医院环境微生物采样方法及注意事项
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四、使用中消毒液染菌量测定
（一）采样时间：采取更换前使用中的消毒剂与灭菌器械保 存液；
（二）采样量及方法：在无菌条件下，用无菌吸管吸取 1.0ml被检样液，加入9.0ml含相应中和 剂的采样管内混 匀；
（三）结果判断： 使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml,不得检出致病菌；无
菌物品保存液应无菌生长。
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三、物品和环境表面消毒效果监测
（一）采样时间：在消毒处理后进行采样。 （二）采样面积：被采面积＜100cｍ2取全部表面；
采样面积≥100 cｍ2，取100cｍ2 （三）采样方法：棉拭子法：用5×5cm的标准灭菌
规格版，放在被检物体表面，用浸有含有相应中 和剂的无菌洗脱液的棉拭子，在规格板内横竖往 返均匀涂抹5次，并随之转动棉拭子，可连续采样 1～4个规格板面积。剪去手接触部分，并将棉拭 子放入装有10ml含相应中和剂的试管内，立即送 检。
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步骤： （在25cm2规格板内横竖往返均匀涂抹各5次，连续采4个规格
板面积）
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（四）结果判断
标准值
环境 类别
范围
Ⅰ类 层流洁净手术室、层流洁净病房
菌落 总数 cfu/c
m2
致病 菌＊
≤5
不得பைடு நூலகம்出
Ⅱ类
普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、烧伤病房、供 应室无菌区
≤5
不得检出
注Ⅲ：类＊致儿 治科 疗病病 室菌房 、指化、溶验妇室产血、科性供检链应查球室室清、菌洁注、区射金、室黄各、类色急普葡诊通室萄病、球房和换菌房药。间室母、婴同≤室10 、早产不得儿检室出、 Ⅳ类婴儿传室染、病新科及生病儿房室及儿科病房的物体表面不得检出沙≤门1氏5 菌。不得检出
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• 一、空气消毒效果监测 • 二、手消毒效果监测 • 三、物品和环境表面消毒效果监测 • 四、使用中消毒液染菌量测定 • 五、医疗器械灭菌质量监测 • 六、灭菌质量监测
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一、空气消毒效果监测
非洁净区域空气消毒效果监测 （一）采样时间：消毒处理后，操作前进行
采样。 （二）采样方法：平板暴露法和微生物采样
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第三十六条 出现医院感染流行或暴发趋势时，应采取下列 控制措施：
一、临床科主必须及时查找原回，协助调查和执行控制措施 。
二、医院感染管理科必须及时进行流行病学调查处理，基本 步骤为；
1、证实流行或暴发 2、查找感染源：对感染病人、接触者、可疑传染源、环境、 物品、医务人员及陪护人员等进行病原学检查。 3、查找引起感染的因素 4、制定和组织落实有效的控制措施 5、分析调查资料 6、写出调查报告。
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外科手消毒监测采样
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（三）结果判断：
《医务人员手卫生规范》 4.4手消毒效果应达到如 下相应要求： 卫生手清毒，监测的细菌菌落总数应≤10cfu/㎝2 外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤5cfu/㎝2
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《医务人员手卫生规范》 8．1监测要求 医疗机构应每季度对手术室、产房、导管室、层流 洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监 护病房、新生儿室、母婴室、血液透析病房、烧伤 病房、 感染疾病科、口腔科等部门工作的医务人员 手进行消毒效果的监测；当怀疑医院感染暴发与医 务人员手卫生有关时，应及时进行监测，并进行相 应致病性微生物的检测。
二、手卫生效果的监测方法
（一）采样时间：在接触患者、进行诊疗活动前采 样。
（二）采样方法：被检者五指并拢，用浸有含相应 中和剂的无菌洗脱水液浸湿的棉拭子在双手指曲 面从指跟到指 端往返涂擦2次，一只手涂擦面积 约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭子 接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和剂 的无菌洗脱液试管内，及时送检。
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采样方法和原则
采样方法：对于大的医疗器械，用浸泡有无菌生理盐水的棉 签在医疗器械接触病人的部分横竖来回涂擦，并随之转动 棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投人10ml含相应中 和剂的无菌洗脱液的试管内，立即送检。小的医疗器械直 接投入洗脱液中送检。
器法。
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平板暴露法（我院采用的方法）
1、布点方法： （1）室内面积≤30 m2，设置内、中、外对角线3
个点，内、外布点部位距墙壁1m处；
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（2）室内面积>30 m2，设4角及中央5 点，4角布点部位距离墙壁1m处。
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2、采样方法：将血平板或普通营养琼 脂平板 （直径9cm)放在室内各采样点处，采样高 度为距离地面1.5m，采样时将平板盖打开，扣放 于平板旁，暴露时间（Ⅱ类15min，Ⅲ类5min）， 盖好立即送检。
医院环境微生物采样方法及注意事项 院感科
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卫医发[2000]431号《医院感染管理规范》 第三十一条 环境卫生学监测：包括对空气、
物体表面和医护人员手的监测。
医院应每月对手术室、重症监护病房／室（ ICU）、产房、母婴室、新生儿病房、骨髓移植病 房、血液病房、血液透析室、供应室无菌区、治 疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。 当有医院感染流行，怀疑与医院环境卫生学因素 有关时，应及时进行监测。
3、检测方法：将采样后平皿置37 ℃±温箱培养48h，计数并鉴定。
注意事项：采样前应关好门窗和空调，无人走 动情况下，静止10min再进行采样。
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4、结果判断
环境类别
范围
标准值
菌落总数cfu/m3
Ⅰ类
层流洁净手术室、层流洁 净病房
≤10cfu/m3(或 0.2cfu/平板）
Ⅱ类
普通产房、手术室、婴儿
注意：采样时应无菌操作，正确选用中和剂，采样后1 小时内检测。
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五、医用物品的实验室监测
• 由外科手术、创伤性操作的对病人感染也是医院 感染的一个主要途径。
• 如果医疗物品的消毒不够完善，对病人是潜在危 险因素。如果对污染的医疗物品操作不当，对医 务工作者也是一个危险因素。
• 对医疗物品尤其是医疗器械消毒十分重要。
室、早产儿室、烧伤病房、 供应室无菌区
≤200cfu/m3(或 4cfu/平板）
儿科病房、妇产 科检查室、注射 注：Ⅲ＊类致病菌室 药 化指、 室 验溶血室、急性治 、诊链球疗 供室菌室应、、金换、室黄色精品葡课≤1萄件50球0c菌f0uc/f平u/板m3）(或
致病 菌＊ 不得 检出 不得 检出
不得 检出
四、使用中消毒液染菌量测定
（一）采样时间：采取更换前使用中的消毒剂与灭菌器械保 存液；
（二）采样量及方法：在无菌条件下，用无菌吸管吸取 1.0ml被检样液，加入9.0ml含相应中和 剂的采样管内混 匀；
（三）结果判断： 使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml,不得检出致病菌；无
菌物品保存液应无菌生长。
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三、物品和环境表面消毒效果监测
（一）采样时间：在消毒处理后进行采样。 （二）采样面积：被采面积＜100cｍ2取全部表面；
采样面积≥100 cｍ2，取100cｍ2 （三）采样方法：棉拭子法：用5×5cm的标准灭菌
规格版，放在被检物体表面，用浸有含有相应中 和剂的无菌洗脱液的棉拭子，在规格板内横竖往 返均匀涂抹5次，并随之转动棉拭子，可连续采样 1～4个规格板面积。剪去手接触部分，并将棉拭 子放入装有10ml含相应中和剂的试管内，立即送 检。
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步骤： （在25cm2规格板内横竖往返均匀涂抹各5次，连续采4个规格
板面积）
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（四）结果判断
标准值
环境 类别
范围
Ⅰ类 层流洁净手术室、层流洁净病房
菌落 总数 cfu/c
m2
致病 菌＊
≤5
不得பைடு நூலகம்出
Ⅱ类
普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、烧伤病房、供 应室无菌区
≤5
不得检出
注Ⅲ：类＊致儿 治科 疗病病 室菌房 、指化、溶验妇室产血、科性供检链应查球室室清、菌洁注、区射金、室黄各、类色急普葡诊通室萄病、球房和换菌房药。间室母、婴同≤室10 、早产不得儿检室出、 Ⅳ类婴儿传室染、病新科及生病儿房室及儿科病房的物体表面不得检出沙≤门1氏5 菌。不得检出
精品课件
• 一、空气消毒效果监测 • 二、手消毒效果监测 • 三、物品和环境表面消毒效果监测 • 四、使用中消毒液染菌量测定 • 五、医疗器械灭菌质量监测 • 六、灭菌质量监测
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一、空气消毒效果监测
非洁净区域空气消毒效果监测 （一）采样时间：消毒处理后，操作前进行
采样。 （二）采样方法：平板暴露法和微生物采样
精品课件
第三十六条 出现医院感染流行或暴发趋势时，应采取下列 控制措施：
一、临床科主必须及时查找原回，协助调查和执行控制措施 。
二、医院感染管理科必须及时进行流行病学调查处理，基本 步骤为；
1、证实流行或暴发 2、查找感染源：对感染病人、接触者、可疑传染源、环境、 物品、医务人员及陪护人员等进行病原学检查。 3、查找引起感染的因素 4、制定和组织落实有效的控制措施 5、分析调查资料 6、写出调查报告。
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外科手消毒监测采样
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（三）结果判断：
《医务人员手卫生规范》 4.4手消毒效果应达到如 下相应要求： 卫生手清毒，监测的细菌菌落总数应≤10cfu/㎝2 外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤5cfu/㎝2
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《医务人员手卫生规范》 8．1监测要求 医疗机构应每季度对手术室、产房、导管室、层流 洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监 护病房、新生儿室、母婴室、血液透析病房、烧伤 病房、 感染疾病科、口腔科等部门工作的医务人员 手进行消毒效果的监测；当怀疑医院感染暴发与医 务人员手卫生有关时，应及时进行监测，并进行相 应致病性微生物的检测。
二、手卫生效果的监测方法
（一）采样时间：在接触患者、进行诊疗活动前采 样。
（二）采样方法：被检者五指并拢，用浸有含相应 中和剂的无菌洗脱水液浸湿的棉拭子在双手指曲 面从指跟到指 端往返涂擦2次，一只手涂擦面积 约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭子 接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和剂 的无菌洗脱液试管内，及时送检。
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采样方法和原则
采样方法：对于大的医疗器械，用浸泡有无菌生理盐水的棉 签在医疗器械接触病人的部分横竖来回涂擦，并随之转动 棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投人10ml含相应中 和剂的无菌洗脱液的试管内，立即送检。小的医疗器械直 接投入洗脱液中送检。
器法。
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平板暴露法（我院采用的方法）
1、布点方法： （1）室内面积≤30 m2，设置内、中、外对角线3
个点，内、外布点部位距墙壁1m处；
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（2）室内面积>30 m2，设4角及中央5 点，4角布点部位距离墙壁1m处。
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2、采样方法：将血平板或普通营养琼 脂平板 （直径9cm)放在室内各采样点处，采样高 度为距离地面1.5m，采样时将平板盖打开，扣放 于平板旁，暴露时间（Ⅱ类15min，Ⅲ类5min）， 盖好立即送检。
医院环境微生物采样方法及注意事项 院感科
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卫医发[2000]431号《医院感染管理规范》 第三十一条 环境卫生学监测：包括对空气、
物体表面和医护人员手的监测。
医院应每月对手术室、重症监护病房／室（ ICU）、产房、母婴室、新生儿病房、骨髓移植病 房、血液病房、血液透析室、供应室无菌区、治 疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。 当有医院感染流行，怀疑与医院环境卫生学因素 有关时，应及时进行监测。
3、检测方法：将采样后平皿置37 ℃±温箱培养48h，计数并鉴定。
注意事项：采样前应关好门窗和空调，无人走 动情况下，静止10min再进行采样。
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4、结果判断
环境类别
范围
标准值
菌落总数cfu/m3
Ⅰ类
层流洁净手术室、层流洁 净病房
≤10cfu/m3(或 0.2cfu/平板）
Ⅱ类
普通产房、手术室、婴儿
注意：采样时应无菌操作，正确选用中和剂，采样后1 小时内检测。
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五、医用物品的实验室监测
• 由外科手术、创伤性操作的对病人感染也是医院 感染的一个主要途径。
• 如果医疗物品的消毒不够完善，对病人是潜在危 险因素。如果对污染的医疗物品操作不当，对医 务工作者也是一个危险因素。
• 对医疗物品尤其是医疗器械消毒十分重要。
室、早产儿室、烧伤病房、 供应室无菌区
≤200cfu/m3(或 4cfu/平板）
儿科病房、妇产 科检查室、注射 注：Ⅲ＊类致病菌室 药 化指、 室 验溶血室、急性治 、诊链球疗 供室菌室应、、金换、室黄色精品葡课≤1萄件50球0c菌f0uc/f平u/板m3）(或
致病 菌＊ 不得 检出 不得 检出
不得 检出