生化检验标本
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第二章
生化检验标本
第一节 标本的采集
第二节 标本的处理
第三节 影响体液成分的因素
第一节 标本的采集
标本的正确采集与保存是生化检验 结果是否可靠的前提,而这种差异往往 不易被检测者发现,因此,必须给予重 视。
生化检验标本主要是血液,其次是 尿液,此外还有脑脊液、胃液、腹水、 唾液等。
一、血液标本的采集
(三)麝香草酚 可抑制尿中细菌生 长,用量1g左右,也可用麝香草酚异丙 醇溶液(10%),5 ml左右,适合作尿 钾,钠、钙、 AA、糖、尿胆原、胆红 素测定,不适合作尿蛋白测定。
三、标本的分离和储存
血液标本采集后,如需要血浆或血清者, 应及时分离,以免红细胞与血清或血浆之间物 质的转移和红细胞对血清中某些物质的利用。 血浆的分离:取血后与抗凝剂充分混匀后, 可立即离心分离,2500~3000转/min,5min。 血清的分离:取血后将试管放37℃水浴放 置30min左右,离心分离。
血液标本最常用的是静脉血。 (一)静脉采血法 1. 采血部位:最常用的是肘静脉, 此外,也可采用手背静脉、外踝静脉、 颈外静脉。 2. 取血容器:最好采用一次性注射 器和试管。
3. 注意事项: ( 1 )如遇到病人采血发生眩晕,平 卧休息,必要时嗅吸芳香氨酊,掐人中。 ( 2 )防止溶血:造成溶血原因,穿 刺不顺利,局部组织损伤过多,取血容 器有水,血液注入试管时不取下针头, 抗凝血的剧烈震荡。
( 3 )避免充血和血液浓缩:止血带 压迫时间不能过长,最好不超过半分钟。 ( 4 )抽血时,只能向外抽,不能向 内推。以免注人空气。 (5)肢体进行静脉输液时不宜在同 侧静脉采血。
(一) 动脉采血法
一般多采用股动脉,其他部位如 桡动脉,肱动脉也可采用,在博动明显 处,常规消毒,刺入动脉后,血液自行 涌入注射器,达所需血量,用干棉球压 迫止血。
(二)氟化钠 抗凝作用弱,常与草酸钾混 合使用, NaF4g,草酸钾 6g,溶解至 100ml,每管 加0.1ml, 80℃以下烘干备用,可抗凝2~3ml血。 优点:防止糖酵解,用于血糖测定。
(三)肝素 是一种含硫酸基团的粘多糖, 具有多方面抗凝作用。
优点:抗凝作用强(抗凝用量0.1mg/ml血) 不影响血细胞体积,不易溶血,配成 1g/L水溶 液,每管0.5ml, 60℃烘干备用,久置而失效, 价格贵。
(三)运动 与运动时间、强度 有关。适度运动,血糖、尿酸、乳 酸 增 加 , ATP 减 少 , 血 清 AST、 LDH、CK、ALP 增加,运动员,血 清Ch、TG减少,HDL-C增加。 (四)年龄 (五)性别 (六)体形
二、饮食和药物的影响
(一)饮食 因饮食量和食物性质 而定,一般血糖,铁、钾、总脂、 TG 、ALP 升高,高蛋白饮食, BUN、磷、 尿酸、血氨升高,咖啡因饮料,儿茶酚 胺、血浆皮质醇、FFA升高,饮酒,乳 酸、尿酸、 ALT、GGT 升高。餐后 12 小时取血。 (二)药物
二、防腐剂
收集24小时尿液时,为防止细菌生 长而影响检验结果,应使用防腐剂,常 用的有:
(一)甲苯(或二甲苯) 在尿液表 面形成一薄膜,防止细菌繁殖,防腐能 力较弱。用量10ml左右,适合作尿糖, 尿蛋白、尿素、肌酸、肌酐、尿酸,钾、 钠、氯测定。
(二)浓盐酸 使尿液保持强酸性, 阻止细菌繁殖,防止尿液中某些成分因 尿酸碱化而分解,用量10ml左右,适合 作尿 17- 羟、 17- 酮、儿茶酚胺、钙测定。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
分离的血浆或血清不能及时检测时,可放 4~6℃冰箱保存,保存期限依待测成分稳定性 而定,一般3~5天。
四、无蛋白血滤液的制备
血液经去蛋白处理后称为蛋白血滤液。去 蛋白的方法很多,一般分为两类: 一类是使蛋白质脱水而沉淀 中性盐。 有机溶剂,
另一类是与蛋白质结合成不溶性蛋白质盐, 某些酸类,重金属盐。
第二节
标本的处理
一、抗凝剂 阻止血液凝固的化学试剂,称为抗凝剂, 常用的有: (一)草酸钾 与血液中钙离子结合生成草 酸钙沉淀。通常配成100g/L水溶液,每支试管 中加0.1ml,80℃以下烘干备用。 优点:溶解度大,抗凝作用强(抗凝用量 2mg/ml血),价格低 缺点:改变血液pH,不能用于酸碱平衡观 察,不能用于K+、Ca2+测定,抑制一些酶活性, LDH、ACP、ALT。
1.钨酸法 血液﹕水﹕ 1/3mol/L硫酸﹕10%钨酸钠
1 ﹕ 7﹕ 1﹕ 1 2.三氯醋酸法 血清:三氯醋酸 1:9
第三节 影响体液成分的因素
一、生理因素
(一)采血时体位 站位,血量比卧 位少 600~700ml,浓缩,一些成分含量 增高。
(二)时间 体液中许多成分一天内 发生周期性变化,如血清皮质醇峰值6~8 点,谷值 16 点,女性月经周期影响性激 素的血浆浓度。
二、 尿液标本的采集
生化检验多用24小时尿,收集方法是, 第一天将尿排尽弃去,记录这次排尿的时间, 从计时开始,以后尿液均收集于干净有盖的 容器内,直至第二天同一时间为止。 留取24小时尿标本应按实验要求加入防 腐剂,一般在收集第一次尿时同时加入。检 验人员接到标本后应充分将尿混匀,精确量 其总量并记录,然后留取实验所需量,其余 弃去。
生化检验标本
第一节 标本的采集
第二节 标本的处理
第三节 影响体液成分的因素
第一节 标本的采集
标本的正确采集与保存是生化检验 结果是否可靠的前提,而这种差异往往 不易被检测者发现,因此,必须给予重 视。
生化检验标本主要是血液,其次是 尿液,此外还有脑脊液、胃液、腹水、 唾液等。
一、血液标本的采集
(三)麝香草酚 可抑制尿中细菌生 长,用量1g左右,也可用麝香草酚异丙 醇溶液(10%),5 ml左右,适合作尿 钾,钠、钙、 AA、糖、尿胆原、胆红 素测定,不适合作尿蛋白测定。
三、标本的分离和储存
血液标本采集后,如需要血浆或血清者, 应及时分离,以免红细胞与血清或血浆之间物 质的转移和红细胞对血清中某些物质的利用。 血浆的分离:取血后与抗凝剂充分混匀后, 可立即离心分离,2500~3000转/min,5min。 血清的分离:取血后将试管放37℃水浴放 置30min左右,离心分离。
血液标本最常用的是静脉血。 (一)静脉采血法 1. 采血部位:最常用的是肘静脉, 此外,也可采用手背静脉、外踝静脉、 颈外静脉。 2. 取血容器:最好采用一次性注射 器和试管。
3. 注意事项: ( 1 )如遇到病人采血发生眩晕,平 卧休息,必要时嗅吸芳香氨酊,掐人中。 ( 2 )防止溶血:造成溶血原因,穿 刺不顺利,局部组织损伤过多,取血容 器有水,血液注入试管时不取下针头, 抗凝血的剧烈震荡。
( 3 )避免充血和血液浓缩:止血带 压迫时间不能过长,最好不超过半分钟。 ( 4 )抽血时,只能向外抽,不能向 内推。以免注人空气。 (5)肢体进行静脉输液时不宜在同 侧静脉采血。
(一) 动脉采血法
一般多采用股动脉,其他部位如 桡动脉,肱动脉也可采用,在博动明显 处,常规消毒,刺入动脉后,血液自行 涌入注射器,达所需血量,用干棉球压 迫止血。
(二)氟化钠 抗凝作用弱,常与草酸钾混 合使用, NaF4g,草酸钾 6g,溶解至 100ml,每管 加0.1ml, 80℃以下烘干备用,可抗凝2~3ml血。 优点:防止糖酵解,用于血糖测定。
(三)肝素 是一种含硫酸基团的粘多糖, 具有多方面抗凝作用。
优点:抗凝作用强(抗凝用量0.1mg/ml血) 不影响血细胞体积,不易溶血,配成 1g/L水溶 液,每管0.5ml, 60℃烘干备用,久置而失效, 价格贵。
(三)运动 与运动时间、强度 有关。适度运动,血糖、尿酸、乳 酸 增 加 , ATP 减 少 , 血 清 AST、 LDH、CK、ALP 增加,运动员,血 清Ch、TG减少,HDL-C增加。 (四)年龄 (五)性别 (六)体形
二、饮食和药物的影响
(一)饮食 因饮食量和食物性质 而定,一般血糖,铁、钾、总脂、 TG 、ALP 升高,高蛋白饮食, BUN、磷、 尿酸、血氨升高,咖啡因饮料,儿茶酚 胺、血浆皮质醇、FFA升高,饮酒,乳 酸、尿酸、 ALT、GGT 升高。餐后 12 小时取血。 (二)药物
二、防腐剂
收集24小时尿液时,为防止细菌生 长而影响检验结果,应使用防腐剂,常 用的有:
(一)甲苯(或二甲苯) 在尿液表 面形成一薄膜,防止细菌繁殖,防腐能 力较弱。用量10ml左右,适合作尿糖, 尿蛋白、尿素、肌酸、肌酐、尿酸,钾、 钠、氯测定。
(二)浓盐酸 使尿液保持强酸性, 阻止细菌繁殖,防止尿液中某些成分因 尿酸碱化而分解,用量10ml左右,适合 作尿 17- 羟、 17- 酮、儿茶酚胺、钙测定。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
分离的血浆或血清不能及时检测时,可放 4~6℃冰箱保存,保存期限依待测成分稳定性 而定,一般3~5天。
四、无蛋白血滤液的制备
血液经去蛋白处理后称为蛋白血滤液。去 蛋白的方法很多,一般分为两类: 一类是使蛋白质脱水而沉淀 中性盐。 有机溶剂,
另一类是与蛋白质结合成不溶性蛋白质盐, 某些酸类,重金属盐。
第二节
标本的处理
一、抗凝剂 阻止血液凝固的化学试剂,称为抗凝剂, 常用的有: (一)草酸钾 与血液中钙离子结合生成草 酸钙沉淀。通常配成100g/L水溶液,每支试管 中加0.1ml,80℃以下烘干备用。 优点:溶解度大,抗凝作用强(抗凝用量 2mg/ml血),价格低 缺点:改变血液pH,不能用于酸碱平衡观 察,不能用于K+、Ca2+测定,抑制一些酶活性, LDH、ACP、ALT。
1.钨酸法 血液﹕水﹕ 1/3mol/L硫酸﹕10%钨酸钠
1 ﹕ 7﹕ 1﹕ 1 2.三氯醋酸法 血清:三氯醋酸 1:9
第三节 影响体液成分的因素
一、生理因素
(一)采血时体位 站位,血量比卧 位少 600~700ml,浓缩,一些成分含量 增高。
(二)时间 体液中许多成分一天内 发生周期性变化,如血清皮质醇峰值6~8 点,谷值 16 点,女性月经周期影响性激 素的血浆浓度。
二、 尿液标本的采集
生化检验多用24小时尿,收集方法是, 第一天将尿排尽弃去,记录这次排尿的时间, 从计时开始,以后尿液均收集于干净有盖的 容器内,直至第二天同一时间为止。 留取24小时尿标本应按实验要求加入防 腐剂,一般在收集第一次尿时同时加入。检 验人员接到标本后应充分将尿混匀,精确量 其总量并记录,然后留取实验所需量,其余 弃去。