乌头蜜制的工艺研究及主要生物碱的含量测定

2. 1. 2 药典法制乌头 :取净药材 100 g ,水浸泡至内 无干心 ,取出 ,加水煮沸 4～6 h ,至个大及实心者切 开内无白心 ,口尝微有麻舌感时取出 ,晾至六成干 , 切厚片 。 2. 1. 3 蜜煮制川乌 :取以上药典法制川乌 100 g ,加 炼蜜 200 g ,加 10 倍量的水浸泡 015 h ,煎煮 2 h ,过 滤 ;药渣加 8 倍量水 ,煎煮 1 h ,过滤 ;药渣再加 8 倍 量水 ,煎煮 1 h ,过滤 。弃药渣 ,合并滤液 ,浓缩至稠 膏干燥备用 。 2. 1. 4 蜜炙生川乌 Ⅰ:取净药材 100 g ,润透 ,切片 , 干燥 。加炼蜜 25 g 拌匀 ,闷润至蜜吸尽 。置炒制容 器内 ,用文火加热 ,炒至不粘手时 ,取出放凉 。 2. 1. 5 蜜炙生川乌 Ⅱ:取净药材 100 g ,润透 ,切片 。 加炼蜜 100 g 拌匀 ,闷润至蜜吸尽 。置炒制容器内 , 用文火加热 ,炒至不粘手时 ,取出放凉 。 2. 1. 6 蜜烘生川乌 :取净药材 100 g ,润透 ,切片 ,干 燥 。加炼蜜 25 g 拌匀 ,闷润至蜜吸尽 。置烘箱内用 90 ℃烘 2 h ,取出放凉 。 2. 1. 7 蜜煮生川乌 :取净药材 100 g ,加炼蜜 25 g , 置煮制容器内 ,加水煮至透心 ,内无白心 ,把蜜液吸 尽 ,取出 ,晾至六成干 ,切片 。 2. 1. 8 蜜酒蒸川乌片 :取净药材 100 g ,润透 ,切片 , 干燥 。加炼蜜 25 g ,50 %乙醇 25 mL ,闷润至蜜吸尽 。 置高压罐内以 110 ℃蒸 40 min ,取出 。 2. 1. 9 蜜蒸川乌片 :取净药材 100 g ,润透 ,切片 ,干 燥 。加炼蜜 25 g ,闷润至蜜吸尽 。置高压罐内以 110 ℃蒸 40 min ,取出 。
乌头的蜜制方法最早见于汉代 ,张仲景在《金匮 要略》中指出乌头“蜜煎以缓其毒性”。此后 ,历代医 学家多按照张仲景的方法来蜜制乌头 。唐 、宋 、明 、 清的许多医书和本草书籍上都曾有过乌头“蜜制”的 记载 。但在现行国家药典和各地中药炮制规范中均 未收载蜜制乌头 ,仅在中医临床治疗癌症疼痛上有 所运用 。研究结果表明 ,制乌头对由环磷酰胺引起 的遗传损伤有明显的抑制作用 ,川乌经蜜炙后其抗 突变性有一定增强[1] 。为挖掘传统炮制规格 ,探讨 蜜制乌头的科学性 、用于抗癌止痛的可行性 ,我们选 择川乌对其进行了系统研究 。本文采用中和法和薄 层扫描法 ,以药典法制乌头作为对照 ,以传统质量要 求和 总 生 物 碱 、乌 头 碱 Aconitine 、美 沙 乌 头 碱 Mesaconitine、海 帕 乌 头 碱 Hypaconitine 的 含 量 为 指 标 ,筛选川乌的蜜制方法 。 1 仪器 、药品和试剂
双波长薄层扫描仪 ,CS - 9000 型 ,日本岛津 ;高 效 GF254 薄层板 , 青岛海洋化工厂 ; 超声波清洗器 , TCQ - 250 型 ,北京医疗设备二厂 ;高压消毒罐 ,上海 医用核子仪器厂 ; 微量进样器 ,上海医用激光仪器 厂 。乌头购自北京市药材公司 ,经本院阎玉凝教授 鉴定为乌头 Aconitum Carmichaeli Debx. 的干燥母根 。 蜂蜜购自北京蜂产品公司 (批号 :990518) 。依法炼 至 116～118 ℃,达到传统规定的中蜜标准 ,用药典 水分测定项中的烘干法 ,测其含水量为 13 %。环己 烷 、乙酸乙酯 、二乙胺 、乙醇 (均为分析纯) 。 2 方法和结果 2. 1 乌头炮制品的制备 2. 1. 1 生乌头 :取原药材 ,除去杂质 ,洗净 ,晾干 。
2003 年 11 月第 26 卷第 6 期 北京中医药大学学报
November 2003 , Vol. 26 , No. 6
Journal of Beijing University of TCM
·中药炮制·
乌头蜜制的工艺研究及主要生物碱的含量测定 Ξ
·57 ·
李 飞 刘 曦 杨 蕾
Ξ
(北京中医药大学中药学院 北京 100102)
摘要 :目的 筛选乌头蜜制工艺 。方法 以不同方法加工的蜜制乌头为对象 , 采用药典法测定总生 物碱含量 ,采用薄层扫描法测定乌头碱 、美沙乌头碱 、海帕乌头碱的含量 。结果 不同的蜜制方法 对乌头中主要生物碱含量变化均有影响 。结论 蜜煮生乌头是最佳的炮制方法 。 关键词 : 乌头 ;蜜制法 ; 生物碱 中图分类号 :R283. 3
以上样品除蜜煮制川乌外 ,为保证一致 ,均在 60 ℃干燥 、称重 、计算收得率 ,粉碎 , 过 60 目筛备
Ξ 李 飞 ,女 ,39 岁 ,副教授 ,医学硕士生导师 Ξ 2000 年教育部青年骨干教师资助项目
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表 1 各种炮制方法工艺对比
样 品 生川乌
浸泡/ 闷润 100 g 药材 加热时间
时间/ h 加蜜量/ g
/ min
总工时 /h
加热温度 吸蜜效果 、润
/℃
蜜均匀程度
药典法制川乌
25/ 0
蜜煮制川乌
25/ 4
25
蜜炙生川乌 Ⅰ
0. 5/ 30
25
蜜炙生川乌 Ⅱ
1/ 40
100
蜜烘生川乌
0. 5/ 30
美沙乌头碱
0. 02424 0. 01824 0. 01739 0. 01473 0. 01444 0. 00047 0. 01704 0. 00803 0. 00750
海帕乌头碱
0. 02833 —
0. 02030 0. 01048 0. 00548
— — 0. 01372 0. 00964
3 种双酯型 生物碱总和
注 :“ △”号表示较药典法制川乌含量降低
2. 3. 2 乌头碱 、美沙乌头碱 、海帕乌头碱的含量测 定
(1) 薄层扫描的条件 : λS216 nm λ, R300 nm ,锯齿 法扫描 ,狭缝 1125 mm ×1125 mm ,灵敏度 ×1 。
(2) 标准溶液的制备 : 分别称取乌头碱 、美沙乌 头碱 、海帕乌头碱 2 mg ,置 2 mL 容量瓶中 ,用二氯甲 烷定容至刻度 。
棕色 棕色
棕色 ,有蜜渗入处为深棕色 棕色 ,有蜜渗入处为深棕色
略带粉性 、略坚硬 略带粉性 、略坚硬
注 表示微有麻辣感 ; + + + 表示麻辣感较重 ; + + + + 表示麻辣感重
口尝麻辣感
++++ ++ +
+++ +++
++ ++ +++ +++
2. 3 各种生物碱含量的测定 2. 3. 1 总生物碱含量测定
0. 08165 0. 03945 0. 05957 0. 04631 0. 03392 0. 00101 0. 04360 0. 03423 0. 02784
3 种双酯型生 与药典法制川乌相比 物碱的降低率 双酯型生物碱变化率
51. 68 27. 04 43. 28 58. 46 98. 76 46. 60 58. 08 65. 90
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北京中医药大学学报 2003 年第 26 卷
用。 2. 2 工艺和饮片性状对比
为考查川乌蜜制工艺的优劣 ,对药典法及不同
蜜制工艺在总工时 、加热温度 、收得率 、成品的吸蜜 效果和润蜜均匀程度方面进行比较 , 结果见表 1 。 并对成品的外观性状进行比较 ,结果见表 2 。
按《中国药典》2000 年版制川乌项下的方法测 定[2 ] 。结果见表 3 。
表 3 川乌及蜜炙川乌饮片中总生物碱含量测定结果 ( %)
样 品
与生川乌 与药典法制川 总生物碱 相比总生 乌相比总生物
物碱损失率 碱变化率
生川乌 药典法制川乌 蜜炙生川乌 Ⅰ 蜜炙生川乌 Ⅱ 蜜烘生川乌 蜜煮制川乌 蜜煮生川乌 蜜酒蒸川乌片 蜜蒸川乌片
25
蜜煮生川乌
0/ 0
25
蜜酒蒸川乌片
0. 5/ 30
25
蜜蒸川乌片
0. 5/ 30
25
270
33. 00
100
570
72. 00
100
得提取液
15
51. 00
110
++
15
50. 25
110
++
120
33. 00
90
++
270
7. 67
100
+++
40
42. 10
110
+
40
41. 10
110
+
注 : + 表示蜜未均匀渗入 ; + + 表示表面润蜜均匀 ,但中心未润透 ; + + + 表示蜜吸收好且均匀渗入
mL 与氨试液 4 mL ,密塞 ,摇匀 ,放置过夜 ,滤过 ,药 渣加乙醚 50 mL ,超声波提取 30 min ,滤过 ,药渣再用 乙醚洗涤 4 次 ,每次 15 mL ,滤过 ,洗液与滤液合并 , 低温蒸干 。用二氯甲烷溶解并转移至 2 mL 容量瓶 中 ,定容至刻度 。精密吸取点样 ,同时以乌头碱 、美 沙乌头碱 、海帕乌头碱作随行对照 ,按标准曲线项下
淡棕色
淡棕色
粉性
药典法制川乌
黑褐色
黑褐色
坚硬的角质状
蜜煮制川乌
黑褐色提取物
浸膏
蜜炙生川乌 Ⅰ 蜜炙生川乌 Ⅱ 蜜烘生川乌 蜜煮生川乌
金黄色 金黄色 棕色 黑褐色
棕色 ,有蜜渗入处为深棕色 棕色 ,有蜜渗入处为深棕色 棕色 ,有蜜渗入处为深棕色