实验四蛋白质的盐析作用和透析

可编辑版
3
• 三、 材料与试剂 1、实验材料：鸡蛋 2、实验试剂 蛋白质氯化钠溶液：取20ml蛋清，加蒸馏水
200ml和饱和氯化钠溶液100ml，充分搅匀后， 以纱布滤去不溶物（加氯化钠的目的是溶解 球蛋白）。 其他试剂：①硫酸铵粉末 ②饱和硫酸铵溶液
可编辑版
4
3、实验器材
试管及试管架、滤纸、研钵、烧杯、玻璃棒 、漏斗
可编辑版
7
• 五、思考题
高浓度的硫酸铵对蛋白质溶液溶解度有何影 响，为什么？
可编辑版
8
实验四 蛋白质可逆沉淀和不可逆沉 淀的比较
可编辑版
9
• 一、目的要求 了解蛋白质的沉淀反应、变性作用 。 学习透析操作技术。
• 二、实验原理 蛋白质分子在水溶液中，由于其表面形成了 水化层和双电层而成为稳定的胶体颗粒，所 以蛋白质溶液和其他亲水胶体溶液相似。
可编辑版
12
不可逆沉淀反应—蛋白质发生沉淀时，其 内部结构空间构象遭到破坏，蛋白质分子 由规则性的结构变为无秩序的伸展肽链， 使原有的天然性质丧失，这时蛋白质已发 生变性。这种变性蛋白已不能再溶解于原 来溶剂中。
可编辑版
13
• 三、试剂和器材
• 1、实验材料：鸡蛋
• 2、实验试剂
蛋白质溶液：取5ml鸡蛋清，用蒸馏水稀释 至100ml，搅拌均与后用4-8层纱布过滤，新 鲜配制。
蛋白质盐析溶液
其他试剂：0.1%硫酸铜溶液
• 3、实验器材
试管及试管架、透析袋、玻璃棒、线绳、烧杯
可编辑版
ห้องสมุดไป่ตู้14
• 四、操作方法
（1）取1支试管，加入约1ml蛋白质溶液，加 入1%硫酸铜溶液3-4滴，观察沉淀的生成。
（2）在蛋白质可逆沉淀反应中，将用硫酸铵盐 析所得的清蛋白沉淀倒入透析袋内，用线绳 或透析袋夹江透析袋口扎紧，把透析袋浸入 盛有蒸馏水的烧杯中进行透析，并经常用玻 璃棒搅拌，每隔15分钟换水一次，仔细观察 透析袋中的蛋白质沉淀变化情况。
可编辑版
15
• 五、思考题 鸡蛋清为什么可用作铅中毒或汞中毒的
解毒剂？
可编辑版
16
实验三 蛋白质的盐析作用
可编辑版
1
• 一、目的要求 了解蛋白质的的沉淀反应 学习盐析操作技术
• 二、实验原理 用大量中性盐使蛋白质从溶液中沉淀析出
的过程称为蛋白质的盐析作用。蛋白质是亲 水胶体，蛋白质溶液在高浓度中性盐的影响 下，蛋白质分子被中性盐脱去水化层，
可编辑版
2
同时所带电荷被中和，结果蛋白质的胶体 稳定性遭到破坏而沉淀析出。析出的蛋白 质仍保持其天然性质，当降低盐的浓度时， 还能溶解。因此，蛋白质的盐析作用是可 逆过程。
可编辑版
5
• 四、操作方法
（1）取一个烧杯，加入10ml蛋白质氯化钠溶 液和10ml饱和硫酸铵溶液，混匀，静置约 10min，则球蛋白沉淀析出；
（2）过滤后向滤液中加入硫酸铵粉末，边加边 用玻璃棒搅拌，直至粉末不再溶解，达到饱 和为止，此时析出的沉淀为清蛋白；
可编辑版
6
（3）静置，倒去上清液，取部分清蛋白沉淀， 加水稀释，观察它是否溶解，留取部分作 透析用。
可编辑版
10
但是，在一定的物理化学因素影响下， 由于蛋白质胶体颗粒的稳定条件被破坏， 如失去电荷、脱水、甚至变性，而以固体 形式从溶液中析出，这个过程称为蛋白质 的沉淀反应。这种反应可分为可逆沉淀反 应和不可逆沉淀反应。
可编辑版
11
可逆沉淀反应—蛋白质虽已沉淀析出，但 它的分子内部结构并未发生显著变化，如 果把引起沉淀的因素去除后，沉淀的蛋白 质能重新溶于原来的溶剂中，并保持其原 有的天然结构和性质。利用蛋白质的盐析 作用和等电点作用，以及在低温下乙醇、 丙酮短时间对蛋白质的作用等所产生的蛋 白质沉淀都属于这类沉淀反应。