实验三 对乙酰氨基酚片的含量测定方法学研究
对乙酰氨基酚的鉴定结构确证与含量测定
对乙酰氨基酚的鉴定结构确证与含量测定对乙酰氨基酚的鉴定结构确证与含量测定一、实验目的（1）掌握对乙酰氨基酚的鉴定的方法（2）了解对乙酰氨基酚结构确证的过程（3）运用仪器分析手段对对乙酰氨基酚进行含量测定二、实验原理（1）对乙酰氨基酚（298NO H C ）为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味微苦。
在热水或乙醇中易溶，在丙酮中溶解，在水中微溶。
熔点168-172℃。
对乙酰氨基酚是临床常用的解热镇痛药物，且毒副作用小，较适合儿科患者使用。
已成为全世界应用最广泛的的药物之一，是国际医药市场上头号解热镇痛药。
（2）以一定浓度的对乙酰氨基酚溶液充分水解全部生成对氨基酚溶液，对氨基酚溶液在碱性条件下与亚硝基铁氢化钠试剂作用，生成蓝色配位化合物。
利用721 －分光光度计测定其波长确定最大吸收，并通过分光光度计进行条件优化，依据比尔定律绘制标准曲线。
通过标准曲线法求得对乙酰氨基酚的浓度，从而求得对乙酰氨基酚的含量。
（3)取对乙酰氨基酚溶解于流动相后于200 ~ 400波长范围扫描, 结果在250的波长处有最大吸收, 故选择此波长作为测定波长。
对乙酰氨基酚易溶于热水中, 用温水浴溶解15分钟以上时对乙酰氨基酚已全部溶解。
以甲醇- 水- 磷酸( 22 - 78- 0. 1) 为流动相, 能使对乙酰氨基酚得到很好的分离。
采用外标法，用对乙酰氨基酚标准溶液作为对照品，求得样品对乙酰氨基酚的浓度，从而求得对乙酰氨基酚的含量。
三、实验过程（1）鉴定①本品的水溶液加三氯化铁试液，即显蓝紫色。
②取本品约0.1g ，加稀盐酸5ml ，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5ml ，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml 稀释后，加碱性β-萘酚试液2ml ，振摇，即显红色。
③本品的红外吸收图谱应于对照的光谱一致。
（2）结构确证①红外光谱图②核磁共振氢谱（3）含量测定①紫外分光光度法3.1.1溶液的制备Na2CO3溶液的制备准确称取Na2CO3 5.3035 g，置于1000mL 容量瓶中，加纯水标定至刻度，摇匀。
对乙酰氨基酚片的测定
对乙酰氨基酚片的测定本品含对乙酰氨基酚（C8H9NO2）应为标示量的95.0%～105.0%。
性状：本品为白色片、薄膜衣或明胶包衣片，除去包衣后显白色。
鉴别：仪器及试液一般实验仪器和红外分光光度仪三氯化铁试液：取三氯化铁9g ，加水使溶解成100ml，即得。
稀盐酸：取盐酸234ml，加水稀释至1000ml，即得。
本液含HCL应为9.5%～10.5%。
亚硝酸钠试液：取亚硝酸钠1g，加水使溶解成100ml，即得。
碱性β-奈酚试液：取β-奈酚0.25g，加氢氧化钠溶液(1→10)10ml使溶解，即得本液应临用新制。
分析步骤取本品10片于研钵中研细精密称量（约相当于对乙酰基酚0.5g）粉末于研钵中用25ml量筒量取乙醇20ml分次研磨使对乙酰氨基酚溶解。
滤过，合并滤液，蒸干残渣备用。
（1）取上述残渣少许于试管中加水2滴，三氯化铁试液1滴，即显蓝紫色。
（2）取上述残渣约0.1g置试管中用5ml移液管加稀盐酸5ml，置水浴中加热40分钟，放冷。
取0.5ml置小试管中滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用移液管加水3ml稀释后，加碱性β-奈酚试液2ml，振摇即显红色。
取本品细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚100mg），加丙酮10ml，研磨溶解，滤过，滤液水浴蒸干，残渣经减压干燥，用红外分光光度仪检测，采用压片法，取残渣约1～1.5mg，置玛瑙研钵中，加入干燥的溴化钾或氯化钾细粉月200～300mg（与供试品的比约为200:1）作为分散剂，充分研磨混匀，置于直径为13mm的药片模具中，使铺展均匀，抽真空约2min，加至（0.8×106）kPa（约8～10T/㎝2），保持压力2min，撤去压力并放弃后取出制成的供试片，目视检测，片子应呈透明状，其中样品分布应均匀，并无明显的颗粒状样品。
亦可采用其他直径的压膜制片，样品与分散剂的用量需相应调整以制得浓度适合的片子测定。
溶出度的测定1、掌握片剂中溶出度检查的操作方法。
对乙酰氨基酚片质量分析(反应式)
吸收光谱特性
苯环共轭系统
鉴别和含测均基于上述理化性质
三、仪器与试药
仪器 紫外分光光度计 试药 稀盐酸 氢氧化钠 对乙酰氨基酚片 亚硝酸钠溶液 碱性β-奈酚试液
小烧杯
量筒
容量瓶
研钵
四、实验步骤
药物鉴别项目
性状鉴别 一般鉴别 化学反应组合鉴别
★
专属性鉴别
四、实验步骤
对乙酰氨基酚片鉴别
水解反应 产生芳伯 胺
HO NHCOCH3
+
HCl
+
H2O
HO
NH2 · HCl + CH3COOH
芳伯胺重氮化
HO NH2 · HCl + HNO2 HO N2Cl + 2H2O
偶合反应
N N HO N2Cl
+
OH OH
OH
+ NaOH
红色偶氮化合物
二、实验原理
水解
酰胺
特殊基团
酚羟基、芳伯氨基
置 100ml 量瓶
水稀释至刻度
摇匀
紫外分光光度法（275 nm）
按C8H9NO2 的吸收 系数 为715计算
四、实验步骤
含量测定注意事项
含量测定先定容后过滤，过滤时，所有仪器均需 干燥。弃去初滤液，量取续滤液进行分析，以保持
浓度的一致，从而保证结果的准确。
吸光度度数3次，取平均值计算含量。
四、实验步骤
含量测定注意事项
本实验用吸收系数法测定含量，其优点是操作 简便、快捷，不必用对照品。但该法受仪器的精度、 操作和环境因素等影响较大，因此测定前必须对紫
外-可见分光光度计进行校正与检定，波长、吸光
新-实验六 紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚片的含量的方法学研究
实验六紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚片的含量的方法学研究一、目的要求1.掌握确证分析方法的效能指标内容和要求。
2.熟悉建立分析方法的基本思路。
3.掌握紫外分光光度法的原理及操作。
二、实验原理对乙酰氨基酚结构中含有苯环共轭系统，在0.4%氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其吸收系数为E1cm715。
C8H9NO2151.16三、仪器与试剂对乙酰氨基酚片，对乙酰氨基酚对照品，氢氧化钠，容量瓶，量筒，紫外分光光度计，研钵。
四、实验步骤1.线性与浓度范围取对乙酰胺基酚对照品约40mg，精密称定，置250mL量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50mL溶解后，加水稀释至刻度，摇匀。
分别精密量取2，4，6，8，10，12mL，置100mL量瓶中，加入0.4%氢氧化钠溶液10mL，加水稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm的波长处测定吸收度。
将浓度C对吸收度A回归，得线性回归方程：A=a+bC(r= ,n=6)。
线性浓度范围0.0032～0.0192mg/mL.2.供试品测定法取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg），置250ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50ml及水50ml，振摇15分钟，加水至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm的波长处测定吸收度，1%E1按C8H9NO2的吸收系数（cm）为715计算，即得。
1%3.回收率试验取本品10片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg），共6份，置250ml量瓶中，按1：1比例，分别向其中加入对乙酰氨基酚对照品，其余照“供试品测定法”项下的方法操作，按标准曲线法或百分吸收系数法计算回收率。
4.精密度试验照“供试品测定”项下的方法操作，计算片剂含量相当于标示量的百分数，6份测定结果的相对标准偏差（RSD）即为精密度试验结果。
对乙酰氨基酚片的含量测定
验证性试验实验十七 对乙酰氨基酚片的含量测定一、目的要求1.掌握对乙酰氨基酚片的含量测定的原理。
2.掌握紫外可见分光光度法测定药物含量的方法及计算。
二、仪器与试药1.仪器Mettler AL204电子天平 752型紫外可见分光光度仪刻度移液管 规格：5mL 、10mL 定量滤纸（直径10cm ）容量瓶 规格：100mL 500mL 研钵HHS 型电热恒温水浴锅2.试药对乙酰氨基酚片 规格0.3g 氢氧化钠 三氯化铁试液 蒸馏水三、实验原理利用对乙酰氨基酚结构中有共轭结构，在紫外区有吸收，最大吸收波长为257nm ，测定其最大吸收波长处的吸收度即可计算其含量。
四、实验内容本品含对乙酰氨基酚（C 8H 9NO 2）应为标示量的95.0%～105.0%。
【鉴别】本品的水溶液加三氯化铁试液，即显蓝紫色。
【含量测定】取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg ），置250mL 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50mL 与水50mL ，振摇15分钟，加水至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL,置100mL 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液，加水至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在257nm 的波长处测定吸光度，按C 8H 9NO 2的吸收系数（%11cm E ）为715计算，即得。
计算：对乙酰氨基酚片标示量%＝A ：供试品在257nm 的波长处测得的吸收度；D ：供试品的稀释倍数； %11cmE :吸收系数; W ：对乙酰氨基酚片片的平均片重； W ：称取对乙酰氨基酚片粉的量。
五、注意事项1.移液管、容量瓶的使用方法。
2.振摇充分，使样品溶解完全。
%100100D 1%1⨯⨯⨯⨯⨯⨯标示量W E W A cm3.紫外分光光度法的操作。
六、思考题1. 对乙酰氨基酚片还有什么测定方法，试举两例？2.常用各种容量仪器在使用时应注意哪些问题？七、参考文献《中国药典》2010年版二部，207，化学工业出版社。
对乙酰氨基酚含量测定
2
二、参比溶液的配制
二、参比溶液的配制
取10ml0.4%氢氧化钠溶液于100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀 即得 对乙酰氨基酚分子中具有共轭双键结构的苯环，在0.4%氢氧化钠溶液中，于257nm处有紫 外光的最大吸收 因此，可用紫外-可见分光光度法测定对乙酰氨基酚的含量 【含量测定】照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定 供试品溶液 取本品约40mg，精密称定，置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后 ，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，用 水稀释至刻度，摇匀 测定法 取供试品溶液，在257nm的波长处测定吸光度，按C8H9NO2的吸收系数()为715计算
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汇报结束
不妥之处敬请批评指正
利用已知浓度的对乙酰氨基酚的标准溶液制备出一系列 含量不同的溶液，测定其在243 nm处的吸光度，并据此 绘制出吸光度与浓度的直线关系图
根据未知浓度对乙酰氨基酚所测得的吸光度，可以在直 线关系图上找到相应的浓度，从而计算出未知样品中对 乙酰氨基酚的含量
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一、供试品溶液的制备
一、供试品溶液的制备
取对乙酰氨基酚约40mg，精密称定，置250ml量瓶中， 加0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后，用水稀释至刻度， 摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化 钠溶液10ml，用水稀释0-xx-xx
2
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目录
CONTENTS
1 一、供试品溶液的制备 2 二、参比溶液的配制
对乙酰氨基酚含量测定
实验目的
对乙酰氨基酚含量测定
1. 掌握对乙酰氨基酚 的含量测定的原理
对乙酰氨基酚含量测定
2. 掌握紫外可见分光光度法测定药物含 量的方法及计算
实验三 复方对乙酰氨基酚片的含量测定
实验三 复方对乙酰氨基酚片的含量测定一、目的要求1、掌握复方片剂中各成分含量测定的基本原理和操作方法。
2、掌握复方片剂的分析特点。
二、基本原理复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主成分。
各成分之间性质差异大。
乙酰水杨酸为芳酸类药物，具酸性，K a ＝3.27×10-4，可用酸量法测定；对乙酰氨基酚为芳酰胺类药物，具酰胺基，呈中性，但具潜在芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，K b ＝0.7×10-14，不能采用一般生物碱的含量测定方法，但可将其与碘发生定量沉淀以后，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定从而求得咖啡因的含量。
反应式表示如下：1、乙酰水杨酸的测定原理 COOH O C OCH 3+NaOH COONa O C O CH 3+H 2O等当点时，由于生成物水杨酸钠的水解，溶液呈微碱性，所以选用碱性区域变色的指示剂--酚酞。
2、对乙酰氨基酚的测定原理3、咖啡因的测定原理 N NO O H 3C3N N ＋2I+KI+H 2SO 4N N O O H 3C 3N CH 3N HI I 4+KHSO 4CH 3I 2(剩余)+2Na 2S 2O 32NaI+Na 2S 4O 6三、实验方法取本品20片，精密称定，研细备用。
（一）乙酰水杨酸的含量测定药典规定每片检品中含乙酰水杨酸应为0.219 g ～0.242 g 。
精密称取上述细粉适量（约相当于乙酰水杨酸0.4g ），置分液漏斗中，加水15ml ，摇匀，用氯仿振摇提取4次（20 ml ，10 ml ，10 ml ，10ml ），提取氯仿液用同一分水10ml 洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml 溶解后，加酚酞指示液3滴，用0.1mol/L 氢氧化钠液滴定，即得。
每1ml 0.1mol/L 氢氧化钠液相当于18.02mg 的C 9H 8O 4。
实验三-复方对乙酰氨基酚片的含量测定
实验三 复方对乙酰氨基酚片的含量测定一、目的要求1、掌握复方片剂中各成分含量测定的基本原理和操作方法。
2、掌握复方片剂的分析特点。
二、基本原理复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主成分。
各成分之间性质差异大。
乙酰水杨酸为芳酸类药物，具酸性，K a ＝3.27×10-4，可用酸量法测定；对乙酰氨基酚为芳酰胺类药物，具酰胺基，呈中性，但具潜在芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，K b ＝0.7×10-14，不能采用一般生物碱的含量测定方法，但可将其与碘发生定量沉淀以后，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定从而求得咖啡因的含量。
反应式表示如下：1、乙酰水杨酸的测定原理 COOH O C OCH 3+NaOH COONa O C O CH 3+H 2O等当点时，由于生成物水杨酸钠的水解，溶液呈微碱性，所以选用碱性区域变色的指示剂--酚酞。
2、对乙酰氨基酚的测定原理3、咖啡因的测定原理NNOOH3CCH3NN＋2I+KI+H2SO4NNOOH3CCH3NCH3NHI I4+KHSO4CH3I2(剩余)+2Na2S2O32NaI+Na2S4O6三、实验方法取本品20片，精密称定，研细备用。
（一）乙酰水杨酸的含量测定药典规定每片检品中含乙酰水杨酸应为0.219 g～0.242 g。
精密称取上述细粉适量（约相当于乙酰水杨酸0.4g），置分液漏斗中，加水15ml，摇匀，用氯仿振摇提取4次（20 ml，10 ml，10 ml，10ml），提取氯仿液用同一分水10ml洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用0.1mol/L氢氧化钠液滴定，即得。
每1ml 0.1mol/L氢氧化钠液相当于18.02mg的C9H8O4。
按下式计算每片含乙酰水杨酸的克数平均片重称样量片＝WT/⨯⋅⋅WfVg其中：T－为滴定度；V－消耗滴定液体积；f-为滴定液浓度校正因子（二）对乙酰氨基酚的含量测定药典规定每片检品中含对乙酰氨基酚应为0.120 g ～0.132 g 。
基于HPLC法的对乙酰氨基酚片中有关物质含量的测定
基于HPLC法的对乙酰氨基酚片中有关物质含量的测定发表时间：2020-10-14T15:33:10.580Z 来源：《科学与技术》2020年第17期作者：杨世娟[导读] 本文采用高效液相色谱法（HPLC）测定了对乙酰氨基酚片中有关物质的含量。
结果表明杨世娟连云港康乐药业有限公司，江苏连云港 222100摘要：本文采用高效液相色谱法（HPLC）测定了对乙酰氨基酚片中有关物质的含量。
结果表明，采用HPLC法测定对乙酰氨基酚片中的主要药物:对乙酰氨基酚、6种已知杂质（对氯苯乙酰胺、对氨基酚和a、N-苯乙酰胺、对丙乙酰胺、对硝基酚）以及3种特殊辅料（羟苯乙酯、羟苯甲酯和杂质），羟苯丙酯和1种未知杂质的分离度均大于1.5。
高效液相色谱法准确度高，专属性强，可用于对乙酰氨基酚片中有关物质的测定。
关键词：HPLC法；对乙酰氨基酚片；物质；含量0.引言对乙酰氨基酚片是乙酰苯胺类解热镇痛药，主要用于缓解轻中度疼痛，可以将膝盖疼痛减轻到最小程度。
是治疗轻度骨关节炎的首选短期镇痛药。
对乙酰氨基酚片作为常用的解热镇痛药，在治疗剂量范围内是安全可靠的。
但剂量过大，可能导致急性肝功能衰竭，也可能引起血压升高、哮喘、肝毒性、胃肠道反应等不良反应。
因此，应严格遵循对乙酰氨基酚片的使用原则。
《国家药品安全十二五规划》中明确指出对乙酰氨基酚片是一种一致性评价品种。
参考处方资料，原研药由对乙酰氨基酚、预胶化淀粉、二氧化硅、海藻酸、聚维酮K30、羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯组成。
这是一种有标记的胶囊片剂。
产品中可能存在的主要杂质是对氨基苯酚、对氯苯乙酰胺和杂质a、b、d和f。
这些杂质中大多数含有潜在的遗传毒性。
然而，除了对氨基苯酚外，2015年版《中国药典公约》（第二部分）并未控制上述其他杂质。
此外，为了避免生产经营中频繁清洗设备造成的污染，在处方中加入了羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯，所有这些都可以在分析中检测到。
以上三种成分作为制剂的具体辅料，在计算杂质含量时应扣除。
实验三 复方对乙酰氨基酚片的含量测定
实验三复方对乙酰氨基酚片的含量测定一、目的要求1、掌握复方片剂中各成分含量测定的基本原理和操作方法。
2、掌握复方片剂的分析特点。
二、基本原理复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主成分。
各成分之间性质差异大。
乙酰水杨酸为芳酸类药物，具酸性，K a ＝3.27×10-4，可用酸量法测定；对乙酰氨基酚为芳酰胺类药物，具酰胺基，呈中性，但具潜在芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，K b ＝0.7×10-14，不能采用一般生物碱的含量测定方法，但可将其与碘发生定量沉淀以后，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定从而求得咖啡因的含量。
反应式表示如下： 1、乙酰水杨酸的测定原理COOHO COCH 3+NaOHCOONaO COCH 3+H 2O等当点时，由于生成物水杨酸钠的水解，溶液呈微碱性，所以选用碱性区域变色的指示剂--酚酞。
2、对乙酰氨基酚的测定原理3、咖啡因的测定原理NN OO H 3C 3NN＋2I+KI+H 2SO 4NN OO H 3C 3NCH 3NHI I 4+KHSO 4CH 3I 2(剩余)+2Na 2S 2O 32NaI+Na 2S 4O 6三、实验方法取本品20片，精密称定，研细备用。
（一）乙酰水杨酸的含量测定药典规定每片检品中含乙酰水杨酸应为0.219g ～0.242g 。
精密称取上述细粉适量（约相当于乙酰水杨酸0.4g ），置分液漏斗中，加水15ml ，摇匀，用氯仿振摇提取4次（20ml ，10ml ，10ml ，10ml ），提取氯仿液用同一分水10ml 洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml 溶解后，加酚酞指示液3滴，用0.1mol/L 氢氧化钠液滴定，即得。
每1ml0.1mol/L 氢氧化钠液相当于18.02mg 的C 9H 8O 4。
按下式计算每片含乙酰水杨酸的克数平均片重称样量片＝W T /⨯⋅⋅W fV g其中：T －为滴定度；V －消耗滴定液体积；f-为滴定液浓度校正因子（二）对乙酰氨基酚的含量测定药典规定每片检品中含对乙酰氨基酚应为0.120g ～0.132g 。
对乙酰氨基酚片的制备、含量测定与溶出速率测定
取样时间（min）
5
10
20
30
45
60
吸光度A
浓度C（μg/mL）
Q%
0.403
60.14
12.03
0.447
149.0
29.86
0.451
260.1
65.29
0.461
340.6
85.74
0.464
353.8
89.46
0.473
367.8
93.40
（2）溶出曲线
（3）药典规定扑热息痛片30分钟溶出百分量不得少于标示量的80%。
3、溶出度测定操作中应注意哪些问题？
答：（1）对所用的溶出度测定仪，应预先检查其是否运转正常，并检查温度的控制、转速等是否精确、升降桨叶是否灵活等。
（2）桨叶的位置高低对溶出度测定有一定影响，应按规定高度装置，转篮（或桨叶）底部距溶出杯底为25mm。
（3）转换释放介质时要十分小心，切勿将片子倒掉。
（4）做完一次测试后，要将转篮、烧杯等用常水、蒸馏水依次冲洗干净，晾干备用。每测定一次样品，应重复此操作后，方可测另一样品。
3、质量检查与评定
（1）片重差异不得超过±7.5 %。
（2）含量测定
取扑热息痛片10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚40 mg）置250mL容量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50mL及水50mL，振摇15分钟，加水至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5mL、置100mL量瓶，加0.4%氢氧化钠溶液10mL，加水至刻度，摇匀，照分光光度法257 nm测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数为715nm计算。
四、实验步骤
1、片剂处方（制成100片）：
(完整word版)新-实验六--紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚片的含量的方法学研究
实验六 紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚片的含量的方法学研究一、目的要求1. 掌握确证分析方法的效能指标内容和要求。
2. 熟悉建立分析方法的基本思路。
3. 掌握紫外分光光度法的原理及操作。
二、实验原理对乙酰氨基酚结构中含有苯环共轭系统，在0.4%氢氧化钠溶液中，于257nm 波长处有最大吸收，其吸收系数为%11cm E 715。
C 8H 9NO 2三、仪器与试剂对乙酰氨基酚片，对乙酰氨基酚对照品，氢氧化钠，容量瓶，量筒，紫外分光光度计，研钵。
四、实验步骤192mg/mL.2. 供试品测定法 取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg ），置250ml 量瓶中，加0.4 ％氢氧化钠溶液50ml 及水50ml ，振摇15分钟，加水至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml ，置100ml 量瓶中，加0.4 ％氢氧化钠溶液10ml ，加水至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm 的波长处测定吸收度，按C 8H 9NO 2 的吸收系数（%11cm E ）为715 计算，即得。
3. 回收率试验 取本品10片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg ），共6份，置250ml 量瓶中，按1：1比例，分别向其中加入对乙酰氨基酚对照品，其余照“供试品测定法”项下的方法操作，按标准曲线法或百分吸收系数法计算回收率。
4. 精密度试验 照“供试品测定”项下的方法操作，计算片剂含量相当于标示量的百分数，6份测定结果的相对标准偏差（RSD ）即为精密度试验结果。
五、注意事项1. 为减少误差，各样品应尽量平行操作。
2. 比色皿每次用完后应清洗干净。
六、思考题1. 测定方法的效能指标包括哪些内容？2. 精密度的表示方法有哪几种？补充：1. 结果应给出平均片重2. 注意是浓度对吸光度作图3.要求学生提前配制好0.4%NaOH，直接带容量瓶去称取样品，要冲洗称量纸4.每组都要用自己的空白溶液5.操作尽量由同一个人完成，减少人为操作误差6.要求结合实验内容进行讨论。
实验三 对乙酰氨基酚片的含量测定方法学研究
取对乙酰氨基酚对照品约40mg，精密称定， 置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml 溶解后，加水稀释至刻度，摇匀。分别精密量 取0,2，4，6，8，10ml，置100ml量瓶中，加 入0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水稀释至刻度， 摇匀，照分光光度法，在257nm的波长处测定 吸收度。将浓度C对吸收度A回归，得线性回 归方程：A=aC+b (r= ，n=6)。线性浓度 范围： ~ mg/ml。
实验三Байду номын сангаас对乙酰氨基酚片的 含量测定方法学研究
一、目的要求
1．掌握确证分析方法的效能指标内容和
要求。
2．熟悉建立分析方法的基本思路。
二、操作步骤
本品为对乙酰氨基酚的片剂（标示
量为300mg），含对乙酰氨基酚 （ C8H9NO2 ）应为标示量的90%～ 110.0%。
1．线性与线性范围
2．精密度试验
照“供试品测定”项下的方法操作，计 算片剂含量相当于标示量的百分数（通 常用“标示量%”表示），6份测定结果 的相对标准偏差(RSD)即为精密度试验 结果。
3.回收率试验
取本品10片，精密称定，研细，精密称 取细粉0.07g（约相当于对乙酰氨基酚 40mg），共6份，置250ml量瓶中，按1： 1比例，分别向其中加入对乙酰氨基酚对 照品，其余照“供试品测定法”项下的 方法操作，按标准曲线法计算回收率。
3．供试品测定法
取本品10片，精密称定，研细，精密称 取0.07g（约相当于对乙酰氨基酚 40mg），置250ml量瓶中，加0.4%氢氧 化钠溶液50ml及水50ml，振摇15分钟， 加水稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初 滤液，精密量取续滤液5ml，置100ml量 瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水 稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在 257nm的波长处测定吸收度。
实验三复方对乙酰氨基酚片的含量测定
实验三复方对乙酰氨基酚片的含量测定
实验原理：
对乙酰氨基酚是一种常见的解热镇痛药物，常用于缓解头痛、发热等症状。
对乙酰氨基酚片常为复方制剂，其中可能含有多种其他成分。
本实验通过测定对乙酰氨基酚片中对乙酰氨基酚的含量来检验复方制剂的质量。
主要操作步骤：
1.称取约0.3克对乙酰氨基酚片碾碎粉末，并移入50毫升锥形瓶中。
2.加入20毫升水，摇匀。
3.加入2毫升浓硝酸，混合均匀。
4.用水稀释至50毫升，混合均匀。
5.过滤，取15毫升滤液于250毫升锥形瓶中。
6.加入50毫升水，摇匀。
7.用横置液面法量取50毫升溶液，加入50毫升蒸馏水，并加入2毫升碘化钾溶液，用0.1M硫酸逐滴滴定至黄色终点。
记录硫酸耗量，计算对乙酰氨基酚的含量。
实验结果：
本实验测定得到的对乙酰氨基酚片含量为X mg/g。
实验注意事项：
1. 操作时应注意个人安全，避免接触有毒有害物质。
2. 摇匀时应充分混合，避免溶剂不充分。
3. 滴定时应缓慢滴加，避免滴加过多导致误差。
4. 所有实验器皿均需清洗干净并烘干，避免残留物影响实验结果。
5. 操作完毕后应将废液归集处理，避免对环境造成污染。
液相色谱法测定对乙酰氨基酚片的含量
ｓｌｔ ｎ—ｍ ｔａｏ（５ １ ）ａ ｔｅｆ ｗ ｒ ｅｏ ． Ｌ ｍｉ， ｈ ｅ ｃ ｏ ａｅ ｎｔ ４ ｍ ａｄｔｅｔ ｐ ｒ ｕｅｏ ｅ ｏ ｉ ｕｏ ｅ ｎ ｌ８ ：５ ｔ ｈ ｏ ｔ ｆ１０ｍ ／ ｎ ｔｅｄｔ ｔ ｎｗ ｖｌ ｇ ２４ ｎ ｎ ｅ ｅａ ｒ ｆ ｈ ｈ ｌ ａ ｅｉ ｅ ｈ ｈ ｍ ｔ ｔ
１２ １ ． ． 色谱条件进行分析 ， 结果 对照品的保 留时 间为 ４ ８ ６ｒ ｎ ． １ ｉ， ａ
ｊ
４ ６
样 品的保 留时间为 ４ ８４ｍ ｎ 其色谱图见图 １ ． １ ｉ ， 。 １２ ６ 线性关系考察 ．．
分别 量 取 标 １至 标 ５对 照 品溶 液 １０ Ｉ ， 次 进 样 ， ０ Ｌ 依 ｘ 按 １２ １色谱条件进行分析 ， ．． 采用 外标法 ， 定峰 面积 ， 测 以浓度 （ ） Ｃ 为横 坐标 、 面 积 （ 为 纵 坐标 进行 线 性 回归 ， 回归方 程 为 峰 Ａ） 得 Ａ＝ ４ ８ ２ ５ 一１０ １７ ｒ ０ ９９ ， ５ ．９ ４ ｃ ．７ ２ ，＝ ．９ ７ 线性 范围为 ３—１ ｇ ｍ 。 ５ ／ Ｌ 标准 曲线 见图 ３ 。
配 置成 ３０ Ｉ ／ Ｌ的储 备液 ， ０ ｇ ｍ Ｘ 精密量 取 ２ ５ｍ ． Ｌ的储 备液 ，分别 置 ２ Ｌ容量 瓶 中， 流动相稀 释至 刻度 ， ５ｍ 加 摇匀 ， 即得 含对 乙酰 氨基 酚 ３ ｇ ｍＬ的母液 。精密量取母液 １２ ３４、 ｍＬ 分别置 ０ ／ 、、、 ５ ， 五个 １ Ｌ容量瓶 中 ， 流动相 稀释至 刻度 ， 匀 ， ０ｍ 加 摇 即得标 １ ２ 、、 ３４、 、 ５对照品溶 液 ， 浓度 分别 为 ３ ６ ９ １ 、５ ｇ ｍ 进 样前 用 、 、 、２ １ ／ Ｌ， ０ ４ ｍ针筒式过滤器过滤 ， ．５Ｉ ｘ 取续滤液进样 。 （） ２ 样品溶液的制备 取对乙酰氨基 酚片 ｌ ， 密称定 ， ０片 精 研 细 。精密称取适量（ 约相当于对 乙酰氨基 酚 ９ ｇ ， １０ｍ ０ｍ ） 置 ０ Ｌ容
新-实验六 紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚片的含量的方法学研究
实验六紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚片的含量的方法学研究一、目的要求1.掌握确证分析方法的效能指标内容和要求。
2.熟悉建立分析方法的基本思路。
3.掌握紫外分光光度法的原理及操作。
二、实验原理对乙酰氨基酚结构中含有苯环共轭系统，在0.4%氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其吸收系数为E1cm715。
C8H9NO2151.16三、仪器与试剂对乙酰氨基酚片，对乙酰氨基酚对照品，氢氧化钠，容量瓶，量筒，紫外分光光度计，研钵。
四、实验步骤1.线性与浓度范围取对乙酰胺基酚对照品约40mg，精密称定，置250mL量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50mL溶解后，加水稀释至刻度，摇匀。
分别精密量取2，4，6，8，10，12mL，置100mL量瓶中，加入0.4%氢氧化钠溶液10mL，加水稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm的波长处测定吸收度。
将浓度C对吸收度A回归，得线性回归方程：A=a+bC(r= ,n=6)。
线性浓度范围0.0032～0.0192mg/mL.2.供试品测定法取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg），置250ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50ml及水50ml，振摇15分钟，加水至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm的波长处测定吸收度，1%E1按C8H9NO2的吸收系数（cm）为715计算，即得。
1%3.回收率试验取本品10片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg），共6份，置250ml量瓶中，按1：1比例，分别向其中加入对乙酰氨基酚对照品，其余照“供试品测定法”项下的方法操作，按标准曲线法或百分吸收系数法计算回收率。
4.精密度试验照“供试品测定”项下的方法操作，计算片剂含量相当于标示量的百分数，6份测定结果的相对标准偏差（RSD）即为精密度试验结果。
HPLC法测定对乙酰氨基酚片的含量
HPLC法测定对乙酰氨基酚片的含量吴玮【摘要】目的建立HPLC法测定对乙酰氨基酚片的含量.方法色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相为甲醇-水(20:80),流速为1.0 ml/min,检测波长为244 nm,柱温30℃.结果对乙酰氨基酚浓度在10.16～30.48μg/ml范围内线性关系良好,r=0.9998(n=5);平均加样回收率为100.04％,RSD=0.95％(n=6).结论 HPLC法操作简便、结果准确、重复性好、专属性强,适用于测定对乙酰氨基酚片中对乙酰氨基酚的含量.【期刊名称】《医学信息》【年(卷),期】2018(031)018【总页数】3页(P127-128,131)【关键词】HPLC;对乙酰氨基酚;含量测定【作者】吴玮【作者单位】安徽省宿州市食品药品检验检测中心,安徽宿州 234000【正文语种】中文【中图分类】R927.2对乙酰氨基酚片为目前临床常用的一种乙酰苯胺类解热镇痛药，适应于普通感冒或流行性感冒引起的发热，也用于缓解轻至中度疼痛如头痛、关节痛、偏头痛、牙痛、肌肉痛、神经痛、痛经。
《中国药典》2015年版[1]二部采用紫外-可见分光光度法测定其含量，本次试验建立了高效液相色谱法（HPLC法）测定对乙酰氨基酚片的含量，该方法专属性强，重现性好，可用于该制剂的质量控制。
1 仪器与试药1.1 仪器 Waters2695高效液相色谱仪，Waters2998二极管阵列检测器，Waters Empower工作站（美国Waters有限公司）；UV2550紫外-可见分光光度计；ABS-135S电子天平，BS110S电子天平。
1.2 试药对乙酰氨基酚对照品（中国食品药品检定研究院，批号为100018-201610）；对乙酰氨基酚片（东北制药集团沈阳第一制药有限公司，批号：4170911；天津市健生制药有限公司，批号：170301；通化万通药业股份有限公司，批号：170106）；甲醇（色谱纯）；水（纯化水）。
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一、目的要求
1．掌握确证分析方法的效能指标内容和 ．
要求。 要求。
2．熟悉建立分析方法的基本思路。 ．熟悉建立分析方法的基本思路。
二、操作步骤
本品为对乙酰氨基酚的片剂（ 本品为对乙酰氨基酚的片剂（标示 对乙酰氨基酚的片剂 量为300mg），含对乙酰氨基酚 ），含 量为 ）， 应为标示量的90%～ （ C8H9NO2 ）应为标示量的 ～ 110.0%。 。
三、思考题
1.含量测定方法的效能指标有哪些？ 1.含量测定方法的效能指标有哪些？ 含量测定方法的效能指标有哪些
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
3.回收率试验 3.回收率试验
取本品10片 精密称定，研细， 取本品 片，精密称定，研细，精密称 取细粉适量（ 取细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚 40mg），共6份，置250ml量瓶中，按1： ），共 份 量瓶中， ）， 量瓶中 ： 1比例，分别向其中加入对乙酰氨基酚对 比例， 比例 照品，其余照“供试品测定法” 照品，其余照“供试品测定法”项下的 方法操作， 方法操作，按标准曲线法或百分吸收系 数法计算回收率。 数法计算回收率。
2．精密度试验
供试品测定” 项下的方法操作， 照 “ 供试品测定 ” 项下的方法操作 ， 计 算片剂含量相当于标示量的百分数（ 算片剂含量相当于标示量的百分数 （ 通 常用“ 标示量%”表示 表示） 常用 “ 标示量 表示 ） ， 6份测定结果 份测定结果 的相对标准偏差(RSD)即为精密度试验 的相对标准偏差 即为精密度试验 结果。 结果。
1．线性与线性范围
取对乙酰氨基酚对照品约40mg，精密称定， ，精密称定， 取对乙酰氨基酚对照品约 量瓶中， 氢氧化钠溶液50ml 置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液 量瓶中 氢氧化钠溶液 溶解后，加水稀释至刻度，摇匀。 溶解后，加水稀释至刻度，摇匀。分别精密量 量瓶中， 取2，4，6，8，10，12ml，置100ml量瓶中， ， ， ， ， ， ， 量瓶中 加入0.4%氢氧化钠溶液 氢氧化钠溶液10ml，加水稀释至刻 加入 氢氧化钠溶液 ， 摇匀，照分光光度法， 度，摇匀，照分光光度法，在257nm的波长处 的波长处 测定吸收度。将浓度C对吸收度 回归， 对吸收度A回归 测定吸收度。将浓度 对吸收度 回归，得线 性回归方程： 性回归方程：A=aC+b (r= ，n=6)。线性 。 浓度范围： 浓度范围： ~ mg/ml。 。
3．供试品测定法
取本品10片 精密称定，研细， 取本品 片，精密称定，研细，精密称取适量 约相当于对乙酰氨基酚40mg），置250ml ），置 （约相当于对乙酰氨基酚 ）， 量瓶中， 氢氧化钠溶液50ml及水 及水50ml， 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液 氢氧化钠溶液 及水 ， 振摇15分钟 加水稀释至刻度，摇匀，滤过， 分钟， 振摇 分钟，加水稀释至刻度，摇匀，滤过， 弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置100ml 弃去初滤液，精密量取续滤液 ， 量瓶中， 氢氧化钠溶液10ml，加水稀 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液 氢氧化钠溶液 ， 释至刻度，摇匀，照分光光度法， 释至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm的 的 波长处测定吸收度， 波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数为 715计算。 计算。 计算