诱导多能性干细胞-张严
一种制备诱导多能干细胞源性心肌细胞的方法及其固定方法和应用[
专利名称：一种制备诱导多能干细胞源性心肌细胞的方法及其固定方法和应用
专利类型：发明专利
发明人：张家浩,曾雪
申请号：CN202010433334.3
申请日：20200521
公开号：CN111621468A
公开日：
20200904
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及生命科学及医疗技术领域，尤其涉及培养规则形状的诱导多能干细胞源性心肌细胞的方法及其固定方法及应用。
本发明所提供的制备诱导多能干细胞源性心肌细胞的方法，具体步骤包括缩印制备步骤和多能干细胞制备步骤。
本发明的有益效果是，结合生物工程中的缩印技术以及生物化学技术，培养和人体心肌细胞相似的、成熟的、规则形状的诱导多能干细胞源性心肌细胞，并且制造成本低、产量高，培养时间短。
本发明能保持所需要的细胞形态，移植到所需的环境中进行深入实验和研究。
申请人：上海慧灯医疗科技有限公司
地址：200131 上海市浦东新区中国(上海)自由贸易试验区巴圣路160号7号1单元5层5005室国籍：CN
代理机构：上海中外企专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：孙旭华
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诱导多能干细胞来源间充质干细胞对大鼠骨关节炎的治疗作用
诱导多能干细胞来源间充质干细胞对大鼠骨关节炎的治疗作用何继晨;严君逸;程琢玉;程润;赵英杰;魏伟;严尚学【摘要】目的研究诱导多能干细胞来源间充质干细胞(iPSC-MSCs)对大鼠骨关节炎(OA)的治疗作用.方法采用Hulth法建立大鼠OA模型,编号后运用Excel表格随机分组功能将其分为模型组、iPSC-MSCs组、人脐带来源间充质干细胞( hUC-MSCs)组、玻璃酸钠(HA)阳性对照组,另设假手术组作为对照,每组10只.除HA组动物多次给药(每周1次,共给药5次)外,其它各组均单次给药,每次每只动物在术侧关节腔注射50 μL药物iPSC-MSCs和hUC-MSCs,假手术组和模型组同法给予生理盐水.给药5周后处死动物,观察iPSC-MSCs对关节直径差值、关节腔结构及评分、关节面评分、病理学评分等指标的影响;检测膝关节基质金属蛋白酶( MMP)-13、Ⅱ型胶原( CollagenⅡ)及解聚蛋白样金属蛋白酶( ADAMTS)-5 表达情况.结果 iPSC-MSCs和hUC-MSCs给药均可显著降低膝关节面Pelletier评分、关节直径和病理Mankin评分,改善关节腔结构,降低X线评分和关节肿胀,且iPSC-MSCs 较hUC-MSCs给药在降低Pelletier评分[(1. 22 ± 0. 67)比(2. 00 ± 0. 71),P=0. 021]方面差异有统计学意义;相比于模型组,iPSC-MSCs关节腔注射给药可显著增加软骨层CollagenⅡ表达[(35. 87 ± 8. 52)比(69. 90 ± 7. 65), P＜0. 01],降低MMP-13[(59. 25 ± 5. 56)比(33. 75 ± 5. 85),P＜0. 01]和ADAMTS-5[(52. 25 ± 10. 47)比(22. 25 ± 6. 13),P＜0. 01]表达水平,且与hUC-MSCs给药差异有统计学意义,iPSC-MSCs组与hUC-MSCs组CollagenⅡ、MMP-13、ADAMTS-5值分别为[(69. 90 ± 7. 65)比(61. 00 ± 5. 52), P =0. 010]、[(33. 75 ± 5. 85)比(43.25 ± 6. 02), P =0. 028]、[(22. 25 ± 6. 13)比(36. 50 ± 4. 65),P=0. 011].结论关节腔注射iPSC-MSCs可显著改善OA大鼠关节病理,具有明显的软骨保护作用.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2019(023)008【总页数】7页(P1496-1500,后插1-后插2)【关键词】骨关节炎;脐血干细胞移植;注射,关节内;诱导多能干细胞;间质干细胞;软骨损伤;大鼠【作者】何继晨;严君逸;程琢玉;程润;赵英杰;魏伟;严尚学【作者单位】安徽医科大学临床药理研究所、抗炎免疫药物教育部重点实验室、抗炎免疫药物安徽省协同创新中心,安徽合肥 230032;安徽医科大学第一临床医学院,安徽合肥 230032;安徽医科大学临床药理研究所、抗炎免疫药物教育部重点实验室、抗炎免疫药物安徽省协同创新中心,安徽合肥 230032;安徽医科大学临床药理研究所、抗炎免疫药物教育部重点实验室、抗炎免疫药物安徽省协同创新中心,安徽合肥230032;安徽医科大学临床药理研究所、抗炎免疫药物教育部重点实验室、抗炎免疫药物安徽省协同创新中心,安徽合肥 230032;安徽医科大学临床药理研究所、抗炎免疫药物教育部重点实验室、抗炎免疫药物安徽省协同创新中心,安徽合肥 230032;安徽医科大学临床药理研究所、抗炎免疫药物教育部重点实验室、抗炎免疫药物安徽省协同创新中心,安徽合肥 230032【正文语种】中文骨关节炎(osteoarthritis，OA)是一种通常发生在中老年人身上的慢性关节疾病，表现为关节僵硬、持续性疼痛甚至残疾，并伴随不同程度的炎症和软骨缺损[1]。
神经干细胞诱导分化调控新进展
神经干细胞诱导分化调控新进展
罗伟;赵匡彦;王廷华;杨志敏
【期刊名称】《云南医药》
【年(卷),期】2004(025)001
【摘要】长期以来，人们认为中枢神经细胞是终末分化的细胞，近年已经从胚胎及成年中枢神经系统不同部位分离出并证实了神经干细胞的存在。
神经干细胞具有以下两个基本特性：(1)自我复制能力；(2)多向分化潜能。
神经干细胞的发现彻底改变了以往认为中枢神经系统神经元不能再生
【总页数】3页(P65-67)
【作者】罗伟;赵匡彦;王廷华;杨志敏
【作者单位】昆明医学院第一附属医院神经外科及昆明医学院神经科学研究
所,650031;昆明医学院第一附属医院神经外科及昆明医学院神经科学研究
所,650031;昆明医学院第一附属医院神经外科及昆明医学院神经科学研究
所,650031;昆明医学院第一附属医院神经外科及昆明医学院神经科学研究
所,650031
【正文语种】中文
【中图分类】R388
【相关文献】
1.胚胎小鼠神经干细胞的培养和诱导分化 [J], 任丽伊;赵海霞;左璇;李淑蓉;苏炳银
2.海马可溶性因子体外诱导分化大鼠内源性神经干细胞为胶质样细胞 [J], 李鹏;陈
凡帆;谢伟;张昊;钟文军;涂兰波;曹志恺;全伟
3.全反式视黄酸对神经干细胞诱导分化和c-myc基因表达的调控 [J], 邓红;邹飞;罗海吉
4.阿尔茨海默病患者来源的诱导多能干细胞向神经干细胞及神经元的诱导分化 [J], 张林;徐玫;刘港;蒋宁;周文霞;张永祥
5.兔骨髓基质细胞源性神经干细胞诱导分化及移植修复脊髓损伤实验研究 [J], 刘德虎
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
诱导多能干细胞的研究进展
诱导多能干细胞的研究进展
张鹏
【期刊名称】《生物技术通报》
【年(卷),期】2009(000)009
【摘要】体细胞诱导成为多能性干细胞(induced pluripotent stem cell,iPS cell)的研究成果被国际生命科学界誉为具有里程碑意义的创新之举.在短短3年多的时间里,这项研究已经在细胞重编程的机理研究、探索疾病的发生发展机制以及临床医学的应用等领域引发了很多突破性的进展,而且,这一非克隆干细胞技术的诞生,成功地避开了长期以来争论不休的伦理问题,极大地推动该领域和相关科学领域的发展.从iPS细胞的研究历程、iPS细胞的构建机理、iPS细胞研究的最新应用成果以及iPS细胞的发展前景和研究方向等方面进行了评.
【总页数】5页(P8-12)
【作者】张鹏
【作者单位】北京林业大学生物科学与技术学院,北京100083
【正文语种】中文
【相关文献】
1.人类诱导多能干细胞在帕金森病治疗中的研究进展 [J], 甄隽颖; 郑晓丹
2.诱导多能干细胞向心肌细胞分化的研究进展 [J], 李星;谭敦勇;郭惠明;赵明一;朱平
3.诱导多能干细胞治疗青光眼的研究进展 [J], 谈思益
4.人诱导多能干细胞分化来源心肌细胞特征及促成熟方法研究进展 [J], 刘明璐(综
述);王伟;付炜(审校)
5.诱导多能干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展 [J], 范佳俊;王君杰;陈烽;陈哲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
缺氧条件下中枢神经系统外泌体作用机制
中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology2021,43(1): 103-109DOI: 10.11844/cjcb.2021.01.0013缺氧条件下中枢神经系统外泌体作用机制张佳佳1苏刚2陈丽霞1王满侠1周娟平1高娟1张振昶0兰州大学第二医院神经内科，兰州730030;2兰州大学基础医学院遗传研宄所，兰州730000)摘要 外泌体是来源于细胞内吞禮作用的细胞外囊泡(extracellular vesicles,E V s)，其含有特定的蛋白质、脂质、R N A和D N A,能将信号传递给受体细胞，从而介导细胞通讯过程。
缺氧作为 一种严重的细胞应激，是脑部疾病的重要特征，可以诱导外泌体的释放并影响其内容物。
越来越多的证据显示，外泌体携带的生物活性物质可以反映其细胞起源和疾病状态，成为诊断或预测缺氧性 疾病的潜在生物标志物。
现对外泌体的一般特性和功能、缺氧条件下外泌体的分泌机制以及缺氧 胁迫下正常神经细胞(例如神经元和星形月交质细胞)和胶质瘤细胞释放的外泌体的作用机制作一综 述。
关键词.外泌体;缺氧;氧和葡萄糖剥夺；中枢神经系统The Role of Exosomes in Central Nervous System under Hypoxic ConditionZ H A N G Jiajia1,S U G a n g2,C H E N Lixia1,W A N G M a n x i a1,Z H O U Juanping1,G A O Juan1,Z H A N G Z h e n c h a n g1* (^Department o f N eurology, Lanzhou University Second Hospital, Lanzhou 730030, China;1I nstitute o f G enetics, School o f B asic Medical Sciences, Lanzhou University, Lanzhou 730000, China)Abstract E x o s o m e s are E V s(extracellular vesicles)deriving from the endosomal system,which co ntain specific proteins,lipids,R N A and D N A.T h e y can transfer signals to recipient cells thus mediating intercellular communication.H y p o x i a,as a serious cellular stress,i s a vital feature of brain diseases,which can induce the release of exosomes and affect the content of exosomes.Increasingly,studies have indicated that the bioactive substances carried b y exosomes can reflect their cellular origin and disease status,which can b e c o m e potential biomarkers for the diagnosis or prediction of hypoxic diseases.This article reviews the general characteristics of exosomes,functions of exos o m e s,secretory m e c h a n i s m of exosomes under hypoxic condition,as well as the m e c h a-nism of exosomes released by normal nerve cells(such as neurons and astrocytes)and glioma cells under hypoxia.K e y w o r d s exos o m e s;hypoxia;oxygen and glucose deprivation;central nervous system充足的氧气(40〜60 m m H g氧压)供应对哺乳动 缺氧是脑部疾病(包括缺血性、创伤性、慢性神经物的正常新陈代谢和生理功能至关重要。
诱导性多能干细胞的制备与应用
诱导性多能干细胞的制备与应用多能干细胞是一种能够不断自我更新和分化成各种类型细胞的细胞。
在医学领域，利用多能干细胞可以制备出各种组织和器官，从而实现再生医学的目标。
然而，目前制备多能干细胞的方法存在一定的局限性。
近年来，科学家在诱导性多能干细胞的制备与应用方面取得了一定的进展。
一、多能干细胞制备方法的历史发展最早制备多能干细胞的方法是从胚胎中分离出干细胞。
这种方法被称为胚胎干细胞制备方法。
然而，胚胎干细胞制备方法存在一定的道德争议，因为要破坏胚胎。
2006年，日本科学家山中伸弥发现了一种能够诱导成多能干细胞的方法。
这种方法不需要破坏胚胎，只需要在体外将成人的普通细胞诱导成多能干细胞。
这种多能干细胞被称为人工诱导多能干细胞。
二、诱导性多能干细胞的制备方法人工诱导多能干细胞的制备方法主要有两种。
一种是转录因子刺激法，另一种是化学物质刺激法。
转录因子刺激法是利用一些特定的转录因子来刺激细胞的再生能力。
这些转录因子可以直接进入细胞核，改变细胞内蛋白质的合成，从而改变细胞的功能。
化学物质刺激法是利用一些特定的化学物质来刺激细胞的再生能力。
这些化学物质可以直接进入细胞，改变细胞内蛋白质的合成，从而改变细胞的功能。
三、诱导性多能干细胞的应用1. 组织工程利用诱导性多能干细胞可以制备出各种类型的细胞，包括心脏细胞、神经细胞、血管细胞等。
这些细胞可以用来制备出各种组织和器官，比如人工心脏、人工肝脏等。
2. 肿瘤治疗肿瘤是一种由于细胞的异常增殖而引起的疾病。
利用诱导性多能干细胞可以制备出特定的细胞，比如免疫细胞，来攻击癌细胞，从而实现肿瘤治疗。
3. 神经系统疾病治疗诱导性多能干细胞可以分化成神经细胞，可以用来治疗各种神经系统疾病，比如帕金森病、脊髓损伤等。
总之，诱导性多能干细胞的制备与应用在未来医学领域有着广泛的前景。
虽然目前制备诱导性多能干细胞的方法还存在一定的局限性，但是随着科技的不断进步和发展，相信制备疗效更好的诱导性多能干细胞的方法必将不断涌现，为人类健康事业作出更大的贡献。
一种诱导人多能干细胞体外分化为停滞在减数分裂II期的卵母细胞的
专利名称：一种诱导人多能干细胞体外分化为停滞在减数分裂II期的卵母细胞的方法
专利类型：发明专利
发明人：俞晓丽,王宁,王翔,任亚辉,王华岩,张樱馨,邱意开,蒲静,刘心蕊,裴秀英,王燕蓉
申请号：CN201910311538.7
申请日：20190418
公开号：CN110004112A
公开日：
20190712
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种诱导人多能干细胞体外分化为停滞在减数分裂II期的卵母细胞的方法，该方法分为三步，首先将细胞密度为80％的多能干细胞更换PGC‑m培养基，于35～40℃、3％～
6％CO下培养10天，得原始生殖细胞样细胞；然后将形成的原始生殖细胞样细胞转移至PF‑m培养基中，于35～40℃、8％～12％CO下培养5天，得卵泡样结构；最后将形成的卵泡样结构转移至OLC‑m培养基中孵育10～15天，得到停止在减数分裂II期的卵母细胞样细胞。
采用本发明中的方法，效率高、时间短，而且诱导出的卵母细胞样细胞可排除第一极体，形成次级卵母细胞。
该方法为研究人类雌性生殖细胞的形成和卵子发生提供了新的手段。
申请人：宁夏医科大学
地址：750004 宁夏回族自治区银川市兴庆区胜利街1160号
国籍：CN
代理机构：成都正华专利代理事务所(普通合伙)
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诱导多能性干细胞-张严26页PPT
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61、奢侈是舒适的，否则就不是奢侈 。——CocoCha nel 62、少而好学，如日出之阳；壮而好学 ，如日 中之光 ；志而 好学， 如炳烛 之光。 ——刘 向 63、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里，与其说好 的教师 是幸福 ，不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦 。——杰纳勒 尔·乔治·S·巴顿
谢谢！
诱导多能性干细胞-张严
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凝
无
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氛
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天
高
风
景
澈
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7、翩翩新 来燕，双双入我庐 ，先巢故尚在，相 将还旧居。
8
、
吁
嗟
身
后
名
，
于
我
若
浮
烟
。
9、 陶渊 明（ 约 365年 —427年 ），字 元亮， （又 一说名 潜，字 渊明 ）号五 柳先生 ，私 谥“靖 节”， 东晋 末期南 朝宋初 期诗 人、文 学家、 辞赋 家、散
文 家 。汉 族 ，东 晋 浔阳 柴桑 人 （今 江西 九江 ） 。曾 做过 几 年小 官， 后辞 官 回家 ，从 此 隐居 ，田 园生 活 是陶 渊明 诗 的主 要题 材， 相 关作 品有 《饮 酒 》 、 《 归 园 田 居 》 、 《 桃花 源 记 》 、 《 五 柳先 生 传 》 、 《 归 去来 兮 辞 》 等 。
《脂肪间充质干细胞促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化》
《脂肪间充质干细胞促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化》一、引言近年来，脂肪间充质干细胞（ADSCs）在再生医学和免疫调节领域的研究日益受到关注。
ADSCs因其独特的免疫调节特性和强大的再生能力，在促进组织修复和免疫平衡方面展现出巨大的潜力。
巨噬细胞作为机体免疫系统的重要组成部分，其极化状态对免疫应答和炎症反应具有重要影响。
M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞是巨噬细胞的两种主要极化状态，它们在炎症反应和免疫调节中发挥着不同的作用。
本研究旨在探讨脂肪间充质干细胞如何促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞的转化。
二、材料与方法1. 材料：实验采用人脂肪间充质干细胞（ADSCs）和M1型巨噬细胞。
实验试剂包括细胞培养基、细胞因子、荧光染料等。
2. 方法：（1）体外培养ADSCs和M1型巨噬细胞；（2）将ADSCs与M1型巨噬细胞共培养，观察其相互作用；（3）通过荧光染色、流式细胞术等方法检测M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞的转化情况；（4）分析相关信号通路及基因表达情况。
三、实验结果1. ADSCs与M1型巨噬细胞的共培养实验结果显示，ADSCs 能有效促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞的转化。
2. 荧光染色和流式细胞术检测结果显示，共培养后M2型巨噬细胞的比例明显增加。
3. 通过对相关信号通路的分析，发现ADSCs通过释放一系列细胞因子和生长因子，激活JAK-STAT3等信号通路，从而促进M1型巨噬细胞的极化转变。
4. 基因表达分析显示，在共培养过程中，与M2型巨噬细胞相关的基因表达水平明显上调，而与M1型巨噬细胞相关的基因表达水平下降。
四、讨论本研究结果表明，脂肪间充质干细胞具有促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化的能力。
这一过程可能涉及ADSCs释放的细胞因子和生长因子激活JAK-STAT3等信号通路。
M2型巨噬细胞在免疫调节和抗炎方面具有重要作用，因此，ADSCs的这种转化作用可能在炎症性疾病、自身免疫病等治疗中具有潜在的应用价值。
一种制备高纯度的诱导性多能干细胞来源的人脑多巴胺能神经元的方法[发明专利]
![一种制备高纯度的诱导性多能干细胞来源的人脑多巴胺能神经元的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/732555e72dc58bd63186bceb19e8b8f67c1cef3e.png)
专利名称：一种制备高纯度的诱导性多能干细胞来源的人脑多巴胺能神经元的方法
专利类型：发明专利
发明人：张凌,何翠敏
申请号：CN202110995932.4
申请日：20210827
公开号：CN113789301B
公开日：
20220510
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及细胞培养领域，尤其涉及一种制备高纯度的诱导性多能干细胞来源的人脑多巴胺能神经元的方法。
本发明提供一种人类多巴胺能神经元诱导方法和相关培养液配方。
培养液中包括无血清基础培养基、细胞添加剂、神经发育因子和抑制剂。
其中，利用无血清基础培养基可以避免引入外源性物质，降低污染风险，同时，多种营养成分，如细胞添加剂和神经发育因子，能够使iPSC细胞受到信号刺激，活化iPSC细胞，促进分化。
本发明提供的细胞培养方法，简单高效、成本低、短周期内可诱导获得高质量的人类多巴胺能神经元细胞。
申请人：广州瑞臻再生医学科技有限公司
地址：510700 广东省广州市黄埔区瑞和路39号G5栋401
国籍：CN
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诱导性多能干细胞研究进展及其在再生医学中的应用
诱导性多能干细胞研究进展及其在再生医学中的应用
程盼盼;王海龙;张全军;王嘉逊;黄鑫;李智;齐忠权
【期刊名称】《中华细胞与干细胞移植（电子版）》
【年(卷),期】2010(002)001
【摘要】Yamanaka在2006年首次报道了体外诱导体细胞成为具备类似胚胎干细胞（embryo stem cell，ES）功能的多能性干细胞，开创了干细胞研究的新篇章，许多研究小组竟相开展这方面研究。
诱导性多能干细胞（induced pluripotent stem，iPS）是利用特定转录因子转入体外培养的体细胞中，直接诱导其成为具有多种分化潜能的干细胞。
【总页数】5页(P54-58)
【作者】程盼盼;王海龙;张全军;王嘉逊;黄鑫;李智;齐忠权
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】R329.25
【相关文献】
1.重编程及诱导性多能干细胞在再生医学的研究进展 [J], 刘路;韦曦;凌均棨
2.诱导性多能干细胞研究进展及应用前景 [J], 汤翠菊;田有勇
3.诱导性多能干细胞的研究进展及其在再生医学上的应用 [J], 樊懿萱;张艳丽;宋辉;闫益波;贾若欣;孟立;王锋
4.猪诱导性多能干细胞技术的研究进展及应用前景 [J], 闫益波;张艳丽;齐巍巍;万永杰;樊懿萱;王锋
5.诱导性多能干细胞研究进展及其在帕金森病中的应用 [J], 杜阳;肖波;冯莉;唐薇婷
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多能干细胞向血管平滑肌细胞定向分化的研究进展
多能干细胞向血管平滑肌细胞定向分化的研究进展
武玉涛;张力
【期刊名称】《中国医学前沿杂志（电子版）》
【年(卷),期】2011(003)004
【摘要】@@ 1 前言rn干细胞(stem cells,SC)是指一类具有自我复制能力,同时也可以分化为特定组织的多潜能细胞.根据SC所处发育阶段的不同,可以分为胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)和成体干细胞(somatic stem cells,SSCs);根据干细胞发育潜能的不同,又可以分为全能干细胞(totipotentstem cells,TSCs)、多能干细胞(pluripotentstem cells,PSCs)和单能干细胞(unipotent stemcells,USCs).
【总页数】5页(P49-53)
【作者】武玉涛;张力
【作者单位】浙江大学医学院附属第一医院,心内科,杭州,310003;浙江大学医学院附属第一医院,心内科,杭州,310003
【正文语种】中文
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1.诱导多能干细胞体外定向分化为雄性生殖细胞研究进展 [J], 杜军慧;曹文广
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3.多能干细胞视网膜定向分化研究进展 [J], 颜廷宇;孔珺
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5.多能干细胞向雄性生殖细胞定向分化的研究进展 [J],
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2013.09.02
主要内容
什么是诱导多能性干细胞？ 获取诱导多能性干细胞的基本原理 诱导多能性干细胞的诱导培养与鉴定 诱导多能性干细胞技术的研究进展 诱导多能性干细胞的优缺点 诱导多能性干细胞的发展历程与应用前景
干细胞
具有无限制自我更新能力、同时也可分化成特定 组织的细胞，在细胞发育过程中处于较原始阶段。 包括：胚胎干细胞 成体干细胞：上皮干细胞 造血干细胞 神经干细胞 肌肉干细胞
2007年末，Thompson实验室和山中伸弥实验室几乎同时 报道，利用iPS技术同样可以诱导人皮肤纤维母细胞成为几 乎与胚胎干细胞完全一样的多能干细胞。 所不同的是日本实验室依然采用了用逆转录病毒引入 Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4 4种因子组合，而 Thompson实验室则采用了以慢病毒载体引入OCT4、 SOX2加NANOG和LIN28这种因子组合。 这些研究成果被美国《科学》杂志列为2008年十大科技突 破中的第1位。
人体胚胎干(hES)细胞
胚胎干细胞（ES细胞）来源于哺 乳动物胚胎发育早期的胚泡期的内 细胞团，是最原始的干细胞 优点：有潜力在体内发育成任何 细胞类型 缺点： (l)供体卵母细胞的来源困难, ES细 胞建系效率低 (2)免疫排斥反应 (3)ES细胞具有成瘤性 (4)体外保持ES细胞全能性的条件 非常复杂 (5)伦理学争论
IPS细胞的应用前景
用于器官移植 建立疾病模型，了解发病机理 治疗某些遗传病 如：患有镰刀型贫血症的小鼠皮肤成纤维细胞建立了IPSc， 并将其移植到小鼠体内，小鼠的症状得以缓解。
实验方案
1. 培养小鼠骨髓间充质干细胞 2. 实验分组：对照 Fe3O4/Au RGD-Fe3O4/Au F3-Fe3O4/Au
人诱导性多能干细胞鉴定 -形态鉴别和AP染色
On feeder (100×) AP staining(40×) Matrigel (200×)
扁平，较高核质比 AP染色呈阳性
qPCR检测内源多能性基因与转基因表达水平
多能性标志物的检测
甲基化水平检测与核型鉴定
拟胚体畸胎瘤形成实验验证分化潜能
成体干细胞
成体干细胞是指存在于一种 已经分化组织中的未分化细 胞，这种细胞能够自我更新 并且能够特化形成组成该类 型组织的细胞。成体干细胞 存在于机体的各种组织器官 中。成年个体组织中的成体 干细胞在正常情况下大多处 于休眠状态，在病理状态或 在外因诱导下可以表现出不 同程度的再生和更新能力。
人诱导性多能干细胞的建立-技术流程
流程图
Cell Stem Cell,2009
人诱导性多能干细胞的建立-克隆挑取
可挑克隆-有光滑边缘，胚胎干细胞样
一次性玻璃巴 氏吸管，需制 备圆口（切割 ，剥离）和断 口（吸取）两 种
人诱导性多能干细胞鉴定
•形态鉴别与AP染色 •Realtime PCR 检测多能性基因的表达水平。 •免疫荧光鉴定胚胎标志物的表达 •多能性基因（Nanog, Oct4）启动子甲基化水平比较 •基因芯片鉴定诱导性多能干细胞与胚胎干细胞在基因表达 谱上的相似程度 •核型鉴定 •拟胚体实验验证分化潜能 •畸胎瘤实验验证分化潜能
2006年日本京都大学山中伸弥Shinya Yamanaka领导的实验室 在世界著名学术杂志《细胞》上率先报道了iPS的研究。 他们把Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4这4种转录因子引入小鼠 胚胎或皮肤纤维母细胞，发现可诱导其发生转化，产生的 iPS细胞在形态、基因和蛋白表达、表观遗传修饰状态、细 胞倍增能力、类胚体和畸形瘤生成能力、分化能力等都与 胚胎干细胞极为相似。
iPS优点
与经典的胚胎干细胞技术和体细胞核移植技术不 同，iPS技术不使用胚胎细胞或卵细胞，因此没有 伦理学的问题。 利用iPS技术可以用病人自己的体细胞制备专用的 干细胞，所以不会有免疫排斥的问题。
iPS缺点ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
比如，添加4个“重新编程”基因或取代疾病细胞中有 缺陷基因的方法都可能有导致癌症的副作用。
获取IPS细胞的基本原理
ES细胞和IPS细胞具有相同的基因。ES细胞中的与细 胞多能性有关的基因能够表达，如：oct4，Sox2等。 而已分化的体细胞中的这些基因不能表达。通过导入 与多能性有关的外源基因来激活体细胞中的多能性基 因，从而使体细胞从分化状态重编程为多能性干细胞。
iPS发展历程
诱导性多能干细胞的安全性-成瘤风险
不同组织来源的 iPSC 神 经 分 化 效 率不同，移植的神 经 球 成 瘤 效 率 iPSC 比ESC高。 不同来源和方法来 的iPSC 神经分化 能力各不相同， 都 不 如 ESC 的 分 化效率。
Zhang S.C. 2010 PNAS
Yamanaka S. 2009 NBT
2009年，中国科学家于2008年11月利用iPS细胞培育 出小鼠——“小小” 中国科学院动物研究所周琪研究员和上海交通大学医 学院曾凡一研究员领导的研究组合作完成的工作表明， 利用iPS细胞能够得到成活的具有繁殖能力的小鼠，从 而在世界上第一次证明了iPS细胞与胚胎干细胞具有相 似的多能性。科学家表示，这一研究成果表明iPS干细 胞或许同胚胎干细胞一样可以作为治疗各种疾病的潜 在来源。
每次用磁场处理30min，每隔4小时处理一次，共处理3天，在显微镜下实 时观察细胞的形态变化。 3. MTT 检测细胞数的变化。（酶标仪） 4. 流式细胞仪检测细胞周期。（流式细胞仪） 5. 收集细胞，用RT-PCR 检测基因的表达水平，包括: oct4, sox2, klf4, c-myc, nanog, utf1,rex1, fbxo15, dax1.（PCR仪） 6. 免疫荧光检测干细胞标志物：SSEA1，OCT4，NANOG，UTF1（荧光显 微镜） 7. NANOG，OCT4甲基化水平检测：送公司甲基化测序。
国际学术权威杂志Science杂志刊登了北京大学生命科学学 院邓宏魁教授和赵扬博士带领的研究团队在生命科学领域 的一项革命性的研究成果——用小分子化合物诱导体细胞 重编程为多潜能干细胞。该成果开辟了一条全新的实现体 细胞重编程的途径，给未来应用再生医学治疗重大疾病带 来了新的可能。 在这项研究中，邓宏魁团队仅使用四个小分子化合物的组 合对体细胞进行处理就可以成功地逆转其“发育时钟”， 实现体细胞的“重编程”。使用这项技术，他们成功地将 已经特化的小鼠成体细胞诱导成为了可以重新分化发育为 各种组织器官类型的“多潜能性”细胞，并将其命名为 “化学诱导的多潜能干细胞（CiPS细胞）”。
神经干细胞 造血干细胞 间充质干细胞 内皮干细胞 ……
iPS
通过基因转染技术(gene transfection)将某些转录因子 导入动物或人的体细胞, 使体细胞直接重构成为胚胎干 细胞（embryonic stem cell, ESC）细胞样的多潜能细 胞。
iPS细胞不仅在细胞形态、 生长特性、 干细胞标志物 表达等方面与ES细胞非常相似, 而且在DNA甲基化方 式、 基因表达谱、 染色质状态、 形成嵌合体动物等方 面也与ES细胞几乎完全相同。
2008年，哈佛大学George Daley实验室利用诱导细胞重 新编程技术把采自10种不同遗传病患者病人的皮肤细胞转 变为iPS，这些细胞将会在建立疾病模型、药物筛选等方面 发挥重要作用。 美国科学家还发现，iPS可在适当诱导条件下定向分化，如 变成血细胞，再用于治疗疾病。 哈佛大学另一家实验室则发现利用病毒将3种在细胞发育过 程中起重要作用的转录因子引入小鼠胰腺外分泌细胞，可 以直接使其转变成与干细胞极为相似的细胞，并且可以分 泌胰岛素、有效降低血糖。这表明利用诱导重新编程技术 可以直接获得某一特定组织细胞，而不必先经过诱导多能 干细胞这一步。