瓜蒌薤白白酒汤螺甾皂苷类活性成分研究

瓜蒌薤白白酒汤螺甾皂苷类活性成分研究

何祥久,王乃利,邱　峰,姚新生

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(沈阳药科大学天然药物化学教研室,辽宁沈阳110016)

摘要:目的　研究瓜蒌薤白白酒汤作用的物质基础。方法　在药理活性指导下利用各种化学和色谱手段对复方进行追踪分离并鉴定其化学结构。结果　从活性部位中分离得到7个活性螺甾类化合物。结论　7个化合物均有抑制血小板聚集活性,其中化合物5和6的抑制活性最强。

关键词:瓜蒌薤白白酒汤;活性成分;螺甾类化合物;抗血小板聚集活性

中图分类号:R284.1;R284.2 文献标识码:A 文章编号:0513-4870(2003)06-0433-05

Study on the active spirostanol saponins of Gualou xiebai baijiutang

HE X iang 2jiu ,WANG Nai 2li ,QI U Feng ,Y AO X in 2sheng

3

(School o f Traditional Chinese Materia Medica ,Shenyang Pharmaceutical Univer sity ,Shenyang 110016,China )

Abstract :Aim T o study the basis of actions of Gualou xiebai baijiutang .Methods G uided by

bioactivities ,chemical and chromatographic ways were applied to is olate and purify the prescription.The chemical structures were identified by chemical and spectral ways.The activities on cardiovascular system of the pure com pounds were measured.R esults Seven steroidal com pounds were is olated and identified from the active parts.Conclusion C om pounds 5and 6showed g ood anti 2platelet aggregation activities induced by ADP

and PAF.The IC 50of com pound 5and 6induced by 2μm ol ・L -1ADP were 01082and 01078mm ol ・L -1

,and the IC 50induced by 015μ

m ol ・L -1

PAF were 01182and 01151mm ol ・L

-1

,respectively.

K ey w ords :Gualou xiebai baijiutang ;active constituents ;spirostanol saponins ;anti 2platelet aggregation activities

收稿日期:2002209202.

基金项目:国家医药监督管理局新药基金(932442N 222)

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通讯作者　T el :86-24-23843711-3389,

E 2mail :hexiangjiu @.

《瓜蒌薤白白酒汤》是汉代名医张仲景的著名方剂,出自《金匮要略》,由瓜蒌、薤白和白酒等3味中药组成,有通阳散结、行气驱痰之功效。现代临床上主要用于治疗冠心病、心绞痛等,疗效显著

[1]

。迄今

对瓜蒌薤白白酒汤的研究主要局限于临床和药理活性方面,对其基础研究特别是此复方发挥作用的物质基础尚未见报道。本文根据作者研究中药复方的思路

[2,3]

,对瓜蒌薤白白酒汤进行系统研究,以期阐

明其发挥作用的物质基础及组方依据。

以生物活性为导向,对此复方进行了系统分离。

从其活性部位分离鉴定了7个螺甾类化合物,通过

化学及波谱学手段,化合物1～7分别被鉴定为:替

告皂苷元32O 2β2D 2吡喃葡糖基(1→2)[β2D 2吡喃葡糖基(1→3)]2β2D 2吡喃葡糖基(1→4)2β2D 2吡喃半乳

糖苷(1),sam ogenin 32O 2

β2D 2吡喃葡糖基(1→2)2β2D 2吡喃半乳糖苷(2),(25S )sam ogenin 32O 2β2D 2吡喃

葡糖基(1→2)2β2D 2吡喃半乳糖苷(3),拉索皂苷元(4),拉索皂苷元32O 2α2吡喃阿拉伯糖基(1→6)2β2

D 2吡喃葡糖苷(5),拉索皂苷元32O 2β2吡喃木糖基(1

→4)[α2吡喃阿拉伯糖基(1→6)]2β2D 2吡喃葡糖苷

(6),异筚契皂苷元(7)。

化合物1　白色无定型粉末,m p 275～276℃,Liebermann 2Burchard 反应阳性,A 试剂反应显黄色,

对E 试剂不显色,M olish 反应为阳性,酸水解检出葡萄糖和半乳糖,提示该化合物为螺甾皂苷类化合物。

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334・药学学报Acta Pharmaceutica S inica 2003,38(6):433-437

T able1　Assignment of carbon signals of the aglycone of compounds1-7

N o.1234567

13710401540153617361536163013

22916671267123017301329132718

37715811781177016761677106710

43416311931193011261826183316

54414361536155618561356133615

6281626132612101421012209182616

73212261826184618461546162616

83510351635163714371337133513

95412411441145410531453154013

103516371137114019401941103515

112110211321132114211321142019

123916401340133916391439153919

133919401840184019401740184017

145612561456145615561256135615

153118321132113114311531173118

168110811281128014801780188019

176217631263126211621562166213

181614161516151614161216131614

191211231923191312121912192319

204118421042104116411841184116

211418151015101414141814181415

2210912109171091210913109121091210915

233115311931193114311631163114

242910291329102818291029112818

253013301630143013301330142919

266617661965116611661766186618

271711171316131711171117121711

在IR谱中,有螺缩酮结构的特征吸收,且920cm-1 <897cm-1(B

1211(192CH3)及δ4414(-CH

/

\

)的碳信号,提示该

化合物苷元5位氢为α2构型[4]。糖端基碳区共有4个糖端基碳,说明该皂苷为四糖苷。在1H NMR中,4个糖端基质子分别为δ:5150(H,d,J=810H z), 5122(H,d,J=810H z),5104(H,d,J=718H z)及4182(H,d,J=718H z),表明4个糖均为β2构型。经与文献对照,该化合物皂苷元部分的碳信号与替告皂苷元(tig ogenin)[5]基本一致,只在3位向低场发生较大的位移,而2位及4位向高场位移,说明糖链连接在苷元的3位。经与文献[6]对照,化合物1鉴定为:替告皂苷元32O2β2D2吡喃葡糖基(1→2)[β2D2吡喃葡糖基(1→3)]2β2D2吡喃葡糖基(1→4)2β2D2吡喃半乳糖苷。

化合物2　白色无定型粉末,m p270～272℃, Liebermann2Burchard反应阳性,A试剂反应显黄色,对E试剂不显色,M olish反应为阳性,酸水解检出葡萄糖和半乳糖,提示该化合物为螺甾皂苷类化合物。FAB2MS(pos.)显示该化合物的分子量为756,结合

氢谱和碳谱,推测该化合物的分子式为C

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H64O14。在IR(K Br)中,3422cm-1为多羟基的吸收峰,在1000～800cm-1之间,且917cm-1(B带)<896 cm-1(C带),说明该化合物25位碳是R构型。在1H NMR中有两个糖端基信号,δ4198(1H,d,J=717 H z)和5128(1H,d,J=810H z),提示化合物2为双糖螺甾皂苷。13C NMR中,δ10917(=C

/

\

)是螺甾皂苷骨架上22位碳的特征信号,δ8117是sam ogenin C23的特征吸收。该化合物苷元部分的碳谱数据与化合

物sam ogenin基本一致,只是在C

3位向低场发生了较大的位移(δ+1310),这是因为3位成苷后发生了苷化位移。13C NMR中,糖端基区有两个糖端基信号,分别为δ10613和δ10314。在FAB2MS(pos.)中, 756M+,774[M+H2O]+,757[M+H]+,595[M+H-

G lc]+,433[Aglycone+H]+。这些质谱碎片进一步确证了该化合物的糖链连接以及苷元结构。经与文献[7]对照,该化合物鉴定为:sam ogenin232O2β2D2吡喃葡糖基(1→2)2β2D2吡喃半乳糖苷。

化合物3　白色无定型粉末,Liebermann2 Burchard反应阳性,A试剂反应显黄色,对E试剂不

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