用金纳米-分子信标的荧光定量PCR新技术研究6个miRNAs在心肌缺血患者中的表达
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何 凤屏 , 徐 新 , 马绍椿 , 唐 良秋 , 刘凤 莲 , 马 占忠 , 刘彦 明
( 汕 头大学 医学 院附属 粤北人 民 医院心 血 管研 究所 , 广 东韶 关 5 1 2 0 2 6 )
摘 要 : 目的 探 讨 新 建 立 金 纳 米一 分 子信标探 针 的 实时荧光 定量 P C R 技 术 及 其 分 析 不 同 程 度 心 肌 缺 血 患 者 的 6个微 小 RN A( mi c r o RN A, mi R NA) : mi R NA - 1 、 mi RNA 一 2 1 、 mi R NA 一 1 3 3 、 mi RN A一 1 9 9 、 m i R NA 一 2 0 8 、 mi R NA 一 4 9 9的 表 达 水 平 。 方 法 用 新
b y u s i ng f l uo r e s c e nc e r e a l — t i me PCR u t i l i z i n g mo l e c ul a r b e a c on a nd g o l d n a no p a r t i c l e s
患 者研 究 显 示 mi R NA 一 2 1 、 mi R NA 一 1 3 3 、 mi R NA 一 1 9 9 、 mi R NA 一 1的表 达 上 调 , 以上 两 组 分 别 与 健 康 对 照 组 比较 差 异 有 统 计 学 意 义 ( P <0 . 0 5 , P< 0 . 0 0 1 ) 。 新 构 建 的 金 纳 米一 分 子信 标探 针 检 测 的特 异度 为 8 6 . 7 , 灵敏 度 为 9 O . 2 , 均 高 于 常 规 分 子 信 标 ( 5 3 . 4 、 6 6 . 8 ) , 两 种 方 法 比较 差 异 有 统 计 学 意 义 ( P <O . 0 0 1 ) , 与x MA P液 态 芯 片技 术 比较 差 异 无 统 计 学 意 义 ( P> 0 . 0 5 ) 。结 论 新 建 立 的金 纳 米一 分 子 信 标探 针 的 实 时 荧 光 定 量 P C R技 术 可 作 为 早 期 检 测 mi RN As 新 的实验方 法, 为 心 肌 梗 死 患 者 的 早 期
诊 断提 供 新 的检 测 手段 。
关键 词 : 金纳米 ; 核 酸探 针 ; 微 RNAs ; 聚合酶链反应 ; 心肌 缺 血
Biblioteka Baidu
D O I : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 6 7 3 — 4 1 3 O . 2 O 1 3 . 0 4 . 0 0 2
国际检验 医学杂 志 2 0 1 3年 2 月第 3 4卷 第 4期
I n t J L a bMe d , F e b r u a r y 2 0 1 3 , V o 1 . 3 4 , N o . 4
・ 3 87 ・
・
基础 实验 研究 论著 ・
用金 纳米一 分 子 信标 的荧 光定 量 P C R 新技 术研 究 6个 mi RNAs 在 心 肌缺 血 患 者 中的表达
He Fe ngpi ng , X“Xi n, Ma Sha o c hu n, Tan g Li angq i u, Li u Fe ngl i an, Ma Zha nz ho n g, Li u Yan mi n g
( De pa r t me n t o f C a r d i o l o g y, I n s t i t u t e o f C a r d i o v a s c u l a r Di s e a s e s , t h e A f fi l i a t e d Yu e b e i Pe o pl e s
文献标识码 : A
文章 编 号 : 1 6 7 3 - 4 1 3 0 ( 2 0 1 3 ) 0 4 - 0 3 8 7 — 0 3
Qu a n t i t a t i v e d e t e c t i o n o f t h e e x p r e s s i o n o f s i x mi RNAs i n p a t i e n t s wi t h i s c h e mi c c a r d i o v a s c u l a r d i s e a s e
Ho s pi t al o fMe di c a l C o l l e g e, Sh a n t o u Un i v e r s i t y, S h a o g u a n , Gu a n g d o n g 5 1 2 0 2 6 , Ch i n a )
Ab s t r a c t : Ob j e c t i v e To i n v e s t i g a t e t h e u s a g e o f a n o v e l f l u o r e s c e n c e r e a l — t i me p o l y m? r a s e c h a i n r a t i o n( RT— P CR)t e c h n o l o g y u —
构建 金 纳 米一 分子 信 标 探 针 引入 实 时 荧光 定量 P C R技术分析 2 0 0例 不 同程 度 心 肌 缺 血 患 者 血 清 中的 以上 6个 mi R N As的 表 达 水 平, 并用 x MA P液 态 芯 片技 术验 证 以 上 mi R NAs 的 表 达 。 结 果 急 性 心肌 缺 血 组 : 在急性心肌梗死 ( A M1 ) 发 病后 1 ~3 h检 测 到 mi R NA 一 2 1 、 mi R NA 一 1 3 3 、 mi R NA 一 1 9 9 、 m. R NA 一 2 0 8 、 mi R N A一 4 9 9的 表 达 上 调 ; 慢 性 心肌 缺 血 组 : 通 过 对 原 发 性 高血 压 并 发 心 肌 缺 血
( 汕 头大学 医学 院附属 粤北人 民 医院心 血 管研 究所 , 广 东韶 关 5 1 2 0 2 6 )
摘 要 : 目的 探 讨 新 建 立 金 纳 米一 分 子信标探 针 的 实时荧光 定量 P C R 技 术 及 其 分 析 不 同 程 度 心 肌 缺 血 患 者 的 6个微 小 RN A( mi c r o RN A, mi R NA) : mi R NA - 1 、 mi RNA 一 2 1 、 mi R NA 一 1 3 3 、 mi RN A一 1 9 9 、 m i R NA 一 2 0 8 、 mi R NA 一 4 9 9的 表 达 水 平 。 方 法 用 新
b y u s i ng f l uo r e s c e nc e r e a l — t i me PCR u t i l i z i n g mo l e c ul a r b e a c on a nd g o l d n a no p a r t i c l e s
患 者研 究 显 示 mi R NA 一 2 1 、 mi R NA 一 1 3 3 、 mi R NA 一 1 9 9 、 mi R NA 一 1的表 达 上 调 , 以上 两 组 分 别 与 健 康 对 照 组 比较 差 异 有 统 计 学 意 义 ( P <0 . 0 5 , P< 0 . 0 0 1 ) 。 新 构 建 的 金 纳 米一 分 子信 标探 针 检 测 的特 异度 为 8 6 . 7 , 灵敏 度 为 9 O . 2 , 均 高 于 常 规 分 子 信 标 ( 5 3 . 4 、 6 6 . 8 ) , 两 种 方 法 比较 差 异 有 统 计 学 意 义 ( P <O . 0 0 1 ) , 与x MA P液 态 芯 片技 术 比较 差 异 无 统 计 学 意 义 ( P> 0 . 0 5 ) 。结 论 新 建 立 的金 纳 米一 分 子 信 标探 针 的 实 时 荧 光 定 量 P C R技 术 可 作 为 早 期 检 测 mi RN As 新 的实验方 法, 为 心 肌 梗 死 患 者 的 早 期
诊 断提 供 新 的检 测 手段 。
关键 词 : 金纳米 ; 核 酸探 针 ; 微 RNAs ; 聚合酶链反应 ; 心肌 缺 血
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D O I : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 6 7 3 — 4 1 3 O . 2 O 1 3 . 0 4 . 0 0 2
国际检验 医学杂 志 2 0 1 3年 2 月第 3 4卷 第 4期
I n t J L a bMe d , F e b r u a r y 2 0 1 3 , V o 1 . 3 4 , N o . 4
・ 3 87 ・
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基础 实验 研究 论著 ・
用金 纳米一 分 子 信标 的荧 光定 量 P C R 新技 术研 究 6个 mi RNAs 在 心 肌缺 血 患 者 中的表达
He Fe ngpi ng , X“Xi n, Ma Sha o c hu n, Tan g Li angq i u, Li u Fe ngl i an, Ma Zha nz ho n g, Li u Yan mi n g
( De pa r t me n t o f C a r d i o l o g y, I n s t i t u t e o f C a r d i o v a s c u l a r Di s e a s e s , t h e A f fi l i a t e d Yu e b e i Pe o pl e s
文献标识码 : A
文章 编 号 : 1 6 7 3 - 4 1 3 0 ( 2 0 1 3 ) 0 4 - 0 3 8 7 — 0 3
Qu a n t i t a t i v e d e t e c t i o n o f t h e e x p r e s s i o n o f s i x mi RNAs i n p a t i e n t s wi t h i s c h e mi c c a r d i o v a s c u l a r d i s e a s e
Ho s pi t al o fMe di c a l C o l l e g e, Sh a n t o u Un i v e r s i t y, S h a o g u a n , Gu a n g d o n g 5 1 2 0 2 6 , Ch i n a )
Ab s t r a c t : Ob j e c t i v e To i n v e s t i g a t e t h e u s a g e o f a n o v e l f l u o r e s c e n c e r e a l — t i me p o l y m? r a s e c h a i n r a t i o n( RT— P CR)t e c h n o l o g y u —
构建 金 纳 米一 分子 信 标 探 针 引入 实 时 荧光 定量 P C R技术分析 2 0 0例 不 同程 度 心 肌 缺 血 患 者 血 清 中的 以上 6个 mi R N As的 表 达 水 平, 并用 x MA P液 态 芯 片技 术验 证 以 上 mi R NAs 的 表 达 。 结 果 急 性 心肌 缺 血 组 : 在急性心肌梗死 ( A M1 ) 发 病后 1 ~3 h检 测 到 mi R NA 一 2 1 、 mi R NA 一 1 3 3 、 mi R NA 一 1 9 9 、 m. R NA 一 2 0 8 、 mi R N A一 4 9 9的 表 达 上 调 ; 慢 性 心肌 缺 血 组 : 通 过 对 原 发 性 高血 压 并 发 心 肌 缺 血