酵母菌霉菌常用培养基的配方

酵母菌、霉菌常用培养基得配制

一、目得要求

了解合成培养基、半合成培养基与天然培养基得配制原理。

学习与掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基与察氏培养基得配制方法。

二、基本原理

麦芽汁培养基与马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌与霉菌、马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌、豆芽汁葡萄糖培养基也就是培养酵母菌及霉菌得一种优良培养基、察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基与豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而察氏培养基则为合成培养基。培养基配方中出现得自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现得pH、

三、实验材料

(一)药品

葡萄搪、蔗糖、NaN03、K２HP04、KCl、MgSO4·7Ｈ２Ｏ,FeS０４、琼脂。

(二)仪器

天平、高压蒸汽灭菌锅。

(三)玻璃器皿

移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。

(四)其她物品

药匙、ｐH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。

四、实验内容

(一)麦芽汁培养基得配制

1.培养基成分

新鲜麦芽汁一般为10-15波林。

2.配制方法

(1)用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡６-1２h,置于１５℃阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒得两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。

(2)取一份麦芽粉加四份水,在6５℃水浴锅中保温3—4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法就是取０.5mｌ得糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。

(3) 糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 m1,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。

(4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10－１５波林,调pH至6.4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花得新鲜麦芽汁,加水稀释到10－15波林后使用。

(５)如配固体麦芽汁培养基时,加入2％琼脂,加热融化,补充失水。

(6)分装、加塞、包扎、

(7)高压蒸汽灭菌100 Pa灭菌2０min。

(二)马铃薯葡萄糖培养基得配制

1、培养基成分

马铃薯

20g

葡萄糖2g

琼脂1。5—2g

水１00ml 自然pH

2、配制方法

(1)配制2０％马铃薯浸汁取去皮马铃薯2００ｇ,切成小块,加水1０00m1、８0℃浸泡ｌh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。100 Ｐa灭菌20 min。即成20％马铃薯浸汁,贮存备用。

(2)配制时,按每10０m1马铃薯浸汁加入２g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化并补足失水、

(3)分装、加塞、包扎。

(4)高压蒸汽灭菌10０Pa灭菌20 miｎ、

(三)豆芽汁葡萄糟培养基得配制

1。培养基成分

黄豆芽10g

葡萄糖

５ｇ

琼脂1、5-2ｇ

水10０ml

自然pH

2.配制方法

(1)称新鲜黄豆芽１0ｇ,置于烧杯中,再加入100 m1水,小火煮沸30 min,用纱布过滤,补足失水,即制成１0％豆芽汁、

(2)配制时,按每100 m1 １０%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入２g琼脂,继续加热融化,补足失水。

(3)分装、加塞、包扎。

(4)高压蒸汽灭菌10０Pa灭菌20 min。

(四)察氏(czapｃk)培养基得配制

１、培养基成分

蔗糖3g

ＮａＮ030.3g

K2HP04 0.1g

KＣl ０。０５ｇ

MｇSO4·７Ｈ2O 0．05g

FeＳ04 ０.０01g 琼脂1、５-２g

蒸馏水100mｌ

自然ｐH

2.配制方法

(１)称量及溶化量取所需水量约2／3左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、NaNO３、K２HP０４、KＣｌ、MgSＯ4。依次逐一加入水中溶解。按每1０0 mｌ培养基加入1ｍl ０。1％得FｅS0４溶液、

(2)定容候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积、

(3)加琼脂加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。

(4)分装、加塞、包扎。

(5)高压蒸汽灭菌1０0 Pa灭菌2０min。

五、实验报告内容

记录您所配制培养基得名称及成分。