医学微生物学实验ppt课件
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医学微生物学PPT医学课件
宿主细胞 衣 原 体 大量繁殖 抑制 细胞代谢
主要外膜蛋白阻止吞噬体与溶酶体的融合 超敏反应
免疫性 免疫力不强
第2节 主要致病性衣原体
• 一、沙眼衣原体
• 致病性与免疫性 • 传播途径 眼 —— 眼、眼 —— 手 —— 眼、性 接触传播、产道感染和呼吸道感染
所致疾病
• 沙眼 沙眼亚种A、B、Ba和C血清型 • 感染眼结膜上皮细胞→增殖，包涵体→局 部炎症→早期流泪、有粘液脓性分泌物、 结膜充血及滤泡增生→后期结膜瘢痕、眼 睑内翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜 损害→影响视力或致盲
一、生物学特性
形态结构
• 体积微小，一般为0.2～0.3µm。无细胞壁, 呈多形性，有球形、杆状、丝状、分枝状 等多形态。革兰染色阴性。姬姆萨染色呈 淡紫色。。 • 繁殖方式多样，以二分裂 繁殖为主。
• 培养
• 营养要求高，在含有20%血清、酵母浸膏及 胆固醇的培养基中，生长缓慢，3～10天 （甚至2～3周）后才形成荷包蛋样微小菌 落。菌落中央厚而隆起，周边薄而扁平。 用低倍镜观察清楚。适宜温度为35℃。 •
第2节 主要致病性立克次体
• 一、普氏立克次体
传染源：病人 传播媒介：体虱
人 人虱 人虱 人
流行性斑疹伤寒传播方式
二、莫氏立克次体
地方性斑疹伤寒（鼠型斑疹伤寒）传播方式
鼠 鼠蚤 鼠虱 鼠蚤 人
鼠
三、恙虫病立克次体
• 传播媒介，储存宿主:恙螨 卵
鼠 幼虫
成虫
稚虫
第二代幼虫 人（恙虫病）
稚虫
成虫
卵
第14章 放线菌
第1节 放线菌属
主要致病菌——衣氏放线菌（A. israelii)
一、生物学性状
G+、非抗酸性丝状菌 培养困难，厌氧或微需氧 硫磺样颗粒（菌落） 压片或组织切片，显微镜下可见颗 粒呈菊花状
主要外膜蛋白阻止吞噬体与溶酶体的融合 超敏反应
免疫性 免疫力不强
第2节 主要致病性衣原体
• 一、沙眼衣原体
• 致病性与免疫性 • 传播途径 眼 —— 眼、眼 —— 手 —— 眼、性 接触传播、产道感染和呼吸道感染
所致疾病
• 沙眼 沙眼亚种A、B、Ba和C血清型 • 感染眼结膜上皮细胞→增殖，包涵体→局 部炎症→早期流泪、有粘液脓性分泌物、 结膜充血及滤泡增生→后期结膜瘢痕、眼 睑内翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜 损害→影响视力或致盲
一、生物学特性
形态结构
• 体积微小，一般为0.2～0.3µm。无细胞壁, 呈多形性，有球形、杆状、丝状、分枝状 等多形态。革兰染色阴性。姬姆萨染色呈 淡紫色。。 • 繁殖方式多样，以二分裂 繁殖为主。
• 培养
• 营养要求高，在含有20%血清、酵母浸膏及 胆固醇的培养基中，生长缓慢，3～10天 （甚至2～3周）后才形成荷包蛋样微小菌 落。菌落中央厚而隆起，周边薄而扁平。 用低倍镜观察清楚。适宜温度为35℃。 •
第2节 主要致病性立克次体
• 一、普氏立克次体
传染源：病人 传播媒介：体虱
人 人虱 人虱 人
流行性斑疹伤寒传播方式
二、莫氏立克次体
地方性斑疹伤寒（鼠型斑疹伤寒）传播方式
鼠 鼠蚤 鼠虱 鼠蚤 人
鼠
三、恙虫病立克次体
• 传播媒介，储存宿主:恙螨 卵
鼠 幼虫
成虫
稚虫
第二代幼虫 人（恙虫病）
稚虫
成虫
卵
第14章 放线菌
第1节 放线菌属
主要致病菌——衣氏放线菌（A. israelii)
一、生物学性状
G+、非抗酸性丝状菌 培养困难，厌氧或微需氧 硫磺样颗粒（菌落） 压片或组织切片，显微镜下可见颗 粒呈菊花状
微生物学实验ppt课件
器材与试剂的选用原则
03
如无菌操作、适用性、经济性等
02
细菌形态与结构观察
细菌培养及形态特征
01
02
03
细菌培养方法
包括需氧培养、厌氧培养 和兼性厌氧培养等，不同 种类的细菌需要不同的培 养条件。
细菌菌落特征
观察细菌在固体培养基上 形成的菌落，了解其形状、 大小、颜色、透明度等特 征。
细菌细胞形态
05
微生物代谢活性测定
生长曲线测定方法
直接计数法
通过显微镜直接观察并计数微生物数量，适用于较大微生物如细 菌、酵母菌等。
比浊法
利用微生物生长引起培养液浊度变化来测定生长曲线，操作简便 但易受杂质干扰。
平板菌落计数法
将待测样品稀释后涂布于固体培养基表面，培养后计数形成的菌 落数，适用于可形成菌落的微生物。
原理
病毒必须寄生在活细胞内才能增 殖，通过提供适宜的细胞环境， 使病毒在细胞内复制并产生子代
病毒。
病毒检测技术及应用
免疫学方法
利用抗原抗体特异性结合的原理，通过酶联免疫吸附试验 （ELISA）、免疫荧光技术等检测病毒抗原或抗体。
分子生物学方法
基于病毒核酸的特异性，利用PCR、实时荧光定量PCR等技术扩增 并检测病毒核酸。
微生物学实验ppt课件
contents
目录
• 实验基础知识 • 细菌形态与结构观察 • 真菌形态与结构观察 • 病毒培养与检测技术 • 微生物代谢活性测定 • 微生物遗传与变异研究 • 微生物生态学及环境因子影响研究
01
实验基础知识
微生物学概述
类生活中的作用：如 生态平衡、发酵工业 等
生理生化鉴定
利用真菌的生理生化特性，如营养需 求、代谢产物等，进行进一步的分类 鉴定。
医学检验微生物ppt课件完整版x
个人防护措施及注意事项说明
实验服与护目镜
进入实验室需穿着实验服，佩戴合适的护目镜， 防止试剂飞溅或粉尘刺激。
手套与口罩
根据实验需要选择合适的手套和口罩，避免皮肤 接触有害试剂或吸入有害气体。
实验操作规范
规范实验操作，避免产生气溶胶或飞溅物，减少 交叉污染的风险。
实验废弃物处理及环保要求讲解
废弃物分类处理
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目录
• 微生物学基础 • 医学微生物学概述 • 常见病原微生物介绍 • 微生物检验技术与方法 • 临床标本中常见病原微生物检测实例分析 • 实验室安全与防护措施
01 微生物学基础
微生物定义与分类
微生物定义
微生物是一类形体微小、结构简单、 必须借助光学显微镜或电子显微镜 才能看到的微小生物。
微生物生长与繁殖
01
微生物营养
微生物从外界环境中摄取和利用营养物质的过程称为营养。微生物营养
类型有光能自养型、光能异养型、化能自养型和化能异养型四类。
02 03
微生物生长
微生物在适宜的环境条件下，通过摄取营养物质、合成细胞物质、增加 细胞数量的过程称为生长。生长曲线可分为迟缓期、对数期、稳定期和 衰亡期四个时期。
通过对微生物基因组进行测序和 分析，了解其基因组成和功能， 为微生物的鉴定和分型提供准确
依据。
基因芯片技术
将大量特异性基因探针固定在芯 片上，通过与待测微生物DNA杂
交来鉴定其种类和型别。
宏基因组学技术
通过对环境中所有微生物的基因 组进行高通量测序和分析，了解 微生物群落的组成和功能，为环 境微生物检测和生态学研究提供
尿液标本中常见病原微生物检测实例分析
尿常规检查
完整版医学微生物学ppt课件
01医学微生物学概述Chapter医学微生物学的定义与任务定义任务01020304包括革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌等不同类型的细菌。
细菌包括DNA 病毒、RNA 病毒等不同类型的病毒。
病毒包括酵母菌、霉菌等不同类型的真菌。
真菌包括原虫、蠕虫等不同类型的寄生虫。
寄生虫古代时期文艺复兴时期19世纪20世纪至今02细菌的基本形态与结构Chapter细菌的大小与形态细菌的大小细菌的形态01020304细胞壁细胞质细胞膜核质荚膜鞭毛菌毛芽孢03细菌的生理与遗传Chapter细菌的形态与结构细菌的理化特性细菌的分类与命名030201细菌的理化性质细菌的生长繁殖与代谢细菌的营养类型细菌的生长繁殖细菌的代谢细菌的遗传与变异细菌的遗传物质细菌的变异类型细菌遗传变异的机制细菌遗传变异的意义04细菌的分类与命名Chapter细菌的分类方法数值分类法传统分类法利用细菌的多种特性，通过计算机进行数值分析，确定细菌之间的相似性和差异性，从而进行分类。
分子分类法常见病原菌的分类与命名葡萄球菌属包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等，引起皮肤和软组织感染、败血症等。
链球菌属包括肺炎链球菌、化脓性链球菌等，引起呼吸道感染、脑膜炎、心内膜炎等。
肠杆菌科包括大肠杆菌、沙门氏菌等，引起肠道感染、泌尿道感染等。
观察细菌的形态、大小、排列方式等特征进行初步鉴定。
形态学鉴定生理生化鉴定免疫学鉴定分子生物学鉴定利用细菌对营养物质的需求、代谢产物的产生以及某些酶的活性等特性进行鉴定。
利用特异性抗体与细菌抗原的结合反应进行鉴定，如凝集试验、沉淀试验等。
基于细菌基因序列的分析和比较，采用PCR 技术、基因芯片技术等手段进行快速、准确的鉴定。
细菌的鉴定与识别05病毒的基本形态与结构Chapter病毒的大小与形态病毒的大小病毒的形态病毒形态各异，常见的有球形、杆状、砖形、丝状、蝌蚪状等。
这些形态与病毒的基因组类型、外壳蛋白的结构以及感染宿主的方式有关。
病毒的基本结构核衣壳包膜病毒的分类与命名病毒的分类病毒的命名06病毒的复制与遗传Chapter病毒的复制周期病毒通过特异性受体吸附于宿主细胞表面，然后将核酸注入细胞内。
《医学微生物》PPT课件
第四十二页，共47页。
产黄青霉菌落 细菌生长 抑制区域 正常细菌 生长区域
第四十三页，共47页。
6、现代(xiàndài)微生物学的发展
随着(suízhe)现代生物学，化学，物理学等基 础学科的发展，推动了微生物学的发展 ，如电子显微镜，PCR技术，基因工程 技术，分子杂交等，使微生物的诊断和 传染病治疗等得到快速的提高。
2、学好微生物学需以生物学、细胞学、 生理学和生物化学为基础，同时也为学 好以后的传染病和中药学等课打下基础 。
第二页，共47页。
3、通过课程的教学(jiāo xué)，要求学生掌握 医学微生物学 基本概念、理论和微生物 观察、接种分离和鉴别技术，为今后实 践工作打好基础。
二、教材：医学微生物与免疫学 三、参考书： 1、医学微生物。北京大学医学出版社 2、动物微生物学 中国农业出版社 3、兽医微生物学 中国农业出版社
微生物的特点
5、分布(fēnbù)广，种类多
种类
(多zhǒngl地èi)球上的微生物： 估计(gūjì)有100万种以上
已发现的微生物： 约有10万种 已开发利用的微生物： 约1000种
微生物的微观性 研究手段的限制 分离培养的局限
第二十二页，共47页。
6.
地球形成于46亿年
前，微生物产生于35亿年前，人类的形
微生物学是研究微生物的形态，结构， 生命活动规律，进化，分类、以及与人类 (rénlèi)，动植物，自然界相互关系的一门学科。
第二十五页，共47页。
（六）医学(yīxué)微生物学
Medical Microbiology
医学微生物学主要研究病原微生物的生物学特性以 及与人类相互关系的科学。
近20年来(niánlái)，医学微生物学有很突出的研究进展
产黄青霉菌落 细菌生长 抑制区域 正常细菌 生长区域
第四十三页，共47页。
6、现代(xiàndài)微生物学的发展
随着(suízhe)现代生物学，化学，物理学等基 础学科的发展，推动了微生物学的发展 ，如电子显微镜，PCR技术，基因工程 技术，分子杂交等，使微生物的诊断和 传染病治疗等得到快速的提高。
2、学好微生物学需以生物学、细胞学、 生理学和生物化学为基础，同时也为学 好以后的传染病和中药学等课打下基础 。
第二页，共47页。
3、通过课程的教学(jiāo xué)，要求学生掌握 医学微生物学 基本概念、理论和微生物 观察、接种分离和鉴别技术，为今后实 践工作打好基础。
二、教材：医学微生物与免疫学 三、参考书： 1、医学微生物。北京大学医学出版社 2、动物微生物学 中国农业出版社 3、兽医微生物学 中国农业出版社
微生物的特点
5、分布(fēnbù)广，种类多
种类
(多zhǒngl地èi)球上的微生物： 估计(gūjì)有100万种以上
已发现的微生物： 约有10万种 已开发利用的微生物： 约1000种
微生物的微观性 研究手段的限制 分离培养的局限
第二十二页，共47页。
6.
地球形成于46亿年
前，微生物产生于35亿年前，人类的形
微生物学是研究微生物的形态，结构， 生命活动规律，进化，分类、以及与人类 (rénlèi)，动植物，自然界相互关系的一门学科。
第二十五页，共47页。
（六）医学(yīxué)微生物学
Medical Microbiology
医学微生物学主要研究病原微生物的生物学特性以 及与人类相互关系的科学。
近20年来(niánlái)，医学微生物学有很突出的研究进展
医学微生物学ppt课件完整版
病毒缺乏独立的代谢和能量系统 ，必须利用宿主细胞的酶系统、 原料和能量进行复制。
形态多样 结构简单 寄生生活
严格细胞内寄生
病毒粒子形态各异，有球形、杆 状、砖形、蝌蚪形等。
病毒必须寄生在活细胞内才能复 制和增殖。
病毒的复制与变异
复制周期
包括吸附、注入、脱壳、生物合 成、组装与释放等步骤。
变异机制
病毒的变异机制包括错误复制、 基因重组和基因重配等。
通过接种疫苗可以预防某些由微生物引起的疾病，如麻疹、流感等 。
微生物与药物的关系
微生物是药物的重要来源
许多抗生素、抗真菌药物等都来源于微生物或其代谢产物。
微生物在药物生产中的应用
利用微生物发酵技术可以生产多种药物，如青霉素、维生素等。
微生物与药物相互作用
某些药物可以影响微生物的生长和代谢，同时微生物也可以影响药 物的吸收、分布和代谢。
06
实验诊断与防治原则
Chapter
实验诊断方法与技术
细菌学诊断方法
包括细菌培养、生化反应、血 清学试验等，用于鉴定细菌种
类和检测细菌感染。
病毒学诊断方法
包括病毒分离、病毒抗原检测 、病毒核酸检测等，用于鉴定 病毒种类和检测病毒感染。
免疫学诊断方法
包括抗原抗体反应、免疫荧光 技术、酶联免疫吸附试验等， 用于检测病原体特异性抗原或 抗体。
03
人类通过培养有益微生物和消灭有害微生物来维护自身健康，
如疫苗接种、消毒灭菌等。
02
细菌学
Chapter
细菌的形态与结构
细菌的基本形态
球菌、杆菌、螺形菌
细菌的结构
细胞壁、细胞膜、细胞质、核质
特殊结构
荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢
形态多样 结构简单 寄生生活
严格细胞内寄生
病毒粒子形态各异，有球形、杆 状、砖形、蝌蚪形等。
病毒必须寄生在活细胞内才能复 制和增殖。
病毒的复制与变异
复制周期
包括吸附、注入、脱壳、生物合 成、组装与释放等步骤。
变异机制
病毒的变异机制包括错误复制、 基因重组和基因重配等。
通过接种疫苗可以预防某些由微生物引起的疾病，如麻疹、流感等 。
微生物与药物的关系
微生物是药物的重要来源
许多抗生素、抗真菌药物等都来源于微生物或其代谢产物。
微生物在药物生产中的应用
利用微生物发酵技术可以生产多种药物，如青霉素、维生素等。
微生物与药物相互作用
某些药物可以影响微生物的生长和代谢，同时微生物也可以影响药 物的吸收、分布和代谢。
06
实验诊断与防治原则
Chapter
实验诊断方法与技术
细菌学诊断方法
包括细菌培养、生化反应、血 清学试验等，用于鉴定细菌种
类和检测细菌感染。
病毒学诊断方法
包括病毒分离、病毒抗原检测 、病毒核酸检测等，用于鉴定 病毒种类和检测病毒感染。
免疫学诊断方法
包括抗原抗体反应、免疫荧光 技术、酶联免疫吸附试验等， 用于检测病原体特异性抗原或 抗体。
03
人类通过培养有益微生物和消灭有害微生物来维护自身健康，
如疫苗接种、消毒灭菌等。
02
细菌学
Chapter
细菌的形态与结构
细菌的基本形态
球菌、杆菌、螺形菌
细菌的结构
细胞壁、细胞膜、细胞质、核质
特殊结构
荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢
医学微生物学微生物实验PPT免疫试验3
转化率﹦
转化的淋巴细胞数(过渡型、淋巴母细胞、有丝分裂相)
×100%
转化的+未转化的淋巴细胞数
正常成人转化率为：60%~80%，﹤50%视为降低
淋巴细胞转化实验
T细胞
PHA
刀豆素A (ConA） 美洲商陆（PWM）
淋巴母细胞
（体积增大，形态不整齐，核 大，松散，有核仁，胞浆变宽，
出现空泡）
Ag刺激T淋巴细胞转化各期形态
常用的丝裂原:
植物血凝素（PHA） 刀豆素A(ConA) 美洲商陆(PWM)
方法： 1.分离外周血淋巴细胞
方法：
2.将分离的血淋巴细胞+PHA→混匀，37℃孵育72
小时→低速离心取培养液涂片染色、镜检，分别
计数转化淋巴细胞（淋巴母细胞、过渡型母细胞
和核有丝分裂相细胞）和成熟的淋巴细胞，共计
数200个细胞。并计算转化率。
Ab 载 体
反应结果
有 不需要
无
凝 集 素
需要 （致敏颗粒）
肉眼可见 凝集块
有 无
需要
无
（致敏颗粒）
有
报告方 式
阳性 阴性 阳性 阴性 阳性 阴性
反应名称
支撑物的 特点
观察现象
意 义
双扩
琼脂凝胶
中不含抗 沉淀线
沉 对流电泳
体
定 性
淀
反
应
单扩
沉淀圈
琼脂凝胶
定
中含抗体
量
火箭电泳
沉淀峰
扩散条件 37℃~36h
2、毒素中和试验
细菌毒素与抗毒素中和试验。 常见用于诊断风湿病抗“O”试验。
原理：
乙型溶血性链球菌产生的溶血毒素“O” （SLO ）能 刺激机体产生抗O抗体（ASO），于感染后2～3周至病愈 后数月到一年可检出高于正常值的SLO抗体（1：400以 上）。SLO与相应抗体作用时会因毒性被中和而失去溶血 活性。因此，可通过该方法测定ASO。
医学微生物学实验三
• 用无菌镊子或纸片分配器将抗菌纸片粘贴于M-H琼脂的表面 ，一旦纸片贴上，不能移动，每两个药敏纸片间隔20mm， 距边缘10mm。
• 盖上平板的盖子，做好标记，放置培养箱内孵育16~18h。
• 下次实验课找到自己的药敏结果，量取抑菌环直径，根据 CLSI（clinical and laboratory standards institute ）标准， 报告细菌对该抗生素敏感(susceptible,S)、耐药(resistant,R) 、中介(intermediate,I)。
MIC：在与微生物生长速率有关的特定时间 间隔内，通常是18－24小时，能够抑制被测菌生 长的最低药物浓度。
抑菌环
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ药物效果越好，抑菌环直径越大；效果越差，抑菌环直径越小。
操作方法
• 无菌挑取孵育16～24h的血平板上4个菌落,沿4个方向均匀抹 无菌M-H琼脂表面，使菌液均匀分布，最后再取一个菌落沿 平板内缘环形涂抹均匀。
直接
涂片镜检 （革兰染色）
接种 血琼脂平板
菌落观察
血浆凝固酶试验
革兰染色
药敏试验 诊断报告
一、脓汁标本中化脓性球菌的鉴定
直接涂片镜检
• 取标本直接涂片，均匀涂成菌膜，自然干 燥，固定后革兰染色，油镜观察。
金黄色葡萄球菌
革兰染色镜检
─────────
形态
排列 染色性
乙型溶血性链球菌
细菌分离培养
• 取一号和二号脓标本，分别接种于血琼脂 平板上，划线分离，37℃培养18~24h后， 观察菌落特征，取单个菌落进行再次革兰 染色镜检。
– 保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏 – 抵抗吞噬细胞的吞噬和消化 – 使感染局限化和形成血栓
游离血浆凝固酶
• 盖上平板的盖子，做好标记，放置培养箱内孵育16~18h。
• 下次实验课找到自己的药敏结果，量取抑菌环直径，根据 CLSI（clinical and laboratory standards institute ）标准， 报告细菌对该抗生素敏感(susceptible,S)、耐药(resistant,R) 、中介(intermediate,I)。
MIC：在与微生物生长速率有关的特定时间 间隔内，通常是18－24小时，能够抑制被测菌生 长的最低药物浓度。
抑菌环
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ药物效果越好，抑菌环直径越大；效果越差，抑菌环直径越小。
操作方法
• 无菌挑取孵育16～24h的血平板上4个菌落,沿4个方向均匀抹 无菌M-H琼脂表面，使菌液均匀分布，最后再取一个菌落沿 平板内缘环形涂抹均匀。
直接
涂片镜检 （革兰染色）
接种 血琼脂平板
菌落观察
血浆凝固酶试验
革兰染色
药敏试验 诊断报告
一、脓汁标本中化脓性球菌的鉴定
直接涂片镜检
• 取标本直接涂片，均匀涂成菌膜，自然干 燥，固定后革兰染色，油镜观察。
金黄色葡萄球菌
革兰染色镜检
─────────
形态
排列 染色性
乙型溶血性链球菌
细菌分离培养
• 取一号和二号脓标本，分别接种于血琼脂 平板上，划线分离，37℃培养18~24h后， 观察菌落特征，取单个菌落进行再次革兰 染色镜检。
– 保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏 – 抵抗吞噬细胞的吞噬和消化 – 使感染局限化和形成血栓
游离血浆凝固酶
医学微生物学PPT课件
四体
3 恙虫病立克次体：
（1）传染源：携带病原体野鼠，家鼠 （2）传播媒介：恙螨 （3）所致疾病：恙虫病 （4）传播途径：
恙螨幼虫叮咬
带菌鼠
人体
局部红色丘疹
全身淋巴结肿大，肺，肝，水疱，中央溃疡，形成黑
脾，脑损害
色焦痂
2024/3/4
43
四体
四 衣原体
一类严格细胞内寄生，具有独特发育周期，并 能通过细菌滤器的原核细胞型微生物。
四体
一 螺旋体
(spirochete )
概念：螺旋细胞型微生物。基本结 构与细菌相似，例如有细胞壁、原始核质，以二分 裂方式繁殖和对抗生素等药物敏感等
主要类型：
疏螺旋体属：
回归热螺旋体 伯氏螺旋体
密螺旋体属：
梅毒螺旋体
钩端螺旋体属：
钩端螺旋体
四体
1.寄居泌尿生殖道，传播途径为性接触和母婴传播。 致病机制与侵袭性酶有关。吸附后产生磷脂酶分 解胞膜中的磷脂，脲酶分解尿素产氨，影响宿主 细胞生物合成。产生IgA蛋白酶，破坏IgA的局部 抗感染作用，有利于粘附和致病。
四体
2.引起非淋菌性尿道炎(NGU) ，上行感染，可引起 前列腺炎或附睾炎；阴道炎和宫颈炎，并可导致 流产。因为与人精子膜有共同抗原，对精子可造 成免疫损伤而致不育。
四体
(3)ELISA
检测IgM抗体对早期诊断有价值。 立克次体抗原吸附于载体。泛影葡胺梯度离心纯化
抗原为优，检出血清的抗体效价高，纸上ELISA测 定抗体，方法简便。将感染卵黄囊悬液加于玻片 (经氯仿·甲醇洗净)上，凉干、固定，加稀释血清 于抗原点上，每张玻片上包括阳性和阴性对照，加 酶标兔抗人IgM/G于抗原·血清点作用后，将浸透新 鲜配制的底物无灰滤纸覆盖在玻片上约4-6min，可 见滤纸条上阳性对照点位置显紫棕色，取下滤纸条 (即终止反应)，观察是否显色，与对照比较判定结 果。此法简便，并可保存实验记录。
临床常见标本的微生物检验ppt课件
• 唾液中口咽部定植菌的浓度可达108 ～ 109/ml。
• 研究显示，国内常规痰标本中约半数存在 唾液严重污染现象。
（一）采集指征
• 凡是发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性， 并伴有胸痛、气急，肺部闻及湿罗音，外周白细 胞总数及中性粒细胞比例明显增高，X线检查提 示肺部有炎性浸润或胸腔积液，甚至出现感染性 休克和呼吸衰竭等患者，应采集痰液或下呼吸道 标本。
同时采集2~3套（不同部位）血培养标本。（即 双瓶双臂同时采集血培养标本。）
婴幼儿患者，推荐同时采集2次（不同部位） 血培养标本。
为什么要求多次采血？
• （1）菌血症有“持续性”和“暂时性”之分，多次采血可 提高阳性检出率，减少漏检； 两瓶或以上血培养以上血培养结果阳性，细菌鉴定结果相 同，判断为感染菌，作药敏并报告临床。 送检两瓶或以上血培养，仅1瓶结果为阳性，且为潜在的污 染菌（如表皮葡萄球菌、微球菌、气球菌、棒状杆菌等）， 一般作为污染菌。 出现多种细菌在排除污染可能后，可考 虑“复数菌”败血症的诊断。 仅送检1瓶血培养，且培养出上述潜在的污染菌。则其临床 意义不能确定，需与临床医生讨论其可能的临床价值。
经支气管镜抽吸法（支气管肺泡灌洗液、防污染样本毛刷等）
• 直接从肺部感染病灶采集高浓度的病原菌，较为安全，但不能避免咽喉部正 常菌群污染。
•
经人工气道吸引分泌物（导管吸痰、防污染灌洗等）
• 较为采用，但人工气道常有致病菌或定值菌存在，建议采集前先做细胞血筛 查。
•
经气管穿刺吸引物
• 采集到的下呼吸道标本不受上呼吸道污染，常用于厌氧菌培养，但患者不易 接受。
中，剧烈振荡5-10s，然后用接种环将沉淀于管底 的脓痰小片沾出，再放另一个无菌试管中，将同 样的方法反复2次。
• 研究显示，国内常规痰标本中约半数存在 唾液严重污染现象。
（一）采集指征
• 凡是发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性， 并伴有胸痛、气急，肺部闻及湿罗音，外周白细 胞总数及中性粒细胞比例明显增高，X线检查提 示肺部有炎性浸润或胸腔积液，甚至出现感染性 休克和呼吸衰竭等患者，应采集痰液或下呼吸道 标本。
同时采集2~3套（不同部位）血培养标本。（即 双瓶双臂同时采集血培养标本。）
婴幼儿患者，推荐同时采集2次（不同部位） 血培养标本。
为什么要求多次采血？
• （1）菌血症有“持续性”和“暂时性”之分，多次采血可 提高阳性检出率，减少漏检； 两瓶或以上血培养以上血培养结果阳性，细菌鉴定结果相 同，判断为感染菌，作药敏并报告临床。 送检两瓶或以上血培养，仅1瓶结果为阳性，且为潜在的污 染菌（如表皮葡萄球菌、微球菌、气球菌、棒状杆菌等）， 一般作为污染菌。 出现多种细菌在排除污染可能后，可考 虑“复数菌”败血症的诊断。 仅送检1瓶血培养，且培养出上述潜在的污染菌。则其临床 意义不能确定，需与临床医生讨论其可能的临床价值。
经支气管镜抽吸法（支气管肺泡灌洗液、防污染样本毛刷等）
• 直接从肺部感染病灶采集高浓度的病原菌，较为安全，但不能避免咽喉部正 常菌群污染。
•
经人工气道吸引分泌物（导管吸痰、防污染灌洗等）
• 较为采用，但人工气道常有致病菌或定值菌存在，建议采集前先做细胞血筛 查。
•
经气管穿刺吸引物
• 采集到的下呼吸道标本不受上呼吸道污染，常用于厌氧菌培养，但患者不易 接受。
中，剧烈振荡5-10s，然后用接种环将沉淀于管底 的脓痰小片沾出，再放另一个无菌试管中，将同 样的方法反复2次。
医学微生物学实验考试切片复习ppt课件
微生物鉴别习题
常见微生物鉴别
01
提供常见微生物的形态特征和鉴别要点，通过对比分析，提高
鉴别能力。
微生物培养与鉴定
02
介绍微生物的培养方法、生长特性以及通过生化试验进行鉴定
的技巧。
微生物药敏试验
03
了解微生物药敏试验的基本原理和方法，以及药敏试验在临床
治疗中的应用。
THANK YOU
感谢聆听
纤毛虫
具有纤毛的动物，如肾 形虫、结肠小袋纤毛虫
等。
孢子虫
无细胞壁的原生动物， 如疟原虫、弓形虫等。
肉足虫
以伪足为运动胞器，如 溶组织内阿米巴、蓝氏
贾第鞭毛虫等。
03
切片考试常见问题解析
切片辨识问题
切片辨识问题
在医学微生物学实验考试中，考生常因无法准确辨识切片而出现 错误。为解决这一问题，考生应熟练掌握各种微生物的形态特征 ，以便在考试中准确辨识。
答题技巧
80%
仔细审题
在答题前，仔细阅读题目，确保 理解题意，避免因误解题目而答 错。
100%
抓住关键信息
抓住题干中的关键信息，筛选出 重要信息，忽略无关紧要的信息 。
80%
逻辑清晰
在回答问题时，注意逻辑清晰， 条理分明，避免出现混乱和重复 。
考试纪律与注意事项
遵守考试纪律
在考试过程中，严格遵守考试纪律，不得抄袭、 作弊或违反考场规定。
注意个人物品安全
保管好个人物品，避免丢失或被盗。
提前到达考场
提前到达考场，以免因迟到而错过考试时间。
05
复习资料与习题
微生物学基础复习资料
微生物的分类与特点
包括细菌、病毒、真菌等各类微生物的形态、结构、生理生化特 性等。
2024年度《微生物学》PPT课件
命名规则
采用双名法，即属名和种名，用斜体拉丁文表示，属名在前，种名在后。例如：Escherichia coli（大肠埃希氏菌 ）。
2024/3/23
24
微生物的鉴定方法与步骤
鉴定方法
表型鉴定（形态学、生理生化特征）、遗传学鉴定（基因型、DNA序列分析）、血清学鉴定（抗原抗 体反应）等。
鉴定步骤
采集样品、分离纯化、形态观察、生理生化试验、血清学试验、分子生物学试验等。
呼吸作用类型
分为好氧呼吸、厌氧呼吸和兼性厌氧 呼吸，不同类型的微生物在不同环境 条件下进行不同的呼吸作用。
2024/3/23
16
微生物的物质代谢与合成作用
01
碳源利用与分解代 谢
微生物利用不同碳源进行分解代 谢，包括单糖、多糖、脂肪和蛋 白质等。
02
氮源利用与合成代 谢
微生物利用不同氮源进行合成代 谢，合成自身所需的氨基酸、核 苷酸等含氮物质。
营养类型
根据微生物对营养需求的不同，可分为自养型、 异养型和兼性营养型。
2024/3/23
12
微生物的生长曲线与测定方法
生长曲线
描述微生物在适宜条件下 生长繁殖的四个阶段，即 延迟期、对数期、稳定期 和衰亡期。
2024/3/23
测定方法
包括直接计数法（如显微 镜计数法、平板菌落计数 法）和间接测定法（如比 浊法、生理指标法等）。
01
球菌、杆菌、螺旋菌
细菌的结构
02
细胞壁、细胞膜、细胞质、核质
特殊结构
03
荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢
8
真核微生物的形态与结构
真菌的形态
酵母菌、霉菌、大型真菌
真菌的结构
菌丝、孢子、细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核
医学微生物学实验PPT实验三细菌的人工培养
医学微生物学实验ppt实验三细菌 的人工培养
汇报人：可编辑 2024-01-11
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 实验总结与思考
01 实验目的
掌握细菌的人工培养技术
了解细菌生长所需的 营养条件和环境因素 。
学会接种、培养和观 察细菌的方法。
掌握培养基的制备和 灭菌技术。
落。
稀释分离法
通过将细菌稀释到一定浓度后，均 匀涂布在培养基表面，使细菌在培 养基上独立生长成单菌落。
选择性分离法
利用选择性培养基的特殊成分或抑 制剂，抑制非目标菌的生长，使目 标菌成为优势菌种，便于分离纯化 。
03 实验步骤
培养基的制备与灭菌
培养基制备
根据实验需求，选择适合的培养 基配方，按照比例混合各种成分 ，搅拌均匀后，调节pH值至适宜 范围。
细菌的形态、染色及生化反应结果
01
02
03
04
形态
通过显微观察，我们记录了不 同细菌的形态特征，如球菌、
杆菌、螺旋菌等。
染色
采用革兰氏染色法对细菌进行 染色，观察其染色反应并记录
。
生化反应
通过观察细菌对不同生化底物 的反应，了解其生化特性。
结论
细菌的形态、染色及生化反应 结果对于鉴别和分类细菌具有
02 实验原理
细菌的生长繁殖条件
营养物质
细菌需要从外界环境中获取营 养物质，如碳源、氮源、水、 无机盐等，以支持其生长和繁
殖。
温度
不同种类的细菌对温度的需求 不同，有些细菌在高温下生长 ，有些则喜低温。
酸碱度
细菌对环境的酸碱度也有一定 的要求，通常在pH值6-8之间 较为适宜。
气体环境
汇报人：可编辑 2024-01-11
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 实验总结与思考
01 实验目的
掌握细菌的人工培养技术
了解细菌生长所需的 营养条件和环境因素 。
学会接种、培养和观 察细菌的方法。
掌握培养基的制备和 灭菌技术。
落。
稀释分离法
通过将细菌稀释到一定浓度后，均 匀涂布在培养基表面，使细菌在培 养基上独立生长成单菌落。
选择性分离法
利用选择性培养基的特殊成分或抑 制剂，抑制非目标菌的生长，使目 标菌成为优势菌种，便于分离纯化 。
03 实验步骤
培养基的制备与灭菌
培养基制备
根据实验需求，选择适合的培养 基配方，按照比例混合各种成分 ，搅拌均匀后，调节pH值至适宜 范围。
细菌的形态、染色及生化反应结果
01
02
03
04
形态
通过显微观察，我们记录了不 同细菌的形态特征，如球菌、
杆菌、螺旋菌等。
染色
采用革兰氏染色法对细菌进行 染色，观察其染色反应并记录
。
生化反应
通过观察细菌对不同生化底物 的反应，了解其生化特性。
结论
细菌的形态、染色及生化反应 结果对于鉴别和分类细菌具有
02 实验原理
细菌的生长繁殖条件
营养物质
细菌需要从外界环境中获取营 养物质，如碳源、氮源、水、 无机盐等，以支持其生长和繁
殖。
温度
不同种类的细菌对温度的需求 不同，有些细菌在高温下生长 ，有些则喜低温。
酸碱度
细菌对环境的酸碱度也有一定 的要求，通常在pH值6-8之间 较为适宜。
气体环境
最新微生物学基础实验PPT课件
实验完毕后的处理
1）观察完毕，关闭电源,下降载物台，将油镜头转出，将浸过液 体石蜡的镜头用干净的擦镜纸将镜头擦2-3次至干净。注意擦镜 头时向一个方向擦拭。 2）观察完毕，擦净标本玻片上的石蜡油。 3）将各部分还原，将显微镜用专用套罩好，以免沾污灰尘。 4）观察完毕，将所观察的长有菌落的培养皿盖好放于以原处。。
微生物的形态观察(一)
注意事项
显微镜观察细菌涂片（细菌三型涂片、枯草杆菌涂片）
使用油镜： 低倍镜（10× ） （100× ）
高倍镜（40× ）
油镜
显微镜观察放线菌、曲霉示菌丝及孢子、匍枝根霉、
有隔菌丝与无隔菌丝等装片时：
低倍镜（10× ）
高倍镜（40× ）
用油镜观察时，观察完毕应将镜头、玻片标本上的液 体、实验原理、涂片观察结果绘图、菌落观察结果填 表。 观察平皿的培养基上生长的各种微生物的菌落，简单分类，详细 记录其特征填入下表。细菌、真菌、放线菌，以下以细菌为例记 录指标。
细菌、真菌、放线菌等菌落观察记录指标
（注意选取单个菌落，进行目测观察，描述菌落特征） 1）大小：大、中、小、针尖状，可用米尺测量菌落的直径（mm）. 2）颜色：黄、浅黄、乳白、灰白、红、粉红等。 3）干湿：干燥、湿润、粘稠。 4）质地：腊状、液滴状、皱褶状。 5）形态：圆形、不规则、同心圆状、丝状、假根状、棉絮状、网 状、疏松或紧密、同心轮纹、放线状的皱褶等。 6）表面：扁平扩展或蔓延生长、隆起、凹、凸、脐状、凸脐状、 乳头状、褶皱凸面。 7）透明：透明、半透明、不透明。 8）边缘：整齐、不整齐、圆锯齿状、裂叶、不定形、边缘波状。
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二.无菌操作技术
实验目的
1. 掌握常用的细菌接种方法 2. 熟悉细菌生长现象的观察方法
11
一、培养基
概念：是人工配制的专供微生物生长繁殖的 混合营养物制品。
成分：充足的营养物质（水分、碳源、氮源、 无机盐）；合适的PH；适宜的温度；适宜的气体环 境。
用途：用于微生物的繁殖及分离接种，传代 或保存，鉴别微生物的类属，研究微生物的生理及 生化特性等。
G+菌细胞壁结构致密，肽聚糖层厚且交联 度高，脂质含量少，乙醇不易渗入。
G-菌细胞壁结构疏松，肽聚糖层薄且交联度 低，含大量脂质，乙醇易渗入。
30
等电点学说
G+菌等电点（pI 2~3） G-菌等电点（pI 4~5）
实验室感染的事件曾多次发生，实 验室人员曾为此付出了沉重的代价。 这些感染的主要原因是：防护意识 不强，操作失误，防护条件不足。
8
医学微生物学实验室规则
学生进微生物实验室必须穿好工作服，离室需脱下反折，要 经常清洗消毒。
进实验室时随带书包、衣物等与实验无关物品一律存放指定 的储物柜内。
后两者的特性： 1、可感知，易避免 2、危害范围有限 3、危害持续时间短
4
一.实验室生物安全
惨痛的历史教训
例一：1956年，前苏联的一个实验室曾有9支 装有感染了委内瑞拉马脑炎病毒的鼠脑的安 瓿被打破。由于没采取必要的措施，结果在 几天内造成24名工作人员感染。
5
一.实验室生物安全
例二：2004年4月，中国疾病预防控制中 心科研人员，采用未经论证的非典病毒灭 活方法，在不符合防护要求的普通实验室 内操作非典感染材料，造成北京、安徽发 生非典疫情。
12
二、培养基分类
基础培养基：普通琼脂培养基
按用途分
营养培养基：血液琼脂培养基 选择培养基：S-S培养基 鉴别培养基：双糖铁培养基 厌氧培养基：庖肉培养基
13
二、培养基分类
液体培养基：大量繁殖细菌 按物理性状分 固体培养基：分离鉴定细菌
半固体培养基：观察动力及保存菌种
14
三、细菌的接种方法
普通固体琼脂培养基接种法
25
三.细菌的形态学检查
染色标本检查
单染法：简单染色，一种染料 （美蓝染色） 复染法：复杂染色，两种以上染料（革兰染色、
抗酸染色）
26
革兰染色(Gram stain)
1884年由丹麦细菌学家Gram创立。 革兰染色是最常用的一种染色方法，可以
将细菌初步分为革兰染色阳性菌和革兰染色 阴性菌，在临床上具有非常重要的意义。
4 菌液入口：立即吐入消毒容器内，1：1000高锰酸钾或3% 双氧水漱口，根据菌种服用抗菌药物。
5 菌液污染台面：2%~3%来苏尔或0.1%新洁尔灭覆盖30分钟 后抹去，皮肤手指沾染活菌应用上述液体浸泡3分后肥皂和 清水洗净。
6 火警：勿慌，立即关闭电闸和煤气闸。若酒精乙醇乙醚等10 有机溶剂起火切不可用水扑救，可用沙土等物扑灭。
第一次划线应占平皿面积的1/10,以后每次划线 约占面积的1/4 ～ 1/5。
划线为连续划线,不能间断。应占满平皿。划线 不能交叉重复。
每次划完后应灭菌。
18
19
2.斜面接种法
20
3.液体培养基接种法 4.半固体培养基穿刺接种法
21
四、细菌生长现象的观察
1.固体培养基-菌落
单个细菌分裂繁殖形成一堆肉眼可见的细菌集团。 观察菌落的形态、大小、表面、边缘、湿度、透明度； 在血平板上还要观察溶血情况和色素等。
医学微生物学实验
1
内容提要
一. 实验室生物安全 二. 细菌的接种方法 三. 革兰染色
2
实验目的
1.通过介绍实验室生物安全方面的相关知 识，树立“有菌的意识，无菌操作的观念” 。
2.掌握革兰染色方法和细菌接种技术。 3.观察细菌的特殊结构。
3
一.实验室生物安全
医学实验室的主要危害源包括哪些?
生物危害源 化学危害源 物理危害源
1 皮肤破损：去除异物，生理盐水或蒸馏水洗净后2% 碘酊 或2%红汞涂抹。
2 烧伤：局部涂凡士林，2%鞣酸或2%苦味酸。
3 化学药品腐蚀伤：若强酸则先用大量清水冲洗，再用碳酸 氢钠溶液洗涤中和；若强碱则先用大量清水冲洗，再用2%硼 酸洗涤中和（若伤处为眼部加用橄榄油或者液体石蜡1~2滴 滴眼）。
22
2.半固体培养基-鞭毛 观察细菌的动力
23
3.液体培养基
三. 细菌在液体培养基中的生长情况
混浊生长（大多数细菌）
沉淀生长（链球菌）
菌膜
膜样生长（专性需氧菌，
对照 如结核分枝杆菌）
菌沉淀
均匀浑浊
24
操作面培养基的接种方法。 3. 半固体培养基穿刺接种法。 4. 液体培养基的接种方法。
严禁在实验室进食、饮水和喧哗打闹。 手拿培养物后或出实验室前要洗手，必要时用消毒液泡手；
避免有菌材料溅出；破损器材及时处理并报告。 实验过程中避免一切不良的个人习惯；操作中产生的废料要
扔在指定容器内；实验完毕清理台面，值日生严格认真打扫 卫生，关闭水电，门窗，洗手后离开实验室。
9
实验室意外紧急处理办法
1.平板分区划线接种法：分离培养细菌。 2.斜面固体培养基接种法：纯菌的移种，
短时间保存菌种。
半固体琼脂培养基穿刺接种法
保存菌种或观察细菌的动力
液体培养基接种法
用于肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等。
15
1.平板分区划线接种-得单个菌落
16
17
分区划线注意事项
划线时接种环与平皿约成30～40度角,轻轻接触, 以腕力在琼脂表面轻快滑动,不能划破琼脂。
6
一.实验室生物安全
例三：2010年12月东北农业大学 “羊活体解剖学实
验”，共5个班级28人感染布鲁氏菌病。采购人均 未要求养殖场出具检疫合格证明，断定未经检验的 这4只山羊带有布鲁氏菌。此外，导致此次感染的 原因还有:未能切实按照实验规范，严格要求学生 遵守操作章程，进行有效防护。
7
一.实验室生物安全
27
一、目的
1.掌握细菌涂片的制备及革兰染色的方法。 2.熟悉革兰染色的原理和临床意义。
28
二、原理
初染
媒染
结
卢
晶
戈
紫
氏
碘
液
一
一
95%
脱色 乙 醇 半
复染
G+
石 碳
酸
复
红
半
G-
凡能保留第一种染料结晶紫的蓝紫色的细菌叫
G+菌，凡能被酒精脱色之后染上复染液石碳酸复
红的红色的细菌叫G-菌。
29
通透性学说