三联吡啶钌电致化学发光法测定苯磺酸顺阿曲库铵_田刚 - 副本

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2+ 3
心血管反应和组胺释放副作用小等 内无蓄积作用, 优点。目前苯磺酸顺阿曲库铵的测定方法主要有高 效液 相 色 谱 法 ( HPLC ) HPLC - 质谱 ( MS )
[ 4 ] [ 2 ]
, 气 相 色 谱 法 ( GC )
[ 5 ]
[ 3 ]

, HPLCMS / MS
。 中国药典
( 2010 年版) 采用 HPLC 方法对其原料药进行测定。 电化学发光 ( ECL ) 检测法, 具有灵敏度高、 选择性 好, 操作简便易控等特点, 广泛用于药物分析 中作为发光试剂的三联吡啶钌 ( Ru ( bpy ) 3 等优点
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-6 -5 磺酸顺阿曲库铵在浓度为 2. 0 × 10 ~ 3. 2 × 10 mol / L 范围内与其相对发光强度呈线性关系( 图 5) , 2 2 线性回归方程为 I = 3. 2 × 10 c + 88. 2 ( r = 0. 9999 ) ,
2. 2
缓冲溶液对 ECL 强度的影响 实验考察了磷酸盐缓冲液, 硼酸盐缓冲溶液和
TrisHCl 缓冲溶液对 ECL 信号和稳定性的影响。 结果发现, 以硼酸盐缓冲体系为介质时, 苯磺酸顺
2+ 阿曲库铵增敏 Ru ( bpy ) 3 的 ECL 信号强度信噪 比最大, 重现性较好。考察了硼酸盐缓冲溶液的浓 结果表明硼酸盐缓冲 度和 pH 对发光强度的影响,
的 Ru( bpy)
图1 Fig. 1 三联吡啶钌( a ) 和苯磺酸顺阿曲库铵 - 三联吡 啶钌( b) 共存体系 Cyclic voltammogram of Ru ( bpy ) 3 cisatracuriumRu( bpy) 3
2+ 2+
有碍于电极表面电子的传递有关, 考 虑 到 实 验 的 灵 敏 度 和 试 剂 成 本,实 验 中
溶液浓度在 20 ~ 100 mmol / L 范围内, 当浓度为 40 mmol / L 时 ECL 强度最大。 苯磺酸顺阿曲库铵的 ECL 强度随硼酸盐缓冲溶液 pH 的增大而逐渐升 pH > 9. 2 时 ECL 急剧增加, pH 9. 6 时其 ECL 强 高, 度最大( 图 2 ) , 故本实验选用 40 mmol / L 硼酸盐缓 冲溶液( pH 9. 6 ) 。苯磺酸顺阿曲库铵是一种季铵 盐, 发光机理可能是实验条件下苯磺酸顺阿曲库铵 分解成劳丹素, 劳丹素因含有叔胺基团, 故能增强
分析试验室
Vol. 32. No. 2
三联吡啶钌电致化学发光法测定苯磺酸顺阿曲库铵
田 刚, 张晓清, 樊子勉, 班艳娜, 丁 敏
*
( 重庆医科大学检验医学院, 临床检验诊断学教育部重点实验室 , 重庆 400016 )
2+ 要 : 基于硼砂溶液中 Ru ( bpy ) 3 的弱电化学发光信号可被苯磺酸顺阿曲 库铵增敏, 建立了测定苯磺酸顺阿曲库铵的电化学发光 ( ECL ) 新方法。 在最佳
2+ 3
发光效率高, 激发态寿命长和电化学再生 水溶性好、 。本文基于碱性条件下苯磺酸顺阿曲库铵
2+
增强 Ru( bpy) 3
的发光强度, 建立测定苯磺酸顺阿
曲库铵的新方法。本方法简便、 快速、 检测限低, 具 有较好的选择性。该方法应用于苯磺酸顺阿曲库铵 结果满意。 注射制剂分析, 1 实验部分 1. 1 仪器与试剂 MPIB 型多参数化学发光分析测试系统 ( 西安 瑞迈分析仪器公司 ) 。 ECL 检测为三电极体系: 工 作电极为直径 500 μm 的铂圆盘电极; 参比电极为 直径 300 μm 的 Ag / AgCl 参比电极 ( 饱 和 KCl 溶
3
2+
Ru( bpy) 2. 4
2+ 3
的浓度确定为 0. 8 mmol / L。
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仪器参数的优化
( a ) and
system ( b)
光电倍增管负高压影响仪器灵敏度和稳定性 , 为获取较高的灵敏度和较低的噪音 , 本实验负高压 为 800 V。考察不同扫描速率 ( 0. 01 ~ 0. 1 V / s ) 对 ECL 的影 响 ( 图 3 ) 。 结 果 表 明 扫 描 速 率 较 慢 时 ECL 强度较高, 但峰展宽, 分析时间较长, 为了维 持较小的峰宽和较高的 ECL 强度, 扫描速率选用 0. 04 V / s。
图2 Fig. 2 硼酸盐缓冲液 pH 对 ECL 强度的影响
2. 6
方法学评价 在最佳条件下, 通过 ECL 工作站记录不同浓度
Effect of pH of biborate sodium buffer solution on ECL intensity
的苯磺酸顺阿曲库铵标准品溶液在电极上的响应曲 线, 如图 4 所示。以相对峰高进行线性回归分析, 苯
图 3 扫描速率对 ECL 强度和峰宽的影响 Fig. 3 Effect of scan rate on ECL intensity and peak width
2. 5
共存物质的影响 在含有 28. 0 μmol / L 的苯磺酸顺阿曲库铵的 溶液中, 考察了常用的药物赋形剂和可能的无机离
子对测定的影响, 在测定的相对误差 < ± 5% 时, 400 倍的葡萄糖, 500 倍的乳糖和 50 倍的枸橼酸以 + - 2+ Cl , Mg , SO4 2 - , Ca2 + , K + 不干扰苯磺酸 及 Na , 顺阿曲库铵的测定。
Chinese Journal of Analysis Laboratory 2013 - 2
第 32 卷第 2 期 2013 年 2 月
0506 收稿日期: 2012Email: dingmin@ cqmu. edu. cn
、 苯磺酸顺阿曲库铵与 Ru ( bpy )
2+ 3

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Chinese Journal of Analysis Laboratory 2013 - 2 存体系的 CV 曲线, 从图中可知苯磺酸顺阿曲库铵 2+ 的加入对 Ru( bpy) 3 的电化学发光信号有显著的 增强作用。 三联吡啶钌的电化学发光强度。 2. 3 Ru( bpy) 3 2 + 浓度的选择 考 察 了 在 0. 4 ~ 6. 0 mmol / L 范 围 内 Ru( bpy) 3 2 + 浓度对发光强度的影响。 结果表明, 随着 Ru( bpy) Ru( bpy) 3
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别用水溶 解 后 定 容 于 100 mL 容 量 瓶 中 , 配制苯 磺酸顺阿 曲 库 铵 溶 液 。 测 得 其 含 量 为 标 示 量 的 ( 90. 0 ± 0. 2 ) % ( n = 3 ) 。 参 照 Fernández[8] 等 人 FD 法 , 建立的以盐酸维拉帕米为内标的 HPLC测 的相同批号 注 射 用 苯 磺 酸 顺 阿 曲 库 铵 的 含 量 为 标示量的 ( 91. 2 ± 0. 1 ) % , 两种方 法 测 定 结 果 差 异无统计学意义 ( P < 0. 05 ) 。 在样品溶液 ( 12. 9 9. 0 , 3. 0 μmol / L) 中 加 入 高 、 中、 低 浓 度 ( 15. 0 , μmol / L) 的苯磺酸顺阿曲库铵标准品溶液进行回 收 实 验 ,回 收 率 分 别 为 ( 96. 2 ± 0. 5 ) % , ( 99. 2 ± 0. 2 ) % 和 ( 98. 5 ± 0. 3 ) % ,( n = 3 , CV 均 < 5% ) , 结果表明本方法可以用于注射用苯磺酸 顺阿曲库铵含量的测定 。
[ 7 ] [ 6 ]
。其
溶液,
2+
) 具有
光电倍增管负高压为 800 V, 扫描电位范围为 1. 2 ~ 1. 4 V, 扫描速率为 0. 04 V / s。 在上述条件下进 行循环伏安( CV) 扫描, 记录发光信号作为空白, 然 后对含一定浓度的苯磺酸顺阿曲库铵溶液再进行 CV 扫描, 以相对化学发光强度 ( 信号 - 空白 ) 对苯 磺酸顺阿曲库铵定量分析。 2 2. 1 结果与讨论 Ru ( bpy ) 3 2 + 与苯磺酸顺阿曲库铵的电化学 行为 在上述条件下对不含苯磺酸顺阿曲库铵和含 有 16. 0 μmol / L 的苯磺酸顺阿曲库铵溶液分别进 行 CV 扫描, 结果如图 1 。 图中曲线 a 和 b 分别为 Ru( bpy)

-6 -5 条件下, 苯磺酸顺阿曲库铵浓度在 2. 0 × 10 ~ 3. 2 × 10 mol / L 范围内与其相 2 -8 检出限为 4. 0 × 10 mol / L ( S / N = 3 ) 。 重 对发光强度呈线性关系( r = 0. 9999 ) , -5 3. 2 × 10 - 6 mol / L) 的苯磺酸顺阿曲库铵溶液 复测定高、 低浓度( 2. 4 × 10 mol / L, 9 次, 其 RSD 均为 3. 2% , 方法具有较好的重现性。 方法已用于注射用苯磺酸顺
阿曲库铵的测定。 关键词: 苯磺酸顺阿曲库铵; 三联吡啶钌; 电致化学发光
中图分类号: O657. 3 文献标识码: A 文章编号: 1000-0720 ( 2013 ) 02-085-04
苯磺酸顺阿曲库铵是麻醉手术中常用的新型非 去极化肌松药
[ 1 ]
, 具有起效快、 作用强、 恢复迅速、 体
液) ; 辅助电极为直径 1 mm 的铂丝对电极。 实验 用水经 Millipore 纯水系统制备。 苯磺酸顺阿曲库 铵标准品和注射用苯磺酸顺阿曲库铵 ( 5 mg / 支 ) ; TBR ) ; 三羟甲 三联吡啶钌 ( Ru ( bpy ) 3 Cl2 ·6H2 O, 其余试剂均为分析纯。 基氨基甲烷( Tris) , 1. 2 实验方法 B 型多参数化学发光分析测试系 试验在 MPI三电极体系。检测池内含 40 mmol / L 硼 统上进行, 0. 8 mmol / L Ru ( bpy ) 砂溶液 ( pH 9. 6 ) ,
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样品分析 取 3 支同一批号注射用苯磺酸顺阿曲库铵分
方法的检出限( S / N = 3 ) 为 4. 0 × 10 mol / L。对高、 -5 3. 2 × 10 - 6 mol / L) 的苯磺 低浓度( 2. 4 × 10 mol / L, 酸顺阿曲库铵平行测定 9 次, 其变异系数分别为 3. 11% 和 3. 14% , 结果表明本方法的重现性较好。
图4 Fig. 4
不同浓度苯磺酸顺阿曲库铵的 ECL 曲线 ECL curves of different concentrations
参考文献
[ 1] Wang P, Zhang H, Stewart J T, et al. J Pharm Biomed Anal, 1998 , 17 ( 3 ) : 547 [ 2] Xu Q A,Zhang Y P,Trissel L A,et al. Am J Health Syst Pharm, 1998 , 55 ( 10 ) : 1037 [ 3] Guitton J,Desage M,Lepape A,et al. J Chromatogr B: Biomed Sci Appl, 1995 , 669 ( 2 ) : 358 [ 4] Zhang H, Wang P, Bartlett M G, et al. J Pharm Biomed Anal, 1998 , 16 ( 7 ) : 1241 [ 5] GutteckAmsler U,Rentsch K M,Clin Chem,2000 , 46 ( 9 ) : 1413 [ 6] Wang Y,Wu Q,Cheng M,et al J Chromatogr B Anal
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ECL 强度增加, 浓度的增加, 说明
浓度的增加有利于电极表面生成激发
3+ 2+ 态的 Ru( bpy) 3 。Ru ( bpy ) 3 浓度在 0. 8 mmol / L 2+ 时 ECL 强度最大, 当 Ru( bpy ) 3 浓度继续增加时, ECL 强度无明显变化, 但背景噪音增加, 这和过多
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