不同柱温模式毛细管柱气相色谱法测试VFA结果的比较
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４ ０ｍＬ・ ｎ ，尾 吹 流 量 ４ ５ ｍｉ一 ５ｍＬ・ ｉ～ ａ ｒ ｎ ；进 样 口参
纯 氮 ９ ． ９ 、低温 高速 离心 机 、０ ２ｍ ９ ９ ％） ９ ． ｍ水 系滤 ２
膜 、１ Ｌ 量进 样器 。 ０ｍ 微
１３ 试 验 方 法 ． ，
１ ． 标 准品 制备 ．１ ３
各段 肠道 的数 量。ＨＰ ５ ９ 组猪的空肠处发生 变化 ，末端回肠或 Ｈ 猪 的盲肠也 产生 了变化 。菊粉 对肠道 管腔 内的茵群 产生了影 Ｐ
响 ， 同 时 ，３ 类型 的 菊粉 抑 制 梭 状 芽孢 杆 菌 的 效 果不 理 想 ，并且 抑 制 了肠 道 各段 黏 膜 和 管 腔 内肠 杆 菌科 的数 量 。研 究 结果 表 种
但 程 序 升 温模 式 测 定 单 个 样 品 的 时 间 ８ ９ｒｎ － ｉ，而 ａ
恒 温 模 式 测 定 单 个 样 品 只 需 要 ６ ６５ｒｉ ，更 加 简 － ．ａ ｎ 便 快捷 。
【 参 考 文 献 】
外 标法 定 量分 析 的优点 是操 作 简单 。不像 内标 法那 样每 测一 个样 品都 需要 加入 内标 物 ，只需将标 准 品配 制成 不 同浓度 梯 度 ，上 机分 析 得 出峰 面积 ，
析 ，结 果见 图 １ ２ －。
不 同柱 温 模式 毛 细 管 柱 测试 ＶＦ Ａ效 果 比较
色 谱
＾
一
．
ｒ 丫一
／ Ｊ ＼ Ｌ ｎ
图 １ 程 序升 温 色 谱 图
八，
４４ 饲料博览 ２ １ 年第 ３ ０１ 期
∞ 们 如 如
加 ∞ ∞
明，饲粮 中添加 菊粉能够改变肠道菌群数 ，这可能是铁 的生物利用率提 高，促进健康的原 因。
关 键 词 ： 菌粉 ；仔 猪 ；肠 道 菌群
摘 译 自 Ｊｕｎｌ ｆ ｕ ｉｏ ，０ ０ １０ １ ）２１８ ２１ １ ｏ ｒａ ｏ Ｎ ｔｔ ｎ ２ １， ４ （ ２ ： ５ — ６ ． ｒｉ
细 管 柱 （０ｍ￣ ． ｍ￣ ． ｍ ｌ ，氢 火焰 离 子 化检 ３ ０３ ｍ ０５ ｉ） ２ １ 测 器 （Ｉ ） Ｆ Ｄ ，并 配 有 空 气压 缩 机 、氢 气 和 氮 气 （ 高
柱 温 箱采 用程 序升 温 ：初始 温度 为 １０℃ ，以 １ １ ０℃ ・ ｎ ｍｉ 的速 度 升 至 １０ 持 续 ５ｒｉ。检 测 器 ５ ｎ ａ 参 数为 温度 ２ ０ｃ ３ ｃ，Ｈ 流量 ４ Ｌ ｒｉ～ ０ｍ ・ ｎ ，空气流 量 ａ
色谱
ｆ ’ ／
１０ ｜ ３０ ． ３５ ．
。
４０
ｆ ／ Ｉ ７ ． Ｉ Ａ
ｊ ｜ ｌ
图 ２ 恒 温 模 式 色 谱
由 图 １ 图 ２ 见 ，程 序 升 温模 式 测 试 一 个样 和 可 品需 要 ８ ９ｍｉ；而 恒 温模 式 下 乙酸 、丙 酸 和 丁酸 － ｎ
液 ，用 于制 作标 准曲线 。
１３２ 样 品 处 理 ．．
用两种 色谱 条件 进行分 析 ，记 录峰 面积 ，以峰面积 （ 和标 品的浓度 （ 制作 标准 曲线 ，见 附表 。 Ｙ） ｘ）
２ ． 定性分析 ２
羊瘤 胃液 经 纱布 过 滤 ，取 ５ｍＬ 液 ３５ ０ｒｍ 滤 ０ ｐ
性 脂肪 酸 （ Ｆ ｌ． 尔滨 建 筑 大学 学 报 ， ０ ０ ３ （ ）３ 一３ ． Ｖ Ａ）Ｊ 哈 】 ２ ０ ， ３６ ： ３ ｌ
本 试 验 所 得 两 种 温 度 模 式 测 试 Ｖ Ａ得 出 的 乙 Ｆ
酸 、丙 酸和 正 丁 酸 的相 对 偏 差 都 为 ０５％～ ． ％。 ． ８ ２４ ９ 李 浩 春等认 为 ，一般 不 同浓度 样 品色 谱定 量允 许标
离 心 １ ｎ ５ｍｉ，再 取 上 清 液 １ ｍＬ于 １ ． ｍＬ的离 心 管 ５
中 ，加入 ２ ％偏磷 酸溶 液 ０２ｍＬ ５ ． ，用 涡旋振 荡器 混 合 均匀 ，１ ０ ｍ离心 １ ｉ，上清液用 ０２ ｍ ００ ０ｒ ｐ ５ｍ ｎ ．２ｍ
附表
将 标 准品分 别按 照恒温 和程序 升温模 式进 样分
数 ：温 度 ２ ０℃，载 气高 纯氮 气 ，分流 比４ ： ，进 ０ ０１ 样 量பைடு நூலகம்１ 。柱温 箱采 用恒 温模 式 ：柱 温 １ ０ｑ ｍＬ ５ Ｃ，检 测 器参数 为温 度 ２ ０℃，Ｈ： ４ 流量 ４ ・ ｉ ０ｍＬ ｍ ｎ ；空气
流量 ４ ０ｍ ・ ｉ～ ０ Ｌ ｒ ｎ ，尾 吹流量 ３ ・ ｉ～ ａ ０ｍＬ ｍ ｎ 。进 样 口
２ １ 年第３ 饲料博览 ４５ ０１ 期
用 峰 面积 和浓度 做标 准 曲线 ，待 测样 品 的浓度 根据
所 测峰 面积 和标 准 曲线就 可计 算 出来 ，但 外标 法必 须 保证进 样 量 和色谱 条件 严格 固定 不 变 ，否则 容易
引起 误差 。
２４ 精 密度 ．
［ ］ 曹庆云， １ 周武艺， 贵钊， 气相色谱测定 羊瘤 胃液 中挥发性 朱 等． 脂肪 酸方法研 究Ⅲ． 中国饲料， ０ ６ ２ ）２ — ８ ２ ０ （４ ：６ ２ ． ［ ２】 丁学 智， 龙瑞军， 淡瑞芳， 瘤 胃发酵液挥发性 脂肪酸的气相 等． 色谱分析方法 ｌ１ Ｊ． 甘肃农业大学学报， ０ ６ ２ ： ４ ２ ． ２ ０ （ ）２ — ６ ［ ３】 刘艳玲， 任南琪， 刘敏， 气相色谱法分析厌氧反应器中的挥发 等．
间点 峰 面积为 所测 指标 外 ，其他 时问点 峰 面积均 为
试样 杂峰 。
２ ． 定 量 分 析 ３
色 谱 柱 的恒 温 和 程 序 升 温 模 式 在 测 试 瘤 胃液 ＶＦ Ａ结 果 时 均 能 很 好 的 分 离 出 瘤 胃液 中 的 乙 酸 、
丙 酸 和 丁酸 ，且 测 试 相 对 偏 差 均 为 ０５ ％～ ． ％， ． ８ ２４ ９
摘 要 ：此 前 我 们 发 现 ， 日粮 中 添 加 短 链 菊粉 （ ９ ） 长 链 菊 粉 （ ） ５ ：Ｏ的 混 合 菊粉 （ 同 １ 改 善 了机 体 内铁 的 状 Ｐ５ 、 ＨＰ 、 ０ ５ 协 ） 态 ，并且 改 变 了仔猪 体 内铁 稳 态 的表 达 和 体 内的 炎症 。然 而 ，３ 类 型 的 菊粉 对 肠道 菌群 的影 响还 未 可知 。 应 用 末 端 限制 性 片 种 段 长度 进 行 多 态 分 析 ，对 缺 铁 基 础 日粮 组 （ Ｄ） Ｂ 、添 加 ４ ％的 短 链 菊粉 组 （ ９ ） ５ ：０ 混 合 菊 粉 组 （ 同 １ 、 长 链 菊 粉 组 Ｐ５ 、 ０５ 的 协 ） （ ） ＨＰ ，猪 的 ６ 小肠 和 大肠 进 行 测 定 ，与 Ｂ 段 Ｄ组 相 比 ，３ 类 型 的 菊粉 增加 了双 歧 杆 菌和 乳 酸 菌的 有 益 微 生 物 菌 群 附 着在 猪 的 种
准 偏 差 是 不 同 的 ， 当试 样 浓 度 为 ００ ％～ ．％时 ， ． ５ ０５
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［ ４］ 李浩春 ， 卢佩 章． 气相 色谱法【 ． Ｍ】北京 ： 学出版社，９ ８ 科 １９ ．
准确 量 取 乙酸 ３ ０Ｉ 、丙 酸 ４ ０ Ｌ和正 丁酸 ３ Ｌ ｘ ０
１０ Ｉ ６ Ｌ置 于 １０ｍＬ容 量 瓶 中 ，蒸 馏 水 定 容 至 刻 ｘ ０
度 ，即乙酸 浓度 为 ５ ．５ｍ Ｌ Ｌ （ ． ． 、丙 ７６ ｍｏ ・ ３ ６ｇ Ｌ ） ４ 酸浓 度 为 ５ ．３ｍ Ｌ Ｌ （ ． ・ 和 正丁 酸浓 度 ３ ｍｏ ・ ３９ ｇ Ｌ ） ６ ７
０８ ．、０ ． 、０６ ． ０２ｍ ４和 ． Ｌ以 及 蒸 馏 水 ０ ．、０４ 、０２ ．、
０ ． ０ Ｌ，即配 制 成 ５ 不 同梯 度 的 Ｖ Ａ 准 ６和 ． ｍ ８ 个 Ｆ标
将 ５ ＶＦ 个 Ａ梯 度标 准 品 按 照样 品的方 法 处 理 ， 用 微量 进 样 器 取上 清 液 １ 注 入进 样 口，分别 采 ｍＬ
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饲 粮 中 添加 菊粉 对 仔 猪 肠 道 菌群 的 改 变
Ｊｎ ｉｅ ， ｏ ， ｏｓ Ｄ ｎ ｉ ＤＭ， ｉ ＧＬ ａ ｎｎ Ｐ Ｋ ｊＹ Ｒ ｓ Ｍ Ｗ， ｅ ｎｓ Ｘ ｎ Ｋ ｉ
司 ，偏 磷酸 为分析 纯 。
１２ 试 验 仪 器 ．
．
水 系滤 膜 过 滤 ，滤 液用 微 量 进样 器 取 １ｘ Ｌ上机 分 Ｉ
析 ，得 到 Ｖ Ａ样 品 色谱 图 ，采 用 外标 法 计 算 样 品 Ｆ
中 Ｖ Ａ的含 量 。 Ｆ
１ ． 色谱 参数 ．３ ３
日本 岛 津 Ｇ 一０ ０ 相 色 谱 仪 ，Ａ ．Ｆ Ｐ毛 Ｃ ２ １气 ＴＦ Ａ
允许的标准偏差＜Ｏ ５ ％即 可 １ 因此 ，两 种 条 件 的 。 测定 结果 都是 准 确 的。
３ 结 论
色谱 峰 的保 留时 间为 ３４４ ． ７ ５９ ２ｍｎ ．１ 、４４ 和 ． ｉ，恒 ３ ７ 温模 式 测试单 个 样 品仅 需 ６ ６ ｉ。除上 述 ３ 时 － ．ｒ ｎ ‘ ５ａ 个
参 数 为温 度 ２０ ，载气 高 纯 氮气 ，分 流 比４ ： ， ３ ０ Ｉ
进样 量 １ 。 ｍＬ
２ 结果 与讨论 ２１ 标 准 曲线 的制备 ．
为 ｌ．５ｍ ｏ ・ １ ３ｇ Ｌ ） ７ ｍ Ｌ Ｌ （． ・ 的混合 标 准溶 液 。在 ４ ５ ５ １ 离 心 管 中分 别 加 入 混 合 标 准 溶 液 １ 、 个 ． ｍＬ ５ ． ０
纯 氮 ９ ． ９ 、低温 高速 离心 机 、０ ２ｍ ９ ９ ％） ９ ． ｍ水 系滤 ２
膜 、１ Ｌ 量进 样器 。 ０ｍ 微
１３ 试 验 方 法 ． ，
１ ． 标 准品 制备 ．１ ３
各段 肠道 的数 量。ＨＰ ５ ９ 组猪的空肠处发生 变化 ，末端回肠或 Ｈ 猪 的盲肠也 产生 了变化 。菊粉 对肠道 管腔 内的茵群 产生了影 Ｐ
响 ， 同 时 ，３ 类型 的 菊粉 抑 制 梭 状 芽孢 杆 菌 的 效 果不 理 想 ，并且 抑 制 了肠 道 各段 黏 膜 和 管 腔 内肠 杆 菌科 的数 量 。研 究 结果 表 种
但 程 序 升 温模 式 测 定 单 个 样 品 的 时 间 ８ ９ｒｎ － ｉ，而 ａ
恒 温 模 式 测 定 单 个 样 品 只 需 要 ６ ６５ｒｉ ，更 加 简 － ．ａ ｎ 便 快捷 。
【 参 考 文 献 】
外 标法 定 量分 析 的优点 是操 作 简单 。不像 内标 法那 样每 测一 个样 品都 需要 加入 内标 物 ，只需将标 准 品配 制成 不 同浓度 梯 度 ，上 机分 析 得 出峰 面积 ，
析 ，结 果见 图 １ ２ －。
不 同柱 温 模式 毛 细 管 柱 测试 ＶＦ Ａ效 果 比较
色 谱
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图 １ 程 序升 温 色 谱 图
八，
４４ 饲料博览 ２ １ 年第 ３ ０１ 期
∞ 们 如 如
加 ∞ ∞
明，饲粮 中添加 菊粉能够改变肠道菌群数 ，这可能是铁 的生物利用率提 高，促进健康的原 因。
关 键 词 ： 菌粉 ；仔 猪 ；肠 道 菌群
摘 译 自 Ｊｕｎｌ ｆ ｕ ｉｏ ，０ ０ １０ １ ）２１８ ２１ １ ｏ ｒａ ｏ Ｎ ｔｔ ｎ ２ １， ４ （ ２ ： ５ — ６ ． ｒｉ
细 管 柱 （０ｍ￣ ． ｍ￣ ． ｍ ｌ ，氢 火焰 离 子 化检 ３ ０３ ｍ ０５ ｉ） ２ １ 测 器 （Ｉ ） Ｆ Ｄ ，并 配 有 空 气压 缩 机 、氢 气 和 氮 气 （ 高
柱 温 箱采 用程 序升 温 ：初始 温度 为 １０℃ ，以 １ １ ０℃ ・ ｎ ｍｉ 的速 度 升 至 １０ 持 续 ５ｒｉ。检 测 器 ５ ｎ ａ 参 数为 温度 ２ ０ｃ ３ ｃ，Ｈ 流量 ４ Ｌ ｒｉ～ ０ｍ ・ ｎ ，空气流 量 ａ
色谱
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１０ ｜ ３０ ． ３５ ．
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４０
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图 ２ 恒 温 模 式 色 谱
由 图 １ 图 ２ 见 ，程 序 升 温模 式 测 试 一 个样 和 可 品需 要 ８ ９ｍｉ；而 恒 温模 式 下 乙酸 、丙 酸 和 丁酸 － ｎ
液 ，用 于制 作标 准曲线 。
１３２ 样 品 处 理 ．．
用两种 色谱 条件 进行分 析 ，记 录峰 面积 ，以峰面积 （ 和标 品的浓度 （ 制作 标准 曲线 ，见 附表 。 Ｙ） ｘ）
２ ． 定性分析 ２
羊瘤 胃液 经 纱布 过 滤 ，取 ５ｍＬ 液 ３５ ０ｒｍ 滤 ０ ｐ
性 脂肪 酸 （ Ｆ ｌ． 尔滨 建 筑 大学 学 报 ， ０ ０ ３ （ ）３ 一３ ． Ｖ Ａ）Ｊ 哈 】 ２ ０ ， ３６ ： ３ ｌ
本 试 验 所 得 两 种 温 度 模 式 测 试 Ｖ Ａ得 出 的 乙 Ｆ
酸 、丙 酸和 正 丁 酸 的相 对 偏 差 都 为 ０５％～ ． ％。 ． ８ ２４ ９ 李 浩 春等认 为 ，一般 不 同浓度 样 品色 谱定 量允 许标
离 心 １ ｎ ５ｍｉ，再 取 上 清 液 １ ｍＬ于 １ ． ｍＬ的离 心 管 ５
中 ，加入 ２ ％偏磷 酸溶 液 ０２ｍＬ ５ ． ，用 涡旋振 荡器 混 合 均匀 ，１ ０ ｍ离心 １ ｉ，上清液用 ０２ ｍ ００ ０ｒ ｐ ５ｍ ｎ ．２ｍ
附表
将 标 准品分 别按 照恒温 和程序 升温模 式进 样分
数 ：温 度 ２ ０℃，载 气高 纯氮 气 ，分流 比４ ： ，进 ０ ０１ 样 量பைடு நூலகம்１ 。柱温 箱采 用恒 温模 式 ：柱 温 １ ０ｑ ｍＬ ５ Ｃ，检 测 器参数 为温 度 ２ ０℃，Ｈ： ４ 流量 ４ ・ ｉ ０ｍＬ ｍ ｎ ；空气
流量 ４ ０ｍ ・ ｉ～ ０ Ｌ ｒ ｎ ，尾 吹流量 ３ ・ ｉ～ ａ ０ｍＬ ｍ ｎ 。进 样 口
２ １ 年第３ 饲料博览 ４５ ０１ 期
用 峰 面积 和浓度 做标 准 曲线 ，待 测样 品 的浓度 根据
所 测峰 面积 和标 准 曲线就 可计 算 出来 ，但 外标 法必 须 保证进 样 量 和色谱 条件 严格 固定 不 变 ，否则 容易
引起 误差 。
２４ 精 密度 ．
［ ］ 曹庆云， １ 周武艺， 贵钊， 气相色谱测定 羊瘤 胃液 中挥发性 朱 等． 脂肪 酸方法研 究Ⅲ． 中国饲料， ０ ６ ２ ）２ — ８ ２ ０ （４ ：６ ２ ． ［ ２】 丁学 智， 龙瑞军， 淡瑞芳， 瘤 胃发酵液挥发性 脂肪酸的气相 等． 色谱分析方法 ｌ１ Ｊ． 甘肃农业大学学报， ０ ６ ２ ： ４ ２ ． ２ ０ （ ）２ — ６ ［ ３】 刘艳玲， 任南琪， 刘敏， 气相色谱法分析厌氧反应器中的挥发 等．
间点 峰 面积为 所测 指标 外 ，其他 时问点 峰 面积均 为
试样 杂峰 。
２ ． 定 量 分 析 ３
色 谱 柱 的恒 温 和 程 序 升 温 模 式 在 测 试 瘤 胃液 ＶＦ Ａ结 果 时 均 能 很 好 的 分 离 出 瘤 胃液 中 的 乙 酸 、
丙 酸 和 丁酸 ，且 测 试 相 对 偏 差 均 为 ０５ ％～ ． ％， ． ８ ２４ ９
摘 要 ：此 前 我 们 发 现 ， 日粮 中 添 加 短 链 菊粉 （ ９ ） 长 链 菊 粉 （ ） ５ ：Ｏ的 混 合 菊粉 （ 同 １ 改 善 了机 体 内铁 的 状 Ｐ５ 、 ＨＰ 、 ０ ５ 协 ） 态 ，并且 改 变 了仔猪 体 内铁 稳 态 的表 达 和 体 内的 炎症 。然 而 ，３ 类 型 的 菊粉 对 肠道 菌群 的影 响还 未 可知 。 应 用 末 端 限制 性 片 种 段 长度 进 行 多 态 分 析 ，对 缺 铁 基 础 日粮 组 （ Ｄ） Ｂ 、添 加 ４ ％的 短 链 菊粉 组 （ ９ ） ５ ：０ 混 合 菊 粉 组 （ 同 １ 、 长 链 菊 粉 组 Ｐ５ 、 ０５ 的 协 ） （ ） ＨＰ ，猪 的 ６ 小肠 和 大肠 进 行 测 定 ，与 Ｂ 段 Ｄ组 相 比 ，３ 类 型 的 菊粉 增加 了双 歧 杆 菌和 乳 酸 菌的 有 益 微 生 物 菌 群 附 着在 猪 的 种
准 偏 差 是 不 同 的 ， 当试 样 浓 度 为 ００ ％～ ．％时 ， ． ５ ０５
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［ ４］ 李浩春 ， 卢佩 章． 气相 色谱法【 ． Ｍ】北京 ： 学出版社，９ ８ 科 １９ ．
准确 量 取 乙酸 ３ ０Ｉ 、丙 酸 ４ ０ Ｌ和正 丁酸 ３ Ｌ ｘ ０
１０ Ｉ ６ Ｌ置 于 １０ｍＬ容 量 瓶 中 ，蒸 馏 水 定 容 至 刻 ｘ ０
度 ，即乙酸 浓度 为 ５ ．５ｍ Ｌ Ｌ （ ． ． 、丙 ７６ ｍｏ ・ ３ ６ｇ Ｌ ） ４ 酸浓 度 为 ５ ．３ｍ Ｌ Ｌ （ ． ・ 和 正丁 酸浓 度 ３ ｍｏ ・ ３９ ｇ Ｌ ） ６ ７
０８ ．、０ ． 、０６ ． ０２ｍ ４和 ． Ｌ以 及 蒸 馏 水 ０ ．、０４ 、０２ ．、
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饲 粮 中 添加 菊粉 对 仔 猪 肠 道 菌群 的 改 变
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１２ 试 验 仪 器 ．
．
水 系滤 膜 过 滤 ，滤 液用 微 量 进样 器 取 １ｘ Ｌ上机 分 Ｉ
析 ，得 到 Ｖ Ａ样 品 色谱 图 ，采 用 外标 法 计 算 样 品 Ｆ
中 Ｖ Ａ的含 量 。 Ｆ
１ ． 色谱 参数 ．３ ３
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３ 结 论
色谱 峰 的保 留时 间为 ３４４ ． ７ ５９ ２ｍｎ ．１ 、４４ 和 ． ｉ，恒 ３ ７ 温模 式 测试单 个 样 品仅 需 ６ ６ ｉ。除上 述 ３ 时 － ．ｒ ｎ ‘ ５ａ 个
参 数 为温 度 ２０ ，载气 高 纯 氮气 ，分 流 比４ ： ， ３ ０ Ｉ
进样 量 １ 。 ｍＬ
２ 结果 与讨论 ２１ 标 准 曲线 的制备 ．
为 ｌ．５ｍ ｏ ・ １ ３ｇ Ｌ ） ７ ｍ Ｌ Ｌ （． ・ 的混合 标 准溶 液 。在 ４ ５ ５ １ 离 心 管 中分 别 加 入 混 合 标 准 溶 液 １ 、 个 ． ｍＬ ５ ． ０