脑片膜片钳记录分析系统700Bpdf

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脑片膜片钳记录分析系统700B
操作规程
1.封接准备
(1) 打开Clampex的Membrane Test,设定封接测试脉冲电流方波的幅度和频率。

(2) 在玻璃微电极内维持一定的正压,用微操作器使电极进入记录液,在Membrane Test中可见测试脉冲方波,观察电极电阻大小。

(3) 关闭Membrane Test,用Auto调节Pipette Offset,使METER中的I(pA)=0。

如果I不显示为0,则可继续手工精确调节补偿的失调电位数值,直至I为0。

2.封接
(1) 打开Membrane Test,使玻璃微电极逐渐接触细胞,去除正压并轻轻给予负压以形成稳定封接。

此时,封接测试脉冲消失,仅出现电极电容瞬变值。

封接
电阻在1GΩ以上。

(2) 补偿电极电容:用Cp Fast和Cp Slow对电极电容进行补偿。

可选Leak Subtraction去除漏电流。

3.破膜
(1) 继续给予负压活用Zap功能电击打破细胞膜。

出现膜电容放电。

缓慢撤除电机内负压。

(2) 用Auto对膜电容进行补偿,必要时手工进行细微调节。

(3) 进行串联电阻补偿:选上Rs Compensation和Disable if oscillation detected,增大Prediction和Compensation对串联电阻进行补偿。

4.记录
关闭Membrane Test。

选择设定好的Clampex采样软件的Protocol,开始记录细胞电信号。

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