基因工程药物制造实例
生物技术制药考试复习资料整理版
第一章、绪论1. 生物技术制药：采用现代生物技术，借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医药品，称为生物技术制药。
2. 生物技术药物：采用DNA重组技术或其他生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物，称为生物技术药物。
3. 生物药物：指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法，利用生物体、生物组织、细胞、体液等制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。
4. 现代生物药物四大类型：⑴应用重组DNA技术制造的基因重组多肽，蛋白质类治疗剂；⑵基因药物⑶来自动物、植物和微生物的天然药物；⑷合成与部分合成的生物药物。
5. 生物药物功能用途分类：⑴治疗药物，⑵预防药物⑶诊断药物。
6. 生物技术制药的特征：⑴高技术⑵高投入⑶长周期⑷高风险⑸高收益7. 生物技术在制药中的应用：⑴基因工程制药：①基因工程药物品种的开发、②基因工程疫苗、③基因工程抗体、④基因诊断与基因治疗、⑤应用基因工程技术建立新药的筛选模型、⑥应用基因工程技术改良菌种，产生新的微生物药物、⑦基因工程技术在改进药物生产工艺中的应用、⑧利用转基因动、⑨植物生产蛋白质类药物⑵细胞工程制药：①单克隆抗体技术、②动物细胞培养⑶酶工程制药⑷发酵工程制药8. 我国生物技术制药现状和发展前景（自己阐述观点）第二章基因工程制药1．基因工程生产哪些药：⑴免疫性蛋白，如各种抗原和单克隆抗体。
⑵细胞因子，如各种干扰素、白细胞介素、集落刺激生长因子、表皮生长因子及凝血因子。
⑶激素，如胰岛素、生长激素、心钠素⑷酶类，如尿激酶、链激酶、葡激酶、组织型纤维蛋白溶酶原激活剂及超氧化物歧化酶等。
2. 利用基因工程技术生产药品的优点在于：⑴利用基因工程技术可大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽（如胰岛素、干扰素、细胞因子等），为临床使用建立有效的保障。
⑵可以提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理、生化和结构进行深入的研究，从而扩大这些物质的应用范围。
基因工程在制药领域的应用
基因工程在制药领域的应用现代生物技术，又称生物工程，是利用生物有机体（从微生物直至高等动物）或其组成部分（器官、组织、细胞等）发展新工艺或新产品的一种科学技术体系。
生物工程主要包括基因工程、细胞工程、酶工程、蛋白质工程和发酵工程等5个部分。
以重组DNA为核心的现代生物技术的创立和发展，为生命科学注入了新的活力，它所提供的实验方法和手段极大地促进了传统生物学科如植物学、动物学、遗传学、生理学、生物医学等的发展。
同时，生物技术目前也已被广泛地应用于医药、食品、化学、农业及环保等领域，为这些行业带来了一场新的技术革命。
下面我主要介绍的是基因工程在制药领域的应用！基因工程概述所谓的基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子，构成遗传物质的新组合，并使之参入到原先没有这类分子的寄主细胞内，而能持续稳定地繁殖。
基因工程自从20世纪70年代初期问世以来，无论是在基础理论研究领域，还是在生产实际应用方面．都已经取得了惊人的成绩。
基因组核苷酸全序列的测定与分析，是基因工程技术促进基础生物学研究的一个出色范例。
2001年2月12 日，由6国的科学家共同参与的国际人类基因组公布了人类基因组图谱及初步分析结果，这结果为人们提供了约3000 多个基因可用来制药，将推进基因制药产业的快速发展。
由于基因克隆技术的发展，已使得基因工程技术在工业生产尤其是制药生产中发挥了重要作用。
以前人们利用微生物自身生产有用的产品，如利用青霉菌生产青霉素、利用链霉菌生产链霉素等。
但是从这些生物体中分离纯化这些药物，不仅成本昂贵，而且技术上也相当困难。
如今将编码这些药物的基因克隆并转移到合适的生物体内进行有效的表达，就可以方便地提取到大量的有用药物。
基因工程技术开发药物的一般过程利用基因工程技术开发一个药物，一般要经过以下几个步骤：①目的基因片断的获得：可以通过化学合成的方法来合成已知核苷酸序列的DNA片段；也可以通过从生物组织细胞中提取分离得到，对于真核生物则需要建立cDNA文库。
基因工程药物制造实例
1
基因克隆
将感兴趣的基因从源细胞中分离并扩
基因表达
2
增。
将克隆的基因导入表达系统，如细胞
或微生物，使其表达目标蛋白质。
3
纯化和制备
从表达系统中提取和纯化目标蛋白质， 并进行进一步的制备和处理。
实例一: 重组蛋白药物
重组蛋白药物通过基因工程技术制造，包括利用重组DNA将目标基因导入宿 主细胞，并使其表达和产生所需蛋白质。
遗传性疾病
基因治疗和基因编辑药物可以治疗一系列遗传性疾病，如囊性纤维化和遗传性失明。
免疫疗法
利用基因工程药物的方法增强机体免疫力，如CAR-T细胞疗法用于白血病的治疗。
未来发展趋势和挑战
随着科技不断进步，基因工程药物将在治疗领域发挥越来越重要的作用。然 而，挑战包: 基因治疗药物
基因治疗药物利用基因工程技术将正常基因导入患者体内，修复异常基因， 以治疗遗传性疾病或慢性疾病。
实例三: 基因编辑药物
基因编辑药物利用基因工程技术对患者体内的基因进行直接编辑或修饰，以治疗一些疾病或改善基因特 性。
基因工程药物的应用领域
癌症治疗
通过基因工程技术开发出的靶向治疗药物可以有效抑制癌细胞生长和扩散。
基因工程药物制造实例
从基因工程药物的定义和背景知识开始，介绍基因工程药物制造的实例及其 应用领域，并探讨未来发展趋势和挑战。
基因工程药物定义和背景知识
基因工程药物是通过人工改变或调整基因来制造的药物，利用生物技术的手 段来生产和开发。它们具有高度的精准性和特异性，可以用于治疗各种疾病。
基因工程药物的制造过程
3.3 基因工程的应用(课件)-【备课精选】2021-2022学年高二生物下学期同步优质资源(人教版
提高动物的生长速率
科学家将外源生长激素基因 导入动物体内，以提高动物的生 长速率，如朱作言等育成了转基 因鲤鱼（冠鲤）。但冠鲤至今并 未获得审批。
02 基因工程在医药卫生领域的应用
医
对微生物或动植物的细胞进行基因改造生产药物
药
卫
生
领
让转基因哺乳动物批量生产药物
域
的
应
用
用转基因动物作为器官移植的供体
显微注射
人生长激素基因
代孕
提供受精卵
生长激素 牛奶
转基因羊
02 基因工程在医药卫生领域的应用
➢ 建立移植器官工厂
①人体器官移植的难题：人体移植器官短缺是世界性难题
②解决途径：寻求可替代的移植器官，如用猪的器官来解决人类器官 移植的来源问题
A.猪的优点： a.猪的内脏构造、大小、血管分布 与人极为相似 b.猪体内隐藏的、可导致人类疾病 的病毒远远少于灵长类动物
B.最大难题：免疫排斥
02 基因工程在医药卫生领域的应用
➢ 建立移植器官工厂
2021年底在美国纽 约，科学家通过基因编
辑，敲除了猪体内会导
致人体免疫反应的基因， 然后将基因编辑猪的肾
基因编 辑胚胎
脏移植入人体（已脑死 亡并发肾衰竭，家属知
代孕母猪
情同意），病人的肾脏
又继续工作了2个月。 （注：人类胚胎的基因
基因产物 受体细胞 导入细胞
与天然蛋白质完全相同
哺乳动物的受精卵 显微注射法
细菌细胞内缺少内质网、高尔基体等 细胞器，合成的蛋白质可能不具有生 物活性
微生物细胞
Ca2+处理法（感受态细胞法）
不需要严格的灭菌，温度等 需严格灭菌，严格控制工程菌所需的
《基因工程制药技术》课件
02
该系统可用于生产具有治疗价值 的蛋白质药物，如疫苗、抗体等
。
转基因植物表达系统的优点是生 产成本低，且易于大规模生产。
03
缺点是可能存在食品安全和环境 问题，需要加强监管和控制。
04
04 基因工程制药的挑战与前 景
安全性问题
基因工程制药产品的安全性是首要考 虑的问题，需要经过严格的临床试验 和审批程序，确保产品的安全性和有 效性。
02 基因工程制药技术的基本 原理
基因克隆与表达
基因克隆
01
通过特定的方法将目的基因从生物体中分离出来，并在体外进
行复制和扩增的过程。
基因表达
02
在细胞内，基因通过转录和翻译过程，将遗传信息转化为蛋白
质的过程。
基因克隆与表达在制药工业中的应用
03
利用基因克隆技术获取药物靶点基因，通过基因表达技术生产
未来发展前景与展望包括开发更加高效和精准的基因工程制药技术、拓展新的治 疗领域和应用范围、降低生产成本和提高可及性等，需要加强研发和创新投入， 推动基因工程制药技术的可持续发展。
பைடு நூலகம்
05 基因工程制药的案例分析
胰岛素的基因工程生产
总结词
通过基因工程技术，将胰岛素基因转入到大肠杆菌或 酵母菌中，实现大规模生产。
感谢您的观看
THANKS
具有生物活性的蛋白质药物。
重组DNA技术
01
重组DNA技术
通过人工方法将不同来源的DNA片段进行剪切、拼接和重组，形成新
的DNA分子。
02
重组DNA技术在制药工业中的应用
利用重组DNA技术构建基因表达载体，将目的基因导入受体细胞，实
现目的基因的高效表达。
生物技术制药-第二章-基因工程制药(201309-201401-2)
7、目的cDNA克隆的分离和鉴定
cDNA克隆示意图
mRNA
逆转录酶
ss-DNA
DNA聚合酶I Klenow片段
ds-cDNA 核酸酶S1
ds-cDNA
二、逆转录－聚合酶链反应法（RT-PCR）
1985，PCR发明以后，RT-PCR得到了广泛的应用。
特异引物 mRNA 逆转录酶 ss-DNA PCR 目的cDNA链
优点：表达产物可由重组转化细胞分泌到培养 液中，纯化容易。产物是糖基化的接近天然物。 缺点：生长慢，生产率低，培养条件苛刻，费 用高，培养液浓度稀。
二、大肠杆菌体系中的基因表达
（一）表达载体 表达载体必须具备的条件
（1）载体能独立地进行复制 (复制起点，ori)
（2）应具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记
核酸酶S1
第三节 目的基因的获得
克隆真核基因常用方法：逆转录法和化学合 成法。（不能直接分离？）
一、逆转录法
逆转录法就是先分离纯化目的基因的mRNA，再 反转录成 cDNA，然后进行 cDNA 的克隆表达。 cDNA与模板mRNA序列严格互补，而不含内含子。
逆转录法的步骤
1、mRNA的纯化 2、cDNA第一链的合成 3、cDNA第二链的合成 4、cDNA克隆
利用基因工程技术生产药品的优点：
（1）可以大量生产过去难以获得的生理活性蛋 白和多肽； （2）可以提供足够数量的生理活性物质；
（3）利用基因工程技术可以发现、挖掘更多的
内源性生理活性物质；
（4）基因工程和蛋白质工程进行改造和去除 内源性生理活性物质的不足之处。 （5）利用基因工程技术可获得新型化合物，
又分为普通表达载体和精确表达载体
基因工程药物的生产原理及其应用
基因工程药物的生产原理及其应用第一篇：基因工程药物的生产原理及其应用基因工程药物的生产原理及其应用摘要：近年来，基因工程药物在目的基因制备、载体的构建、基因转移技术、宿主表达系统和生物反应发生器等方面取得了令人瞩目的成就。
本文简单介绍基因工程药物的生产原理及其重要应用。
关键词：基因工程药物生产原理应用随着基因研究的深入，人类已经可以生产出许多基因工程产品。
基因工程药物引入医药产业,由此引起了医药工业的重大变革,使得医药产业成为最活跃、发展最快的产业之一，同时大大提高了21世纪人类的整体健康状况。
基因工程药物又称生物技术药物是指利用基因工程技术研制和生产的药物，是根据人们的愿望设计的基因,在体外剪切组合,并和载体DNA 连接,然后将载体导入靶细胞(微生物、哺乳动物细胞或人体组织靶细胞),使目的基因在靶细胞中得到表达,最后将表达的目的蛋白质纯化及做成制剂,从而成为蛋白类药或疫苗。
主要种类有：胰岛素、单克隆抗体、荷尔蒙、干扰素、白细胞介素、组织型纤溶酶原激活因子、红细胞生成素、集落刺激因子。
生产原理基因工程制药技术分获取目标基因的上游技术和大量培养上游技术阶段。
上游技术实质就是基因工程技术。
下游技术则包括菌体培养，细胞破碎，大量培养以及分离纯化几个步骤。
1.1 基因工程制药的上游技术基因工程是生物工程的一个重要分支，它和细胞工程、酶工程、蛋白质工程和微生物工程共同组成了生物工程。
所谓基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。
它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中，以让外源物质在其中“安家落户”，进行正常的复制和表达。
基因工程研究采用的技术方法很多，以下介绍常见基本两种：聚合酶链反应技和Sanger双脱氢链终止法。
生物制药 第三章 基因工程制药 基因工程药物制造实例和质量控制
• 基因工程药物需要在宿主细胞中表达的 外源基因，在转录或翻译、精制、工艺 放大过程中，都有可能发生变化，所以 从原料—制备过程—产品的每一步都必 须严格控制条件和鉴定质量，确保产品 符合质量标准、安全有效。
一、原材料的质量控制
1. hIFN-ɑ2b基因的获得 • 用于克隆的人ɑ2b干扰素基因是应用PCR方法
从带有人ɑ2b干扰素基因的染色体片段获得的： 模板DNA 4ng，引物为50pmol/L，各25µL 4×dNTP 4µL，TaqDNA聚合酶2.5µL， 10×PCR反应缓冲液10µL，补水使总反应体积 为100µL。反应条件：变性温度为94 ℃，退火温 度为50℃，链延伸温度为72 ℃ 。共30个循环。
第八节 基因工程药物制造实例
一、干扰素 二、人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 三、人白细胞介素-2 四、美洲商陆抗病毒蛋白
干扰素（interferon，IFN）是人体细胞 分泌的一种活性蛋白质，具有广泛的抗病毒、 抗肿瘤和免疫调节活性，是人体防御系统的重 要组成部分。根据分子结构和抗原性的差异分 为α、β、γ、ω等4个类型。α型干扰素在 分为ɑ1b，ɑ2a ，ɑ2b等亚型，其区别表现在个 别氨基酸的差异上。
⑻残余抗生素活性测定 ⑼紫外光谱扫描 ⑽肽图测定 ⑾等电点测定 ⑿除菌半成品应做干扰素效价测定、无
菌试验、热原质试验。
⒉ 成品检定
⑴物理性状 ⑵鉴别试验 ⑶水分测定 ⑷无菌试验 ⑸热原试验 ⑹干扰素效价测定 ⑺安全试验 美洲商陆
第九节 基因工程药物的质量控制
• 基因工程药物与传统意义上的一般药品的生产不同， 首先它是利用活的细胞作为表达系统，所获蛋白质产 品往往相对分子质量较大，并具有复杂的结构；许多 基因工程药物还是参与人体一些生理功能精密调节所 必需的蛋白质，极微量就可产生显著效应(每剂量的用 量：白介素-12仅0.1 µg， ɑ干扰素也只有10~30
第三章基因工程制药
模板DNA 第1轮扩增 第2轮扩增 第3轮扩增
PCR的基本原理
PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点
第4轮扩增 第5轮扩增
第6轮扩增
PCR 动画
过
变
程
性
引 物 退 火
DNA 复制
1st cycle
2nd cycle
3rd cycle
PCR
琼脂糖凝胶电泳
3-4 小时
最终产物
紫外光观察
1977 日本 1978 美国 1979 美国 1980 美国 1983 美国 1984 美国 日本
美国已批准了56种生物制剂部分摘录（1）
• 产品 公司 主要适应症
---------------------------------------------------------------------• 人胰岛素 Eil Lilly 糖尿病
产品时间国家用途上市时间国家人生长激素释放抑制素srm197日本巨人症人胰岛素insulin美国糖尿病1982欧洲人生长激素hgh美国侏儒症1985美国干扰素ifn美国病毒1985欧洲乙肝疫苗hbsagv美国乙肝1986欧洲人白细胞介素hil美国肿瘤1989欧洲人促红细胞生成素epo日本贫血1988欧洲人粒细胞集落刺激因子gcsf白血病1991美国人组织纤溶酶原激活剂tpa血栓症1987美国美国已批准了56种生物制剂部分摘录1产品公司主要适应症人胰岛素eillilly糖尿病人生长激素eillilly儿童生长激素缺乏症2a干扰素hoffmannlarocke白血病a2b干扰素scheringplough白血病爱滋病肝炎小鼠抗co3单抗orthobiotech肾心移植排斥反应乙肝疫苗msdmerck乙型肝炎tpaalteplasegenentech急性心肌梗死肺栓塞型嗜血性流感疫苗praxisbiologics美国已批准了56种生物制剂部分摘录2产品公司主要适应症epoorthobiotech慢性肾衰竭贫血an3干扰素interferonsciencesr1b干扰素genentech类风湿rgcsfamgen化疗所致的白细胞减少gmcsfimmunex自体骨髓移植白细胞介素2chiron转移性肾癌凝血因子viigeneticsinstitute血友病美国已批准了56种生物制剂部分摘录3产品公司主要适应症1b干扰素berlexlabchiron多发性硬皮病葡萄糖苷脂酸genzymegaucher遗传病单抗治疗剂centocor抗血液凝固因子viiinovo血友病humaloglilly糖尿病nateplase三井alfacon1干扰素amgen慢性丙肝干扰素8nlotsuka日本治疗蕈样真菌病利用基因工程技术可大量生产过去难以获得的生理活性蛋白质和多肽为临床使用提供有效保障
基因工程制药(3)
基因工程制药(一) (二) (三) (四) (五) (六) (七) (八) (九) (十)概述 基因工程药物生产的基本过程 目的基因的获得 基因表达 基因工程菌的稳定性 基因工程菌生长代谢的特点 基因工程菌发酵 基因工程药物的分离纯化 基因工程药物的质量控制 基因工程药物制造实例(九)基因工程药物的质量控制原核生物表达的重组蛋白质量检测重组蛋白的质量控制指标包括：重组蛋白的鉴别（序列） 重组蛋白的纯度（杂质的类型） 重组蛋白的活性（检测方法） 重组蛋白的安全性 重组蛋白的稳定性 重组蛋白的一致性（构象与构型）原核细菌表达的重组蛋白产物的质量检测项目与方法检测项目 检测项目 检测方法 检测方法产品是否含内毒素 产品是否含内毒素 蛋白质是否变异 蛋白质是否变异 甲硫氨酸是否被甲酰化 甲硫氨酸是否被甲酰化家兔热原法 家兔热原法 肽谱、HPLC、等电聚焦、毛细管电泳 肽谱、HPLC、等电聚焦、毛细管电泳 肽谱、质谱、HPLC、Edman分析 肽谱、质谱、HPLC、Edman分析蛋白质是否变性、聚合、脱氨基 SDS-PAGE、凝胶层析、等电聚焦、质 蛋白质是否变性、聚合、脱氨基 SDS-PAGE、凝胶层析、等电聚焦、质 谱、HPLC、毛细管电泳、Edman分析 谱、HPLC、毛细管电泳、Edman分析 配体是否脱落 配体是否脱落 氨基酸是否发生取代 氨基酸是否发生取代 SDS-PAGE、免疫分析 SDS-PAGE、免疫分析 氨基酸分析、肽谱、质谱、毛细管电泳 氨基酸分析、肽谱、质谱、毛细管电泳是否被细菌、病毒、支原体等污染 微生物学检测 是否被细菌、病毒、支原体等污染 微生物学检测药物的特点 含量少 活性高 安全、可靠 有效基因工程药物研发过程临床前 临床实验 新药申请 批准投放市场新药研究进度表临床前试验 年数 1 2 3 期 4 5 期 6 7 ～ 期 8 批准 9 10人数－20～80人100～300人1000～3000人动物 实验安全性 剂量 70疗效长期毒性通过率（％）30－3520－3020IND (Investigational New Drug Application) NDA (New Drug Application) PLA (Production License Application)基因工程药物(1)活细胞作为表达系统 (2)化学性质:活性蛋白质或多肽; 相对分子量 较大，结构复杂;性质或剂量，对理化条件的 要求高 (3)全过程严格控制、鉴定质量基因工程药物生产工艺过程 种子的贮存培养种子细胞株分离纯化除菌过滤半成品检定成品检定基因工程药物质量控制 原材料的质量控制培养过程质量控制分离纯化过程的质量控制 目标产品的质量控制一、原材料的质量控制确保编码药品的DNA序列的正确性，重组微生物来自单一克隆，所用质粒纯而稳定，以保证产品质量的安全性和一致性。
举例说明基因工程药物的生产制备工艺流程
举例说明基因工程药物的生产制备工艺流程Gene engineering drugs, also known as biopharmaceuticals, are a revolutionary class of medicines produced through the manipulation of genes and genetic material. The process involves several key steps from gene selection to drug formulation.The first step in the production process is gene identification and selection. Scientists identify and isolate the desired gene responsible for producing the therapeutic protein. This can be done by various methods, such as screening libraries of DNA or using recombinant DNA technology.我的问题是：举例说明基因工程药物的生产制备工艺流程基因工程药物，也被称为生物制药品，是通过操纵基因和遗传物质来生产的一类革命性药物。
该过程涉及从基因选择到药物配方的几个关键步骤。
生产过程的第一步是基因鉴定和选择。
科学家们确定并分离出负责产生治疗蛋白的理想基因。
这可以通过多种方法来完成，如筛选DNA库或应用重组DNA技术。
Once the desired gene is identified, it is inserted into a host cell for expression. This is typically done using cloning vectors, which are small pieces of DNA capable of carrying the desired gene into the host cell. The host cell could be a bacteria, yeast, or mammalian cell line depending on the complexity of the desired protein.After successful insertion into the host cell, gene expression takes place. The host cell then reads and interprets the inserted gene to produce the therapeutic protein. This step involves regulating gene expression through various transcription factors and regulatory elements.When enough therapeutic proteins have been produced by the host cell, the next step is protein purification. This process involves isolating the therapeutic protein from other cellular components and impurities. Differentpurification methods like chromatography, filtration, and centrifugation can be employed to achieve this.Once the pure therapeutic protein is obtained, it undergoes formulation and drug product development. The formulation process aims to stabilize the protein and optimize its pharmacokinetic properties. This typically involves formulating the protein into a suitable dosage form, suchas injectables or oral tablets.Quality control tests are conducted throughout the production process to ensure safety and efficacy of thefinal drug product. These tests include assays for identity, purity, potency, stability, and sterility.Overall, the production process of gene engineering drugs involves several stages – gene identification and selection, gene expression in host cells, protein purification, formulation development, and quality control. With advancements in biotechnology and genetic engineering techniques, the production of these innovative medicines continues to evolve for better healthcare outcomes.一旦确定了所需的基因，就将其插入宿主细胞进行表达。
生物制药--基因工程制药--ppt课件可编辑全文
组建重组质粒 构建基因工程菌或细胞
前5个步骤是上游过程
培养工程菌
后4个步骤是下游过程
产物分离纯化
除菌过滤
半成品和成品鉴定
包装
基因工程制药
2.1 目的基因的获得
逆转录法
• 从真核细胞中提取产生该蛋白质的 mRNA 并纯化 （oligo-dT 亲和层析法）
• 借助于逆转录酶，以 mRNA 为模板，以 oligo-dT 为引物， 进行第一链 cDNA 的合成
• 酶解除去 mRNA 链； • 通常在合成 cDNA 第一链后直接 PCR 扩增，即“逆转录
－PCR法”
基因工程制药
2.1 目的基因的获得
逆转录法
基因工程制药
2.1 目的基因的获得
从基因组中直接分离
• 随机断裂法：将基因组 DNA 用内切酶切成多个片段，然 后将这些片段混合物随机重组入适当载体、转化、扩增， 再筛选出所需的基因片段
基因工程制药
2.2 基因载体的选择
质粒载体 —— pET-32a(+)
E. coli 中表达的优良载 体。
pET-32a(+) 具有 Ampr 抗性，酶切位点丰富。含 T7lac 启动子；含有 T7.Tag 和 His-Tag 融合标签，便于 检测和纯化目标蛋白。
基因工程制药
2.2 基因载体的选择
Escherichia coli Rye13
Hae III G GCC
Haemophilus aegyptius
Hind III A AGCTT
Haemophilus influenzae
Hpa I GTT AAC（平末端）
Haemophilus parainfluenzae
基因工程的应用
感谢您的观看
汇报人：
良食品等
基因工程在医 药工业中的应 用：如基因工 程药物、基因
诊断试剂等
基因工程在农 业中的应用： 如转基因作物、 基因改良家畜
等
基因工程在环 保工业中的应 用：如基因工 程微生物、基 因工程降解剂
等
基因工程在生物制药中的应用：通过基因工程技术可以改变生物体的基因从而改变其性状如提 高药物产量、改善药物质量等。
医学领域的应用。 ● 1982年美国科学家Kry Mullis发明了PCR技术为基因工程的发展提供了重要的技术支持。 ● 1990年美国科学家J. Crig Venter 和Hmiln Smith发明了基因测序技术为基因工程的发展提供了重要的技术支持。 ● 2000年人类基因组计划完成标志着基因工程的发展进入了一个新的阶段。
基因工程药物： 通过基因工程 技术生产具有 特定功能的药
物
疫苗研发：利 用基因工程技 术研发新型疫 苗提高疫苗的 效力和安全性
基因诊断：利 用基因工程技 术进行疾病诊 断提高诊断的 准确性和效率
基因治疗：利 用基因工程技 术进行疾病治 疗如基因编辑、
基因替代等
基因工程的应用实 例
转基因作物：通过基因工程技术改造的作物 目的：提高作物的抗病性、抗虫性、抗逆性等 应用实例：抗虫棉、抗除草剂大豆、抗旱玉米等 影响：提高作物产量降低生产成本改善生态环境
隐私问题：基因信息的隐私 保护问题如何解决？
基因编辑：是否应该允许对 人类胚胎进行基因编辑？
公平问题：基因技术的应用 是否会加剧社会不平等？
生态问题：基因工程的应用 是否会对生态环境造成影响？
监管机构：负责监管基因工 程的机构和组织
法规：各国政府对基因工程 的法规和规定