关于荧光染料(资料集合)
流式细胞术中应用的荧光染料介绍
流式细胞术中应用的荧光染料介绍流式细胞术（Flow Cytometry）是一种用于分析和计数细胞的技术。
在流式细胞术中，荧光染料起着至关重要的作用，可以标记细胞的不同成分，使其能够通过流式细胞仪进行检测和分析。
荧光染料通过特定的荧光光谱来发出荧光信号，这些信号被流式细胞仪采集和分析，从而提供有关细胞类型、数量和功能的信息。
以下是几种常见的流式细胞术中应用的荧光染料的介绍。
1. FITC（Fluorescein Isothiocyanate）：FITC是最常用的荧光染料之一，通过与免疫球蛋白G（IgG）结合，可用于免疫细胞表面分子的检测。
FITC在波长为488 nm的激光下激发，发射的荧光信号在525 nm 左右。
它可以与其他荧光染料（如PE或APC）结合使用，以实现多参数流式细胞分析。
2. PE（Phycoerythrin）：PE是一种从红藻中提取的荧光染料，其发射的荧光信号在575 nm左右。
PE通常用于检测细胞表面的抗原或细胞内的蛋白质，如细胞因子。
PE也可以与其他染料结合使用，以实现多参数分析。
3. APC（Allophycocyanin）：APC是一种类似于PE的荧光染料，通过独特的发射波长（约于660 nm附近）和长的荧光寿命来区分。
APC适用于检测多种细胞表面分子和蛋白质，在深色的区域提供了可靠的信号。
5. PE-Cy7：PE-Cy7是PE染料与Cyanine 7（Cy7）结合形成的荧光染料。
它适用于多参数流式细胞术，利用其较长的荧光寿命和波长（激发于488 nm，发射于780 nm左右），可以与其他染料一起使用，以实现更多的细胞表面和内部分子的检测。
除了上述染料外，还有很多其他的荧光染料可以用于流式细胞术。
例如，Alexa Fluor系列、eFluor系列、Brilliant Violet系列等。
这些染料具有不同的光谱特性和荧光强度，可以根据实验需要选择合适的染料。
需要注意的是，在选择荧光染料时，需考虑染料的互相干扰问题和流式仪的激发和检测系统。
常见细胞核荧光染料
细胞核常用荧光染料有：吖啶橙（Acridine Orange，AO）、溴化乙锭（Ethidium Bromide，EB）和碘化丙啶（Propidium Iodide，PI），DAPI、Hoechst染料、EthD III、7-AAD、RedDot1、2 等等。
透膜的染料如下：AO：具有膜通透性，能透过细胞膜，将核DNA和RNA分别染成绿色和红色，因此使细胞核呈绿色或黄绿色荧光。
EB：一种高度灵敏的荧光染色剂，在标准302nm处激发出橙红色信号。
DAPI：蓝色一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，其与DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，而与单链DNA结合无荧光的增强。
DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高于EB和PI，荧光强度比Hoechst低，但光稳定性高于Hoechst。
Hoechst染料：蓝色一类在显微观察中标记DNA的荧光染料，最常见的两种是Hoechst33342和Hoechst33258。
这两种染料都在紫外350nm处被激发，在461nm处最大发射光附近发射青/蓝色荧光。
与DAPI相比，Hoechst33342加有乙基，具有更强的亲脂性，因此能更好的透过完整的细胞膜，并且细胞毒性更小。
RedDot 1染料：红色，超强的细胞核选择性，其光谱相似于Draq?5 和Draq?7。
RedDot?染料可被几种常见的激光激发并可在远红外区激发荧光。
RedDot? 的红色近红外荧光有效的与其他常用荧光探针区分开来。
不透膜的染料，如下：PI：不同通过活细胞膜，但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。
PI作为红色荧光复染剂首选，PI经常与Calcein-AM或者FDA等荧光探针合用，区分死/活细胞。
EthD III、7-AAD、RedDot 2：不能透过细胞膜，但能将坏死细胞区分开来；更适合凋亡坏死实验的检测；细胞核荧光染料（PI DAPI Hoechst33342）细胞核荧光染料PI碘化丙啶（简称PI）是一种常用的细胞核荧光染色剂。
关于荧光染(资料集合)
关于荧光染料（资料集合）●人肉眼对光源波长的颜色感觉红色770-622 nm橙色622~597 nm黄色597~577 nm绿色577~492 nm蓝靛色492～455nm紫色455～350nm●理想的荧光染料一般具有以下几个特点：1.具有高的光子产量，信号强度高；2.对激发光有较强的吸收，降低背景信号；3.激发光谱与发射光谱之间距离较大，减少背景信号的干扰；4.易与被标记的抗原、抗体或其他生物物质结合而不影响被标记物的特异性；5.稳定性好，不易受光、温度、PH、标本抗凝剂和固定剂的影响。
●染料在生物化学中最早的应用是直接对切片进行染色，然后进行观察。
随着生物技术、计算机技术以及荧光光谱测定技术的不断发展，许多染料尤其是荧光染料在细胞检测、肿瘤基因蛋白分析、毒物分析、临床医疗诊断等方面得到了广泛的应用。
荧光染料泛指吸收某一波长的光波后能发射出另一大于吸收光波长的光波的物质。
利用荧光染料进行抗体标记分析在现代生物免疫学领域中应用广泛，并逐步显示出明显的优越性。
下面简要介绍应用于标记抗体的荧光染料及其种类：1.荧光素类染料，包括异硫氰酸荧光素(FITC)、羟基荧光素(FAM)、四氯荧光素(TET)等及其类似物。
这是一类具有较多苯环的化合物。
应用最广泛的是FITC(如图为FITC标记的组织荧光图)，在488nm 处由氩离子激光激发，发射525nm的蓝绿色荧光。
FITC能够与各种抗体蛋白结合，并在碱性溶液中稳定呈现蓝绿色荧光。
2.罗丹明类染料，包括红色罗丹明（RBITC）、四甲基罗丹明（TAMRA）、罗丹明B（TRITC）等。
TRITC在550nm处被激发可发射出570nm的黄色荧光。
3.Cy系列菁染料，菁染料通常有两个杂环体系组成，包括Cy2、Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7及其类似物。
4.Alexa系列染料，它是由MolecularProbes开发的系列荧光染料。
其激发光和发射光光谱覆盖大部分可见光和部分红外线光谱区域，应用广泛。
荧光染料波长查询
荧光染料波长查询
荧光染料是一种能够吸收光能并发射出更长波长的荧光的染料。
每种荧光染料都有其特定的吸收和发射波长。
以下是一些常见的荧光染料及其对应的吸收和发射波长：
1. 荧光素（Fluorescein）：
- 吸收波长：494-495 nm
- 发射波长：518-520 nm
2. 罗丹明B（Rhodamine B）：
- 吸收波长：540-550 nm
- 发射波长：565-580 nm
3. 二甲基琼脂绿（Ethidium Bromide）：
- 吸收波长：518-530 nm
- 发射波长：605-625 nm
4. 亚甲基蓝（Methylene Blue）：
- 吸收波长：600-660 nm
- 发射波长：660-740 nm
需要注意的是，荧光染料的波长可能因厂商和实验条件而略有差异。
因此，在具
体实验中，最好参考相关荧光染料的技术说明书或与供应商联系以获取准确的波长信息。
荧光染料
AlexaFluor 荧光素是市场上效果最好的荧光素，比较传统荧光素，它具有以下优点：·多色彩选择的灵活性- 染料颜色区广，从蓝色到远红外；·更亮- 荧光强度明显高于近似波长的对应染料，可高达20 倍，镜下可持续3 分钟；·更不容易光淬灭；·对PH 变化极不敏感，可耐受PH2.5-10 广泛的PH 环境；·仪器适配性佳- 荧光显微镜、流式细胞仪等。
AlexaFluor 488 和FITC 的荧光强度对比AlexaFluor488 的荧光强度随时间降低的速度要远小于FITCAlexaFluor 488 的荧光强度几乎不随pH 变化，而FITC 变化显著麦生物™ AlexaFluor 荧光标记抗体实验推荐稀释浓度：使用前先离心，只使用上清，这样能避免保存过程中可能出现的任何微小的蛋白沉淀带来的背景染色。
染色步骤根据应用不同而有差异，所以抗体稀释精确倍数也需要摸索。
一般来说，可使用下表的荧光二抗浓度来进行初始实验：流式细胞术0.06-1.0 ug/106细胞免疫荧光1-10 ug/ml您需根据不同实验需要滴定抗体的最适稀释比例，即最佳工作浓度。
用PBS 进行稀释。
普通荧光素和Alexa Fluor® 替换对应表（括弧中为激发/ 发射波长最值）如果您使用... 那么您可以尝试...AMCA, coumarin (350/445) A lexa Fluor® 350 (346/442)Cascade Blue® (4000/423)Alexa Fluor® 405 (402/421) Alexa Fluor® 430 (434/539)Cy®2, FITC (488/519)Alexa Fluor® 488 (495/519) Alexa Fluor® 532 (531/554)PE, TRITC, TAMRA(547/572)Alexa Fluor® 546 (556/573) Cy®3 (550/570)Alexa Fluor® 555 (555/565) Rhodamine Red (570/576) Alexa Fluor® 568 (578/603)Texas Red® (589/615)Alexa Fluor® 594 (590/617) Alexa Fluor® 633 (632/647)Cy®5, APC (650/670,660)Alexa Fluor® 647 (650/668) Alexa Fluor® 660 (663/690)Cy®5.5 (675/694)Alexa Fluor® 680 (679/702) Alexa Fluor® 700 (696/719)Cy®7 (743/767) Alexa Fluor® 750 (752/779)。
荧光染料分类
荧光染料：猝不及防的五大种类荧光染料是一类可以在紫外光或蓝光激发下发出明亮的颜色或光的化学染料，被广泛地应用于生命科学、材料科学、医学与环境监测等领域。
相较于传统染料，荧光染料有更亮、更稳定的发光效果，使得研究者们可以在实验中获得更精准的结果。
然而，由于类型繁多，新手常常会被五花八门的荧光染料种类搞得晕头转向。
今天，让我们来剖析一下荧光染料的五大种类，帮助大家猝不及防地选出最适合自己实验的染料吧！一、荧光普通染料荧光普通染料是最常见的一种荧光染料，通常在化学与生命科学领域广泛使用。
其发射的荧光主要由它们的分子中的芳香环基团产生，因此常常被用于荧光免疫分析、免疫印迹和荧光染色等。
二、pH指示荧光染料pH指示荧光染料可以根据生物体液中的pH值发出不同颜色的荧光信号，因此在生物医学研究和医学诊断中得到广泛应用。
它们的收集窗口位于甲酰胺或亚胺键附近，pH的变化会导致该结构的变化，进而使荧光性质发生改变。
三、光动力学荧光染料光动力学荧光染料可以用于癌症治疗，这些染料在光照下能够被物质所激发，并且会发出特定的荧光信号。
在照射后，它们可以通过生物体的普通代谢途径排出体外。
四、DNA标记荧光染料DNA标记荧光染料可以和目标DNA结合，形成稳定的复合物，并且以稳定的荧光信号显示出来。
因此，用于 DNA 的荧光标记，是基因克隆、PCR体外扩增和原位杂交等领域的常用手段。
五、光谱比对荧光染料光谱比对荧光染料可以根据染料的反应性和化学性质发出多个波长的荧光信号，并且可以与其他荧光染料进行配对，以增加其特异性。
因此，在分析和鉴定复杂混合物的时候，经常会使用光谱比对荧光染料。
总之，在选择荧光染料的时候，需要根据实验需求、染色失真、照射条件、荧光信号等方面进行考虑。
希望以上五大种荧光染料的分类，能够帮助大家在实验中更好地选择染料，并取得更精准的实验结果。
常见荧光染料及用途
常见荧光染料及用途《常见荧光染料及用途》荧光染料是一种能够吸收可见光或紫外光，并在吸收能量的激发下发射可见光的化学物质。
它们的应用非常广泛，涵盖了许多领域，例如生物医学、材料科学、环境监测等。
以下介绍几种常见的荧光染料及其主要用途。
1. 墨水蓝(BR)：墨水蓝是一种具有强烈蓝色荧光的染料，常用于生物实验中的DNA染色。
它与DNA结合后能发出强烈的荧光信号，从而在实验中方便地观察和分析DNA的存在和定位。
2. 罗丹明B(RhB)：罗丹明B是一种红色荧光染料，广泛用于组织切片和细胞染色。
它能够与细胞核和胞浆中的核酸结合，以显示细胞和组织的结构，帮助科研人员研究细胞分裂和组织结构变化。
3. 草酸罗丹明G(OG)：草酸罗丹明G是一种绿色荧光染料，主要应用于蛋白质和核酸的定量分析。
在分光光度计中配合荧光检测器使用，可以精确测定溶液中蛋白质和核酸的浓度。
4. 罗丹明110(Rh110)：罗丹明110是一种黄绿色荧光染料，常用于细胞活性检测。
通过与细胞内的酶或细胞膜结合，罗丹明110可以用来评估细胞的活力和存活情况，特别适用于细胞毒性测试和细胞增殖研究。
5. 荧光素(FITC)：荧光素是一种与生物相容性极高的荧光染料，常用于免疫染色和分子生物学实验。
它能与抗体特异性结合，在免疫组化和流式细胞术中用于检测蛋白质的表达以及细胞表面标记。
以上只是常见的荧光染料中的几种，它们的应用还远不止于此。
随着科学技术的不断进步，新型的荧光染料不断问世，为各个领域的研究提供了更多更有力的工具。
通过荧光染料的运用，科学家们能够更好地理解和研究生物、物质和环境，进一步推动科学的发展。
有机荧光染料分子
有机荧光染料分子
有机荧光染料分子是一类能够产生荧光的化学结构，其中最常见的有机荧光染料分子包括偶氮染料、螺环芘、芴、喹啉、苯并二氮杂苯、铝酞菁等。
它们通过吸收光子能量后发生激发态跃迁，从而产生荧光，荧光的颜色和强度取决于染料分子的化学结构和环境。
偶氮染料是一类含有偶氮化合物的大分子结构的有机染料，具有特殊的色谱和光学性质。
其中最常见的是罗丹明B和甲基红等。
螺环芘是一种含有螺环结构的多环芳香族化合物，具有较强的光稳定性和发光强度，常用于生物荧光标记和光致变性材料。
芴、喹啉和苯并二氮杂苯等也是常见的有机荧光染料分子，具有不同的化学结构和光学性质，被广泛应用于传感器、荧光染料、荧光探针等领域。
铝酞菁是一类含有铝离子的酞菁类荧光染料分子，具有较强的光稳定性和发光强度，被广泛应用于荧光显微镜、分析化学等领域。
此外，还有许多其他种类的有机荧光染料分子，如杜邦染料、染料颜料等。
总之，有机荧光染料分子是一类功能多样、应用广泛的化学物质，已经成为现代生物医学、环境监测、光电器件等领域的重要工具和材料。
荧光染料用途
荧光染料用途
荧光染料是一种特殊的染料，可以发出明亮的荧光光线，因此广泛用于各种领域。
以下是荧光染料的几种主要用途：
1. 生物医学：荧光染料可以用于生物医学研究中的细胞成像、分子生物学、药物筛选等方面。
比如，在细胞成像中，荧光染料可以标记细胞内的蛋白质、核酸等分子，便于观察它们的运动、交互、分布等。
2. 材料科学：荧光染料可以用于制备荧光材料，如荧光纳米材料、荧光聚合物等。
这些材料可以应用于光电子学、荧光传感等领域。
3. 环境监测：荧光染料可以作为环境监测中的标记物，用于追踪水、空气、土壤等中的污染物。
比如，在水污染监测中，荧光染料可以标记水中的重金属、有机污染物等，便于跟踪它们的扩散和排放。
4. 安防领域：荧光染料在安防领域有广泛应用，如防伪标记、水印、指纹检测等。
荧光染料可以做成无法直接肉眼观察到的标记物，只能通过特定的荧光检测器或显微镜观察到。
总之，荧光染料是一种具有特殊荧光性质的染料，有着广泛的应用前景。
随着科技的不断发展，它在各个领域的应用也将越来越广泛。
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荧光染料有哪些
荧光染料有哪些
荧光染料是一种特殊的染料，它具有一种发光的性质，当它受到一定的光照时，能够发出特定的色彩，具有特殊的美感。
在电子行业，荧光染料用于制备各种液晶屏，以实现屏幕
的彩色显示；在医学保健行业，荧光染料用于生物标记物质，检测病原体，分析各种物质
以及进行药物检测；在生物行业，荧光染料应用于进一步研究生物应激反应，如分子医学、植物病害诊断等。
常见的荧光染料有：荧光绿B（EGFP）、荧光红（DsRed）、荧光黄（YFP）、荧光紫（CFP）、荧光橙（CFTR）等，它们的类型和颜色不完全一样。
前三类荧光染料具有荧光现象，可以被相应的可视光照耀，大致可以得到红、绿或蓝色荧光；后三类荧光染料在不可见的紫外线的照射下，也能发出不同的荧光色，其中荧光紫和荧光橙是比较常用的。
荧光染料作为一种特殊的染料，它的主要特性是高灵敏度和亮度，能够有效的反映一个物质的定性和定量的结果，因此应用在检测、分析、生物医学治疗等领域是十分成功的，使用荧光染料的益处在于能够加快以及改善医疗检测、药物检测及疾病检测的过程，其中荧
光检测技术是一项迅速发展的现代诊断技术。
通过生物标记，荧光染料和抗原物质结合在
一起，在特定的激发光照射下发出某种色彩的荧光，从而及早发现病毒、细菌、血液病等
微生物，以便即将的治疗及控制。
总之，荧光染料作为一种新型的染料，在电子行业、医疗卫生行业以及生物行业都有极其重要的应用，同时它还具有较高的精度和准确性，所以在检测、分析、生物学研究等领域
中起到了重要作用。
常用荧光染料的激发和发射波长
常用荧光染料的激发和发射波长荧光染料广泛应用于生物医学、材料科学、光电子学等领域，其特点是在受到激发后会发出可见光，具有较高的荧光量子产率和灵敏度。
在实际应用中，荧光染料的激发和发射波长显得尤为重要，因此本文将整理常用荧光染料的激发和发射波长，方便读者在实验或研究中的选择。
常用荧光染料1. FITC （荧光同型素-异硫氰酸酯）FITC是一种广泛应用于生物学实验的荧光染料，常用于标记蛋白质、抗体、药物等分子，其最大吸收波长和最大发射波长分别为495 nm和519 nm。
FITC的分子量小，荧光量子产率高，这使得它成为一种理想的荧光标记分子。
2. Rhodamine 123Rhodamine 123是一种阳离子荧光染料，可在细胞中标记线粒体，同时也可在许多生物学应用中标定其他细胞器。
Rhodamine 123的最大吸收波长和最大发射波长分别为507 nm和529 nm，其荧光量子产率高，荧光亮度高。
3. Texas RedTexas Red是一种常用的激发波长长达596 nm的荧光染料，在荧光共振能量转移等实验中被广泛应用。
Texas Red的最大发射波长在610 nm左右，其在荧光共振能量转移实验中能够提供强烈的荧光标记。
4. PE （腺苷酸酰基酯）PE是一种被广泛用于流式细胞仪实验中的荧光染料，其最大激发波长为488 nm，最大发射波长在575 nm左右。
PE作为一种非常亮的荧光染料，可用于标记和鉴定特定类型的细胞。
荧光染料的选择在实验或研究中，需要根据具体的情况选择合适的荧光染料。
对于激发波长和发射波长的选择，一些因素应该被考虑，如：•研究对象的荧光信号贡献；•其他染料的交叉激发和发射波长；•激发和发射波长的设备可用范围。
一般来说，应选择滤光片相对集中并且有较高吸收的荧光染料，以确保设备需要的能量和检测返回信号的量达到最大程度。
总结本文简要介绍了几种常用的荧光染料及其特性，这些荧光染料可以分别从不同角度用于生物学、光学、材料学等领域的研究和实验中。
关于荧光染料
关于荧光染料（资料集合）●人肉眼对光源波长的颜色感觉红色770-622 nm橙色622~597 nm黄色597~577 nm绿色577~492 nm蓝靛色492～455nm紫色455～350nm●理想的荧光染料一般具有以下几个特点：1.具有高的光子产量，信号强度高；2.对激发光有较强的吸收，降低背景信号；3.激发光谱与发射光谱之间距离较大，减少背景信号的干扰；4.易与被标记的抗原、抗体或其他生物物质结合而不影响被标记物的特异性；5.稳定性好，不易受光、温度、PH、标本抗凝剂和固定剂的影响。
●染料在生物化学中最早的应用是直接对切片进行染色，然后进行观察。
随着生物技术、计算机技术以及荧光光谱测定技术的不断发展，许多染料尤其是荧光染料在细胞检测、肿瘤基因蛋白分析、毒物分析、临床医疗诊断等方面得到了广泛的应用。
荧光染料泛指吸收某一波长的光波后能发射出另一大于吸收光波长的光波的物质。
利用荧光染料进行抗体标记分析在现代生物免疫学领域中应用广泛，并逐步显示出明显的优越性。
下面简要介绍应用于标记抗体的荧光染料及其种类：1.荧光素类染料，包括异硫氰酸荧光素(FITC)、羟基荧光素(FAM)、四氯荧光素(TET)等及其类似物。
这是一类具有较多苯环的化合物。
应用最广泛的是FITC(如图为FITC标记的组织荧光图)，在488nm 处由氩离子激光激发，发射525nm的蓝绿色荧光。
FITC能够与各种抗体蛋白结合，并在碱性溶液中稳定呈现蓝绿色荧光。
2.罗丹明类染料，包括红色罗丹明（RBITC）、四甲基罗丹明（TAMRA）、罗丹明B（TRITC）等。
TRITC在550nm处被激发可发射出570nm的黄色荧光。
3.Cy系列菁染料，菁染料通常有两个杂环体系组成，包括Cy2、Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7及其类似物。
4.Alexa系列染料，它是由MolecularProbes开发的系列荧光染料。
其激发光和发射光光谱覆盖大部分可见光和部分红外线光谱区域，应用广泛。
生物荧光染料波长
生物荧光染料波长荧光染料是一种能够吸收特定波长的光并发射出不同波长的光的化合物。
它们在生物科学研究、医学诊断、药物开发等领域中起着重要作用。
本文将介绍几种常见的生物荧光染料及其波长特性。
一、荧光染料的波长定义荧光染料的波长通常由其吸收峰和发射峰决定。
吸收峰是指荧光染料能够吸收的最大波长，而发射峰则是指荧光染料在受到激发后发射的最大波长。
二、常见的荧光染料及其波长特性1. Alexa Fluor 488（波长：495 nm/519 nm）Alexa Fluor 488是一种常用的荧光染料，其吸收峰位于495 nm，发射峰位于519 nm。
它在细胞免疫荧光染色、蛋白质定位研究等方面广泛应用。
2. Cy3（波长：550 nm/570 nm）Cy3是一种红色荧光染料，其吸收峰位于550 nm，发射峰位于570 nm。
它常用于DNA、RNA等核酸的荧光标记，也可用于蛋白质荧光标记。
3. Texas Red（波长：595 nm/615 nm）Texas Red是一种红色荧光染料，其吸收峰位于595 nm，发射峰位于615 nm。
它在细胞荧光染色、分子探针等方面有广泛应用，常用于免疫荧光标记和显微镜观察。
4. FITC（波长：492 nm/520 nm）FITC是一种绿色荧光染料，其吸收峰位于492 nm，发射峰位于520 nm。
它常用于细胞免疫荧光染色、蛋白质标记等研究中。
5. Rhodamine B（波长：554 nm/576 nm）Rhodamine B是一种橙红色荧光染料，其吸收峰位于554 nm，发射峰位于576 nm。
它在细胞荧光染色、荧光显微镜观察等方面有广泛应用。
6. DAPI（波长：358 nm/461 nm）DAPI是一种蓝色荧光染料，其吸收峰位于358 nm，发射峰位于461 nm。
它可用于染色体核型分析、细胞核染色等。
三、荧光染料的应用领域荧光染料在生物科学领域中有着广泛的应用。
它们可以被用于细胞荧光染色、蛋白质定位、基因表达分析、药物荧光标记等方面。
荧光抗体染料大集合
荧光抗体染料大集合染料在生物化学中最早的应用是直接对切片进行染色，然后进行观察。
随着生物技术、计算机技术以及荧光光谱测定技术的不断发展，许多染料尤其是荧光染料在细胞检测、肿瘤基因蛋白分析、毒物分析、临床医疗诊断等方面得到了广泛的应用。
荧光染料泛指吸收某一波长的光波后能发射出另一大于吸收光波长的光波的物质。
利用荧光染料进行抗体标记分析在现代生物免疫学领域中应用广泛，并逐步显示出明显的优越性。
下面简要介绍应用于标记抗体的荧光染料及其种类：1.荧光素类染料，包括异硫氰酸荧光素(FITC)、羟基荧光素(FAM)、四氯荧光素(TET)等及其类似物。
这是一类具有较多苯环的化合物。
应用最广泛的是FITC(如图为FITC标记的组织荧光图)，在488nm处由氩离子激光激发，发射525nm的蓝绿色荧光。
FITC能够与各种抗体蛋白结合，并在碱性溶液中稳定呈现蓝绿色荧光。
2.罗丹明类染料，包括红色罗丹明（RBITC）、四甲基罗丹明（TAMRA）、罗丹明B （TRITC）等。
TRITC在550nm处被激发可发射出570nm的黄色荧光。
3.Cy系列菁染料，菁染料通常有两个杂环体系组成，包括Cy2、Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7及其类似物。
4.Alexa系列染料，它是由Molecular Probes开发的系列荧光染料。
其激发光和发射光光谱覆盖大部分可见光和部分红外线光谱区域，应用广泛。
以高亮度、稳定性、仪器兼容性、多种颜色、pH值不敏感以及水溶性为主要特点。
包括Alexa Fluor350、405、430、488、532、546、555、568、594、610、633、647、680、700、750。
目前市面上Alexa系列染料应用非常广泛，且逐渐替代传统的荧光染料，如Alexa Fluor488可替代FITC、Cy2；Alexa Fluor555可替代Cy3、TAMRA；Alexa Fluor633可替代APC、Cy5等。
荧光染料基础知识大全
荧光染料基础知识大全纺织染整团队今天荧光显微镜技术的基本原理是借助荧光剂让细胞成分呈现高度具体的可视化效果,比如在目的蛋白后面连一个通用的荧光蛋白—GFP。
在组织样本中,目的基因无法进行克隆,则需要用免疫荧光染色等其他技术手段来观察目的蛋白。
为此,就需要利用抗体,这些抗体连接各种不同的荧光染料,直接或间接地与相应的靶结构相结合。
此外,借助荧光染料,荧光显微镜技术不只局限于蛋白质,它还可以对核酸、聚糖等其他结构进行染色,即便钙离子等非生物物质也可以检测出来。
1免疫荧光<IF>在荧光显微镜技术中,可以通过两种方式观察到你的目的蛋白：利用源荧光信号,即通过克隆手段,用遗传学方法将荧光蛋白与目的蛋白相连；或利用荧光标记的抗体特异性结合目的蛋白。
有些生物学问题采用第二种方法会更有用或更有必要。
比如,组织学样品无法使用荧光蛋白,因为通常来说,标本都是从无法保存荧光蛋白的生物体中获取。
此外,当有一个有功能的抗体可用时,免疫荧光法会比荧光蛋白技术快很多,因为后者必须先克隆目的基因再将DNA转染到适当的细胞中。
荧光蛋白的另一项劣势在于其本身属于蛋白质。
因此,细胞的这些荧光蛋白具有特定的蛋白质特性,其会导致附着的目的蛋白质发生功能紊乱或出现误释的情况。
然而,荧光蛋白技术仍然是观察活细胞的首选方法。
免疫荧光法利用了抗体可以和相应抗原特异性结合的这个特性,对此它还有两种不同的表现形式。
最简单的方式是使用可与目的蛋白相结合的荧光标记抗体。
这种方法被称为"直接免疫荧光法"。
在很多情况下,我们可以利用两种不同特性的抗体。
第一种抗体可以结合目的蛋白,但其本身并未进行荧光标记〔一抗。
第二种抗体本身就携带荧光染料〔二抗,并且可以特异性结合一抗。
这种方法被称为"间接免疫荧光法"。
这种方法存在诸多优势。
一方面,它会产生放大效应,因为不只一个二抗可以与一抗相结合。
另一方面,没有必要始终用荧光染料标记目的蛋白的每个抗体,但可以使用市售荧光标记的二抗。
流式常用荧光染料概要
流式常用荧光染料概要《流式常用荧光染料概要篇一》流式细胞术就像是一场细胞的盛大舞会，而荧光染料呢，那就是给细胞们精心打扮的神奇魔法颜料。
咱今儿个就来唠唠流式常用的荧光染料那些事儿。
先来说说碘化丙啶（PI）吧。
这PI就像是一个严格的门卫，专门负责检测那些已经没了活力的细胞，也就是死细胞。
我第一次接触PI的时候，就觉得它特神奇。
在实验室里，师兄把它加进细胞样本里，就像是给细胞们来了个突然袭击。
那些死细胞就像暴露身份的小可怜，被PI染上颜色，在流式细胞仪的检测下无所遁形。
我当时就想，这PI可真是细胞世界里的“死亡探测器”啊。
不过呢，PI也有它的小脾气，它的染色可能会受到一些因素的影响，也许是样本处理的方式不太对，又或者是环境温度啥的。
这就好比一个精密的仪器，稍微有点风吹草动就可能影响它的工作效果。
再讲讲异硫氰酸荧光素（FITC）。
FITC就像是细胞舞会上的小清新，它发出的绿色荧光特别亮眼。
我记得有一次做实验，要标记一种特定的细胞蛋白，用的就是FITC。
当在显微镜下看到那些发出绿色荧光的细胞时，我都惊呆了，感觉就像在黑暗中看到了一群闪闪发光的小精灵。
FITC的优点那是相当明显的，它的标记效率挺高的，而且价格相对来说也比较亲民。
但是呢，它也有个小缺点，就是容易猝灭。
就像那些美丽却短暂的烟花一样，FITC的荧光可能在检测过程中突然就黯淡下去了，这可真让人头疼。
有时候我就想，要是能有个办法让FITC的荧光一直那么亮堂就好了，难道就只能眼睁睁地看着它慢慢消失吗？还有一个很厉害的荧光染料叫藻红蛋白（PE）。
PE就像是细胞舞会上的贵妇人，散发着一种高贵的红色荧光。
在多色流式分析中，PE可是经常被用到的。
我听老师说，PE的荧光强度比较高，就像一个大功率的灯泡，能在众多的细胞信号中脱颖而出。
不过，这PE就像个娇贵的大小姐，它的保存条件比较苛刻。
有一次，实验室的师弟没注意保存温度，结果一批PE 就这么报废了，那叫一个心疼啊。
免疫分析中常用的荧光染料与标记染色
（一）免疫荧光标记最常用的荧光染料最常用的染料有FITC和藻红蛋白类（PE）及罗丹明等。
FITC（异硫氰酸荧光素）：绿色530nm PE（藻红蛋白）：橙黄色575nm PerCP （多甲藻黄素叶绿素蛋白）：深红色675nm PI（碘化丙啶）：橙红色620nm 488nm波长的氩离子激光激发APC（别藻青蛋白）：红色660nm 630nm波长的氦氖激光或红色二极管激光激发（二）免疫荧光标记常用的标记染色为直接免疫荧光染色和间接免疫荧光染色。
在进行双参数或多参数分析时，常常需要进行荧光抗体的组合标记，目前已经有双色、三色以及四色标记。
（三）细胞自发荧光自发荧光信号为噪声信号，在多数情况下会干扰对特异荧光信号的分辨和测量。
在免疫细胞化学等测量中，对于结合水平不高的荧光抗体来说，如何提高信噪比是个关键。
一般说来，细胞成分中能够产生自发荧光的分子（例如核黄素、细胞色素等）的含量越高，自发荧光越强；培养细胞中死细胞／活细胞比例越高，自发荧光越强；细胞样品中所含亮细胞的比例越高，自发荧光越强。
荧光染料在生命科学中的应用
荧光染料在生命科学中的应用荧光染料，在生命科学领域中有着极其广泛的应用。
引人注目的荧光信号，是科学家们观察和探索生命现象的一个重要工具。
在生命科学的各个领域中，从生物学到医学，再到生物工程，荧光染料在其研究中都有着不可或缺的作用。
一、荧光染料的分类和特性荧光染料按照化学结构可以分为有机染料和无机染料两大类。
有机染料具有较强的荧光性质，而且在荧光强度和荧光颜色上有着极大的可调性。
无机染料的荧光性质一般不强，但是其强的结构稳定性和抗氧化性使其在荧光探针中被广泛应用。
不同的荧光染料也有其不同的特点。
比如，染料的最大激发波长、最大荧光发射波长、荧光寿命等参数，都对其在特定应用场合的性能表现有着决定性的影响。
在实际应用中，科学家们需要根据实验要求和设备条件选用合适的荧光染料，以取得最佳表现效果。
二、荧光染料在生物分子检测和成像中的应用荧光染料具有极高的灵敏度，独特的光化学性质使其能够实现生物分子检测的高灵敏度和高专一性。
生物分子检测是许多生命科学研究的重要环节，涉及到蛋白质、核酸、糖等多种生物分子的定量检测和图像化分析。
对于生物分子的检测，常常采用的是适配体-荧光染料复合物。
适配体是一种可以与特定生物分子（如蛋白质）高度结合的分子。
当适配体与特定生物分子结合后，通过与荧光染料的结合来实现生物分子的检测。
荧光染料的特别荧光性使其可以被用来标记生物分子，这样研究人员就可以通过荧光显微镜等手段来观察特定生物分子在活细胞内的分布和运动状态等信息。
三、荧光染料在药物研发中的应用药物研究是一个相当繁琐的过程，需要通过大量的实验才能确定一个具备治疗效果和安全性的化合物。
荧光染料在药物研发中也被广泛应用，主要体现在衡量药物与受体之间的相互作用、评估药物在细胞内的分布及药物代谢等方面。
荧光染料可以用来模拟药物分子与受体之间的相互作用。
这样的模拟会使得研究人员对不同药物与受体之间的相互作用有更清晰的认识。
进一步，通过荧光化合物标记药物，可以跟踪药物在细胞内的运动和代谢情况，从而评价药物的高效性和安全性。
荧光染料的分类与介绍
荧光染料分类荧光染料是在荧光剂的帮助下对细胞成分进行高度特异性的可视化。
可以是一种荧光蛋白、例如 GFP在基因上与感兴趣的蛋白质相关联。
接下来，新研博美的小编带大家了解一下我们公司荧光染料的分类。
一、花菁染料1、Cyanines（Cyanine dyes花菁染料）花青素（Cyanines）是在两个具有离域电荷的氮原子之间含有聚甲炔桥的分子：花青素（Cyanines）染料主要用于通过光学方法监测细胞、细胞器和囊泡中的膜电位差。
用于通过光学方法监测细胞、细胞器和囊泡中的膜电位差。
这些对电位敏感的染料在分子结构、电荷和通过膜的渗透性方面有所不同。
根据染料的不同，涉及到与膜的电位依赖性结合以及二聚体和更高聚集体的形成。
花菁染料有两种：非磺化花菁和磺化花菁。
对于许多应用，它们是可互换的，因为它们的光谱特性几乎相同。
磺化和非磺化染料均可用于标记生物分子，例如DNA和蛋白质。
染料之间的区别在于它们的溶解度：硫化染料是水溶性的，并且它们在水性环境中不使用有机助溶剂进行标记。
它们不易在水中聚集。
在某些情况下，需要使用一种类型的花菁。
非磺化花菁染料Cyanine3 NHS esterCyanine3.5 carboxylic acidCyanine5 azideCyanine5.5 hydrazideCyanine7 amineCyanine7.5 tetrazine磺化花菁染料sulfo-Cyanine3 DBCOSulfo-Cyanine3.5 alkyneSulfo-Cyanine5 NHS esterSulfo-Cyanine5.5 azideSulfo-Cyanine7 maleimideSulfo-Cyanine7.5 carboxylic acid2、ICG吲哚菁绿Indocyanine Green，ICG，吲哚菁绿CAS:3599-32-4是一种三碳菁染料，具有良好的水溶性，分子量为775，吲哚菁绿完全可以在血浆和全血液中几乎完全与血浆蛋白结合，可以保证其几乎完全留在血管中，不易向外扩散，因此被作为一种常用的血管造影剂使用。
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关于荧光染料（资料集合）
●人肉眼对光源波长的颜色感觉
红色770-622 nm
橙色622~597 nm
黄色597~577 nm
绿色577~492 nm
蓝靛色492～455nm
紫色455～350nm
●理想的荧光染料一般具有以下几个特点：
1.具有高的光子产量，信号强度高；
2.对激发光有较强的吸收，降低背景信号；
3.激发光谱与发射光谱之间距离较大，减少背景信号的干扰；
4.易与被标记的抗原、抗体或其他生物物质结合而不影响被标记物的特异性；
5.稳定性好，不易受光、温度、PH、标本抗凝剂和固定剂的影响。
●染料在生物化学中最早的应用是直接对切片进行染色，然后进行观察。
随着生物技术、计算机技术以及荧光光谱测定技术的不断发展，许多染料尤其是荧光染料在细胞检测、肿瘤基因蛋白分析、毒物分析、临床医疗诊断等方面得到了广泛的应用。
荧光染料泛指吸收某一波长的光波后能发射出另一大于吸收光波长的光波的物质。
利用荧光染料进行抗体标记分析在现代生物免疫学领域中应用广泛，并逐步显示出明显的优越性。
下面简要介绍应用于标记抗体的荧光染料及其种类：
1.荧光素类染料，包括异硫氰酸荧光素(FITC)、羟基荧光素(FAM)、四氯荧光素(TET)等及其类似物。
这是一类具有较多苯环的化合物。
应用最广泛的是FITC(如图为FITC标记的组织荧光图)，在488nm 处由氩离子激光激发，发射525nm的蓝绿色荧光。
FITC能够与各种抗体蛋白结合，并在碱性溶液中稳定呈现蓝绿色荧光。
2.罗丹明类染料，包括红色罗丹明（RBITC）、四甲基罗丹明（TAMRA）、罗丹明B（TRITC）等。
TRITC在550nm处被激发可发射出570nm的黄色荧光。
3.Cy系列菁染料，菁染料通常有两个杂环体系组成，包括Cy2、Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7及其类似物。
4.Alexa系列染料，它是由MolecularProbes开发的系列荧光染料。
其激发光和发射光光谱覆盖大部分可见光和部分红外线光谱区域，应用广泛。
以高亮度、稳定性、仪器兼容性、多种颜色、pH值不敏
感以及水溶性为主要特点。
包括AlexaFluor350、405、430、488、532、546、555、568、594、610、633、647、680、700、750。
目前市面上Alexa系列染料应用非常广泛，且逐渐替代传统的荧光染料，如AlexaFluor488可替代FITC、Cy2；AlexaFluor555可替代Cy3、TAMRA；AlexaFluor633可替代APC、Cy5等。
5.蛋白类的染料，包括藻红蛋白（PE）、藻蓝蛋白（PC）、别藻蓝蛋白（APC）、多甲藻黄素-叶绿素蛋白（preCP）等。
他们大多是在蓝藻中发现的蛋白。
这类荧光染料可以与Cy系列菁染料偶联形成复合染料用于抗体标记。
如市面上常用的有PE-Cy3/Cy5/Cy7、APC-Cy7、PerCP-Cy5.5等。
【菁类染料-Cyanine dyes(Cy2, Cy3, Cy5)】
Cy2耦联基团激发波长为492nm，发光为波长510nm的绿色可见光。
Cy2和FITC使用相同的滤波片。
由于Cy2比FITC在光下更稳定。
要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片剂，因为这种抗淬灭剂和Cy2反应，在染色片储存后会导致荧光微弱和扩散。
Cy3和Cy5比其他的荧光团探针要更亮，更稳定，背景更弱。
Cy3耦联基团激发光的最大波长为550nm，最强发射光为570nm。
因为激发光和发射光波长很接近TRITC, 在荧光显微镜中，可使用和TRITC一样的滤波片。
Cy3在氩光灯(514nm或528nm)下可以被激发出50％的光强，在氦氖灯(543nm)或者汞灯(546nm)下则约75％。
Cy3可以和荧光素一起作双标。
Cy3还可以和Cy5一起在共聚焦显微镜实验中作多标记。
Cy5耦联基团的激发波长最大650nm，发光波长最大670nm。
在氪氩灯(647nm)下它们可被激发出98％的荧光，在氦氖灯下(633nm)为63％。
Cy5可以和很多其他的荧光基团一起用在多标记的实验中。
由于它的最大发射波长在670nm，Cy5很难用裸眼观察，而且不能用汞灯作理想的激发。
通常观察Cy5时采用具有合适激发光和远红外检测器的共聚焦显微镜。
在水相封片剂中应当加入抗淬灭剂。
使用传统的表面荧光显微镜时，不推荐使用Cy5。
【藻红蛋白或藻胆色素蛋白-Phycoerythrin(PE)荧光标记二抗】
存在于被称为藻红的多聚微粒中，位于叶绿素的反应中心，在自然结构中，藻红蛋白吸收光能，吸收后转化成能量，供其发育生长。
当藻红蛋白被分离和纯化后，其蛋白质变得具有很强的荧光，能吸收不同波长的光，发出亮红色的荧光，此时不再接受任何外来的光，也不能转移光能。
藻红蛋白PE的吸收波长范围较广，最大的吸收波长为566nm，最大的发射波长为574nm。
藻红蛋白作为荧光标记物具有以下优点：首先具有强的长波长激发和发射荧光，可避免来自其他生物材料荧光的干扰；并且具有极高的发射量子产率；另外PE具有非常高的水溶性而且与许多生物学或合成材料的多位点稳定交联。
【Aminomethylcoumarin Acetate (AMCA)】
耦联的AMCA吸收光波长最大为350nm，发荧光则为450nm。
对于荧光显微镜来说，AMCA可以用汞灯来激发，用紫外滤板来观察。
由于AMCA的信号相对较弱，单标实验中不推荐使用AMCA。
AMCA和荧光素的荧光波长只有很小的重叠范围，而和发出长波长荧光的荧光基团没有或者只有极少的重叠，因此它最常用于多标记实验中，比如免疫荧光显微镜和流式细胞仪。
由于人眼不能很好的检测蓝色荧光，在多标记的实验中，AMCA耦联的二抗应当被用于检测大量的抗原。
AMCA和荧光素一样很快淬灭，使用抗淬灭剂可以减轻。
且由于肉眼不能很好的检测AMCA所激发的蓝色荧光，因而AMCA耦联的二抗更适用于检测大量存在的抗原。
如果使用在流式细胞仪中，AMCA 可以用汞灯或者水冷却的氩光灯激发，因为它们发出的光线是在光谱的紫外区。
注：由于观察荧光需要一定波长的激发光，必须根据实验室已有的仪器可发光的波段进行选择。
另外，多标记中对探针色彩区分程度的要求。
例如，若丹明红-X (RRX)和德克萨斯红(TR)荧光素的区别就比四甲基若丹明(TRITC)或者Cy3的区别明显。
如果对灵敏度有更高的要求，则Cy3和Cy5就比其他的荧光团探针要亮。
西美杰备有全面的二抗现货产品并能提供最完整的二抗产品线。
主要二抗品牌为全球最大的二抗和底物生产厂商KPL以及前沿抗体生产商ProteinTech。
针对荧光标记二抗，有FITC、TRITC、Rhodamine、PE、Cy3/5、AMCA、Dylight等多种荧光标记二抗；按照检测物种分，有抗人、大鼠、小鼠、猪、驴、绵羊、山羊、小鸡、马、兔、仓鼠、狗、牛，以及多种细菌类二抗；另外，还有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、IgG(ab’)2等不同类型抗体。