高效液相色谱法在分析测试中的应用

安徽职业技术学院毕业论文

论文题目：高效液相色谱法在分析测试中的应用所属系部：化学工程系

专业：工业分析与检验

姓名：张雪伟

班级：分析1021

学号： 2010276141

指导老师：戴晨伟

完成日期： 2013年3月30号

第一章：高效液相色谱的发展历史及特点

1.1高效液相色谱的历史

1.2高效液相色谱与其它色谱的比较

1.2.1与经典液相色谱的比较

1.2.2与气相色谱法的比较

1.3 高效液相色谱的特点

1.3.1 高效液相色谱的优点：

1.3.2 高效液相色谱的缺点

1.4 高效液相色谱的分类

1.5 高效液相色谱的组成

第二章：高效液相色谱法在分析测试中的应用

2.1在天然产物监测分析中应用

2.1.1 黄酮类化合物的分析分离

2.2在食品检测分析中的应用

2.2.1糖类的分析

2.2.2　食品中蛋白质的分析

2.2.3　有机酸的测定

2.2.4 HPLC在食品中的各种添加物质检测中的应用

2.2.5　食品中激素的测定

第三章：结论及展望

参考文献：

高效液相色谱法在分析测试中的应用

摘要：

高效从1903年，色谱的开始使用，各种色谱技术应运而生，其中高效液相色谱由于其分析速度快、分离效率高、检测灵敏度高、检测自动化、适用范围广等优点，作为物质分离的重要工具，在各个方面都取得了很大的发展，并且出现了许多的新型色谱。液相色谱法 High Performance Liquid Chromatography 简称HPLC 又叫做高压或高速液相色谱、高分离度液相色谱或近代柱色谱,以液体为流动相 采用高压输液系统 是色谱法的一个重要分支。也是我们学习仪器分析化学的一个重难点 。本论文简述了高效液相色谱法的发展历史及其特点，重点介绍了其在天然矿物、食品检测、农药及原药检测和医学领域测试中的应用，并对其未来的发展做了展望。

关键词：高效液相色谱法应用发展历史发展展望

On the Application of High Performance Liquid Chromatography in Analysis and Detection

Abstract: This paper briefly introduces the development history of high performance liquid chromatography (HPLC) and its characteristics. It focuses on the applications of the natural mineral, food detection, pesticide detection and medical field detection. Meanwhile, the paper discusses its development in the future.

Key Words: high performance liquid chromatography (HPLC), development history, natural mineral, food, pesticide, medicine.

引言：

引言：

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography/HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法在天然矿物、食品检测、农药及原药检测和医学领域测试等学科领域中得到广泛应用，是重要的分离分析技术。高效液相色谱法因其高灵敏度和低检测限度，逐渐成值，增强了产品的市场竞争力，未来发展前途广大。

第一章：高效液相色谱的发展历史及特点

1.1高效液相色谱的历史

1903年，俄国植物学家Tswett在华沙大学研究植物叶组成时，用碳酸钙作吸附剂分离植物叶石油醚萃取物，是最早的液固色谱法。1931年，德国Kuhn和Lederer用氧化铝和碳酸钙分离了α，β和γ－胡萝卜素；此后用这种方法分离了60余种这类色素。高效液相色谱作为色谱分析法的一个分支，是在二十世纪60年代末期，在经典液相色谱法和气相色谱法的基础上，发展起来的新型分离分析技术。1960年中后期，气相色谱理论和实践的发展，以及机械、光学、电子等技术上的进步，液相色谱开始活跃。到70年代初期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了高效液相色谱。70年代末，出现反相色谱柱；80年代得到广泛应用；80年代末，出现毛细管超临界流体色谱和毛细管电泳。1990年以后，生物工程和生命科学在国际和国内的迅速发展，为高效液相色谱技术提出了更多、更新的分离、纯化、制备的课题，如人类基因组计划，蛋白质组学有HPLC作预分离等。

1.2高效液相色谱与其它色谱的比较

1.2.1与经典液相色谱的比较

经典液相色谱法使用粗粒多孔固定相，装填在大口径、长玻璃柱管内，流动相仅靠重力流经色谱柱，溶质在固定相的传质、扩散速度缓慢，柱入口压力低，柱效低，分析时间冗长。

高效液相色谱法使用了全多孔微粒固定相，装填在小口径、短不锈钢柱内，流动相通过高压输液泵进入高柱压的色谱柱，溶质在固定相的传质，扩散速度大大加快，从而在短的分析时间内获得高柱效和高分离能力。

1.2.2与气相色谱法的比较

高效液相色谱法与气相色谱法有许多相似之处。气相色谱法具有选择性高、分离效率高、灵敏度高，分析速度快的特点，但它仅适于分析蒸气压低、沸点低的样品，而不适用于分析高沸点有机物、高分子和热稳定性差的化合物以及生物活性物质，因而使其应用受到限制。在全部有机化合物中仅有20%的样品适用于气相色谱分析。高效液相色谱法却恰可弥补气相色谱法的不足之处，可对80%的有机化合物进行分离和分析。

1.3 高效液相色谱的特点

高效液相色谱分析是20世纪70年代急剧发展起来的一项高效、新颖、快速的分析分离技术。由于分离机制的不同，可分为以下几种类型：液固色谱、液液色谱、离子交换色谱、离子对色谱、亲和色谱、电色谱等。其中，反相色谱的应用较多，占高效液相色谱的70%-80%。高效液相色谱具有以下突出的优缺特点：

1.3.1 高效液相色谱的优点：

高压：高效液相色谱以液体作为流动相，这种液体称为载体。由于载液流经色谱柱时，受到阻力较大，为了使载液迅速通过色谱柱，必须对载液施加高压，压力一般达150～350×105Pa。

高速：高效液相色谱由于采用了高压，载液流速快，因而所需的分析时间较之经典液体色谱法少得多，十几分钟到几十分钟可完成。

高效：高效液相色谱法的柱效很高，约可达3万塔板/m以上。

高灵敏度：由于采用高灵敏度的检测器，自动化操作，分析精确度高，所需试样量较少。

高分辨率，可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。