薄荷叶中黄酮类物质的提取及其抗氧化活性研究
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作者简介 邱贺媛 ( 1965- ), 女, 河北昌黎人, 高级实验师, 从事有 机化学和食品化学的教学与研究工作。
收稿日期 2010 08 23
师范学院生物系曾宪锋副教授鉴定为薄荷 (M entha hap loca lyx Briq. )正品。粉碎, 于干燥箱中 60 ! 干燥至恒重, 冷却, 备用。 1. 1. 2 主要试剂。芦丁标准品, 生化试剂, 由上海试剂二厂 生产; 无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、硫酸亚铁、过 氧化氢、水杨酸, 均为分析纯, 由广州试剂厂生产。 1. 1. 3 主要仪器。 Spectrum lab 752S 型紫外可见分光光度 计, 由上海棱光技术有限公司生产; KQ 500DB 型数控超声波 清洗器, 由昆山市超声仪器有限公司生产; JFSD 100 ∀型粉碎 机, 由上海华岩仪器设备有限公司生产; JA1203型上皿电子 天平, 由上海精密科学仪器有限公司生产; SH Z D ( #) 型循环 水式真空泵由巩义市予华仪器有限责任公司生产; DF 02型精 密恒温水槽, 由南京舫奥科技有限公司生产; DZF 6050型真空 干燥箱, 由上海博讯实业有限公司医疗设备厂生产; GZH DH X型电热恒温干燥箱, 由上海跃进医疗机械厂生产。 1. 2 方法 1. 2. 1 薄荷中总黄酮的提取。称取一定量薄荷叶, 研碎, 准 确称取 1. 000 0 g于碘量瓶中, 加入一定体积分数的乙醇, 设 提取温度为 50 ! , 在一定超声波功率下提取一定时间, 冷 却, 过滤, 将滤液定容至 250 m ,l 即得总黄酮提取液。 1. 2. 2 单因素试验。 1. 2. 2. 1 乙醇体积分数的选择。准确称取 5份薄荷叶粉 末, 各 1. 000 0 g, 设料液比为 1 30(W /V, 下同 ), 分别用 30% 、 40% 、50% 、60% 、70% 乙醇溶液浸泡, 在超声波功率为 400 W、提取温度为 50 ! 的条件下, 超声提取 30 m in, 冷却, 过滤, 将滤液定容至 250 m ,l 测定吸光度值, 研究乙醇体积分数对 薄荷叶总黄酮提取率的影响。
薄荷 (M entha hap localyx Briq. )又称夜息香、鱼香菜、狗 肉香、水益母和鱼香草等, 为唇形科 ( Lab iatae)薄荷属 (M en tha) 1年或多年生宿根性草本植物, 是一种生长在低地、路 边、河滩、湖边以及园地等处可以药食兼用的野菜, 且是一种 具有特种经济价值的芳香作物。薄荷全草均可入药, 味辛、 凉, 归肺、肝经, 有发散风热、清利咽喉、透疹解毒、疏肝解郁 和止痒等功效, 可用于治疗感冒发热、头痛、咽喉肿痛、无汗、 风火赤眼、风疹、皮肤发痒、疝痛、下痢及瘰疬等症, 外用有轻 微的止痛作用, 可用于神经痛等。薄荷嫩叶除了含有丰富的 蛋白质、脂肪和碳水化合物之外, 还含有钙、磷、铁、多种维生 素和人体必需的微量元素, 而可溶性有害重金属 ( Pb、C r和 Cd)等含量很低。近年来, 国内外学者对唇形科很多种植物 的生物学特性进行了大量研究, 发现其具有广泛的药理作 用 [ 1- 3] 。但目前, 关于薄荷中黄酮类化合物的研究尚未见报 道。为此, 笔者以乙醇作提取剂, 采用单因素试验和正交试 验优化超声波辅助提取薄荷叶中的黄酮类化合物的工艺, 并 研究薄荷叶提取液中黄酮类物质对羟基自由基 ( OH ) 的清 除作用, 旨在为建立快速、高效的从薄荷叶中提取、分离黄酮 类化合物的方法及进一步开发利用薄荷叶提供科学依据。 1 材料与方法 1. 1 材料 1. 1. 1 供试药材。薄荷叶, 购自广东省潮州市中药店, 由韩山
19 336
源自文库
安徽农业科学
2010年
1. 2. 2. 2 料液比的选择。准确称 取 5 份薄荷叶粉末, 各 1. 000 0 g, 设料液比分别用 1 10、1 20、1 30、1 40、1 50, 用 40% 乙醇溶液浸泡, 在超声波功率为 400 W、提取温度为 50 ! 的条件下, 超声提取 30 m in, 冷却, 过滤, 将滤液定容至 250 m l测定吸光度值, 研究料液比对薄荷 叶总黄酮提 取率的 影响。
安徽农业科学, Jou rn al ofAnhu iAgr.i Sc.i 2010, 38( 34): 19335- 19337, 19340
责任编辑 姜丽 责任校对 傅真治
薄荷叶中黄酮类物质的提取及其抗氧化活性研究
邱贺媛, 章宋洁 (韩山师范学院化学系, 广东潮州 521041)
摘要 [目的 ]优化薄荷 (M entha hap localyx Briq. )叶总黄酮提取工艺, 并研究其抗氧化活性, 为薄荷叶总黄酮的提取利用提供依据。 [方法 ]在单因素试验基础上, 以黄酮提取率为指标, 采用 L9 ( 34 )正交试验, 对超声波辅助提取, 薄荷叶中的黄酮类物质的工艺进行优 选。并研究薄荷叶水提液和乙醇提取液对 OH 的清除作用。 [结果 ]薄荷叶中总黄酮的最佳工艺为: 以体积分数 40% 乙醇为溶剂, 料 液比 1 30(W /V ), 超声波功率 400W, 提取温度 50 ! , 提取时间 40 m in, 此优化条件下, 薄荷叶总黄酮得率达 6. 58% 。薄荷叶水提液对
1. 2. 2. 3 超声波功率的选择。准确称取 5份薄荷叶粉末, 各 1. 000 0 g, 各设料液比为 1 20, 分别用 40% 乙醇浸泡, 在提 取温度为 50 ! 、超声波功率分别为 300、350、400、450、500 W 的条件下提取 30 m in, 冷却, 过滤, 将滤液定容至 250 m l测定 吸光度值, 研究超声波功率对薄荷叶总黄酮提取率的影响。 1. 2. 2. 4 提取时间的选择。准确称取 5份薄荷叶粉末, 各 1. 000 0 g, 设料液比为 1 20, 分别用 40% 乙醇浸泡, 在提取温 度为 50 ! 、超声波功率为 400W 的条件下, 分别提取 10、20、 30、40、50 m in, 冷却, 过滤, 将滤液定容至 250 m l测定吸光度 值, 研究提取时间对薄荷叶总黄酮提取率的影响。 1. 2. 3 正交试验。在单因素试验基础上, 选取乙醇体积分 数、料液比、超声波功率和提取时间 4个因素, 每个因素 3个 水平, 进行 L9 ( 34 )正交试验, 以黄酮得率为考察指标, 优化从 薄荷叶中提取总黄酮的工艺。各因素与水平设计见表 1。
Study on Extracting and A ntioxidant A ctivity of Flavonoids from M entha haplocalyx Briq. QIU He yuan et al ( D epartm ent of Chem istry, H anshan N orm alU niversity, Chaozhou, Guangdong 521041) A bstract [ Objective]The research ami ed to optmi ize the ex traction process of flavono ids from M entha hap localyx Br iq. leaves and study its an tioxidant activ ity so as to prov ide the basis for extraction and utilization o f flavonoids from M entha hap localyx Briq. leaves. [M ethod] Taking ex traction ratio of the total flavonoids as index, L9 ( 34 ) orthogonal testwas used to optmi ize the extraction process of flavonoids from M entha haplo calyx Br iq. leaves by ultrasound assisted extraction. And the clear ing rate ofwa ter and ethonal extract ofM entha haplocalyx Briq. leaves to OH was studied. [ Result] The results showed that the optmi a lprocess of extracting flavono ids from M entha haplocalyx Briq. leavesw as as fo llow: etha nol concentration 40% , solid liquid ratio of 1 30, ultrasonic power 400W, ex traction tem perature 50! , and extraction tmi e 40 m in. Under the op tmi al conditions, the y ie ld of flavonoids from M entha hap localyx Br iq. leavesw as 6. 58% . The w ater extract ofM entha hap localyx Briq. leaves had strong clear ing effect to OH, and gradually increased w ith the raising of flavonoids conten;t The biggest clear ing rate was 44. 23% . The clearing effect o f ethonal extract ofM entha hap localyx Briq. leaves to OH increased slow ly firs,t then decreased quickly and continuously w ith the raising of flavonoids conten,t but less than the effect of itsw ater extract in whole. [ Conclusion] The m ethod of extracting flavono ids from leaves ofM entha hap localyx Briq. by using ethanol and ultrasonic was smi ple, and had strong m aneuverability. The flavono ids from leaves ofM entha hap localyx Briq. had strong clearing effect to OH, and could be developed and used. Key words M entha hap localyx Br iq. leaves; F lavono ids; U ltrasound assisted extraction; OH; Clearing effect
OH有较强的清除作用, 且随着总黄酮含量的增加逐渐增大, 最高消除率达到 44. 23% ; 薄荷叶乙醇提液对 OH 的清除作用随着黄酮 含量的增加先缓慢上升后持续快速下降, 总体上低于薄荷叶水提液对 OH 的清除作用。 [结论 ]利用超声波协同乙醇提取薄荷叶中黄 酮类物质的方法简单, 可操作性强。薄荷叶中黄酮类物质对 OH 有较强的清除作用, 可以开发利用。 关键词 薄荷叶; 总黄酮; 超声波辅助提取法; OH; 清除作用 中图分类号 S367. 23+ 5 文献标识码 A 文章编号 0517- 6611( 2010) 34- 19335- 03
收稿日期 2010 08 23
师范学院生物系曾宪锋副教授鉴定为薄荷 (M entha hap loca lyx Briq. )正品。粉碎, 于干燥箱中 60 ! 干燥至恒重, 冷却, 备用。 1. 1. 2 主要试剂。芦丁标准品, 生化试剂, 由上海试剂二厂 生产; 无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、硫酸亚铁、过 氧化氢、水杨酸, 均为分析纯, 由广州试剂厂生产。 1. 1. 3 主要仪器。 Spectrum lab 752S 型紫外可见分光光度 计, 由上海棱光技术有限公司生产; KQ 500DB 型数控超声波 清洗器, 由昆山市超声仪器有限公司生产; JFSD 100 ∀型粉碎 机, 由上海华岩仪器设备有限公司生产; JA1203型上皿电子 天平, 由上海精密科学仪器有限公司生产; SH Z D ( #) 型循环 水式真空泵由巩义市予华仪器有限责任公司生产; DF 02型精 密恒温水槽, 由南京舫奥科技有限公司生产; DZF 6050型真空 干燥箱, 由上海博讯实业有限公司医疗设备厂生产; GZH DH X型电热恒温干燥箱, 由上海跃进医疗机械厂生产。 1. 2 方法 1. 2. 1 薄荷中总黄酮的提取。称取一定量薄荷叶, 研碎, 准 确称取 1. 000 0 g于碘量瓶中, 加入一定体积分数的乙醇, 设 提取温度为 50 ! , 在一定超声波功率下提取一定时间, 冷 却, 过滤, 将滤液定容至 250 m ,l 即得总黄酮提取液。 1. 2. 2 单因素试验。 1. 2. 2. 1 乙醇体积分数的选择。准确称取 5份薄荷叶粉 末, 各 1. 000 0 g, 设料液比为 1 30(W /V, 下同 ), 分别用 30% 、 40% 、50% 、60% 、70% 乙醇溶液浸泡, 在超声波功率为 400 W、提取温度为 50 ! 的条件下, 超声提取 30 m in, 冷却, 过滤, 将滤液定容至 250 m ,l 测定吸光度值, 研究乙醇体积分数对 薄荷叶总黄酮提取率的影响。
薄荷 (M entha hap localyx Briq. )又称夜息香、鱼香菜、狗 肉香、水益母和鱼香草等, 为唇形科 ( Lab iatae)薄荷属 (M en tha) 1年或多年生宿根性草本植物, 是一种生长在低地、路 边、河滩、湖边以及园地等处可以药食兼用的野菜, 且是一种 具有特种经济价值的芳香作物。薄荷全草均可入药, 味辛、 凉, 归肺、肝经, 有发散风热、清利咽喉、透疹解毒、疏肝解郁 和止痒等功效, 可用于治疗感冒发热、头痛、咽喉肿痛、无汗、 风火赤眼、风疹、皮肤发痒、疝痛、下痢及瘰疬等症, 外用有轻 微的止痛作用, 可用于神经痛等。薄荷嫩叶除了含有丰富的 蛋白质、脂肪和碳水化合物之外, 还含有钙、磷、铁、多种维生 素和人体必需的微量元素, 而可溶性有害重金属 ( Pb、C r和 Cd)等含量很低。近年来, 国内外学者对唇形科很多种植物 的生物学特性进行了大量研究, 发现其具有广泛的药理作 用 [ 1- 3] 。但目前, 关于薄荷中黄酮类化合物的研究尚未见报 道。为此, 笔者以乙醇作提取剂, 采用单因素试验和正交试 验优化超声波辅助提取薄荷叶中的黄酮类化合物的工艺, 并 研究薄荷叶提取液中黄酮类物质对羟基自由基 ( OH ) 的清 除作用, 旨在为建立快速、高效的从薄荷叶中提取、分离黄酮 类化合物的方法及进一步开发利用薄荷叶提供科学依据。 1 材料与方法 1. 1 材料 1. 1. 1 供试药材。薄荷叶, 购自广东省潮州市中药店, 由韩山
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安徽农业科学
2010年
1. 2. 2. 2 料液比的选择。准确称 取 5 份薄荷叶粉末, 各 1. 000 0 g, 设料液比分别用 1 10、1 20、1 30、1 40、1 50, 用 40% 乙醇溶液浸泡, 在超声波功率为 400 W、提取温度为 50 ! 的条件下, 超声提取 30 m in, 冷却, 过滤, 将滤液定容至 250 m l测定吸光度值, 研究料液比对薄荷 叶总黄酮提 取率的 影响。
安徽农业科学, Jou rn al ofAnhu iAgr.i Sc.i 2010, 38( 34): 19335- 19337, 19340
责任编辑 姜丽 责任校对 傅真治
薄荷叶中黄酮类物质的提取及其抗氧化活性研究
邱贺媛, 章宋洁 (韩山师范学院化学系, 广东潮州 521041)
摘要 [目的 ]优化薄荷 (M entha hap localyx Briq. )叶总黄酮提取工艺, 并研究其抗氧化活性, 为薄荷叶总黄酮的提取利用提供依据。 [方法 ]在单因素试验基础上, 以黄酮提取率为指标, 采用 L9 ( 34 )正交试验, 对超声波辅助提取, 薄荷叶中的黄酮类物质的工艺进行优 选。并研究薄荷叶水提液和乙醇提取液对 OH 的清除作用。 [结果 ]薄荷叶中总黄酮的最佳工艺为: 以体积分数 40% 乙醇为溶剂, 料 液比 1 30(W /V ), 超声波功率 400W, 提取温度 50 ! , 提取时间 40 m in, 此优化条件下, 薄荷叶总黄酮得率达 6. 58% 。薄荷叶水提液对
1. 2. 2. 3 超声波功率的选择。准确称取 5份薄荷叶粉末, 各 1. 000 0 g, 各设料液比为 1 20, 分别用 40% 乙醇浸泡, 在提 取温度为 50 ! 、超声波功率分别为 300、350、400、450、500 W 的条件下提取 30 m in, 冷却, 过滤, 将滤液定容至 250 m l测定 吸光度值, 研究超声波功率对薄荷叶总黄酮提取率的影响。 1. 2. 2. 4 提取时间的选择。准确称取 5份薄荷叶粉末, 各 1. 000 0 g, 设料液比为 1 20, 分别用 40% 乙醇浸泡, 在提取温 度为 50 ! 、超声波功率为 400W 的条件下, 分别提取 10、20、 30、40、50 m in, 冷却, 过滤, 将滤液定容至 250 m l测定吸光度 值, 研究提取时间对薄荷叶总黄酮提取率的影响。 1. 2. 3 正交试验。在单因素试验基础上, 选取乙醇体积分 数、料液比、超声波功率和提取时间 4个因素, 每个因素 3个 水平, 进行 L9 ( 34 )正交试验, 以黄酮得率为考察指标, 优化从 薄荷叶中提取总黄酮的工艺。各因素与水平设计见表 1。
Study on Extracting and A ntioxidant A ctivity of Flavonoids from M entha haplocalyx Briq. QIU He yuan et al ( D epartm ent of Chem istry, H anshan N orm alU niversity, Chaozhou, Guangdong 521041) A bstract [ Objective]The research ami ed to optmi ize the ex traction process of flavono ids from M entha hap localyx Br iq. leaves and study its an tioxidant activ ity so as to prov ide the basis for extraction and utilization o f flavonoids from M entha hap localyx Briq. leaves. [M ethod] Taking ex traction ratio of the total flavonoids as index, L9 ( 34 ) orthogonal testwas used to optmi ize the extraction process of flavonoids from M entha haplo calyx Br iq. leaves by ultrasound assisted extraction. And the clear ing rate ofwa ter and ethonal extract ofM entha haplocalyx Briq. leaves to OH was studied. [ Result] The results showed that the optmi a lprocess of extracting flavono ids from M entha haplocalyx Briq. leavesw as as fo llow: etha nol concentration 40% , solid liquid ratio of 1 30, ultrasonic power 400W, ex traction tem perature 50! , and extraction tmi e 40 m in. Under the op tmi al conditions, the y ie ld of flavonoids from M entha hap localyx Br iq. leavesw as 6. 58% . The w ater extract ofM entha hap localyx Briq. leaves had strong clear ing effect to OH, and gradually increased w ith the raising of flavonoids conten;t The biggest clear ing rate was 44. 23% . The clearing effect o f ethonal extract ofM entha hap localyx Briq. leaves to OH increased slow ly firs,t then decreased quickly and continuously w ith the raising of flavonoids conten,t but less than the effect of itsw ater extract in whole. [ Conclusion] The m ethod of extracting flavono ids from leaves ofM entha hap localyx Briq. by using ethanol and ultrasonic was smi ple, and had strong m aneuverability. The flavono ids from leaves ofM entha hap localyx Briq. had strong clearing effect to OH, and could be developed and used. Key words M entha hap localyx Br iq. leaves; F lavono ids; U ltrasound assisted extraction; OH; Clearing effect
OH有较强的清除作用, 且随着总黄酮含量的增加逐渐增大, 最高消除率达到 44. 23% ; 薄荷叶乙醇提液对 OH 的清除作用随着黄酮 含量的增加先缓慢上升后持续快速下降, 总体上低于薄荷叶水提液对 OH 的清除作用。 [结论 ]利用超声波协同乙醇提取薄荷叶中黄 酮类物质的方法简单, 可操作性强。薄荷叶中黄酮类物质对 OH 有较强的清除作用, 可以开发利用。 关键词 薄荷叶; 总黄酮; 超声波辅助提取法; OH; 清除作用 中图分类号 S367. 23+ 5 文献标识码 A 文章编号 0517- 6611( 2010) 34- 19335- 03