烟碱实验方法

烟碱含量测定

一、引言

烟碱,俗称尼古丁,化学名称为1-甲基3-（3-氮杂苯基）氮杂环戊烷,分子式为C10H14N2,是烟草十多种生物碱中最重要的一种成分,而且具有多种用途,是重要的农药、医药工业原料和烟草添加剂。根据“在pH5.0下,甲基橙可与烟碱反应生成有色络合物,该络合物于氯仿中在可见光波长处的吸光度与其浓度成正比”的原理可用分光光度计测定烟草提取液中烟碱含量，其线性相关范围是0～0.2550g/L、线性相关系数为0.9994，此方法准确性好、精密度高、操作简便快捷、仪器价格低廉。

二、材料与方法

2.1 原材料、试剂与仪器设备

2.1.1 待测试样:

烟草提取液,经过烘干、研磨、浸提、离心分离等步骤进行制备。

2.1.2 化学试剂

烟碱标样,氯仿(AR)、0.05mol/L盐酸(AR)、柠檬酸(AR)、磷酸氢二钠(AR)、甲基橙(AR)。柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液(pH5.00),甲基橙饱和溶液均在实验室现场配制。

2.1.3 仪器设备:

分光光度计、磁力搅拌器、精密酸度计、分析天平(感量0.1mg)、1L容量瓶和10ml容量瓶。

2.2 实验方法

2.2.1 烟碱标准贮备液的配制

准确称取0.4280g烟碱标样,用0.05mo1/L盐酸溶液溶解并定容至1000mL,得到0.4250g/L 烟碱标准贮备液。

2.2.2 烟碱标准溶液的制备

取10个10mL容量瓶分别编号为0、1、2、3、4、5、6、7、,分别加入0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL标准贮备液,用0.05mo1/L盐酸溶液定容到刻度,得到10个浓度分别为0.0000、0.0425、0.0850、0.1275、0.1700、0.2125、0.2550g/L的烟碱标准溶液(简称标液,下同)。

2.2.3 测定吸光度的基本操作

取某号标液或试样2mL,加入2mLpH5.00缓冲溶液和2.0ml的甲基橙饱和溶液,摇匀后加入20mL萃取剂,振荡萃取2～3min后静置3～5min;分离出下层萃取液后立即用比色皿取样, 立即(2～5min内)用分光光度计测定420nm波长处的吸光度并绘制标准曲线，求得回归方程。