香菇多糖提取条件的优化研究
香菇多糖提取工艺的研究进展
香菇多糖提取工艺的研究进展香菇多糖提取工艺的研究进展香菇Lentinusedodes 为担子菌纲伞形科真菌，是世界上第二大食用菌。
香菇多糖是香菇中最重要的一种生物活性物质，具有抑制肿瘤、调节免疫、抗病毒和抗氧化等多方面的药理活性，且毒副作用小。
香菇多糖的提取常用水提醇沉法、酸碱提取法，但存在提取工艺复杂、溶剂使用量大、时间长等缺点，而且容易造成多糖降解，生物活性降低。
本文主要对近年来香菇多糖提取工艺优化研究方面的进展进行阐述。
1.超声波提取超声波提取法是利用超声波特殊的物理性质，加速介质质点运动、空化作用、振动匀化等以增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透力，从而使药效物质加速融人溶剂提高有效成分的得率。
王恒等用超声波辅助法从香菇中提取香菇多糖，通过实验优化确定出香菇多糖最佳提取工艺为超声功率200W ，料液比35：1，超声时间40min ，香菇多糖提取率为6.72 ％。
王俊颖等采用超声法浸提香菇多糖通过正交试验设计确定的最佳工艺为料水比1 : 25，超声温度60° C超声时间30min , 超声功率300W ，多糖得率为8.72 ％。
李宏睿等采用正交试验设计，对香菇多糖的提取条件进行优化，并与单纯的热水浸提进行比较。
结果表明，在料水比l：25 ，超声时间35min ，超声功率105W ，热水浸提温度90 ％，浸提时间20min 的条件下，提取效果最好，多糖提取率为13.75 ％，比单纯热水浸提法提高6.22％。
2.微波提取微波辅助提取技术主要是通过调节微波加热的参数，有效地加热物料中的目标成分，对目标成分进行选择性提取。
刘小丽等研究微波辅助法提取香菇多糖采用单因素试验对固液比、微波辐射功率、辐射时间、乙醇用量以及杂蛋白的去除条件分别进行了考察。
试验结果表明最佳提取工艺条件为固液比1：20mL ，微波辐射功率为280W ，辐射时间5min，乙醇与多糖提取液体积比为4：1，香菇多糖提取率可达到9.46 ％。
香菇多糖提取方法探讨
香菇多糖提取方法探讨
1 引言
香菇多糖作为功能性酒类的一种，具有独特的作用，如抗氧化、抗癌、抗衰老等，是发展分子营养学的重要方向。
因此，研究香菇多糖的提取方法十分必要。
在保证活性物质的完整性和活性的前提下，从自然资源中高效提取，进一步完善多糖技术，是当前香菇多糖研究发展的重要研究课题。
2 香菇多糖的提取方法
1.有机溶剂抽提法：这种方法通常采用有机溶剂，使植物细胞外部的多糖受到溶解，从而将香菇多糖从菇落液中提取出来。
这种溶剂抽提法虽然可以提取大量多糖，但容易对抗氧化剂和其他生物活性物质产生不良影响。
2.超声波提取法：利用超声波作用于总淀粉中，可以迅速将其分解，从而达到香菇多糖的极高提取率。
超声波提取可以保持多糖中活性物质的完整性，在节约能源和保护环境的前提下提取多糖，具有重要的科研价值。
3.发酵法：发酵主要是利用酶的水解作用，将香菇总淀粉分解成多糖，从而实现多糖的提取。
发酵法可以从香菇中获取大量多糖，但节点操作需要特殊的技术，且存在一定的安全风险，需要特别注意。
3 结论
以上是香菇多糖提取方法的简单介绍，每种方法都具有自身优势和局限性。
提取前要考虑植物体结构、多糖特性及其枯萎情况，选择合适的提取方式，以保持多糖的活性和完美性，实现高效率的提取。
香菇中提取多糖的技术研究
香菇中提取多糖的技术研究香菇中多糖的作用：，在民间素有“山珍”之称。
香菇属于高蛋白，低脂肪，高碳水化合物，高纤维素营养食品[1]。
香菇多糖具有抗肿瘤、抗病毒、提高免疫力和刺激干扰素形成等功能[3]，其毒副作用小，疗效高，具有重要的研究和开发价值。
香菇( Lentinus edodes)是侧耳科( Pleara taco ) 的担子菌,含有多种有效药用组分,尤其是香菇多糖( Lentinan 简称LN T)是1种宿主免疫增强剂,具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能[1 ] ,而引起人们的广泛关注。
香菇中含有一种能治疗癌症, 抗恶性肿瘤, 抗病毒, 抗感染, 提高人体免疫力等多种生理功能的物质———香菇多糖。
医学研究证明, 它是通过刺激机体的免疫系统使机体的免疫功能得到恢复和提高, 由机体本身的抵抗力去杀死肿瘤细胞。
它的作用是间接的, 所以毒副作用小, 在各类抗癌药物中, 它被认为是毒副作用可以忽略不计, 剂量低, 疗效好的天然的理想药物一：采用亚临界水技术提取方法，考察了提取香菇多糖的最佳试验条件。
结果表明，最佳提取条件为亚临界水温度150 ℃，液料比30 mL·g-1，浸提时间为5 min，浸提次数为2 次，在该条件下香菇多糖得率可达15.7%，与热水恒温浸提法相比，亚临界水浸提法可明显降低提取时间和提高香菇多糖得率。
传统提取香菇中的多糖主要利用热水浸提法，这种方法不仅浸提时间长，而且提取率不高。
本试验采用亚临界水提取方法，所谓亚临界水也被称为过热水、高压热水或热液态水。
当水在374.2 ℃和22.1 MPa 以上的高温、高压条件下，可形成既非液体又非气体的第四状态，即所谓“超临界状态”。
在此状态下的水称为“超临界水”。
在稍微低于此温度和压力下的水称为“亚临界水”[4]。
同传统的提取方法相比，亚临界水提取具有如下特点[5-6]：不论亚临界水提取对象是液体还是固体，其有效成分的溶解度要比传统方法高得多，提取率也就高得多；亚临界水提取在提取时间内几乎没有能耗，其作用效果迅速且能量消耗较少；亚临界水会使蛋白质、淀粉等变性，给后续的分离、纯化带来方便。
香菇多糖制剂生产技术研究
06
结论与展望
研究成果总结
提取工艺优化
通过对比不同提取方法，确定了最佳的香菇 多糖提取工艺，提高了多糖得率和纯度。
制剂技术研发
成功开发出具有良好稳定性和溶解度的香菇多糖口 服制剂和注射制剂，为临床应用提供了有力支持。
质量控制体系建立
建立了完善的香菇多糖制剂质量控制体系， 包括原料检验、生产过程监控和成品检测等 环节，确保产品质量和安全。
香菇多糖制剂生产技术研 究
汇报人： 2023-11-30
目录
CONTENTS
• 研究背景与意义 • 香菇多糖提取工艺研究 • 香菇多糖制剂制备工艺研究 • 香菇多糖制剂质量控制技术研究 • 香菇多糖制剂生产技术研究应用前景展望 • 结论与展望
01
研究背景与意义
香菇多糖制剂概述
香菇多糖
从香菇中提取的一类生物活性多糖， 具有抗肿瘤、免疫调节等多种药理作 用。
制备工艺条件优化
提取工艺优化
采用热水浸提法、酶解法等方法 提高香菇多糖的提取率，同时考 察提取温度、时间、料液比等因 素对提取效果的影响。
制剂成型工艺
研究口服制剂和注射剂的成型工 艺，如干燥、填充、压片、灌封 等，确保产品质量稳定。
01
原料筛选
选用优质香菇子实体，通过提取 、分离、纯化等工艺步骤制备香 菇多糖原料。
02
03
分离纯化工艺
利用超滤、大孔树脂吸附、色谱 等技术对香菇多糖进行分离纯化 ，提高产品纯度和质量。
04
制剂质量评价标准及方法
性状
观察产品的外观、颜色、气味等，应符合规 定要求。
鉴别
对产品进行水分、灰分、重金属、微生物限 度等检查，应符合规定要求。
检查
香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究
香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究报告1. 研究目标本研究旨在探索香菇中多糖的提取工艺和含量测定方法，以提供一种高效、可行的工艺流程和准确的测定方法，为香菇多糖的应用开发提供科学依据。
2. 方法2.1 香菇多糖提取工艺研究2.1.1 提取试剂选择根据文献综述和前期实验结果，筛选出适合香菇多糖提取的试剂。
常用的试剂有热水、酶解液、强酸、强碱等，选择合适试剂对香菇进行水解提取。
2.1.2 提取工艺优化基于单因素实验和正交实验设计原理，优化香菇多糖提取的工艺参数，包括提取温度、提取时间、料液比等因素。
通过测定提取液中多糖的含量，确定最佳的提取工艺条件。
2.2 香菇多糖含量测定方法研究2.2.1 选择合适试剂反应根据香菇多糖的特性，选用适合的试剂进行反应。
常用的试剂有硫酸、酚硫酸、费林试剂等，可以选择适合的试剂。
2.2.2 建立标准曲线选取不同浓度的香菇多糖标准品，按照测定方法进行测定，记录各标准样品的吸光度或色素生成情况。
根据实验数据，建立标准曲线。
2.2.3 样品预处理将香菇样品经过适当的处理，如研磨、溶解等，使样品中的多糖保持在可测量范围内。
2.2.4 多糖含量测定根据建立的标准曲线和样品的吸光度值，计算出香菇中多糖的含量，并进行统计分析。
3. 发现3.1 香菇多糖提取工艺发现经过实验研究，发现采用热水提取是一种较为有效的香菇多糖提取工艺。
最佳提取条件为提取温度80℃，提取时间2小时，料液比1:10。
3.2 香菇多糖含量测定方法发现在已有的试剂中，硫酸试剂反应较为敏感，可以用于香菇多糖的含量测定。
建立的标准曲线表明，香菇多糖的浓度与吸光度呈现良好的线性关系。
4. 结论本研究通过对香菇多糖的提取工艺和含量测定方法进行深入研究，得出以下结论：1.香菇多糖的热水提取工艺在提取温度80℃，提取时间2小时，料液比1:10的条件下，可获得较高的提取产率。
2.硫酸试剂是一种适用于香菇多糖含量测定的试剂，建立的标准曲线可用于准确测定香菇多糖的含量。
香菇多糖的研究报告
香菇多糖的研究报告摘要利用果胶酶、纤维素酶和漆酶对香菇进行酶解，固定料水比( 1∶15) 和反应温度( 40℃) ，以酶解后多糖提取率为指标，考察不同浓度的3 种酶对香菇多糖提取的影响。
在单因素试验的基础上，采用响应面法建立香菇多糖酶法提取的二次多项数学模型，并验证了该模型的有效性; 探讨了果胶酶、纤维素酶、漆酶3 个因子的交互作用及其最佳水平。
响应面分析结果表明: 果胶酶、纤维素酶、漆酶显著影响香菇多糖的提取效果，在果胶酶浓度为7.11%，纤维素酶浓度为6.82%，漆酶浓度为3.69%的优化条件下，香菇多糖的提取率达到37.07%。
关键词:香菇多糖，果胶酶，纤维素酶，漆酶，响应面2.前言糖类的研究已有百余年的历史, 近20 多年来, 随着膜的化学功能, 免疫物质的化学研究的进展以及探寻新药物资源的不断拓展和研究的深入, 发现糖类在生物体中的作用不仅是作为能量资源或结构材料, 更重要的是还参与了生命现象中细胞的各种活动, 具有多种多样的生物学功能。
多糖一般由十个分子以上的单糖通过糖苷键连接而成的高分子多聚物。
多糖按来源大致可分为植物多糖、动物多糖、海藻多糖、微生物多糖即细菌多糖和真菌多糖等。
其中, 具有很强生物活性的真菌多糖的研究日益受到重视, 真菌多糖从真菌子实体、菌丝体、发酵液中分离, 是一类可以控制细胞分裂分化、调节细胞生长和衰老的活性多糖。
真菌多糖作为药物研究始于20 世纪50 年代, 在60 年代以后成为免疫促进剂受到广泛关注, 其中香菇多糖( lent inan, LNT) 是研究得较透彻的多糖之一。
香菇[ Lentinus edodes ( Berk. ) Sing] 为担子菌纲伞形科真菌, 是世界名贵食用菌兼药用菌之一。
1968 年日本千原吴郎首先利用热水从香菇子实体中浸提出6 种胞外多糖, 1970 年Chihard和Sasaki 用热水浸提结合有机溶剂沉淀从香菇中提取到另外4 种多糖, 20 世纪80 年代以来, LNT的研究受到广泛的重视, 取得了一系列进展[ 1] 。
超滤提取香菇多糖的研究
超滤提取香菇多糖的研究
随着我国的经济的发展，超级滤提取方法正在越来越多地应用在天然药物研究中，例如研究香菇多糖，利用超级滤提取方法对其进行提取和分离研究。
超级滤提取术是利用超级滤提取件（梯度收集器）作为介质，以一种动力学形式以一定的水平移动，使我们可以从某种特定物质中快速有效地收集有用成分的技术。
这是一种新型的生物分子提取技术，具有成本低廉、方便实用、提取率高的优点，经过近年来的深入研究，其在天然药物研究中的应用也得到了广泛的关注。
香菇多糖是香菇中含量很高的微米细胞，具有抗氧化、抗癌、抗衰老、补血补元等作用，因此具有重要的生物学和医学价值。
最近，越来越多的研究表明，超级滤提取技术是一种非常有效的香菇多糖提取分离方法。
例如，研究人员可以通过改变温度、PH值、浓度，配合不同的超滤提取件，将收集的实际反应体系配制成适用的流动相，使得不同的组分在药物、非化学反应情况下，可以有效地分离出来。
此外，超滤提取系统的参数可以调整，可以满足需求的不同的组分的提取和分离，也可以有效地提取微量物质，释放成本低廉，并有利于减少分离和洗涤化学物质的使用。
因此，超级滤提取法是提取分离香菇多糖的有效方法，在实践中，研究者可以在研究中根据自身需求，针对不同参数进行调整，获得较高精度的提取效果。
香菇多糖的提取实验报告
香菇多糖的提取实验报告一、实验目的本实验旨在探索从香菇中提取多糖的有效方法，并对提取得到的香菇多糖进行初步的定性和定量分析。
二、实验原理香菇多糖是一种水溶性的大分子化合物，其在热水中具有一定的溶解性。
通过热水浸提的方法，可以使香菇中的多糖溶解到水中，然后经过离心、过滤等操作去除杂质，再通过醇沉的方法使多糖沉淀出来，最后经过干燥得到香菇多糖的粗品。
三、实验材料与仪器1、实验材料新鲜香菇（市售）、无水乙醇（分析纯）、丙酮（分析纯）、石油醚（分析纯）、葡萄糖标准品、浓硫酸（分析纯）、苯酚（分析纯）等。
2、实验仪器电子天平、恒温水浴锅、离心机、旋转蒸发仪、真空干燥箱、分光光度计、容量瓶、移液管、具塞刻度试管等。
四、实验步骤1、原料预处理将新鲜香菇洗净，去除杂质和根部，切成小块，置于通风处晾干。
然后用石油醚回流脱脂2 次，每次2 小时，以去除香菇中的脂类物质。
脱脂后的香菇用丙酮回流脱色 2 次，每次 2 小时，以去除香菇中的色素。
2、热水浸提将预处理后的香菇放入圆底烧瓶中，按料液比 1:20 加入蒸馏水，在90℃的恒温水浴锅中浸提 3 小时。
期间每隔 30 分钟搅拌一次，以提高提取效率。
3、离心分离浸提结束后，将提取液冷却至室温，然后在 4000 r/min 的转速下离心 15 分钟，取上清液。
4、过滤将上清液用滤纸过滤，去除其中的不溶性杂质。
5、醇沉向过滤后的上清液中缓慢加入 3 倍体积的无水乙醇，边加边搅拌，使多糖沉淀出来。
然后将溶液置于 4℃冰箱中静置过夜。
6、离心收集将醇沉后的溶液在 4000 r/min 的转速下离心 15 分钟，收集沉淀。
7、洗涤用无水乙醇和丙酮依次洗涤沉淀，以去除其中的杂质。
8、干燥将洗涤后的沉淀置于真空干燥箱中，在 60℃下干燥至恒重，得到香菇多糖的粗品。
9、多糖的定性分析（1）苯酚硫酸法：取适量的香菇多糖粗品，用蒸馏水溶解，制成一定浓度的溶液。
然后取 1 mL 溶液，加入 1 mL 5%的苯酚溶液和 5mL 浓硫酸，摇匀后在沸水浴中加热 15 分钟，冷却至室温后，在 490 nm 处测定吸光度。
香菇多糖的提取实验报告
香菇多糖的提取实验报告1. 掌握香菇多糖的提取方法；2. 了解香菇多糖的物化性质；3. 研究香菇多糖的抗氧化活性。
实验原理：香菇多糖是一种高分子多糖，具有多种保健功效，如抗氧化、抗肿瘤、促免疫等。
香菇多糖的提取方法有多种，其中较为常用的是热水浸提法和酸碱法。
热水浸提法是指将香菇粉末加到一定的温度下的水中，随后进行浸提，加热时间和浸提时间是影响提取率和质量的关键因素。
酸碱法是指将香菇粉末加入一定比例的酸和碱溶液中，进行水解，随后用酒精沉淀，最后用稀酸或碱溶解，并用冷醇进行沉淀和洗涤，得到香菇多糖。
实验材料：香菇粉末、蒸馏水、NaOH、HCl、酒精、醋酸钠、DPPH、卡拉菲指示剂。
实验步骤：实验一：热水浸提法提取香菇多糖1. 取4g香菇粉末，加入200mL蒸馏水中，加热至80℃，并保持2h；2. 将提取液用纱布过滤，分别收集滤液；3. 将滤液浓缩至大约50mL，用三倍体积的酒精沉淀，过滤并收集沉淀；4. 重复上述步骤2和步骤3，直至香菇多糖的浓度达到所需浓度为止。
实验二：酸碱法提取香菇多糖1. 取4g香菇粉末，加入100mL0.1mol/L NaOH中，进行水解，保持100℃，2h；2. 加入等量的0.1mol/L HCl至酸度为2，用酒精沉淀；3. 用10%醋酸钠溶液洗涤沉淀，并用稀棕黑色指示剂观察，直至洗涤液呈现淡黄色；4. 用酒精洗涤沉淀，分别重复上述步骤2-3，将洗涤干燥的沉淀溶解后，混合，加热水浴，调节pH至7左右，沉淀多糖，洗涤，干燥得到香菇多糖。
实验三：测定香菇多糖的抗氧化活性1. 取一定量的DPPH溶液（30mg/L），加入1mL香菇多糖液体，反应30min；2. 测定吸收值，计算香菇多糖的抗氧化活性。
实验结果：通过实验一和实验二分别提取了香菇多糖，得出了两种不同的提取方法的多糖成品。
经过实验三，测得香菇多糖的抗氧化活性，根据吸收值的大小可以判断多糖的抗氧化强弱。
实验结论：热水浸提法和酸碱法提取香菇多糖都是有效的提取方法。
入党申请书
香菇多糖提取条件的优化研究2007-8-14 来源：中国食品机械设备网摘要：香菇营养丰富、味道鲜美，是我国传统的药食两用食品。
1957年，L.Hlueas首先开展了真菌抗肿瘤的研究，他发现美味牛肝菌的子实体提取液对小白鼠的肉瘤Ｓ180有明显的抑制作用。
香菇营养丰富、味道鲜美，是我国传统的药食两用食品。
1957年，L.Hlueas首先开展了真菌抗肿瘤的研究，他发现美味牛肝菌的子实体提取液对小白鼠的肉瘤Ｓ180有明显的抑制作用。
1968年，日本学者千原吴朗首先利用热水从香菇子实体中分离出能抑制肿瘤的物质，并对其进行了分析测定，证实此类物质主要是一些高分子多糖(LNT)，它能提高巨噬细胞的吞噬能力，诱导白细胞介素-l(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF)的生成；促进T淋巴细胞增殖，诱导其分泌白细胞介素-2(IL-2)；提高B淋巴细胞活性，增加多种抗体的分泌，增强机体的体液免疫调节功能，从而增强机体的抗病能力。
现有的研究表明[1-7]：香菇多糖有多种生理功能，主要的有：免疫调节、抗突变、抗肿瘤、抗感染、抗疲劳、降血脂、降胆固醇、抗衰老等。
香菇多糖的提取主要是通过水提醇沉法，但得率较低，本文拟通过正交试验，优化其提取条件，以提高其得率。
1 材料和方法1.1实验材料1.1.1材料香菇：市售。
1.1.2试剂：浓硫酸、苯酚、葡萄糖(以上均为分析纯)95%的食用乙醇。
1.2试验方法1.2.1 多糖提取方法香菇→粉碎(60目)→蒸馏水浸提→过滤→上清液加3倍酒精沉淀多糖→离心(4000转／分)→蒸馏重溶解→测定。
1.2.2测定方法苯酚一硫酸法[8]。
1.2.3 试验设计现有的研究结果表明，影响多糖提取得率的主要因素有：温度、时间、料水比等。
根据预实验结果，选择料水比、浸提温度、浸提时间3项为考察因素，各取3个水平，进行(33)正交试验设计(见表1)。
表1 因素水平表Table 1 Test design of factor and levelA 料水比B 浸提时间／hC浸提温度／0C2.结果正交试验结果见表2，方差分析结果见表3。
高压热水浸提法提取香菇多糖工艺优化
高压热水浸提法提取香菇多糖工艺优化
简介：
香菇是一种营养丰富、风味独特的食用菌，其中的多糖具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化等多种功效。
本文旨在优化高压热水浸提法提取香
菇多糖的工艺，以提高多糖提取效率和产率。
一、实验材料和仪器
（略）
二、实验步骤
1. 香菇的预处理：（略）
2. 热水浸提工艺的优化探索：
在实验室中，我们探索了不同的工艺参数对高压热水浸提法提取香
菇多糖的影响。
下面是具体的操作步骤：
（略）
三、结果与分析
1. 高压热水浸提法提取香菇多糖的效果评价：
通过测定不同参数下提取液中多糖含量，我们评价了不同工艺条件
下的多糖提取效果。
结果表明，（略）
2. 工艺参数对多糖提取的影响分析：
我们分析了不同参数对多糖提取效果的影响，并得出以下结论：（略）
四、工艺优化
结合实验结果和分析，我们对高压热水浸提法提取香菇多糖的工艺参数进行了优化。
我们主要优化了以下几个方面：
（略）
五、结论
通过本次实验，我们得出了以下结论：
（略）
最后，本文优化了高压热水浸提法提取香菇多糖的工艺，明确了适宜的工艺参数，并获得了较高的多糖提取效率和产率。
这一工艺优化结果为提取香菇多糖的应用研究提供了重要参考依据，对于香菇多糖的开发和利用具有重要意义。
响应面法优化香菇胞外多糖提取工艺
响应面法优化香菇胞外多糖提取工艺摘要：采用单因素实验研究醇沉时间、乙醇浓度和发酵液pH对香菇（Lentinula edodes）发酵液中提取胞外多糖产量的影响，结果表明最佳醇沉时间为16 h，乙醇浓度为80%，pH为8。
在单因素实验基础上采用Box-Behnken响应面设计法优化香菇发酵液中胞外多糖提取工艺，最佳提取工艺为：醇沉时间17.71 h，乙醇浓度78.66%，pH 7.93。
在此条件下，香菇胞外多糖产量达到3.15 g/L，与模型预测值3.08 g/L接近。
关键词：香菇；胞外多糖；Box-Behnken设计；响应面法；提取条件香菇多糖是目前临床上广泛应用的免疫增强剂，广泛应用于恶性肿瘤的辅助治疗，可有效改善患者免疫功能，增强化疗疗效并降低毒副反应，使患者生存质量明显提高[1-4]。
目前香菇多糖多从子实体中提取，存在生产周期长、耗能大、产量和提取率低等问题[5-7]。
活泼的研究表明，香菇发酵液含有与香菇子实体相同的营养成分，而且含量均高于香菇子实体，尤其是钙、镁、多糖、异亮氨酸、亮氨酸含量很高[8]。
因此，利用廉价农副产品做原料，采用液体深层发酵技术不仅可以规模化培养香菇菌丝体，还可以从发酵液中提取香菇多糖。
此技术已成为降低香菇多糖生产成本、提高生产效率的有效途径[9]。
目前，从香菇发酵液中提取胞外多糖（extracellular polysaccharide，EPS）的研究甚少，特别是以响应面法用于优化香菇胞外多糖提取的工艺尚无报道。
因此，笔者通过响应面分析法优化香菇胞外多糖提取工艺，为从发酵液中提取香菇多糖的工业化生产提供参考。
1材料与方法1.1供试菌株香菇（Lentinula edodes）66#菌株由陕西省食药用菌工程技术研究中心提供。
1.2培养基斜面培养基（CPDA培养基）：20%马铃薯、2%葡萄糖、2%琼脂、0.3% KH2PO4、0.15% MgSO4·7H2O、0.001% VB1、pH自然。
复合酶协同高压热水浸提法提取香菇多糖的研究
复合酶协同高压热水浸提法提取香菇多糖的研究近年来，人们对天然植物提取物的需求不断增加，因为它们可以用于制备保健品、药品和食品等多种领域。
香菇作为一种常见的食用菌，其多糖具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等多种生物活性，是一种重要的天然植物提取物。
然而，传统的提取方法存在提取效率低、操作复杂等问题。
因此，本文研究了一种新的提取方法——复合酶协同高压热水浸提法，以提高香菇多糖的提取效率。
1. 研究背景香菇是一种营养丰富的食用菌，含有丰富的多糖、蛋白质、氨基酸等营养成分。
其中，香菇多糖是一种高分子多糖，具有多种生物活性，如抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、降血脂等功效。
因此，香菇多糖在食品、保健品、药品等领域有广泛的应用前景。
目前，香菇多糖的提取方法主要有水提、酸提、碱提、酶解等多种方法。
其中，水提法是一种简单、易操作的提取方法，但是提取效率较低。
酸提法和碱提法虽然提取效率较高，但是存在环境污染和对多糖分子结构的破坏等问题。
酶解法可以提高多糖的提取效率，但是酶解剂价格较高，成本较高。
因此，研究一种高效、环保、低成本的香菇多糖提取方法具有重要的意义。
2. 研究方法本研究采用复合酶协同高压热水浸提法提取香菇多糖，具体步骤如下：（1）香菇干品研磨成粉末。
（2）将香菇粉末加入热水中，加入复合酶，进行高压热水浸提。
（3）离心、过滤、浓缩提取液。
（4）加入醇沉淀，离心、过滤、干燥，得到香菇多糖。
3. 研究结果本研究采用复合酶协同高压热水浸提法提取香菇多糖，对提取条件进行了优化。
结果表明，最佳提取条件为：酶解剂质量比为0.2%、浸提温度为120℃、浸提时间为2小时、压力为0.6 MPa。
在此条件下，香菇多糖的提取率为2.48%。
同时，本研究还对提取的香菇多糖进行了理化性质分析。
结果表明，提取的香菇多糖具有较高的分子量和较好的糖原性质，其在水中形成的溶液呈现出较好的粘度和稳定性。
4. 研究意义本研究采用复合酶协同高压热水浸提法提取香菇多糖，提高了提取效率，同时减少了对环境的污染和对多糖分子结构的破坏。
超声波辅助复合酶法优化提取香菇多糖
2017.奉第2期俱第_%期）闽南师歡大擊奉报(自然科学版)Journal of Minnan Normal University (Nat. Sci.)No.2.2017 年General No.96超声波辅助复合酶法优化提取香菇多糖陈巧玲，郑艺梅，王丽娟，王兵丽，张泽宏，李奕雅，郑霖华(闽南师范大学生物科学与技术学院，福建漳州363000)摘要：利用超声波辅助纤维素酶与果胶酶复合法优化提取香菇多糖.方法：在单因素及正交实验基础上，以香菇 多糖提取率为响应值，采用Box-Benhnken法设计响应面实验，得出香菇多糖最佳提取工艺参数.结果：香菇多糖最佳提取工艺：料液比1:21.17 g/mL、复合酶比1.96:1、温度48.21 在此条件下提取率最高为3.09%，与预测值3.14%相比，相对误差1.59%，模型拟合良好.结论：与传统方法对比，超声辅助复合酶法明显提高香菇多糖得率，是较理想的提取方法.关键词：超声波辅助；复合酶法；正交实验；响应面优化中图分类号：0675.5 文献标志码：A 文章编号：2095-7122{2017)02-0039-09Optimum Technology on Extraction of Lentinan by Ultrasonic-assistedComposite Enzyme MethodCHEN Qiaoling, ZHENG Yimei, WANG Lijuan, WANG Bingli, ZHANG Zehong,LI Yiya, ZHENG Linhua(School of Biological Science and Biotechnology, Minnan Normal University, Zhangzhou, Fujian 363000, China)Abstract：Objective: ultrasonic -assisted composite enzymatic method for optimized extraction of Lentinan. method.Methods: based on single factor experiment and orthogonal experiment, choosed the yield of lentinan as the response value to designed the Box-Benhnken experiment. Results: the optimum conditions of extraction were solid-liquid ratio 1:21.17 g/mL, ratio of compound enzyme 1.96:1, temperature 48.21 X I.On this condition, the lentinan yield was 3.09%, compared with the theoretical value (3.14%), it has a smaller relative error at 1.59%, proving the regression model can well predict the actual situation. Conclusion: compared with the traditional method, ultrasonic -assisted enzymatic method increases the yield of lentinan, obviously, it was the ideal extraction methods.Key words：ultrasonic assisted extraction method; compound enzymatic method; orthogonal design; response surface optimization香兹effocfes(Berk.)Pegler)，担_子菌纲丨伞菌目口:薦科，.香截属，:慧我舞一种著名食甩菌w.我国栽培香菇的历史悠久产量居世界前列.香菇营养价值丰富，主要含有蛋白质、多糖、膳食纤维、碳水 化合物等多种人体所15的营养物质，经研究，香菇多糖因其具有提高人体免疫力、抑制肿瘤生长、能抗病 毒、抗氧化、缓解慢性肝炎等多方面的功效而受到广大研究人员的关注目前，已有将香菇用¥防治癌 症的临床治疗s除此之外，香菇还被用于治疗肺结核、糖尿疴等多种疾病，效果显著传统多糖的提取方法，水提法、酸碱提取法等受到技术水平的制约，存在耗时久、得率不高的缺点 经过改进，传统方法得到改善，酶法M和超声彼法有效避免了传统方法的缺陷.酶具有低量高效的优 点，将果胶酶和纤维素酶作用于香菇细胞壁，使多糖溶出，用此种方法提取多糖可减少使用成本;超声波技术，通过空化作用，使细胞破碎，加速目标提取物的溶出，在提高多糖得率方面效果明显.本文通过超声 辅助复合酶法提取香菇多糖，在单因素实验及正交实验基础上^利用响应面法优化提取：n艺.收稿日期：2017-02-27基金项目：福建省大学生«薪_创业训练计划碰目CfS翁高P〇:13：]6S号）作者简介：陈苟玲!;1986-)..女...植建脅安溪S人'樂验师..39 .2017 年闽南师蒞大学学报(自德科学版)1材料与方法1.1实验原料^■^(L e n t i n u s e d o d e s (Berk .)sing )1.2实验试剂葡萄糖、硫酸、蒽酮、95%乙醇.:AR 级，广东西陇化工股份有限公司；纤维素酶(酶活力50000 u /g )、果肢酶(酶活力30000 u /g ).:食品添加剂,桓生生物科技.1.3主要仪器和设备AR 224CN 电子天平（奥豪斯仪器有限公司）；Haier 冰箱(青岛海尔股份有限公司）;HH -6数显恒温水浴锅（金坛市鸿科仪器广);RE -201D 恒温水油浴锅(巩义市予华仪器有晦责任公司);RE -301旋转蒸发器(巩义市予华仪器有限责任公可);SHB-III 型循环水真空泵(河南省予华仪器有限公司800电动离心机(金 坛市江南仪器广);JY 99-IIDN 超声波细胞粉碎仪(宁波新芝生物科技有限公铕)；JJ -2组织粉碎机(金坛市 国旺实验仪器厂);UV -1100型紫外可见分光光度计(上海美谱达仪器有限公司);2XZ _2型旋片真空泵(浙 江黄岩天龙真空.泵1.4 J ：艺流程香燕^■供千一^•粉碎、过筛一^称貴一**提取（氣声辅助，超声波功率720 1)一抽滤^•离心一^浓缩一►醇 沉—离心—沉淀、烘干—测粗多糖.1.5实验方法1.5.1原料预处理香菇清洗、处理成小块后放人真'空干燥箱60丈干燥直至食用菌恒重后，粉碎，过60目筛，香菇粉装 人密封袋中，至于千燥器中备用.1.5.2蒽酮试剂的配制精密称取0.2000 g 蒽酮,加人浓H 2S 04 100 rnL 溶解，摇匀(现配现用）.1.5.3葡萄糖标准溶液(0.1 g /L )的配制准确称取干燥恒重的葡萄糖0.0100 g ，加造量超纯水溶解后，转移至100 mL 容量瓶中，加水定容至刻度，播匀.1.5.4 .香菇多耱的提取称取3.00 g 香菇粉，加60 mL 蒸馏水混合均勻，进行超声波细胞破碎.超海3：作5 s ，间隙5 s ，超声波 功率720 W ，总ZC 作时间20 min ；氣瑩f 50弋水浴0.5 h .称取果腔酶和纤维素酶，按一定比例加人食用菌溶液中（复合酶用量与底物量的比值为1.5%)反应1 h 后抽滤，滤液宁沸水中灭酶10 min ,温度降至室温 爵，将酶提取液于转数5000 r /min 下离心5 min ，取上滇液，75丈，0.09 P a 条件下浓缩到总土清液体积的 2/5-1/2.加入3倍体积的95%的乙醇溶液,4弋冰箱静置24 h .取扭后，4000 r /m in 离心20 min .将沉淀溶解、定容、稀释后，采用蒽酮-硫酸法测定多糖总量.1.6标准曲线制作蒽酮-硫酸法测香菇多糖含囊,>制作标准曲线的方法:紫外分光光度计在625 nm 条件下，测定吸光值，线性回归方程:y =0.0142x +0.0021，R 2=0.9993，y 为吸光值；x 为葡萄糖浓度，如图1所示，10 20 30 40 50 6070萄葡糖浓度/(hg/mL)6 5 4320.0.0.0,0.l§/««l i• 40 •图1标准曲线1:1 1.5:1 2:1 2.5:1 3:1眞:雜比.闺_ 2實:合酶比对_糠提联率的影响2丄2温度对提取香菇多糖的影响酶活力的关键影响因素是温度，因此温度直j 接影响香鹿多糖的提取率，温度过低，提取多糖不彻底; 温度过高，则会造成复合酶的失活，并i 还有可能导致多糖结构发生变化.如图3所示，随着温度的提髙， 香菇多糖的提取率先上升后下降，在50沱时，多糖提取率最大，纤维素酶的最适作用温度为45~55 t ：，果胶酶的最适作用温度为45~50弋，两种酶协调作用的结果下，选择50 T 为最优提取温度.陈巧玲，郑..艺梅卜繫:丽娼，m兵丽，张泽宏，李奕雅，郑:霖华：超声波辅助复合酶法优化提取香菇多糖第2期_1.7单廣素实验按照提取步骤，选取复合藤比（1:1、1.5:1、2:1、2.5:1、3:1)、提取温度(40弋、50^、60丈、70丈、80丈）、提取时间（1 h 、2 h 、3 h 、4 h )以及料液比（1:15 g /mL 、l :20 g /mL 、l :30 g /mL 、l :40 g /mL )四个因素进行单因素实验，提取香菇多糖，以多糖提取率作为考察指标，考察各因素对香菇多糖提取率的影响.1.8，麵实验根据单因素的实验结果，详见2.1，设计了 L 9(3)4的正交实验(表2)，因素水平如（表1).根据极差值 R 的大小确定各齿素对实验结果的影响顺序tI2l1.9响应面法实验设计根据正交实验极差分析，结果详见2.2,选择影响提取率的前三个因素进行3因素3水平响应面分析， 这样可以更好通过采用Box -Benhnken 法[〜*^香菇多糖的提取工艺进行更简洁的优化减少实验的组数.1.10多糠提取率多糖提取率Y (%)=复溶液中香菇多糖含量/所用香菇粉末总量xlOO %.2结果与讨论2.1单因素实验结果2.1.1复合酶.的比例对提取香菇多糖的影响如图2所示，香菇多糖提取率先増加后减少最后趋于稳定.在复合酶比2:1时，香菇多糖的提取率达 到最高.因此，选择复合酶比2:1为最优酶比.这与香菇本身的成分关系较大,香菇本身纤维素含量较少， 因此适当提高果胶酶与纤维素酶的复合比可以更加充分合理的提高酶的催化效率.* 41•12 34时间/h图4复合酶比对多糖提取率的影响2.1.4料液比对多糖提取率的影响如图5所示，在1:20 g /mL 条件下多糖提取率最高，这与张艳、陈春萍等B 的研究结果一致，他们在提 取温度55 Up H =5.48的条件下，分别用料液比1:15、1:20、1:30、1:40，时间1丨1，料液比增加多糖提取率随着提高舍料液比为1:20日中，，多糖提取欢果最好，提取率梟局，而料液比1:30之后，.多糖提取率下降.料撤 比对实验结果影响较大,若料液比太低，水量太少，多糖溶出不彻底；料液比过高，水量过多，除多糖外其 他物质溶出，对多糖造成影响，此种情况下多糖也有可能发生水解，结构发生破坏，导致多糖提取率下降. 结合实验结果，选择1:20 g /mL 为最优提取料液比.5厂4 -x1:15 1:20 1:30 1:40料液比/(g /mL )图5料液比对多糖■取率的影响2.2香菇多糖提取条件的正交优化设计根据单因素实验分析的结果，对上述四个单因素设计了 U (3)4的芘交实验(表1)，根据表2的极差 分析结果Rd >Ra >RL >RC ,得出各实验因素的影响顺序为d (料液比)>a (复合酶比）>h (温度)>c (时间）f由 此可见料液比对于香燕多糖的提取率影响最大而影响最小的因素为时间.2017年 闽南师蒞大学学报(自然科学版：)2.1.3时间对多糖提取率的影响如图4所示,多糖提取率整体鏡现先増加后减少的趋势.2 h 时多糖提取率最高，随着时间的増加，多 糖提取率减少并趋宁:平缓.说明在2h 时多糖溶出已经达到最优状态，继续增加提取时间，多糖被水解，导 致香菇多糖提取率下降，且费时，这与贺胜英、罗华峰等ts ]的研究结果一致，反应2 h 时提取率达到最高, 综合考虑时间成本，选择2 h 为最优提取时间.%/#©«*飧%/齋赵螬鹣飧• 42 •陈巧玲，郑艺梅，王丽娟，王兵丽，张泽宏，李奕雅，郑霖华：超声波辅助复合酶法优化提取香菇多糖第2期表1因素水平表水平复：合酶比(a).温度(b)/T：因素时间(c)/h液料比(a)1 1.5:140115:122:150220:13 2.5:160330:1表2. Lg.(3.)4IE:交设计表格及实繼■果实验号a b c d提取率/%11111 1.9621222 2.5831333 2.8642123 2.3652231 1.5662312 2.3273132 2.1883213 1.8593321 1.75K,7.40 6.50 6.13 5.27K, 6.24 5.99 6.697.08K, 5.78 6.93 6.607.07kij 2.47 2.17 2.04 1.76k2j 2.08 2.00 2.23 2.36k3j 1.93 2.31 2.20 2.36R0.540.310.190.602.3响应面法优化实验结果2.3.1响应面实验设计及结果根据正交实验极差分析结果，筛选料液比、复合酶比、温度为自变量，多糖提取率为响应值，采用Box- Benhnken法优化香菇多糖的提取工艺.香菇多糖提取率响应面因素水平如表3所示，设计方案及结果如表4所7K.表3响应面因素水平设计表因素-1因素水平和编码01料液比A152025复合酶比B 1.52 2.5温度c/t405060* 43 *2017 年闽南师范大学学报(自然科学版）表4响应面实验设计及结果实验普A B C香.菇多驗提取率/%1-1-10 2.202000 3.013-110 2.224101 2.655011 2.216-10-1 2.567-101 2.3381-10 2.589110 2.51100-11 2.63110-1-1 2.6112000 3.331301-1 2.531410-1 2.8015000 2.8916000 3.1217000 3.232.3.2数学模型的建立和数据分析将实验所得数据利用DeSign-Expert8.0软件进行二次多项回归拟合实验，所得二次回翁方程如下:Y= 3.12+0.15A-0.069B-0.085C-0.023AB+0.020AC-0.085BC-0.32A2-0.41B2-0.21C2.方程中:Y为多糖提取率/ %;A为料液比;B为复合酶比;C为温度/T.对模型进行方差分析，结果如表5所示，方差的模型显著性PcO.Ol，为极M著，表示模型具有意义;失 拟项>0.05,不显著,表明模型与实验值向的差异较小;决定系数胪与1越接近，表明该模型可以更好的预 测响应值['本实验的R2=0.9239>0.9,表明模型拟合程度较好，预测值和实测值间相关性较好，试验误差 不大，可直接采用®归方程分析、预测实际结果;R%=0.8260,证明该模型可解释82.6%的响应值的变化，而另外的17.4%的响应值的变化改模型无法解释，因此该结果表明，各个实验因素对响应值的影响为非简 单线性关系表5香菇多糖提取率的方差分析F值Prob>F显著性项平方和自由度均方模型 1.8190.209.440.0037氺氺A-料液比0.1910.198.900.0204氺B-复:合酶比0.03810.038 1.780.2240C-温度0.05810.058 2.720.1431AB 2.025E-0031 2.025E-0030.0950.7665AC 1.600E-0031 1.600E-0030.0750.7917• 44 •陈巧玲，郑.艺梅卜繫:丽娼，m兵丽，张藥宏，李奕雅，報霖华：超声波辅助复合酶法优化提取香菇多糖第2斯BC0.02910.029 1.360.2817A20.4410.4420.830.0026B20.7210.7234.000.0006C20.1810.188.470.0227残差0.1570.021失拟项0.02839.208E-0030.300.8222纯误差0.1240.030总离差 1.9516R2=0.9239心=0.8260is/Trofor’值桊f〇.〇i为极显著，用**表泰；〇.〇5为显署用*裹:i t2.3.3响座面分析图如图6-8响应面图所示，从等髙线形状看出，复合酶比所在的曲面较陡，这是由宁酶所具有的“微震 高效”的特点使得复合酶比对香菇多糖提取率的影响作用最明显;其次是料液比，料液比太低，g的产物 溶出不够彻底，料液比太高，传质动力就会受溶剂量影响，多糖溶出越多温度所代表的曲面最平缓，对 香截多糖提取率的影响作用最弱.如图6所示，在复合酶比小- 1.95:1、料液比小于21.3时，随着复合酶比和料液比的升高，多糖得率 随之増大，当复合酶比大宁1.95:1时，继续升高料液比，多糖得率呈现下降趋势，表明在一定范围内，复合 酶比和料液比表现出一定的交互作用，实际应用中可根据这一结果确定复合酶比和料液比，以便获得更 高的香难多糖得率.图6料液比与::眞合酶比对'香菇多擀提取率影响的响应面图如图7所示，温度48 X：左右、料液比1:21.3左右时，香菇多糖的提取率最高，料液比与温度表现出较 弱的交2作用，温度超过48 t：以后继续増加料液比对;提高多糖得率的影响较小.在较低的料液比下，超 过一定的温度范围，多糖得率随温度的升髙出现减少的趋势，原因'可能是在酶的最适温度时，多糖提取率 最高，之后超过酶的最适温度，多糖得率不再上升，反而随着温度的升髙呈现下降的趋势.• 45 •2017 年闽南师蒞大学学报(自德科学版)A:料液比留7料《比与緝度对'香菇多擀提取率影响的响应面图如图8所示，在复合酶比小^1.95:1时，随着温度的升髙，香菇多糖得率随之増加，当复合酶比大I3 1.95:1，温度对提高香菇多糖得率帮助不大，表明在一定范围内，复合酶比和温度有一定的交互作用.实际应用中，可利用这一实验结果指导生产，起到节约能源的效果、图__8复含酶比导温撵对香截多糠提取_率■响的响虛商图2.3.4优化提取参数和验证模型在实验得出的最优提取条件下（料液比1:21.17 g/mL，复合酶比1.96:1，提取温度48.21丈）进行3组 平行实验进行验证，实验结果如表6所示.验证实验的平均值为3.09%与囬归方程所得的预测值3.14%的误差为1.59%，表明在误差允许范围内，回归方程各个因素对多糖提取率的影响结果真实可篆• 46 •陈巧玲，郑.艺梅卜繫:丽娼，m兵丽，张藥宏，李奕雅，報霖华：超声波辅助复合酶法优化提取香菇多糖第2斯6讀斑矣蠢结果实翁辱多爾提取率.(％)1 3.072 3.123 3.083结论通过响应面Box-Bfmhnken法对香薛多糖的提取工艺进行优化及分析，建立超声辅助复合酶法提取 香菇多糖的数学模型，实验结果表明该模型拟合良好.通过试验结果分析得出，最优工艺条件为：料液比1:21.17 g/mL,复合酶比1.96:1，温度48.21 ^，在该条件下，香菇多糖提取率的预测值为3.14%烃过验证，得到实测平均值为3.09%，与预测值间误差为1.59%,进一步验证了响应面优化结果的可靠性.经过最优方案提取后，超声辅助复合酶法比复:合酶法提取香菇多糖的提取率2.59.%提商_了_ 19.3%左右.诙法.可以为 卖际生产_提供一•定的参考.参考文献：[1] 鉍川&，孔静，游丽_君，等.超声波辅助热水浸提##多#响座面.优化工艺及其抗氧牝活性的研究P],现代食品科技,2011, 27(04)： 452-456.[2] 宣丽，胡春氣齐森，低.温水提法对香兹*_自和多糖提取率的影响[J1.中国调味品，2014, 39(11): 23-26.[3] 王虜佳，曹缸，香菇多*的研究进展[U.解放军药学学报，2011，27(05): 451-455.[4] 吕與英，范雷法，张作法，等.香蔹多搪研究进展[J].浙江农业学报,2009, 21(02); 183-188.[5] 朱俊访，李博.香菇多糖提取工艺的研究进展[J].中筒民族民间医铸，2013, (01): 43.问王文文李小丹，黄齐磊，等.纤维素酶协.同高压■热水提取香-藥多糖的研究[J].中獨食品添加劑；2015, (04): 106-110.[7] 张艳，歡养苹魏兵.复合鱗法提取香菇多糖的工艺研宠.[J], «山学見2012.,. 26(4): 31-34.[8] 贺胜英，穸华峰，王强.复合:酶提取香菇多■糖的研究[J]..安徽农业科学，2012, 40(13): 7907-7901, 7931.[9] 陆姆，.武.哲斌，.康长青，,氣声波補助提取香菇多糖的研究[J].安徽农.A科学，2013., 38(33): 18625_1862C 186_6_3.[:10]念■保义，王铮敏，黄河宁，超声提取、超滤分离香菇多糖工艺的研究[H,化，学与生物工.程，2004, (04): 16-18.[.11]王亚.飞，毕紅梅.超声波法提取香菇多糖的研.究[J].内蒙古科技与经济，_2004, (SI);. 1'24-125,[1.2]杜小氣接.颖张晓楠，等.正交实_教法4选香菇多糖的捉取工艺及其成酸酯化研究.〇].现我生物S学进展，2008, 8(12):2484-2486, 2493.[13] 胡成旭，椟欣.彤冯永宁，等.响雇面法优化云芝.多糖提取条件的研究[J].食品工业科技,_2007, 28(07): 124-126, 130.[14] 朱磊，王振宇，周芳.响_应面法优化擻波辅助提取黑禾■耳多糖工艺研究[J]..中国食品学报，2009,9(02): 53-60.[_15]王明张小杰，王涛，等.响应©法优化香椿叶多糖的提取条件[J],.食品科学,2010, 31(04): 106-110.[:16]王明艳，鲁加峰，王晓氣等，响.应面法犹化天.冬多糖的提取条件[J],食品科学，2010, 31(06): 91-95,[17] Haaland PD. Statisitic problem solving in Experimental design in biotechnology[M]. New York and Basel Marcel Dekker Inc,1989.[18] 万阅，齐计英，曾红，等.响应面法优化香菇多糖的超声辅助提取工艺[J].生物技术通报，2015, 31(01): 79-85.[19] 余杰，崔鹏举，卓健勇，等.响应面分析方法在鸡腿菇多糖提取中的应用[J].食品科学，2009, 30(08): 93-96.[20] Bendahou A, Dufresne A, Kaddami H, et al. Isolation and structural characterization of hemicelluloses from palm Phoenixdactylifera L[J]. Carbohydrate Polymers, 2007, (68): 601-608.[责任编辑：钟国翔]* 47 *。
香菇提取多糖实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解香菇多糖的提取方法及其原理。
2. 掌握香菇多糖的提取工艺流程。
3. 优化提取条件，提高香菇多糖的提取率。
二、实验原理香菇多糖是一种具有多种生物活性的多糖类物质，主要存在于香菇子实体中。
香菇多糖的提取方法有热水提取法、酸碱提取法、酶解提取法等。
本实验采用热水提取法，通过加热香菇子实体，使香菇多糖溶解于水中，再通过离心、沉淀等步骤提取香菇多糖。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 香菇子实体：市售优质香菇- 蒸馏水：分析纯- 无水乙醇：分析纯- 95%乙醇：分析纯- NaCl：分析纯- 乙酸：分析纯- 乙醚：分析纯- 磷酸盐缓冲液：pH 7.42. 实验仪器：- 电子天平- 烧杯- 离心机- 恒温水浴锅- 真空干燥箱- 超声波清洗器- 精密移液器- 滤纸- 漏斗- 玻璃棒四、实验步骤1. 香菇子实体的预处理- 将香菇子实体洗净，去除根部，切成小块。
- 将香菇小块放入真空干燥箱中低温烘干，直至水分含量低于10%。
- 将烘干的香菇小块研磨成粉末。
2. 香菇多糖的提取- 称取20g香菇粉末，置于250ml烧杯中。
- 加入100ml蒸馏水，于石棉网上加热至沸，并不断搅拌，煮沸30min。
- 用滤纸过滤，收集滤液。
- 将滤渣再用100ml蒸馏水煮沸30min，过滤，收集滤液。
- 将两次滤液合并，加热浓缩至20ml。
3. 香菇多糖的纯化- 将浓缩后的滤液加入95%乙醇，搅拌并冷却至室温，静置1h。
- 以4000r/min的转速离心10min，收集沉淀。
- 将沉淀置于真空干燥器中干燥，得到粗香菇多糖。
4. 香菇多糖的鉴定- 将干燥后的粗香菇多糖用蒸馏水溶解，制成一定浓度的溶液。
- 采用高效液相色谱法对香菇多糖进行鉴定。
五、实验结果与分析1. 香菇多糖的提取率- 通过实验，得到香菇多糖的提取率为1.5%。
2. 香菇多糖的鉴定- 通过高效液相色谱法，鉴定出香菇多糖的主要成分是β-1,3-葡萄糖。
香菇多糖的复合酶法提取
环保性
复合酶法提取过程不需要使用强酸、强碱或 有机溶剂，对环境友好。
可重复性
复合酶法提取工艺稳定，可重复性强，适合 大规模生产。
复合酶法提取的局限性
成本高
对某些物质提取效果不佳
复合酶的生产成本较高，导致整个提 取过程的成本增加。
对于某些结构特殊的物质，复合酶法 提取效果可能不佳。
酶的来源有限
用于提取香菇多糖的酶主要来源于微 生物发酵，来源有限制。
参考文献
参考文献1
香菇多糖的复合酶法提取工艺研究，探讨了不同酶种类和浓度 对提取效果的影响，为优化提取工艺提供了理论依据。
参考文献2
香菇多糖的生物活性研究，分析了香菇多糖在免疫调节、抗肿 瘤、降血糖等方面的生物活性，为多糖的应用提供了科学依据
。
参考文献3
香菇多糖的化学结构与功能关系，探讨了多糖的分子量、单糖 组成等因素与其生物活性的关系，为多糖的结构改造和功能优
抗肿瘤
香菇多糖对多种肿瘤细胞具有 抑制作用，能够诱导肿瘤细胞 凋亡，抑制肿瘤生长和扩散。
降血糖
香菇多糖能够降低血糖水平， 对糖尿病具有一定的辅助治疗 作用。
抗氧化
香菇多糖具有抗氧化活性，能 够清除自由基，延缓衰老。
香菇多糖的来源和分布
来源
香菇多糖主要来源于香菇的子实体和菌丝体。
分布
香菇多糖主要分布于香菇的细胞壁中，其中子实体和菌丝体中含量较高。
香菇多糖的提取方法
传统提取方法
包括热水提取、酸碱提取等，但提取 效率较低，且容易造成环境污染。
复合酶法提取
利用多种酶分解香菇细胞壁，释放出 香菇多糖，具有提取效率高、环保等 优点。
02 复合酶法提取原理
酶法提取的原理
香菇多糖提取工艺的优化及其体外抗菌试验研究
香菇多糖提取工艺的优化及其体外抗菌试验研究下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!香菇多糖提取工艺的优化及其体外抗菌试验研究一、引言香菇，作为全球广泛消费的食用菌，富含多种生物活性物质，尤其是香菇多糖，具有显著的免疫调节、抗肿瘤和抗氧化等生物活性。
香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究
香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究一、研究背景香菇是一种常见的食用菌，具有丰富的营养价值和药用价值。
其中，香菇多糖是一种重要的生物活性物质，具有抗肿瘤、抗氧化、免疫调节等多种生物学活性。
因此，提取香菇多糖并测定其含量具有重要的意义。
二、香菇多糖提取工艺1. 原料准备：选择新鲜的香菇作为原料，洗净后切碎备用。
2. 提取方法：采用水提法进行多糖提取。
将切好的香菇放入适量的水中，加热至沸腾后继续加热2小时左右，然后过滤得到提取液。
3. 沉淀分离：将提取液加入3倍体积的绝对乙醇中搅拌均匀后静置12小时以上，使得多糖沉淀。
然后将沉淀分离出来并用纯水洗净。
4. 浓缩干燥：将分离出来的多糖溶液进行浓缩至一定浓度后干燥得到香菇多糖粉末。
三、香菇多糖含量测定方法1. 蒽醌法：将香菇多糖与蒽醌反应生成有色化合物，通过比色法测定其吸光度从而计算出含量。
具体操作步骤为：取适量的香菇多糖溶液加入适量的蒽醌溶液，加入硫酸后混匀，放置15分钟后用紫外分光光度计测定吸光度。
2. 酚-硫酸法：将香菇多糖与酚反应生成有色化合物，通过比色法测定其吸光度从而计算出含量。
具体操作步骤为：取适量的香菇多糖溶液加入适量的稀硫酸和5%的酚溶液，混匀后放置15分钟后用紫外分光光度计测定吸光度。
3. 高温高压消解法：将香菇多糖样品进行高温高压消解后使用紫外分光光度计进行测定。
具体操作步骤为：取适量的香菇多糖样品加入稀酸后进行高温高压消解，然后用紫外分光光度计测定吸光度。
四、总结提取香菇多糖的工艺主要是采用水提法，然后进行沉淀分离和浓缩干燥。
含量测定方法主要有蒽醌法、酚-硫酸法和高温高压消解法。
这些方法都可以有效地提取香菇多糖并测定其含量，为香菇的开发利用提供了重要的技术支持。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
［６］
Ｄ ｕ ｂ ｏ ｉ ｓ Ｍ ，Ｇ ｉ ｌ ｌ ｅ ｓ Ｋ Ａ， Ｈａ ｍｉ ｌ ｔ ｏ ｎ Ｊ Ｋ， ｅ ｔ ａ １ ．Ｃ ｏ ｌ ｏ ｉ ｆ ｍ ｅ ｔ ｒ ｉ ｃ
（ 黑 龙 江 省 绥 化 学 院 食 品 与制 药 工程 学 院 ，黑 龙 江 绥 化 １ ５ ２ ０ ６ １ ）
摘 要 ：研 究 了采 用 微 波 协 同高 压 热 水 浸 提 法 从 香 菇 中提 取 活 性 多 糖 的 最 适 条 件 。 通 过 单 因素 试 验 和 正 交 试 验 ，探 讨 了 料 液 比 、微波 功 率 、微 波 处 理 时 间 、高 压 浸 提 时 间 及 高 压 浸 提 温 度 对 香 菇 多 糖 提 取 率 的 影 响 ，并 以 香 菇 多 糖 提 取 率 为评 价 指 标 ，优 化 提 取 工 艺 。试 验 结 果 表 明 ，微 波 协 同 高 压 热 水 浸 提 法 提 取 香 菇 多 糖 的最 适 条 件 ：料 液 比为 １ ： ５ ０（ ｇ： ｍ Ｌ ） ，微 波 功 率 为 ６ ４ ０ Ｗ ，微 波 处 理 时 间 为 ６ ｍ ｉ ｎ ， 高压 浸提 温度 为 １ １ ５ ｏ Ｃ，高 压 浸 提 时间为 １ ０ ０ ｍｉ ｎ 。在 此 条 件 下 ，香菇 多 糖 的 提 取 率 为 １ ３ ． ８ ％。
关 键 词 ：香 菇 ；多糖 ；微 波 ；高 压 ； 提 取 中 图分 类 号 ：Ｓ ６ ４ ６ 文 献 标 志 码 ：Ａ ． 文章 编 号 ：０ ５ ２ ８ ． ９ ０ １ ７ （ ２ ０ １ ４ ） ０ １ － ０ ０ ８ ５ － ０ ３
香菇 （ Ｌ ｅ ｎ ｔ ｉ ｎ ｕ ｓ ｅ ｄ ｏ ｄ ｅ ｓ ） 含 有 多 种 有 效 药 用 成 分 ，尤其 香 菇多 糖 是 一 种 重 要 的 生 物 反应 调 节 剂 。 它 通过 刺激 免疫 细胞 成 熟 、分化 和增 殖 ，改善 宿 主 机 体平衡 ，达到 恢 复 和 提 高 宿 主 细 胞 对 淋 巴 因子 、 激 素和 其他 生理 活性 因子 的反应 性 ，且 由于是 间 接 作 用 ，所 以毒 副 作 用 小 … 。 因 此 ，建 立 高 效 经 济
收稿 Ｆ ｔ 期 ：２ ０ １ ３ － ０ ９ － ２ ５
香 菇经 除 杂 、干燥 、粉碎 等 预处理 后 ， ． 得到 香
菇 子实 体 干粉 。准确 称取 香菇 粉若 干份 ，每 份 １ ｇ 。
将 每份 香菇 粉先 进行 微 波处理 ，然 后进 行 高压热 水
基 金 项 目： 国家 自然 科 学 基 金 （ ２ １ ２ ０ １ １ ２ ８ ） ； 黑龙 江 省绥 化 学 院科 学 技 术 研 究 项 目 （ Ｋ １ １ ０ １ ０ ０ ３ ） 第１ 期
文献 著 录格 式 ：王 广 慧 ，于 德 涵 ．香菇 多 糖 提 取 条 件 的 优 化 研 究 ［ Ｊ ］ ．浙 江 农 业 科 学 ，２ ０ １ ４（ １ ） ：８ ５—８ ７
因
香菇多糖提取条件 的优 化研究
王 广慧 ，于德 涵
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 试 验 材 料
多糖提 取 率／ ％ ＝多糖量／ 子实 体干 重 ×１ ０ ０ 。
１ ． ３ 微 波协 同高压热 水浸 提法 提取 香菇 多糖
以香菇 为试材 ，购 于绥 化 市华辰 超 市 。供试 药 剂有 ３ ，５ － 二硝 基水 杨酸 （ Ｄ Ｎ Ｓ ） 、苯 酚 、无 水 乙 醇 、三氯 乙酸 、浓 硫 酸等 ，均 为 国产分 析纯 。试 验
的香 菇 多糖 提取 方法 具 有重 要 的现实 意义 。本 研 究 通 过单 因素 试验 和正 交 试验 探讨 了微 波 协 同高压 热
仪器 有 ７ ５ ２型紫外 可见 分光 光度 计 ，上 海 菁华科 技 仪 器有 限 公 司 ；Ｆ Ｗ１ ０ ０型 高 速 万 能 粉 碎 机 ，天 津
市 泰斯 特仪 器有 限公 司 ；Ｄ Ｋ ９ ８ 一 Ｉ Ｉ Ａ型 电热恒 温水
浴 锅 ，天津 市 泰斯 特 仪 器有 限公 司 ；Ｙ Ｘ Ｑ 。 Ｌ Ｓ ． １ ０ ０ Ｓ
Ⅲ型立 式 压 力 蒸 汽 灭 菌 锅 ，上 海 博 讯 实 业 有 限 公 司 ；Ｍｉ ｄ ｅ ａ Ｅ Ｇ ８ ２ ３ Ｌ Ｃ ． Ｎ Ｓ型微 波 炉 ，佛 山市 美 的微 波 电器 制造 有 限公 司。 １ ． ２ 测 定方 法及 试验 参数
作者简 介：王广慧 （ １ ９ ７ ３ 一 ） ， 黑龙江绥化人， 副教授， 硕士， 研究方向为生物活 性物质的提取。 Ｅ － ｍ ａ ｉ ｌ ： ｗ ａ ｎ ￣Ａ ８ ７ ＠ｓ ｉ ｎ ａ ． ｃ ｏ ｎ ｒ 。
Ｚ ｈ ａ ｏ Ｗ ，Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ｘ Ｊ ， Ｄｅ ｎ ｇ Ｗ Ｗ ，ｅ ｔ ａ １ ．Ａｎ ｔ ｉ ｏ ｘ ｉ ｄ ａ ｎ ｔ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｉ ｅ ｓ
水 浸提 法从 香菇 中提 取 活 性 多 糖 的 最 佳 工 艺条 件 ， 以期能 为开 发利 用香 菇 资 源开辟 一条 新 的途 径 。
以葡萄 糖 为 标 准 样 ，用 Ｄ Ｎ Ｓ法 测 定 还 原 糖 含
量 ，用 苯 酚一 硫 酸法 测定 总糖 含量 。
多 糖 ＝总糖 一 还 原糖 。
ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｆ ｏ ｒ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｓ ｕ ｇ ａ ｒ ｓ ａ ｎ ｄ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｓ ｕ ｂ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ｓ［ Ｊ ］ ．