EZH2、P53与喉癌

EZH2、P53与喉癌

p53基因与EZH2基因参与了喉癌的发生、发展及恶化转移过程，可作为一种分子标志物，用于喉癌的诊断、治疗效果的评价、预后判断以及作为潜在的治疗靶标。本文就p53基因与EZH2基因的结构、功能、与喉癌的关系及临床意义做一综述。

标签：喉肿瘤（Laryngeal neoplasms）；癌（Carcinoma）；果蝇zeste基因增强子的人类同源物2（EZH2）；P53基因；基因（Gene）

喉癌是耳鼻喉科最常见、危害较大的恶性肿瘤之一，晚期喉癌预后不良，五年生存率在60%以下。因此，早期检测、诊断和治疗，是控制肿瘤、延长患者的生存期和提高生活质量的重要途径之一。近年来，随着医学技术的进步，肿瘤标志物的检测进展迅猛，为早期发现、诊断和治疗肿瘤带来了曙光。研究认为，喉癌的发生、发展是多基因作用、多因素参与和多阶段发展的病理过程，涉及众多癌基因的激活与抑癌基因的异常，其中p53基因与EZH2基因在这一过程中的作用已经引起了人们的关注。

p53基因和蛋白结构及一般生物学特性

人类p53基因定位于17p13.1，长度约20kb，由11个外显子和10个内含子组成。外显在2、4、5、7、8分别编码5个进化上高度保守的结构域，这5个高度保守区为13-19、117-142、171-192、236-258、270-286編码区。人类P53蛋白由393个氨基酸组成，分子量为53×103，P53蛋白分为N-末端的酸性转录活化区、信号区、中央核心DNA连接区、同源寡聚区、C-末端的非专一DNA结合区，这些结构在p53识别并转录活化靶基因的过程中发挥着重要作用[1]。

p53基因分为野生型（Wild-Typt p53，Wtp53）和突变型（Mutant- Typt p53，Mtp53）两种。野生型p53是抑癌基因，主要的生物学功能为引起细胞周期阻滞，诱导细胞凋亡和促进细胞分化。对细胞的分裂和增殖起负调控作用，抑制细胞的生长与分裂。而突变型p53由于缺乏对细胞增殖的负调控作用，当其表达增加时，促进细胞的增生和转化，诱导肿瘤的发生，使得p53由抑癌基因转化为致癌基因。

P53基因突变形式以点突变为主，突变型P53 是喉癌中基因改变频率最高的基因。P53 基因突变产生突变型p53 蛋白，其结构发生改变，稳定性增加，半衰期延长，易被检测[2]。这种异常p53蛋白比野生型的p53蛋白更稳定，且在肿瘤细胞中有高水平的表达，其功能由抑癌基因转化为促癌效应。

p53基因与喉癌

大量研究表明，P53基因是人类肿瘤中最为常见的损伤靶位[3]。在人乳腺癌、结肠癌、膀胱癌、肺癌、淋巴瘤、喉癌、口腔癌、口咽癌、下咽癌等肿瘤中常伴有P53基因的异常[4]。有作者在对较小样本含量的头颈鳞癌患者中发现P53的

异常表达高达77%[5]。P53基因是迄今发现的与喉癌的发生最为密切的基因，基因改变约60%左右[6]。1992 年Maestro[7]报告，60%喉癌病例因P53基因突变而产生异常p53 蛋白表达，使细胞失去负生长信号，导致细胞过度增生、癌变。他们还发现，在某些癌旁组织也有该蛋白的表达，这些癌旁组织的异常基因表达可能是邻近癌组织诱导的结果，这些组织可能是喉癌术后复发的根源。提示p53表达者可能预后差。因此手术切除范围应在保留喉功能的前提下，要有足够的安全边缘。Gasparini等[8]对头颈部肿瘤的研究表明，p53蛋白的表达与肿瘤临床分期及淋巴结转移相关，p53蛋白表达者多为临床晚期，恶性程度高。Buyukbayram 等[9]指出p53过度表达与肿瘤病理分级以及肿瘤位置有关。秦兆冰等[10]研究表明，p53 蛋白异常表达与喉癌发生有关，可以作为喉癌诊断和鉴别诊断的辅助依据，在评估肿瘤的恶性程度上及预后判定上有一定价值。于振坤等[11]报告，p53 蛋白表达与喉癌、下咽癌的临床分期有良好的对应关系，并与肿瘤的分化程度和淋巴结转移相关。喉乳头状瘤、喉部非典型增生病变以及原位癌也出现的p53过度表达，表明抑癌基因p53突变在喉组织癌变中的作用。

EZH2基因和蛋白结构及一般生物学作用

EZH2 基因是果蝇转录因子zeste 增强子E（z）的人类同源物[12]，该基因在人的多种细胞中表达，与果蝇E（z）基因存在高度保守性和同源性。EZH2定位于人染色体7q35 位置上，包含20 个外显子和19个内含子。EZH2 基因在进化过程中高度保守，在N 端有3个保守序列与果蝇（z）基因高度同源，分别为Ⅰ区、Ⅱ区和富含半胱氨酸区；在C 端有1 个进化高度保守的SET 结构域，EZH2 介导转录抑制要依赖完整的SET结构域，如果该区域丢失则不能产生抑制表型，并且在一些情况下使基因去抑制化。EZH2是PcG（polycomb group）基因家族的重要成员之一，是一个非常重要的核转录调控因子。PcG蛋白主要由两种不同的复合体组成，即PRC1和PRC2。其中PRC1参与基因抑制的维持；PRC2与基因抑制的启动有关，二者通过对组蛋白的修饰控制靶基因转录[13]。EZH2 蛋白是PRC2 的核心组成部分，起组蛋白甲基转移酶的作用，能使H3K27 侧链上的ε 氨基发生三甲基化。H3K27 三甲基化被认为是在PcG 沉默机制中起作用的主要存在形式。三甲基化后的H3K27 后能将PRC1 复合物招募到特定基因位点，从而沉默与细胞分化、抑制增殖在内的基因，导致肿瘤的发生。EZH2 除了起组蛋白甲基转移酶作用外，在X染色体的灭活、生殖发育、干细胞多功能性的维持以及肿瘤的转移中起重要作用。EZH2基因与恶性肿瘤

EZH2 基因作为染色质修饰蛋白，与多种类型肿瘤的发展预后密切相关。相对于正常组织，EZH2在癌组织中高表达，并且与疾病的进展阶段和疾病预后有关。EZH2 基因过度表达首先是在血液系统恶性肿瘤中发现，包括骨髓肿瘤、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤及外套细胞淋巴瘤，随后在肝癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、膀胱癌、胃癌中发现EZH2 基因高表达[14]。很多研究者都發现，相对正常组织来说，EZH2在癌组织中表达异常增高，且其表达越高，肿瘤恶性度越高，预后越差。在某些情况下，EZH2过表达与EZH2基因扩增相平行。强表达的EZH2 可以促进肿瘤细胞的增殖和侵袭，并且与肿瘤的恶性程度和预后密切相关；一项最早的基因分析研究报道，与临床局限性前列腺癌相比，在转移性前列腺癌中基因上调最显著的基因是EZH2[15]。Bachmann等[16]进行了一项包