞因子的作用
除上述具有抑制作用的T细胞分泌的抑制性细胞因 子外，细胞存活及生长因子的水平，亦涉及免疫耐受。 外周免疫器官中初始T及B细胞，在未遇外来抗原前，因 其对自身抗原的低应答，T及B细胞分别在 IL-7、 B细胞 活化因子（B-cell-activating-factor,BAFF）刺激下存活 与有限增殖；但如BAFF分泌过多，致B细胞增殖超限， 易致自身免疫病如SLE、类风湿性关节炎等。

后天接触抗原导致的免疫耐受
（一）抗原因素与免疫耐受
1.抗原剂量 1964年Mitchison的实验, BSA剂量在
10-8M ------10 -7~10 - 6 M------ 10 -5 M
耐受 有应答,抗体生成 耐受
低带耐受：TDAg量过低不足以诱导有效应 答而引起T细胞耐受。APC的MHC-Ag肽须达10-100 以上才能有效提呈并激活T细胞(单一的TCR结合 产生的活化信号不足以活化T细胞)。
一、中枢耐受
概念：中枢免疫器官(胸腺和骨髓)内，发育中尚未 成熟的T、B淋巴细胞，识别自身抗原的细胞克隆 被清除而形成的自身耐受。 1.胸腺内发育中的T细胞 阳性选择和阴性选择 识别自身抗原的未成熟T细胞凋亡。 2.骨髓内发育中的B细胞(表达mIgM的未成熟B细 胞) 阴性选择 识别自身抗原的未成熟B细胞克
新
生 期 成 年 期 移 植
CBA
A系
A系CBA
A系CBA
新
生 期
CBA
CBA
Balb/c
CBA
成 年 期 移 植
Balb/c
皮 肤
皮 肤
天然特异免疫耐受的形成
结论:
处于早期发育阶段的免疫细胞接触抗原 (自
身或同种异型)可诱导免疫耐受。
机制：
胚胎期免疫系统尚未发育成熟，抗原异物 的刺激导致抗原特异性免疫细胞克隆被排除， 从而产生免疫耐受。 此期所形成的耐受具有特异性、持久性。
血液循环
B细胞耐受机制：
1.单体抗原不能使BCR交联，而致B无能；
2.能使B细胞活化的抗原浓度，T细胞已耐受, 而无Th和细胞因子辅助，B细胞不能活化； 3.B细胞也有免疫忽视，感染时旁路活化的Th 细胞可致自身免疫。
4.在生发中心，B细胞对外来抗原应答发生高 频突变产生的自身应答克隆，与大量可溶性自 身抗原相遇，导致B细胞凋亡消除。
第三节 免疫耐受与临床医学
免疫耐受与临床疾病的发生、发展及转 归密切相关。生理性的免疫耐受对自身组织 抗原不应答，不发生自身免疫疾病；病理性 的免疫耐受，对感染的病原体或肿瘤细胞抗 原不产生特异免疫应答，不能执行免疫防卫 功能，则疾病发展及迁徙。为临床治疗目的， 打破或建立免疫耐受，多处于临床前实验阶 段。
2.抗原类型及剂型
抗原单体分子易形成免疫耐受，其原因是 由于蛋白单体不易被巨噬细胞吞噬处理，不能 被APC提呈,T细胞不能被活化；可溶性抗原， 不易诱发免疫应答；抗原联合佐剂使用或蛋白 聚合体，可诱导正免疫应答。 3.抗原免疫途径 静脉注射及口服易致全身耐受；经皮内或 皮下免疫，激活特异T细胞的免疫应答。 4.抗原持续存在
免疫忽视的机制：
1）组织特异性抗原浓度低，不足以活化初始T
2）免疫隔离组织，初始T细胞不能进入
免疫忽视的打破：
感染：病原体与自身抗原的分子模拟作用； (异嗜性抗原) 外伤：组织特异性抗原暴露增多； 相继APC活化、粘附分子表达增多，活化 初始T，效应TH1穿过隔离屏障致自身免疫病。 随感染的控制及消失，免疫忽视又可 恢复。
HGG 耐受原 （HGG）
不同时间
耐受T 正常B ＋ 细胞 细胞
检测应答 （抗HGG） HGG
耐受B 正常T 细胞 ＋ 细胞
检测应答 （抗HGG）
X射线照射受者
T细胞和B细胞耐受特点比较
T 细 胞 抗原 诱导期 维持时间 耐受形成 TDAg 剂量高 / 低 短 1 —2 天 长，数月至数年 易 B 细 胞 TI Ag 剂量高 长 数十天 短，数周 难
隆消除或处于无反应性(anergy)状态。
一、中枢耐受
• T及B细胞发育阶段经受的克隆消除，显 著减少出生后自身免疫病的发生； • 诱导胸腺及骨髓中克隆消除的自身抗原 包括：体内各组织细胞普遍存在的自身 抗原（ubiquitous self-antigen）与组织 特异抗原（tissue specific antigen）。
体
Ag2 → → T、B细胞不活化，I R ( - ) 耐受 无效应物 → 不排斥Ag2(耐受原)
第一节 免疫耐受的形成及表现 第二节 免疫耐受机制 第三节 免疫耐受与临床医学
第一节 免疫耐受的形成及表现
胚胎期及新生期接触抗原所致的免疫耐受 1.胚胎期嵌合体形成中的耐受 owen于1945年 首先报道了胚胎期接触同种异型抗原所致免疫耐受 的现象。这种耐受具有抗原特异性。 2.在胚胎期人工诱导的免疫耐受 owen和 medawar等设想，可能是在胚胎期接触同种异型抗 原诱导而诱导了免疫耐受的产生。
正常发育的个体，主要靠外周耐受机制及免疫调 节维持对自身抗原的耐受；否则，致自身免疫病。
交感性眼炎
一只眼外伤时，晶体蛋白 一只眼外伤时，晶体蛋白 等眼内蛋白成分外溢，剌激 等眼内蛋白成分外溢，剌激 自身应答性 T细胞活化，产 自身应答性 T细胞活化，产 生效应性 T细胞，其粘附分 生效应性 子(VCAM 等)T ↑细胞，其粘附分 、血管内皮细 子(VCAM等)↑、血管内皮细 胞粘附分子受体表达 ↑，活 胞粘附分子受体表达↑活化 化的效应细胞进入健康眼， 的效应细胞进入健康眼。 而致免疫损害。
5.抗原表位特点
如：鸡卵溶菌酶(HEL)蛋白→免疫H-2b小鼠 →形成耐受；
去除HEL的N端三个氨基酸（即Treg 的表位）→免疫
H-2b小鼠 →耐受解除→Th细胞活化 →辅助B细胞产生Ab。
将能诱导Treg细胞活化的抗原表位，称为耐受原表位
（tolerogenic epitope)。
6.抗原变异与免疫耐受 病原体发生抗原变异（如HIV、HCV），不仅 使原有免疫力失效，亦会因变异而产生模拟抗原， 这类抗原能与特异应答的T及B细胞表达的受体结 合，却不能产生使细胞活化的第一信号，使细胞 处于免疫耐受状态。
第二节
免疫耐受机制
免疫耐受按其形成时期的不同，分为中枢 耐受和外周耐受。 中枢耐受（central tolerance)是指在胚 胎期及出生后T及B细胞发育的过程中，遇自身 抗原所形成的耐受。 外周耐受（peripheral tolerance)是指 成熟的T及B细胞遇内源性或外源性抗原，不产 生正免疫应答，而显示免疫耐受。
6. 免疫隔离部位的抗原在生理条件下不致免疫应答
脑及眼前房,胎盘等均为免疫隔离部位。 产生免疫隔离部位的原因： 生理屏障；PD-1的负调控作用；抑制性细胞因子抑 制Th1类细胞功能。
在免疫隔离部位的表达组织特异抗原的细胞，几 乎无机会活化自身抗原应答T细胞克隆，因而这些T 细胞克隆处于免疫忽视状态。
（二）机体方面的因素
年龄： 胚胎期 > 新生期 > 成年期
与免疫系统的发育成熟度有关。
遗传因素： 不同种属
小鼠和大鼠：胚胎期 或 新生期 可致耐；
家兔、有蹄类和灵长类：胚胎期才可诱导耐受。
同一种属不同品系
HGG(0.1mg) C57BL/6小鼠 产生耐受性； HGG(1.0mg) A/J小鼠 产生耐受性； HGG(10mg) BALB/c小鼠 产生耐受性。