三联吡啶钌电致化学发光法测定苯磺酸顺阿曲库铵_田刚 - 副本
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2+ 3
心血管反应和组胺释放副作用小等 内无蓄积作用， 优点。目前苯磺酸顺阿曲库铵的测定方法主要有高 效液 相 色 谱 法 （ HPLC ） HPLC － 质谱 （ MS ）
［ 4 ］ ［ 2 ］
， 气 相 色 谱 法 （ GC ）
［ 5 ］
［ 3 ］
，
， HPLCMS / MS
。 中国药典
（ 2010 年版） 采用 HPLC 方法对其原料药进行测定。 电化学发光 （ ECL ） 检测法， 具有灵敏度高、 选择性 好， 操作简便易控等特点， 广泛用于药物分析 中作为发光试剂的三联吡啶钌 （ Ru （ bpy ） 3 等优点
［ 7 ］ ［ 6 ］
。其溶液，2+） 具有光电倍增管负高压为 800 V， 扫描电位范围为 1. 2 ～ 1. 4 V， 扫描速率为 0. 04 V / s。 在上述条件下进 行循环伏安（ CV） 扫描， 记录发光信号作为空白， 然 后对含一定浓度的苯磺酸顺阿曲库铵溶液再进行 CV 扫描， 以相对化学发光强度 （ 信号 － 空白 ） 对苯 磺酸顺阿曲库铵定量分析。 2 2. 1 结果与讨论 Ru （ bpy ） 3 2 + 与苯磺酸顺阿曲库铵的电化学 行为 在上述条件下对不含苯磺酸顺阿曲库铵和含 有 16. 0 μmol / L 的苯磺酸顺阿曲库铵溶液分别进 行 CV 扫描， 结果如图 1 。 图中曲线 a 和 b 分别为 Ru（ bpy）
— 86 —
Chinese Journal of Analysis Laboratory 2013 － 2
－6 －5 磺酸顺阿曲库铵在浓度为 2. 0 × 10 ～ 3. 2 × 10 mol / L 范围内与其相对发光强度呈线性关系（ 图 5） ， 2 2 线性回归方程为 I = 3. 2 × 10 c + 88. 2 （ r = 0. 9999 ） ，
阿曲库铵的测定。 关键词： 苯磺酸顺阿曲库铵； 三联吡啶钌； 电致化学发光
中图分类号： O657. 3 文献标识码： A 文章编号： 1000-0720 （ 2013 ） 02-085-04
苯磺酸顺阿曲库铵是麻醉手术中常用的新型非 去极化肌松药
［ 1 ］
， 具有起效快、 作用强、 恢复迅速、 体
液） ； 辅助电极为直径 1 mm 的铂丝对电极。 实验 用水经 Millipore 纯水系统制备。 苯磺酸顺阿曲库 铵标准品和注射用苯磺酸顺阿曲库铵 （ 5 mg / 支 ） ； TBR ） ； 三羟甲 三联吡啶钌 （ Ru （ bpy ） 3 Cl2 ·6H2 O， 其余试剂均为分析纯。 基氨基甲烷（ Tris） ， 1. 2 实验方法 B 型多参数化学发光分析测试系 试验在 MPI三电极体系。检测池内含 40 mmol / L 硼 统上进行， 0. 8 mmol / L Ru （ bpy ） 砂溶液 （ pH 9. 6 ） ，
的 Ru（ bpy）
图1 Fig． 1 三联吡啶钌（ a ） 和苯磺酸顺阿曲库铵 － 三联吡 啶钌（ b） 共存体系 Cyclic voltammogram of Ru （ bpy ） 3 cisatracuriumRu（ bpy） 3
2+ 2+
有碍于电极表面电子的传递有关， 考 虑 到 实 验 的 灵 敏 度 和 试 剂 成 本，实 验 中
图4 Fig． 4
不同浓度苯磺酸顺阿曲库铵的 ECL 曲线 ECL curves of different concentrations
参考文献
［ 1］ Wang P， Zhang H， Stewart J T， et al． J Pharm Biomed Anal， 1998 ， 17 （ 3 ） ： 547 ［ 2］ Xu Q A，Zhang Y P，Trissel L A，et al． Am J Health Syst Pharm， 1998 ， 55 （ 10 ） ： 1037 ［ 3］ Guitton J，Desage M，Lepape A，et al． J Chromatogr B： Biomed Sci Appl， 1995 ， 669 （ 2 ） ： 358 ［ 4］ Zhang H， Wang P， Bartlett M G， et al． J Pharm Biomed Anal， 1998 ， 16 （ 7 ） ： 1241 ［ 5］ GutteckAmsler U，Rentsch K M，Clin Chem，2000 ， 46 （ 9 ） ： 1413 ［ 6］ Wang Y，Wu Q，Cheng M，et al J Chromatogr B Anal
3
2+
Ru（ bpy） 2. 4
2+ 3
的浓度确定为 0. 8 mmol / L。
仪器参数的优化
（ a ） and
system （ b）
光电倍增管负高压影响仪器灵敏度和稳定性 ， 为获取较高的灵敏度和较低的噪音 ， 本实验负高压 为 800 V。考察不同扫描速率 （ 0. 01 ～ 0. 1 V / s ） 对 ECL 的影 响 （ 图 3 ） 。 结 果 表 明 扫 描 速 率 较 慢 时 ECL 强度较高， 但峰展宽， 分析时间较长， 为了维 持较小的峰宽和较高的 ECL 强度， 扫描速率选用 0. 04 V / s。
分析试验室
Vol. 32． No． 2
三联吡啶钌电致化学发光法测定苯磺酸顺阿曲库铵
田 刚， 张晓清， 樊子勉， 班艳娜， 丁 敏
*
（ 重庆医科大学检验医学院， 临床检验诊断学教育部重点实验室 ， 重庆 400016 ）
2+ 要 ： 基于硼砂溶液中 Ru （ bpy ） 3 的弱电化学发光信号可被苯磺酸顺阿曲 库铵增敏， 建立了测定苯磺酸顺阿曲库铵的电化学发光 （ ECL ） 新方法。 在最佳
溶液浓度在 20 ～ 100 mmol / L 范围内， 当浓度为 40 mmol / L 时 ECL 强度最大。 苯磺酸顺阿曲库铵的 ECL 强度随硼酸盐缓冲溶液 pH 的增大而逐渐升 pH ＞ 9. 2 时 ECL 急剧增加， pH 9. 6 时其 ECL 强 高， 度最大（ 图 2 ） ， 故本实验选用 40 mmol / L 硼酸盐缓 冲溶液（ pH 9. 6 ） 。苯磺酸顺阿曲库铵是一种季铵 盐， 发光机理可能是实验条件下苯磺酸顺阿曲库铵 分解成劳丹素， 劳丹素因含有叔胺基团， 故能增强
摘
－6 －5 条件下， 苯磺酸顺阿曲库铵浓度在 2. 0 × 10 ～ 3. 2 × 10 mol / L 范围内与其相 2 －8 检出限为 4. 0 × 10 mol / L （ S / N = 3 ） 。 重 对发光强度呈线性关系（ r = 0. 9999 ） ， －5 3. 2 × 10 － 6 mol / L） 的苯磺酸顺阿曲库铵溶液 复测定高、 低浓度（ 2. 4 × 10 mol / L， 9 次， 其 RSD 均为 3. 2% ， 方法具有较好的重现性。 方法已用于注射用苯磺酸顺
第 32 卷第 2 期 2013 年 2 月
分析试验室
Vol. 32． No． 2
2. 7
样品分析 取 3 支同一批号注射用苯磺酸顺阿曲库铵分
方法的检出限（ S / N = 3 ） 为 4. 0 × 10 mol / L。对高、 －5 3. 2 × 10 － 6 mol / L） 的苯磺 低浓度（ 2. 4 × 10 mol / L， 酸顺阿曲库铵平行测定 9 次， 其变异系数分别为 3. 11% 和 3. 14% ， 结果表明本方法的重现性较好。
2. 2
缓冲溶液对 ECL 强度的影响 实验考察了磷酸盐缓冲液， 硼酸盐缓冲溶液和
TrisHCl 缓冲溶液对 ECL 信号和稳定性的影响。 结果发现， 以硼酸盐缓冲体系为介质时， 苯磺酸顺
2+ 阿曲库铵增敏 Ru （ bpy ） 3 的 ECL 信号强度信噪 比最大， 重现性较好。考察了硼酸盐缓冲溶液的浓 结果表明硼酸盐缓冲 度和 pH 对发光强度的影响，
0506 收稿日期： 2012Email： dingmin@ cqmu． edu． cn
、 苯磺酸顺阿曲库铵与 Ru （ bpy ）
2+ 3
共
— 85 —
Chinese Journal of Analysis Laboratory 2013 － 2 存体系的 CV 曲线， 从图中可知苯磺酸顺阿曲库铵 2+ 的加入对 Ru（ bpy） 3 的电化学发光信号有显著的 增强作用。 三联吡啶钌的电化学发光强度。 2. 3 Ru（ bpy） 3 2 + 浓度的选择 考 察 了 在 0. 4 ～ 6. 0 mmol / L 范 围 内 Ru（ bpy） 3 2 + 浓度对发光强度的影响。 结果表明， 随着 Ru（ bpy） Ru（ bpy） 3
2+ 3
发光效率高， 激发态寿命长和电化学再生 水溶性好、 。本文基于碱性条件下苯磺酸顺阿曲库铵
2+
增强 Ru（ bpy） 3
的发光强度， 建立测定苯磺酸顺阿
曲库铵的新方法。本方法简便、 快速、 检测限低， 具 有较好的选择性。该方法应用于苯磺酸顺阿曲库铵 结果满意。 注射制剂分析， 1 实验部分 1. 1 仪器与试剂 MPIB 型多参数化学发光分析测试系统 （ 西安 瑞迈分析仪器公司 ） 。 ECL 检测为三电极体系： 工 作电极为直径 500 μm 的铂圆盘电极； 参比电极为 直径 300 μm 的 Ag / AgCl 参比电极 （ 饱 和 KCl 溶
图 3 扫描速率对 ECL 强度和峰宽的影响 Fig． 3 Effect of scan rate on ECL intensity and peak width
2. 5
共存物质的影响 在含有 28. 0 μmol / L 的苯磺酸顺阿曲库铵的 溶液中， 考察了常用的药物赋形剂和可能的无机离
子对测定的影响， 在测定的相对误差 ＜ ± 5% 时， 400 倍的葡萄糖， 500 倍的乳糖和 50 倍的枸橼酸以 + － 2+ Cl ， Mg ， SO4 2 － ， Ca2 + ， K + 不干扰苯磺酸 及 Na ， 顺阿曲库铵的测定。
－8
别用水溶 解 后 定 容 于 100 mL 容 量 瓶 中 ， 配制苯 磺酸顺阿 曲 库 铵 溶 液 。 测 得 其 含 量 为 标 示 量 的 （ 90. 0 ± 0. 2 ） % （ n = 3 ） 。 参 照 Fernández［8］ 等 人 FD 法 ， 建立的以盐酸维拉帕米为内标的 HPLC测 的相同批号 注 射 用 苯 磺 酸 顺 阿 曲 库 铵 的 含 量 为 标示量的 （ 91. 2 ± 0. 1 ） % ， 两种方 法 测 定 结 果 差 异无统计学意义 （ P ＜ 0. 05 ） 。 在样品溶液 （ 12. 9 9. 0 ， 3. 0 μmol / L） 中 加 入 高 、 中、 低 浓 度 （ 15. 0 ， μmol / L） 的苯磺酸顺阿曲库铵标准品溶液进行回 收 实 验 ，回 收 率 分 别 为 （ 96. 2 ± 0. 5 ） % ， （ 99. 2 ± 0. 2 ） % 和 （ 98. 5 ± 0. 3 ） % ，（ n = 3 ， CV 均 ＜ 5% ） ， 结果表明本方法可以用于注射用苯磺酸 顺阿曲库铵含量的测定 。
2+ 2+ 3
第 32 卷第 2 期 2013 年 2 月
分析试验室
Vol. 32． No． 2
ECL 强度增加， 浓度的增加， 说明
浓度的增加有利于电极表面生成激发
3+ 2+ 态的 Ru（ bpy） 3 。Ru （ bpy ） 3 浓度在 0. 8 mmol / L 2+ 时 ECL 强度最大， 当 Ru（ bpy ） 3 浓度继续增加时， ECL 强度无明显变化， 但背景噪音增加， 这和过多
图2 Fig． 2 硼酸盐缓冲液 pH 对 ECL 强度的影响
2. 6
方法学评价 在最佳条件下， 通过 ECL 工作站记录不同浓度
Effect of pH of biborate sodium buffer solution on ECL intensity
的苯磺酸顺阿曲库铵标准品溶液在电极上的响应曲 线， 如图 4 所示。以相对峰高进行线性回归分析， 苯
Chinese Journal of Analysis Laboratory 2013 － 2
第 32 卷第 2 期 2013 年 2 月
心血管反应和组胺释放副作用小等 内无蓄积作用， 优点。目前苯磺酸顺阿曲库铵的测定方法主要有高 效液 相 色 谱 法 （ HPLC ） HPLC － 质谱 （ MS ）
［ 4 ］ ［ 2 ］
， 气 相 色 谱 法 （ GC ）
［ 5 ］
［ 3 ］
，
， HPLCMS / MS
。 中国药典
（ 2010 年版） 采用 HPLC 方法对其原料药进行测定。 电化学发光 （ ECL ） 检测法， 具有灵敏度高、 选择性 好， 操作简便易控等特点， 广泛用于药物分析 中作为发光试剂的三联吡啶钌 （ Ru （ bpy ） 3 等优点
［ 7 ］ ［ 6 ］
。其溶液，2+） 具有光电倍增管负高压为 800 V， 扫描电位范围为 1. 2 ～ 1. 4 V， 扫描速率为 0. 04 V / s。 在上述条件下进 行循环伏安（ CV） 扫描， 记录发光信号作为空白， 然 后对含一定浓度的苯磺酸顺阿曲库铵溶液再进行 CV 扫描， 以相对化学发光强度 （ 信号 － 空白 ） 对苯 磺酸顺阿曲库铵定量分析。 2 2. 1 结果与讨论 Ru （ bpy ） 3 2 + 与苯磺酸顺阿曲库铵的电化学 行为 在上述条件下对不含苯磺酸顺阿曲库铵和含 有 16. 0 μmol / L 的苯磺酸顺阿曲库铵溶液分别进 行 CV 扫描， 结果如图 1 。 图中曲线 a 和 b 分别为 Ru（ bpy）
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－6 －5 磺酸顺阿曲库铵在浓度为 2. 0 × 10 ～ 3. 2 × 10 mol / L 范围内与其相对发光强度呈线性关系（ 图 5） ， 2 2 线性回归方程为 I = 3. 2 × 10 c + 88. 2 （ r = 0. 9999 ） ，
阿曲库铵的测定。 关键词： 苯磺酸顺阿曲库铵； 三联吡啶钌； 电致化学发光
中图分类号： O657. 3 文献标识码： A 文章编号： 1000-0720 （ 2013 ） 02-085-04
苯磺酸顺阿曲库铵是麻醉手术中常用的新型非 去极化肌松药
［ 1 ］
， 具有起效快、 作用强、 恢复迅速、 体
液） ； 辅助电极为直径 1 mm 的铂丝对电极。 实验 用水经 Millipore 纯水系统制备。 苯磺酸顺阿曲库 铵标准品和注射用苯磺酸顺阿曲库铵 （ 5 mg / 支 ） ； TBR ） ； 三羟甲 三联吡啶钌 （ Ru （ bpy ） 3 Cl2 ·6H2 O， 其余试剂均为分析纯。 基氨基甲烷（ Tris） ， 1. 2 实验方法 B 型多参数化学发光分析测试系 试验在 MPI三电极体系。检测池内含 40 mmol / L 硼 统上进行， 0. 8 mmol / L Ru （ bpy ） 砂溶液 （ pH 9. 6 ） ，
的 Ru（ bpy）
图1 Fig． 1 三联吡啶钌（ a ） 和苯磺酸顺阿曲库铵 － 三联吡 啶钌（ b） 共存体系 Cyclic voltammogram of Ru （ bpy ） 3 cisatracuriumRu（ bpy） 3
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有碍于电极表面电子的传递有关， 考 虑 到 实 验 的 灵 敏 度 和 试 剂 成 本，实 验 中
图4 Fig． 4
不同浓度苯磺酸顺阿曲库铵的 ECL 曲线 ECL curves of different concentrations
参考文献
［ 1］ Wang P， Zhang H， Stewart J T， et al． J Pharm Biomed Anal， 1998 ， 17 （ 3 ） ： 547 ［ 2］ Xu Q A，Zhang Y P，Trissel L A，et al． Am J Health Syst Pharm， 1998 ， 55 （ 10 ） ： 1037 ［ 3］ Guitton J，Desage M，Lepape A，et al． J Chromatogr B： Biomed Sci Appl， 1995 ， 669 （ 2 ） ： 358 ［ 4］ Zhang H， Wang P， Bartlett M G， et al． J Pharm Biomed Anal， 1998 ， 16 （ 7 ） ： 1241 ［ 5］ GutteckAmsler U，Rentsch K M，Clin Chem，2000 ， 46 （ 9 ） ： 1413 ［ 6］ Wang Y，Wu Q，Cheng M，et al J Chromatogr B Anal
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的浓度确定为 0. 8 mmol / L。
仪器参数的优化
（ a ） and
system （ b）
光电倍增管负高压影响仪器灵敏度和稳定性 ， 为获取较高的灵敏度和较低的噪音 ， 本实验负高压 为 800 V。考察不同扫描速率 （ 0. 01 ～ 0. 1 V / s ） 对 ECL 的影 响 （ 图 3 ） 。 结 果 表 明 扫 描 速 率 较 慢 时 ECL 强度较高， 但峰展宽， 分析时间较长， 为了维 持较小的峰宽和较高的 ECL 强度， 扫描速率选用 0. 04 V / s。
分析试验室
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三联吡啶钌电致化学发光法测定苯磺酸顺阿曲库铵
田 刚， 张晓清， 樊子勉， 班艳娜， 丁 敏
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（ 重庆医科大学检验医学院， 临床检验诊断学教育部重点实验室 ， 重庆 400016 ）
2+ 要 ： 基于硼砂溶液中 Ru （ bpy ） 3 的弱电化学发光信号可被苯磺酸顺阿曲 库铵增敏， 建立了测定苯磺酸顺阿曲库铵的电化学发光 （ ECL ） 新方法。 在最佳
溶液浓度在 20 ～ 100 mmol / L 范围内， 当浓度为 40 mmol / L 时 ECL 强度最大。 苯磺酸顺阿曲库铵的 ECL 强度随硼酸盐缓冲溶液 pH 的增大而逐渐升 pH ＞ 9. 2 时 ECL 急剧增加， pH 9. 6 时其 ECL 强 高， 度最大（ 图 2 ） ， 故本实验选用 40 mmol / L 硼酸盐缓 冲溶液（ pH 9. 6 ） 。苯磺酸顺阿曲库铵是一种季铵 盐， 发光机理可能是实验条件下苯磺酸顺阿曲库铵 分解成劳丹素， 劳丹素因含有叔胺基团， 故能增强
摘
－6 －5 条件下， 苯磺酸顺阿曲库铵浓度在 2. 0 × 10 ～ 3. 2 × 10 mol / L 范围内与其相 2 －8 检出限为 4. 0 × 10 mol / L （ S / N = 3 ） 。 重 对发光强度呈线性关系（ r = 0. 9999 ） ， －5 3. 2 × 10 － 6 mol / L） 的苯磺酸顺阿曲库铵溶液 复测定高、 低浓度（ 2. 4 × 10 mol / L， 9 次， 其 RSD 均为 3. 2% ， 方法具有较好的重现性。 方法已用于注射用苯磺酸顺
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样品分析 取 3 支同一批号注射用苯磺酸顺阿曲库铵分
方法的检出限（ S / N = 3 ） 为 4. 0 × 10 mol / L。对高、 －5 3. 2 × 10 － 6 mol / L） 的苯磺 低浓度（ 2. 4 × 10 mol / L， 酸顺阿曲库铵平行测定 9 次， 其变异系数分别为 3. 11% 和 3. 14% ， 结果表明本方法的重现性较好。
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缓冲溶液对 ECL 强度的影响 实验考察了磷酸盐缓冲液， 硼酸盐缓冲溶液和
TrisHCl 缓冲溶液对 ECL 信号和稳定性的影响。 结果发现， 以硼酸盐缓冲体系为介质时， 苯磺酸顺
2+ 阿曲库铵增敏 Ru （ bpy ） 3 的 ECL 信号强度信噪 比最大， 重现性较好。考察了硼酸盐缓冲溶液的浓 结果表明硼酸盐缓冲 度和 pH 对发光强度的影响，
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、 苯磺酸顺阿曲库铵与 Ru （ bpy ）
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Chinese Journal of Analysis Laboratory 2013 － 2 存体系的 CV 曲线， 从图中可知苯磺酸顺阿曲库铵 2+ 的加入对 Ru（ bpy） 3 的电化学发光信号有显著的 增强作用。 三联吡啶钌的电化学发光强度。 2. 3 Ru（ bpy） 3 2 + 浓度的选择 考 察 了 在 0. 4 ～ 6. 0 mmol / L 范 围 内 Ru（ bpy） 3 2 + 浓度对发光强度的影响。 结果表明， 随着 Ru（ bpy） Ru（ bpy） 3
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发光效率高， 激发态寿命长和电化学再生 水溶性好、 。本文基于碱性条件下苯磺酸顺阿曲库铵
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增强 Ru（ bpy） 3
的发光强度， 建立测定苯磺酸顺阿
曲库铵的新方法。本方法简便、 快速、 检测限低， 具 有较好的选择性。该方法应用于苯磺酸顺阿曲库铵 结果满意。 注射制剂分析， 1 实验部分 1. 1 仪器与试剂 MPIB 型多参数化学发光分析测试系统 （ 西安 瑞迈分析仪器公司 ） 。 ECL 检测为三电极体系： 工 作电极为直径 500 μm 的铂圆盘电极； 参比电极为 直径 300 μm 的 Ag / AgCl 参比电极 （ 饱 和 KCl 溶
图 3 扫描速率对 ECL 强度和峰宽的影响 Fig． 3 Effect of scan rate on ECL intensity and peak width
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共存物质的影响 在含有 28. 0 μmol / L 的苯磺酸顺阿曲库铵的 溶液中， 考察了常用的药物赋形剂和可能的无机离
子对测定的影响， 在测定的相对误差 ＜ ± 5% 时， 400 倍的葡萄糖， 500 倍的乳糖和 50 倍的枸橼酸以 + － 2+ Cl ， Mg ， SO4 2 － ， Ca2 + ， K + 不干扰苯磺酸 及 Na ， 顺阿曲库铵的测定。
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别用水溶 解 后 定 容 于 100 mL 容 量 瓶 中 ， 配制苯 磺酸顺阿 曲 库 铵 溶 液 。 测 得 其 含 量 为 标 示 量 的 （ 90. 0 ± 0. 2 ） % （ n = 3 ） 。 参 照 Fernández［8］ 等 人 FD 法 ， 建立的以盐酸维拉帕米为内标的 HPLC测 的相同批号 注 射 用 苯 磺 酸 顺 阿 曲 库 铵 的 含 量 为 标示量的 （ 91. 2 ± 0. 1 ） % ， 两种方 法 测 定 结 果 差 异无统计学意义 （ P ＜ 0. 05 ） 。 在样品溶液 （ 12. 9 9. 0 ， 3. 0 μmol / L） 中 加 入 高 、 中、 低 浓 度 （ 15. 0 ， μmol / L） 的苯磺酸顺阿曲库铵标准品溶液进行回 收 实 验 ，回 收 率 分 别 为 （ 96. 2 ± 0. 5 ） % ， （ 99. 2 ± 0. 2 ） % 和 （ 98. 5 ± 0. 3 ） % ，（ n = 3 ， CV 均 ＜ 5% ） ， 结果表明本方法可以用于注射用苯磺酸 顺阿曲库铵含量的测定 。
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第 32 卷第 2 期 2013 年 2 月
分析试验室
Vol. 32． No． 2
ECL 强度增加， 浓度的增加， 说明
浓度的增加有利于电极表面生成激发
3+ 2+ 态的 Ru（ bpy） 3 。Ru （ bpy ） 3 浓度在 0. 8 mmol / L 2+ 时 ECL 强度最大， 当 Ru（ bpy ） 3 浓度继续增加时， ECL 强度无明显变化， 但背景噪音增加， 这和过多
图2 Fig． 2 硼酸盐缓冲液 pH 对 ECL 强度的影响
2. 6
方法学评价 在最佳条件下， 通过 ECL 工作站记录不同浓度
Effect of pH of biborate sodium buffer solution on ECL intensity
的苯磺酸顺阿曲库铵标准品溶液在电极上的响应曲 线， 如图 4 所示。以相对峰高进行线性回归分析， 苯
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