试验十蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测蔬菜是我们日常生活中不可或缺的食物之一,是我们餐桌上重要的一部分。
随着农业生产的发展,农药的使用也在逐渐增加,为了提高产量和质量,农民们经常使用有机磷及氨基甲酸酯类农药来防治病虫害。
这些农药的残留问题却引起了人们的关注。
对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测成为了一个迫切需要解决的问题。
有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前农业生产中广泛使用的一类农药,它们能够有效地抑制害虫和杂草的生长,提高作物产量。
在农药使用过程中,由于农民对农药的使用不当或者过量使用,导致蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量超标的情况屡见不鲜。
这些农药残留会对人体健康造成潜在的威胁,因此对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测显得尤为重要。
目前,关于蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测的方法有很多种,包括色谱法、光谱法、质谱法等。
这些方法虽然在检测有机磷及氨基甲酸酯类农药残留方面具有一定的灵敏度和准确性,但是它们需要昂贵的设备和复杂的操作流程,并且需要较长的时间才能得到结果,无法满足快速检测的需求。
研究人员正在不断寻找更加简便、快速和准确的方法来检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留。
近年来,基于生物传感技术的快速检测方法逐渐成为研究热点。
生物传感技术是一种利用生物材料的特异性反应来检测目标化合物的技术,具有操作简便、灵敏度高、结果快速等优点。
在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测中,常用的生物传感技术包括酶传感技术、免疫传感技术和核酸传感技术等。
酶传感技术是利用酶对目标化合物的特异性反应来进行检测的技术。
在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测中,常用的酶包括乙酰胆碱酯酶、磷酸化酶等。
当有机磷及氨基甲酸酯类农药存在时,它们会与酶发生特异性的化学反应,产生颜色变化或发光信号,从而实现对有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。
除了传统的生物传感技术之外,近年来还出现了一些新的快速检测方法,如基于纳米材料的快速检测方法、基于光学技术的快速检测方法等。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
随着人们生活水平的提高,对于蔬菜的需求量也越来越大,这也就导致了蔬菜的生产
量和种植面积也不断增加。
而随之而来的问题就是蔬菜生产的过程中使用的农药残留问题。
农药残留问题一直备受人们关注,因为它直接关系到人们的健康。
其中有机磷及氨基甲酸
酯类农药一直是蔬菜中常见的一种农药,因此对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量
的快速检测显得尤为重要。
有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前蔬菜中最常见的一类农药,它们在蔬菜生产过程中
被广泛使用,可以有效地防治害虫和病害,提高蔬菜产量。
有机磷及氨基甲酸酯类农药在
使用过程中也存在一定的风险,因为它们对人体健康有一定的危害,长期食用残留有机磷
及氨基甲酸酯类农药过量的蔬菜对人体健康将会产生严重的影响,甚至会引发一些严重的
疾病。
对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测变得尤为重要。
目前,常见的
有机磷及氨基甲酸酯类农药残留检测方法有气相色谱法、液相色谱法和免疫测定法等。
这
些方法可以对有机磷及氨基甲酸酯类农药残留进行比较精确的检测,但是需要花费较长的
时间和费用,无法满足蔬菜快速上市的需求。
为了解决这一问题,近年来,一些新型的有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测技
术开始逐渐出现。
基于光谱技术的有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术备受关注。
光谱技术是一种非破坏性的检测技术,它可以通过测量样品对光的吸收、散射、发射等特
性来分析样品的成分和性质。
这种技术具有快速、简便、高效的特点,非常适合于蔬菜中
有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测【摘要】本文围绕蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测展开讨论。
在介绍了相关背景和研究意义。
正文部分分析了农药残留对人体健康的危害,现有检测方法存在的问题,快速检测技术的发展,有机磷及氨基甲酸酯类农药的特点以及蔬菜中残留检测方法。
结论部分探讨了快速检测方法的应用前景和需要进一步研究的方向。
通过本文的研究,可以更好地了解蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测技朧,有助于保障人们健康。
【关键词】有机磷、氨基甲酸酯、农药残留、快速检测、蔬菜、健康风险、检测方法、技术发展、应用前景、研究方向1. 引言1.1 背景介绍随着农业生产的发展,农药的使用量逐渐增加。
有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前主要的农药类型之一,广泛应用于蔬菜种植中。
随着人们对食品安全的关注度增加,蔬菜中农药残留问题日益凸显。
有机磷及氨基甲酸酯类农药残留不仅会影响蔬菜的品质和食用安全,还可能对人体健康造成潜在的危害。
对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测技术的研究具有重要意义。
当前,主要的检测方法包括气相色谱-质谱联用技术、高效液相色谱-质谱联用技术等,然而这些方法存在着操作复杂、耗时长、成本高等问题。
研究快速、准确、低成本的蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的检测方法具有深远意义。
本文将从农药残留对人体健康的危害、现有的检测方法及问题、快速检测技术的发展、有机磷及氨基甲酸酯类农药的特点以及蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的检测方法等方面进行探讨,旨在为提高蔬菜食品安全提供技术支持和参考。
”1.2 研究意义有机磷及氨基甲酸酯类农药残留对人体健康造成潜在危害,引起了广泛关注。
蔬菜作为人们饮食中不可或缺的一部分,其农药残留量直接关系到人体健康。
开展对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测研究具有重要的社会意义和健康意义。
目前,针对蔬菜中农药残留的检测方法存在一些问题,如检测周期长、检测结果不准确等,制约了蔬菜农药残留监测工作的进行。
KJ01蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测(精)
§3.1 蔬菜中有机磷和氨基甲 酸酯类农药残留量的快速检测
1.农药残留测试的相关知识点 2.农药残留的快速检测技术 3.多功能食品安全检测仪的使用
上海农林职业技术学院
一、背
景
2001年,杭州的空心菜有机磷中毒事件。 2003年,南京蔬菜有机磷残留导致中毒的事件。
2007年,福建大田发生有机磷污染水源导致中毒事件。
品种类中的“空白测”项,按“确认”键。
将放置10min的样液倒入比色皿中,加入0.1 mL低物摇匀,吹吸混匀
马上放入仪器中,按“检测”键,进行空白检测,记录反应3 min,过
程中请勿打开盖子。
《食品安全快速检测》
上海农林职业技术学院
实验:蔬菜农药残留快速检测技术-仪器法
3、 样品溶液测定
先于试管中加入2.5 mL样品提取液,再加入0.1 mL酶液、0.1 mL显色 剂。摇匀后于35 ℃放置10 min以上。 于“检测”状态下选择“农药残留”项目,按“确认”键,选择样品 种类中的“蔬菜”项,按“确认”键。 将放置10min的样液倒入比色皿中,加入0.1 mL低物摇匀,吹吸混匀 马上放入仪器中,按“检测”键,进行空白检测,记录反应3 min, 过程中请勿打开盖子。
药的总称。大多为磷酸酯类或硫代磷酸酯类。
有机磷类农药包括:甲胺磷、水胺硫磷、乐果、敌百虫、敌敌畏、氧化 乐果、马拉硫磷、甲基异柳磷、辛硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、乙酰甲 胺磷、久效磷、杀螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱等。 氨基甲酸酯类农药包括:叶蝉散、速灭威、西维因、涕灭威、克百威 (呋喃丹)、异丙威、灭多威等。
《食品安全快速检测》
上海农林职业技术学院
实验:蔬菜农药残留快速检测技术-仪器法
试验十蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
实验十三、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测(GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测 )方法一快速卡法一、目的要求:学习快速卡法测定有机磷农残快速检验法及熟悉检验结果评定。
二、实验原理:胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色) ,有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。
三、实验试剂:1、固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片;2、pH 7.5磷酸盐缓冲液:分别称取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4?12HO]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2PQ],用500 mL蒸馏水溶解。
四、实验步骤:1 、整体测定法(1)选取具有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右方形碎片,取5g防入带盖瓶中,加入10 mL 缓冲溶液,振摇50 次,静置2min 以上.(2)取一片快速卡,用白色药片沾取提取液,放置10min以上进行预反应,有条件时在37 C 恒温装置中放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
(3)将快速卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意:每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
2、表面测定法(粗筛法)( 1 )擦去蔬菜表面泥土,滴2~3 滴缓冲液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
(2)取一速片测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
(3)放置10 min以上进行预反应,有条件时在37 C恒温装置中放置10 min。
预反应10 min , 预反应后的药片表面必须保持湿润。
(4)将快速卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意:每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
五、检测结果判断:1结果判断结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制(为阳性)、未抑制(阴性)表示。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测【摘要】本文针对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测进行研究。
在分别阐述了研究背景、研究意义以及研究目的。
在详细介绍了有机磷类农药和氨基甲酸酯类农药的种类和残留量,以及快速检测技术的发展。
还探讨了蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的危害和现有快速检测方法的局限性。
在提出了发展更快速、灵敏的检测方法、加强对农药残留的监管措施以及保障蔬菜食品安全的重要性。
通过本研究,有望为解决蔬菜中农药残留问题提供有效的应对措施,保障公众健康。
【关键词】关键词:有机磷类农药、氨基甲酸酯类农药、农药残留、快速检测技术、蔬菜、食品安全、监管措施1. 引言1.1 研究背景农药残留一直是蔬菜安全问题中备受关注的话题。
随着人们生活水平的提高,蔬菜的需求量也越来越大,为了提高产量和保护作物免受病虫害的侵袭,农民逐渐使用了大量的农药。
农药残留却成为一个令人担忧的问题。
有机磷及氨基甲酸酯类农药是常用的农药之一,它们在农作物生长过程中被广泛使用,而这些农药具有较强的毒性,对人体健康产生潜在风险。
目前,我国蔬菜中农药残留问题严重,尤其是有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量较高。
据统计,蔬菜中有机磷类农药残留超标的情况时有发生,部分蔬菜中氨基甲酸酯类农药的残留量也存在较大的波动。
对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测势在必行。
通过对不同农产品中农药残留问题的分析研究,可以有效提高农产品质量安全,保障食品安全,减少对人体健康的潜在风险。
开展蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测研究,对于促进农产品质量安全和人民身体健康至关重要。
1.2 研究意义有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前农业生产中广泛使用的农药种类,其在提高农产品产量和质量方面发挥着重要作用。
随着农药残留对人体健康的不良影响逐渐被重视,快速、准确地检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的方法显得尤为重要。
本研究的意义主要表现在以下几个方面:蔬菜是人们日常生活中不可缺少的食品,而农药残留会对人体健康产生潜在威胁,因此必须对蔬菜中的有机磷及氨基甲酸酯类农药残留进行及时检测,以保障消费者的健康。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
随着工业的发展和农业的现代化,化学农药的广泛应用成为农业生产中的常见现象。
因此,农产品中农药残留已成为一个普遍的问题。
为了确保消费者的健康和安全,需要对
农产品中的农药残留进行检测。
其中,有机磷类及氨基甲酸酯类农药是最常见的农药残留
物之一。
本文将介绍如何快速检测蔬菜中的有机磷类及氨基甲酸酯类农药残留量。
有机磷类农药是一类广泛使用的农药,它的主要成分是磷酸酯化合物。
这种农药可以
杀死害虫、杂草和真菌,从而保护作物的生长。
但是,它往往会对环境和人体产生有害影响,因此需要对其进行检测。
在蔬菜中,有机磷类农药的常见成分包括马拉硫磷、甲胺磷、乐果等。
针对这些残留物的检测方法主要有色谱法、荧光法和电化学法等。
其中,色谱法
是最常见的检测方法之一。
该方法可以快速和准确地检测出有机磷类农药在蔬菜中的残留量。
除了现有的检测方法之外,近年来还出现了一种新型的检测技术——基于光纤传感器
的检测技术。
这种技术利用光纤的传导性能和敏感度来检测蔬菜中的农药残留。
与传统的
检测方法相比,基于光纤传感器的检测技术具有响应快、准确、灵敏度高等特点,可以快
速地检测出蔬菜中的农药残留,同时可节省检测成本和时间。
总之,在蔬菜中确定有机磷类及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测对保障农产品质
量和消费者的健康至关重要。
通过创新技术和不断的研究,我们可以期望未来的检测方法
会更加成熟、高效和安全。
农药残留快速检测方法操作规程
农药残留快速检测方法操作规程1目的能快速检测有机磷和氨基甲酸脂类农药在蔬菜中的残留,检验室操作人员按本规程操作,保证公司到货蔬菜的质量。
2范围本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸脂类农药残留量的快速筛选测定,规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸脂类农药残留量的快速检验方法。
有两种检验方法:速测卡片(纸片法)、酶抑制率法(分光光度法)3依据GB/T 5009.199-2003,蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测。
一、速测卡片(纸片法)4原理胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酯酸类农药的存在,农药速测卡片是用对农药高度敏感的胆碱酯酶和显色剂做成的酶试纸。
5试剂速测卡片:胆碱酯酶和靛酚乙酸试剂做成的纸片6仪器常量天平37°C±2°C恒温装置4.分析步骤4.1整体测定法①样品处理:选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,取5&放入带盖瓶中,加入10mL缓冲液或纯净水中,振摇50次,静置2min以上。
②取一片速测卡片,撕去上盖膜,用白色药片沾取提取液,放置10min以上进行预反应,有条件的在37C 恒温装置中,放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
③将速测卡片对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应,根据白色药片的颜色判断结果。
每批测定应设一个空白对照卡。
4.2表面测定法(粗筛法)①擦去蔬菜表面泥土,滴2滴〜3滴缓冲液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
②取一片速测卡片,撕去上盖膜,将蔬菜上的液滴滴到白色药片上。
放置10min以上进行预反应,有条件的在37°C恒温装置中,放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
③将速测卡片对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应,根据白色药片的颜色判断结果。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术
- 61 -Vegetables 2019.8检验检测收稿日期:2019-03-19蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术许爱霞1,2(1.甘肃省干旱生境作物学重点实验室/甘肃农业大学农学院,甘肃 兰州 730070;2.定西市农产品质量安全监督管理站,甘肃 定西 743000)摘要:为了为农产品质量安全检测及监管工作提供理论保障,就近年来农药残留快速检测技术的发展,分析了蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术的原理、方法、结果判定等。
对农药残留检测与农产品质量安全的重要性进行了讨论,并提出建议,如加强农业投入品监管、强化农产品例行监测、加强品牌认证、推进质量安全追溯工作、开展风险预测评估等。
关键词:有机磷;氨基甲酸酯;农药;快速检测;技术Rapid Detection Technology of Organophosphorus andCarbamate Pesticide Residues in VegetablesXU Aixia 1,2(1. Gansu Provincial Key Laboratory of Aridland Crop Science/Agricultural College of Gansu Agricultural Uni-versity, Lanzhou 730070, China; 2. Dingxi Agricultural Product Quality and Safety Supervision and Administra-tion Station, Dingxi 743000, China)Abstract: In order to provide theoretical guarantee for the inspection and supervision of agricultural product quality and safety, the principle, method and result determination of the rapid detection technology of organophosphorus and carbamate pesticide residues in vegetables were analyzed based on the development of the rapid detection technology of pesticide residues in recent years. The importance of pesticide residue detection and quality safety of agricultural products were discussed. Suggestions were put forward, such as strengthening the supervision of agricultural inputs, enhancing routine monitoring of agricultural products, strengthening brand certification, promoting quality and safety traceability, carrying out risk prediction and evaluation and so on.Keywords: organophosphorus; carbamate; pesticide; rapid detection; technology目前,在影响我国农产品质量安全的因素中,较为突出的是有机磷和氨基甲酸酯类农药残留问题[1]。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着人们对食品安全和健康的重视,关于农产品中农药残留的检测变得愈发重要。
尤其是蔬菜这一日常饮食中不可或缺的食物,其安全性更是受到广泛关注。
而蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测就显得尤为重要。
那么,有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的检测又是如何进行的呢?我们需要了解一下有机磷及氨基甲酸酯类农药。
有机磷农药是一类广泛使用的杀虫剂,其在农业生产中有着广泛的应用。
由于其毒性较大,如果不当使用或者残留量超标,就会对人体健康造成危害。
检测蔬菜中有机磷农药残留量就显得尤为重要。
而氨基甲酸酯类农药则是一类常见的除草剂和杀虫剂,同样需要重点检测其在蔬菜中的残留情况。
目前,对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法主要包括化学方法和生物方法两种。
化学方法是指利用化学分析的方法,通过检测农产品中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的含量来判断其安全性。
这种方法主要包括气相色谱法、液相色谱法、质谱法等。
而生物方法是指利用生物学技术进行检测,通过检测样品中农药残留物对生物体的影响来判断其安全性,包括细胞毒性实验、细胞生长抑制实验等。
值得注意的是,传统的化学方法检测效率较低,且需要较长的检测时间,无法满足农产品快速检测的需求。
近年来,一种新型的快速检测技术——光谱检测技术逐渐受到关注。
光谱检测技术是一种利用物质对光的吸收、散射、发射等特性进行检测的方法,其具有快速、准确、非破坏性等优点。
在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测中,光谱检测技术可以通过测定蔬菜样品中特定波长下的光谱吸收情况来判断其中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留物的含量。
通过光谱检测技术,可以实现对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速、准确、非破坏性检测。
除了光谱检测技术,纳米材料技术也是一种新型的快速检测技术。
纳米材料技术是一种利用纳米材料的特殊性能进行检测的方法,其具有灵敏度高、响应速度快、操作简便等特点。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着人们对食品安全意识的提高,食品安全问题成为社会关注的焦点。
蔬菜中农药残留是影响食品安全的主要因素之一,尤其是有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量高,对人体健康造成潜在危害。
因此,快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的方法显得尤为重要。
常规检测方法需要样品预处理、分离纯化并经过复杂分析程序,耗时且成本高。
因此,发展新的快速检测方法迫在眉睫。
近年来微波辅助提取-气相色谱/质谱联用技术被广泛用于农产品中农药残留快速检测,其操作简单、灵敏度高、准确性好等优点越来越受到人们的关注。
1.快速检测方法的原理微波辅助提取技术能够使有机磷和氨基甲酸酯类农药能够充分溶解于有机相中,提取过程快速、高效。
同时,气相色谱/质谱联用技术能够将溶解后的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留物清晰准确地分离和定量,具有高灵敏度和高准确性的特点。
2.实验步骤(1)样品准备:取新鲜蔬菜样品,将其洗净、切碎。
取适量的样品,加入玻璃离子交换树脂和水,混合后在微波辅助提取器中进行微波提取。
(2)微波辅助提取:将样品置于微波辅助提取器中,设定合适的时间和温度进行提取,这样有机磷和氨基甲酸酯类农药残留物极易被提取出来。
(3)萃取物的净化:通过萃取物的净化,将微波提取的样品溶液中的杂质去除,保证后续分析的准确性。
(4)色谱分析:将经过净化的样品溶液用气相色谱/质谱联用技术进行分析和检测,可以得到有关有机磷和氨基甲酸酯类农药残留物的详细数据。
3.实验结果与意义实验证明,该方法能够检测到蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留物的质量分数,具有较高的灵敏度和准确性。
比较不同样品准备方法得到的残留物结果,微波辅助提取方法的检测结果更加准确。
这种方法除了可以节省检测时间、简化操作步骤等优点,还可以为蔬菜生产和加工提供可靠的技术支持,更好地保障人们的食品安全。
(完)。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测蔬菜是人们日常饮食中不可或缺的食物之一,但由于不规范的农药使用,导致蔬菜中常常存在有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留物。
这些农药残留物对人体健康造成潜在的威胁,因此对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测具有重要意义。
有机磷及氨基甲酸酯类农药常被广泛应用于蔬菜的种植过程中,主要用于杀虫、杀菌和除草。
这些农药残留物不仅会对蔬菜自身造成影响,还会通过人们饮食而进入人体,对人体健康造成潜在的危害。
有机磷农药一般被认为是神经毒剂,会抑制胆碱酯酶的活性,影响人体神经系统的正常功能。
氨基甲酸酯类农药则会对人体的心血管、呼吸和神经系统产生影响。
长期暴露于农药残留物可能会引发慢性中毒,并增加癌症和其他疾病的风险。
为了保障人们食品安全,各国纷纷制定了对农产品中农药残留物的安全标准。
快速检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的方法的研究成为了一个热点领域。
目前,研究人员提出了各种各样的检测方法,如色谱法、电化学法、光谱法等,不仅可以快速而准确地检测到蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留物的含量,还具有灵敏度高、操作简便等优点。
色谱法是一种常用的检测方法,主要包括气相色谱法和液相色谱法。
气相色谱法具有分离效果好、检测灵敏度高的特点,但需要耗费较长的样品前处理时间。
液相色谱法则是将样品溶解在溶剂中,并通过液相进行分离和检测,操作简便且快捷。
电化学法是一种非常灵敏的检测方法,可以通过检测电流的变化来间接地确定有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量。
光谱法则可以通过检测样品对特定波长的光的吸收或散射来确定有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量,具有快速和高灵敏度的特点。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测是确保人们食品安全的重要一环。
各种各样的检测方法都在不断地研究和发展,以提供更准确、快速和有效的检测手段。
只有通过科学的方法确保农产品中农药残留物的安全水平,才能让人们放心地享用美味的蔬菜。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留是造成食品安全问题的一个重要因素。
这些农药常用于农田中,以控制病虫害,帮助提高农作物产量。
过量或长期使用这些农药会导致其在农产品中残留过量,对人体健康造成潜在威胁。
快速检测蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留成为了食品安全监管的重要任务之一。
为能快速准确地检测出这些农药的残留量,科学家们进行了大量的研究,并开发了许多不同的检测方法。
一种常用的检测方法是高效液相色谱法(HPLC)。
这种方法基于样品中目标物与色谱柱中填充物之间的相互作用,通过控制样品在柱中的流动速度,分离并测量目标分析物。
利用此方法,可以快速、准确地检测出蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留。
还有一些新兴的技术用于快速检测蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量。
基于免疫分析的方法,如酶联免疫吸附测定法(ELISA)和免疫层析法,利用特异性抗体与目标农药残留物结合,从而实现快速、灵敏的检测。
还有基于生物传感器的方法,如电化学生物传感和光学生物传感,利用生物分子与目标化合物之间的相互作用来检测、定量目标农药残留。
在选择适合的检测方法时,需要考虑多个因素,包括检测的灵敏度、准确性、简便性和快速性等。
目前,各种方法已经在实践中得到应用,并逐渐得到改进和完善。
蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测是保障食品安全的重要环节。
通过选择适当的检测方法,并加强监管,能够有效地控制这些有害物质在蔬菜中的残留,保障公众食品安全。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测—酶抑制率法(分光光度法)
结果计算
抑制率(%)=[(ΔA0-ΔAt)/ ΔA0]×100 式中: ΔA0对照溶液反应3min吸光度的变化值; ΔAt样品溶液反应3min吸光度的变化值;
结果判定
结果以酶被抑制的程度(抑制率)表示。 当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时,表 示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农 药存在,样品为阳性结果。 阳性结果的样品需要重复检验2次以上。
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原理
在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱 酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度 呈正比。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物 (乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应,产 生黄色物质,用分光光度计在412nm处测定吸光度 随时间的变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以 判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类 农药的存在。
原理
试剂 pH8.0缓冲溶液 分别取 11.9g无水磷酸氢二钾与3. 2g磷酸二氢钾,用1000mL 蒸馏水溶解。
显色剂 分别取160mg二 硫代二硝基苯甲酸(DTNB) 和15.6mg碳酸氢钠,用20mL 缓冲溶液溶解,4℃冰箱中 保存。
试剂 底物:取25.0mg硫代乙酰 胆碱,加3.0mL蒸馏水溶解, 摇匀后置4℃冰箱中保存备 用。
乙酰胆碱酯酶 根据酶的 活性情况,用缓冲溶液溶 解,3min的吸光度变化ΔA0 值应控制在0.3以上。摇匀 后置4℃冰箱中保存备用。
分析步骤
样品处理:选取有代表性的蔬菜样品,冲洗掉表面泥土,剪 成1cm左右见方碎片,取样品1g,放入烧杯或提取瓶中,加 入5mL缓冲溶液,振荡1~2min,倒出提取液,静置3~5min,待 用。 对照溶液测试: 先于试管中加入2.5mL缓冲溶液,再加入 0.lmL酶液、0.1mL显色剂,摇匀后于37℃放置15min以上 (每批样品的控制时间应一致)。加入0.lmL底物摇匀,此 时检液开始显色反应,应立即放入仪器比色池中,记录反应 3 min的吸光度变化值Δ A0 样品溶液测试:先于试管中加入2.5mL样品提取液,其它操 作与对照溶液测试相同,记录反应3min的吸光度变化值Δ At
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着现代城市化发展和经济的迅速增长,人们对食品的质量和安全性越来越关注。
由于蔬菜作为人们日常饮食中不可或缺的组成部分,因此其安全性备受关注。
然而,蔬菜中存在着各种农药残留,其中包括有机磷和氨基甲酸酯类农药,这些化合物被广泛用于蔬菜生产中的虫害和病害防治。
因此,蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测具有重要的现实意义。
有机磷和氨基甲酸酯类农药对人体健康有潜在的危害。
有机磷类农药与乙酰胆碱酯酶的结合会引起中毒作用,而氨基甲酸酯类农药也有潜在的毒性。
在食品中,这些化合物的残留量可能会对人体健康造成不利影响。
因此,为了保障食品安全,有必要开发一种快速和准确的检测方法,以检测有机磷和氨基甲酸酯类农药在蔬菜中的残留量。
目前,常用的农药残留检测方法包括高效液相色谱(HPLC)、气相色谱法(GC)、液相质谱法等。
这些方法通常需要耗费大量的时间和成本,且需要复杂的仪器设备和高度技术人员的操作技能。
这使得这些方法不适合于在食品加工和销售过程中进行快速检测。
近年来,基于生物技术手段,如酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光探针法等新的农药残留检测方法得到了广泛的研究和应用。
这些方法具有快速、准确、低成本和易操作等优点,且可以实现高通量检测和多重残留物的同时检测。
其中,基于ELISA技术的快速检测方法是目前应用最广泛的一种方法。
ELISA技术是一种基于免疫反应原理的化学测量方法,通常用于快速检测多种化合物的残留量。
它通过检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的抗原抗体结合反应,确定蔬菜中的农药残留量。
基于ELISA技术的农药残留检测方法具有很多优势。
首先,它可以提高检测速度和准确性,同时可以检测多种化合物的残留量。
其次,它可以在不需要复杂的化学试剂和设备的情况下进行实验操作,降低检测成本和提高检测效率。
此外,ELISA技术还能够在食品加工和销售过程中进行快速检测,以保障食品安全。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
技术应用J1392019年6月·下蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测袁柱良1 李海英2(1.2东莞市常平镇农业技术服务中心,广东 东莞 523560)摘 要 蔬菜中农药残留作为食品安全管理的重要内容,关于检验蔬菜中的农药残留量主要是检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量。
气相色谱法是检测这两类农药的主要标准方法,尽管所具有的灵敏度较高,但是需要耗费较长时间,不适合在临床检验中进行大力推广。
为此,找到快速检测方法刻不容缓。
关键词 蔬菜;有机磷;氨基甲酸酯类农药;残留量;快速检测通过检测农产品中的农药残留可充分确保农产品的质量安全,为此农产品检测的重点在于科学的检测农药残留量。
当下,我国有一百多种有机磷与氨基甲酸酯类农药,质量参差不齐,品种复杂,在检测时很难有效的应用色相谱方法[1]。
若使用CL-BIII残留农药测定仪,对于假阳性问题很难得到有效避免。
现就两种快速检测方法进行详细介绍,详情如下。
1 酶抑制法1.1 原理有机磷与氨基甲酸酯类农药在一定情况下能够对胆碱酯酶的正常功能进行有效抑制,且抑制率的高低直接取决于农药浓度。
通过对待测样品的检测可掌握对乙酰胆碱酶活性抑制情况的了解,根据紫外可见分光光度计原理和412nm 波长的吸光度随时间的变化值可将抑制率计算出来,同时能够初筛/定性分析待测样品。
阴性:抑制率不足50%、阳性:超过50%[2]。
1.2 调试仪器采用CL-BIII 八通道残留农药测定仪。
将电源接通后,开机进行半小时预热;设置参数,选择通道,对照试样与样品试样可分别在第1、2-8通道放置;设置当日测试日期;调0使吸光度为0.000.1.3 试剂配制显色剂:取二硫代二硝基苯甲酸160mg、碳酸氢钠15.6mg,20ml 提取溶解,保存在4℃条件下。
提取溶液:取无水磷酸氢二钠11.9g、磷酸二氢钾3.2g,溶解时采用1000ml 蒸馏水,所制成的提取液pH 为8.0.乙酰胆碱酯酶:使用提取液进行溶解,控制3分钟吸光度变化值超过0.3,摇匀后保存在4℃条件下备用,保存期小于4天。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着世界人口的不断增长和养分需求的提高,人们对农作物的生产和流通进行了广泛的农药使用。
虽然农药的大量使用使得农作物的产量得以提高,但是同样也是导致食品中有害农残残留的主要原因之一。
农药残留不仅会对人体健康产生潜在威胁,而且会危害环境生态系统稳定性。
因此,在对农产品进行贸易和出口时,对食品中的农残残留进行严格控制是非常重要的。
近年来,对食品中农药残留的检测逐渐受到了广泛关注。
有机磷和氨基甲酸酯类农药是食品中存在的最常见的两类农药残留。
在许多国家和地区,这些农药已成为必要的化学农药处理工具,以控制各种害虫,因此它们常常出现在大部分常见蔬菜中。
这就需要高效、精确的检测方法来评估蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药的含量。
目前,用于检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的方法有很多种,但是由于在进行检测过程中所需的成本和技术难度,许多检测方法并不实用。
因此,需开发出一种高效、便捷、快速、准确和经济的检测方法,帮助人们评估蔬菜中的农药残留。
近年来,蛋白质印迹技术已成为一种快速检测食品中农药残留的有效方法。
蛋白质印迹技术是一种基于分子识别原理的有效生物传感器技术,它可利用特定的分子识别机制,并产生特定的选择性,以实现对被测样品中的农药残留物的高灵敏度识别。
蛋白质印迹技术需要通过两个步骤来获得高选择性的蛋白质生物传感器。
第一步,将目标农药材料的印迹模板与生物传感器上的信号转导区结合。
在此步骤中,目标农药的分子结构被镶嵌在生物传感器的信号转导区,从而形成有选择性的绑定位点。
第二步,将生物传感器与蔬菜样本接触,旨在使目标农药残留物与生物传感器结合,进而产生信号输出。
蛋白质印迹技术是一种非常有前途的技术,可以用于快速、准确地检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的含量,具有很好的选择性。
不过,目前仍需进一步完善该技术,如降低干扰信号甚至是交叉反应产生的影响、提高灵敏度和检测速度等,才能被广泛应用。
果蔬中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速测定方法
果蔬中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速测定方法摘要介绍了果蔬中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速测定方法的原理、设备、方法、结果判定及注意事项,并系统阐述了快速测定方法的优点、缺点,以供参考。
关键词果蔬;有机磷;氨基甲酸酯;农药残留;快速测定方法随着人民生活水平的提高、健康意识的增强,果蔬的质量安全问题已成为社会各界普遍关注的大事。
各级政府对果蔬的监管措施也在不断强化[1-2]。
由于传统的检测技术检测时间长、成本高、对检测人员专业性要求高而不适于对果蔬进行有效的产前、产中、产后的监督管理[3-4]。
因此,用时少、成本低、易操作的快速测定方法发展前景广阔。
本文介绍了果蔬中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术,根据有机磷及氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶活性,从而导致加入底物后颜色发生不同程度变化的原理,通过测出吸光度变化值,进而计算出抑制率的方法来判断果蔬中有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留情况。
1 检测原理与方法1.1 检测原理有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性,造成神经传导介质乙酰胆碱的积累,影响正常传导,使昆虫中毒致死。
根据这一昆虫毒理学原理,将其用于农药残留的检测中[5-7]。
如果蔬菜的提取液中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量较低,酶的活性就不被抑制,反之,如果蔬菜的提取液中含有一定量的有机磷或氨基甲酸酯类农药,酶的活性就被抑制,再用农药残留快速检测仪测定吸光值随时间的变化,计算出抑制率,便可判断出蔬菜中含有机磷或氨基甲酸类酯农药的残留情况。
1.2 检测设备及试剂检测设备为RP-410农药残留快速检测仪、电子天平(精确到0.1 g)、台式培养箱。
试剂:pH值为8的磷酸缓冲液、丁酰胆碱酯酶、底物(碘化硫代丁酰胆碱)、显色剂(二硫代二硝基苯甲酸),酶、底物及显色剂均用缓冲液溶解。
1.3 检测方法样品处理:选取有代表性的样品,擦去泥土,并剪成1 cm2的小碎片。
蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法
蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法(除韭菜外)果菜类豆菜类瓜菜类根菜;1范围:本标准规定了甲胺磷等有机磷和克百威等氨基甲酸酯类农药在蔬菜中的残毒快速检测方法。
本标准适用于叶菜类叶菜类(除韭菜外)果菜类豆菜类瓜菜类根菜类(除胡萝卜茭白)中甲胺磷氧化乐果对硫磷甲拌磷久效磷倍硫磷杀扑磷敌敌畏克百威涕灭威灭多威抗蚜威丁硫克百威甲萘威丙硫克百威速灭威残杀威异丙威等的农药残毒的快速检测。
2原理:有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性,造成神经传导介质乙酰胆碱的积累,影响正常传导,使昆虫中毒死亡,根据这一昆虫毒理学原理,用在对农药残留的检测中。
加入反应试剂后,用分光光度计测定吸光值随时间的变化值,计算出抑制率,判断蔬菜中含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的残毒情况。
即:乙酰胆碱酯酶+有机磷或氨基甲酸酯类农药→酶活性被抑制→活性被抑制→样本中含有有机磷或氨基甲酸酯类农药乙酰胆碱酯酶+样本提取液︱→→活性正常→样本中不含有有机磷或氨基甲酸酯类农如以乙酰硫代胆碱(AChE)为底物,在乙酰胆碱酯酶(AChE)的作用下乙酰硫代胆碱(AsCh)水解成硫代胆碱和乙酸,硫代胆碱和二硫双对硝基苯甲酸(DTNB)产生显色反应,使反应液呈黄色,在分光光度计410纳处有最大吸收峰,用分光光度计可测的酶活性被抑制程度(用抑制率表示)。
3试剂:3.1磷酸缓冲液。
3.2丁酰胆碱酯酶:根据酶活性情况按要求用缓冲液溶解,⊿A值控制在0.4~0.8之间。
3.3底物典化硫代丁酰胆碱,用缓冲液溶解。
3.4显色济:二硫代二硝基甲酸,用缓冲液溶解。
4仪器:4.1波长为410纳米±3纳米专用测速仪,或用可见光分光度计.4.2电子天平(准确度0.1克).4.3微型样品混合器.4.4台式培养箱4.5可调移液枪: (10~100微升,1~5毫升).4.6不锈钢取样器(内径2厘米).4.7 配套玻璃仪器及其他配件等.5 检测5.1 取样用不锈钢管取样器取来自不同植株叶片(至少八~十片叶子)的样本;果皮从表皮到果肉1-1.5厘米处取样.5.2检测过程取两克切碎的样本(非叶菜类取4克),放入提取瓶内,加入20毫升缓冲液震荡一到两分钟,倒出提取液,静止3-5分钟;于小试管内分别加入五十微升酶,3毫升样本提取液,50微升显色剂,于37~38℃下放置30分钟后再分别加入50微升底物,倒入比色杯中,用仪器进行测定.5.3 检测结果计算检测结果按式(1)计算抑制率(%)=﹝△ΑC-△Αs﹞/△Α c ×100 (1)式中△ΑC——对照组三分钟后与三分钟前吸光值之差;△Αs——样本三分钟后与三分钟前吸光值之差.抑制率≥70%时,蔬菜中含有某种有机磷或氨基甲酸酯类农药残毒.此时样本要有2次以上重复检测,几次重复检测的重现性应在80%以上.6最低检出浓度本方法的最低检出浓度见表1。
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实验十三、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
(GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测)
方法一快速卡法
一、目的要求:学习快速卡法测定有机磷农残快速检验法及熟悉检验结果评定。
二、实验原理:
胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。
三、实验试剂:
1、固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片;
2、pH 7.5 磷酸盐缓冲液:分别称取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4•12H2O]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2PO4],用500 mL蒸馏水溶解。
四、实验步骤:
1、整体测定法
(1)选取具有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右方形碎片,取5g防入带盖瓶中,加入10 mL缓冲溶液,振摇50次,静置2min以上.
(2) 取一片快速卡,用白色药片沾取提取液,放置10min以上进行预反应,有条件时在37 ℃恒温装置中放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
(3)将快速卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意:每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
2、表面测定法(粗筛法)
(1)擦去蔬菜表面泥土,滴2~3滴缓冲液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
(2)取一速片测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
(3)放置10 min以上进行预反应,有条件时在37 ℃恒温装置中放置10 min。
预反应10 min,预反应后的药片表面必须保持湿润。
(4)将快速卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意:每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
五、检测结果判断:
1、结果判断
结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制(为阳性)、未抑制(阴性)表示。
与空白对照卡比较,白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。
白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同,为阴性结果。
对阳性结果的样品,可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。
2、样品检测结果记录并对检测结果进行评价。
六、实验注意事项及说明:
1、速测卡灵敏度指标如下表所示。
部分农药检出限参考表
2、速测卡法符合率:在检出的30份以上阳性样品中,经气相色谱法验证,阳性结果的符合率应在80%以上。
3、葱、蒜、萝卜、韭菜、香菜、茭白、蘑菇和番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性,处理样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提或采用表面测定法。
对一些含叶绿素较高的蔬菜,也可采取整株(体)蔬菜浸提法,减少色素的干扰。
4、当温度条件低于37℃,酶反应速度随之放慢,药片加液后放置反应的时间也应相对延长,延长时间的确定,应以空白对照卡用手指(体温)捏3min时可以变蓝,即可往下操作。
注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性。
空白对照卡不变色的原因:一是药片表面缓冲溶液加得少、预反应后的药片表面不够湿润;二是温度太低。
5、红色药片与白色药片叠合反应的时间以3min为准,3 min后的蓝色会逐渐加深,24h后
颜色回逐渐退去。
方法二酶抑制率法(分光光度法)
一、目的要求:学习酶抑制率法测定果蔬有机磷和氨基甲酸脂类农药残留的原理和方法,注意实验过程的操作要点。
二、实验原理:
根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶的活性原理,向蔬菜的提取液中加入生化反应底物碘化乙酰硫代胆碱和乙酰胆碱酯酶,如果蔬菜不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量低,酶的活性就不被抑制,实验中加入的底物就能被酶水解,水解产物与加入的显色剂反应产生黄色物质。
如果蔬菜的提取液含有农药并残留量较高时,酶的活性被抑制,底物就不被水解,当加入显色剂时就不显色或颜色变化很小。
用分光光度计在412nm 处或农药残毒快速检测仪测定吸光值,根据计算出的抑制率,就可以判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留量的情况。
三、实验试剂和仪器:
(一)试剂
1、pH8.0缓冲液分别称取11.9g无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二氢钾,溶解于1000 mL蒸馏水中。
2、乙酰胆碱酯酶(实验专用酶)根据酶活力用缓冲溶液溶解,3 min的吸光值变化ΔA0值应控制在0.3以上。
摇匀后在0~5℃冰箱中保存,保存期不超过4天。
3、底物碘化乙酰硫代胆碱称取25.0 mg碘化乙酰硫代胆碱,用3.0 mL缓冲溶液溶解,在0~5℃下保存。
保存期不超过2周。
4、显色剂分别称取160 mg二硫代二硝基苯甲酸和15.6 mg碳酸氢钠,用20 mL缓冲溶液溶解,4℃冰箱保存。
5、可选用由以上试剂配置的试剂盒。
乙酰胆碱酯酶的ΔA0值应控制在0.3以上。
(二)仪器
1、分光光度计或相应的农残快速检测仪;
2、天平(0.01g);
3、恒温水浴或恒温培养箱。
四、实验步骤: 1、样品处理
选取有代表性的蔬菜样品,去掉不可食部分后称取蔬菜试样,冲洗掉表面泥土,剪成1 cm 左右碎片。
取样品1 g ,放入烧杯或提取瓶中,加入5 mL 缓冲液,振荡1~2 min ,倒出提取液,静置3~5 min ,待用。
2、对照溶液测试
先于试管中加入2.5 mL 缓冲液,再加入0.1 mL 酶液、0.1 mL 显色剂。
摇匀后于37 ℃放置15 min 以上(每批样品的控制时间应一致)。
加入0.1 mL 低物摇匀,此时检液开始显色反应,应立即放入比色皿中,记录反应3 min 的吸光度的变化值ΔA 0。
3、 样品溶液测定
先于试管中加入2.5 mL 样品提取液,其他操作与对照测定相同,记录反应3 min 的吸光度的变化值ΔA t 。
五、结果计算:
抑制率(%)=
1000
0⨯∆∆-∆A A A t
式中 ΔA 0——对照液反应3 min 吸光度的变化值; ΔA t ——样品溶液反应3 min 吸光度的变化值。
六、实验结果判断:
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率大于50% 时,表示样品中有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药残留,可判定样品为阳性结果,对检验结果阳性的样品需重复检验两次以上。
检验结果记录:
七、实验注意事项及说明
1、对检验结果阳性的样品,需用其他方法进一步确定残留农药的种类和进行定量测定。
2、酶抑制率法对部分农药的检出限为:
3、葱、蒜、萝卜、韭菜、香菜、茭白、蘑菇和番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性,处理样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提或采用表面测定法。
对一些含叶绿素较高的蔬菜,也可采取整株(体)蔬菜浸提法,减少色素的干扰。
4、当温度条件低于37℃,酶反应速度随之放慢,药片加液后放置反应的时间也应相对延长,延长时间的确定,应以胆碱酯酶空白对照测试的吸光度变化
ΔA0在0.3以上为准。
注意样品放置时间应与空白对照溶液放置时间一致才有可比性。
酶的活性不够和温度太低都可能造成胆碱酯酶空白对照液3 min的吸光度ΔA0变化值<0.3。
5、该法适用于大量蔬菜样本的筛检,不适用于最后的仲裁检测。
八、思考题
1、使用速测卡的注意事项有哪些?
2、影响胆碱酯酶抑制检测法的因素有哪些?如何解决?
3、可用何种检测方法对检验结果为阳性样品,进行进一步的定性和定量?。