三叶青乙酸乙酯提取物对小鼠Lewis肺癌移植性肿瘤的抑制作用及免疫功能的影响
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与模型组 比较 ▲Ｐ＜ ．５ ▲ＡＰ＜ ． １ 下同） Ｏ０ ， ０Ｏ （
３ ２ 三 叶 青 乙酸 乙酯 提 取 物 对荷 瘤 小 鼠脾 脏 指 数 和 胸腺 指 ． 数的影响
表２
肢腋 窝皮 下建立模型 。
２ ２ 分组与给 药 体重 ２ ． ０—２ ｇ小 鼠接种 ２ 时后 随机 ２ ４小
２ ４ 统计 学处理 ．
采用 Ｓ Ｓ １． 统计 软件 ， Ｐ Ｓ ００版 计量数据 以
均数 ±标准差 （ ｓ 表示 ， ± ） 组间差异的 比较采用单因素方差 分析 ， 显著性水准为 Ｐ＜ ．５ ００ 。
３ 结 果
小鼠 ， 由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。
１３ 实验 试 剂 小 鼠血 清 ＩＮ一 、 Ｎ ． Ｆ Ｔ Ｆ—Ｏ Ｉ ２检 测 试 ｔ Ｌ一 、
剂量组脾指数 、 胸腺 指数较模型组增高 ， 差异具 显著性 （ ０ ０ ） 三叶 青高、 Ｐ＜ ．５ ； 中剂量组 ＩＮ一 Ｔ Ｆ一 Ｆ Ｎ
含 量高于模 型对照组 ， 差异具显著性 （ ０ ０ ） Ｐ＜ ．５ 。结论 ： 中药三叶青 乙酸 乙酯提取 物具有抑制 Ｌ ｗｓ肺癌 ｅｉ
移植瘤作 用 ， 且能保护 实验动物的 细胞免疫 器官 ， 提高免疫功能 。 主题词 肺肿 瘤／ 中医药疗 法 三叶青提取物／ 治疗应用 小鼠 ２ ３ 观察指标与测定 ． 末次 给药后 ２ ４小时 ， 摘取小 鼠右 侧
３ １ 三 叶 青 乙酸 乙酯提 取 物 对 小 鼠 瘤 体 生 长 的 抑 制 作 用 ．
剂盒 ： 国 Ｒ Ｄ公 司提供 。 美 ＆
２ 实 验 方 法
见表 １ 。
表１ 各组小 鼠瘤重 、 抑瘤 率的比较 （１ ０ Ｉ＝１ ） ，
２ １ 造模 ．
取 接种 Ｌｗｓ ｅ ｉ 肺癌瘤 株 １ ４天 的 Ｃ ７ Ｌ ６ ０～１ ５Ｂ ／Ｊ
三 叶青 （ ｅ ａｔ ｈｍ ｌ ａ ｕ ｉ ｓｅ Ｇｌ）属 葡 Ｔｔ ｓｉ ｒ ｇ ｅ ｓ ｙ ｎｍ Ｄｅ ｔ ｉ ｅ ｌ ｇ
萄科 崖爬藤属植物 ， 主要 分布于长 江 以南 各地 ， 于 阴湿山 生 坡、 山沟或溪谷旁林 下 ， 以块根或全草人药 。具有清热解毒 、
眼球 取血后脱颈处死 ， 用眼科剪分离剥取肿瘤 ， 胸腺 及脾脏 ， 称取质量。计算各 组小 鼠抑瘤 率 、 胸腺 指数 、 指数 。抑瘤 脾
中国中医药科技 ２ １ ５月第 １ ０ ２年 ９卷第 ３期 Ｍａ ０ ２ Ｖ １１ ｏ３ ｙ２ １ ｏ ９ Ｎ ． ．
・２ ２ ９・
三 叶青 乙酸 乙酯 提取 物对 小 鼠 Ｌｗｓ 癌 移 植 性 ｅ ｉ肺 肿 瘤 的 抑 制 作 用 及 免 疫 功 能 的 影 响
李华 美 浦锦 宝 郑军 献 魏 克 民。
均瘤 重 ×１０ ； ０ ％ 胸腺 （ ） 数 ＝胸腺 （ ） （ ｇ ／ ０ 脾 指 脾 重 ｍ ） １ｇ体 重。取小 鼠静脉血 ０ ４— ．ｍ ， ． ０ ６ ｌ室温 静置后 离心取 上清液 ，
采用美国 Ｒ Ｄ公 司 提供 的试剂 盒 Ｅ ＩＡ法 检测 小 鼠血清 ＆ ＬＳ
ＩＮ — 、Ｎ Ｆ Ｔ Ｆ一仅 Ｉ ２的 含 量 ， 作 过 程 严 格 按 照试 剂 盒 说 、Ｌ一 操 明 书 进行 。
（ 浙江大学 医学院 附属儿童 医院 ・ 州 ３００ 浙江省 中医药研究 院 ・ 杭 １０ ３ 杭州 ３ ００ ） １０ ７
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
摘
要 目的 ： 观察三叶青 乙酸 乙酯提取物对小鼠 Ｌｗｓ 癌移植瘤 的抑 制作 用及免 疫功能 的影响。方 ｅ ｉ肺
法 ： 用动物移植性肿瘤 实验 法腋 下接种 Ｌｗｓ 采 ｅ ｉ 肺癌细胞制备 小鼠荷 瘤模 型。观察三 叶青 乙酸 乙酯提取
物 高、 低 剂量对瘤 重、 中、 抑瘤率 、 脾指数 、 胸腺指数的影响 ， ＬＳ Ｅ ＩＡ法检 测血 清 中细胞 因子 Ｉ ２ ＩＮ一 Ｌ一 、Ｆ 、
Ｔ Ｆ一 含量。结果 ： Ｎ 三叶青各 剂量组瘤 重均低 于模型组（ ０ ０ Ｐ＜ ．５或 Ｐ＜ ． １ ， ０ Ｏ ） 并呈 剂量依赖 性 ； 中 高、
见 表 ２ 。
各组小 鼠脾指数 、 胸腺指数 的比较 （ ４ ｎ：１ ） ． － ， ０ 组别 剂量 （／ ｇ ｇｋ ）脾指数（ ，ｌｇ 胸腺指数 （ ｓ ｌｇ ｍｒ Ｏ ） ／ ｍ ／Ｏ ）
分组 、 编号 ， 分为 ４组 ： 三叶青高剂量组 （ ０只 ） 三 叶青 中剂 １ 、 量组 （Ｏ只 ） 三 叶青 低 剂 量 组 （ ０只 ） 模 型 对 照 组 （ ０ １ 、 １ 、 １ 只） 。将 三叶青 乙酸 乙酯提取物 用无菌 蒸馏 水配 制成低 （ 相 当于生药 ０５ ／ ） 中（ 当于原药 １５ ｍ ） 高（ ． ｇｍ１ 、 相 ． １ 、 相当于原
１１ 实验药物 ．
三 叶青 ： 东医药公司中药分公司提供 。 由华
三叶青 乙酸乙酯提取 物制备 ： １ｇ三 叶青用 ８ 将 ｋ Ｌ乙酸 乙酯
提取 ３次 ， 取液回收乙酸 乙酯后 ， 于冰箱 中保存备用。 萃 置 １２ 实验动物与 瘤株 ． 小 鼠 Ｌ ｗｓ 癌细 胞株 、 ５ ＢＭ６ ｅ ｉ肺 Ｃ７ Ｉ Ｊ
荷瘤 小 鼠３只 ， 颈椎脱臼处死 ， 无菌条件下取瘤组织 ， 离血 剥 管及黏附的其它组 织 ， 在无 菌平皿 中剪碎 ， 置组织 研磨器 中 加 ４ 生理盐 水 ， ℃ 轻轻研磨 过滤 ， 成瘤 细胞悬液 ，． ％ 台 制 ０４ 盼蓝计数 ， 细胞 活力大 于 ９ ％ ， ５ 调整 细胞 为 １×１ ｍ 。消 ０／ ｌ 毒小鼠右 前腋 ， ０ ２ ｌ 取 ． ｍ 上述瘤细胞混悬液接种于小 鼠右前
祛风化痰 、 活血 止痛 的功 效。临 床多 用 于治疗 ｄ Ｊ 高热 惊 ，Ｌ 厥、 肺炎等症 ， 现研究 对肿 瘤有 防治 作用 Ｊ 。为 探讨 三叶 青抗 肿瘤作用 的机制 ， 本实验观察 了三叶青乙酸乙酯提取物
对荷瘤小 鼠免疫功能 的影响 ， 道如下。 报
１ 实 验 材 料
率（ ） （ ％ ＝ 对照组平均 瘤重 一 治疗 组平 均瘤重 ）模 型组平 ／
３ ２ 三 叶 青 乙酸 乙酯 提 取 物 对荷 瘤 小 鼠脾 脏 指 数 和 胸腺 指 ． 数的影响
表２
肢腋 窝皮 下建立模型 。
２ ２ 分组与给 药 体重 ２ ． ０—２ ｇ小 鼠接种 ２ 时后 随机 ２ ４小
２ ４ 统计 学处理 ．
采用 Ｓ Ｓ １． 统计 软件 ， Ｐ Ｓ ００版 计量数据 以
均数 ±标准差 （ ｓ 表示 ， ± ） 组间差异的 比较采用单因素方差 分析 ， 显著性水准为 Ｐ＜ ．５ ００ 。
３ 结 果
小鼠 ， 由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。
１３ 实验 试 剂 小 鼠血 清 ＩＮ一 、 Ｎ ． Ｆ Ｔ Ｆ—Ｏ Ｉ ２检 测 试 ｔ Ｌ一 、
剂量组脾指数 、 胸腺 指数较模型组增高 ， 差异具 显著性 （ ０ ０ ） 三叶 青高、 Ｐ＜ ．５ ； 中剂量组 ＩＮ一 Ｔ Ｆ一 Ｆ Ｎ
含 量高于模 型对照组 ， 差异具显著性 （ ０ ０ ） Ｐ＜ ．５ 。结论 ： 中药三叶青 乙酸 乙酯提取 物具有抑制 Ｌ ｗｓ肺癌 ｅｉ
移植瘤作 用 ， 且能保护 实验动物的 细胞免疫 器官 ， 提高免疫功能 。 主题词 肺肿 瘤／ 中医药疗 法 三叶青提取物／ 治疗应用 小鼠 ２ ３ 观察指标与测定 ． 末次 给药后 ２ ４小时 ， 摘取小 鼠右 侧
３ １ 三 叶 青 乙酸 乙酯提 取 物 对 小 鼠 瘤 体 生 长 的 抑 制 作 用 ．
剂盒 ： 国 Ｒ Ｄ公 司提供 。 美 ＆
２ 实 验 方 法
见表 １ 。
表１ 各组小 鼠瘤重 、 抑瘤 率的比较 （１ ０ Ｉ＝１ ） ，
２ １ 造模 ．
取 接种 Ｌｗｓ ｅ ｉ 肺癌瘤 株 １ ４天 的 Ｃ ７ Ｌ ６ ０～１ ５Ｂ ／Ｊ
三 叶青 （ ｅ ａｔ ｈｍ ｌ ａ ｕ ｉ ｓｅ Ｇｌ）属 葡 Ｔｔ ｓｉ ｒ ｇ ｅ ｓ ｙ ｎｍ Ｄｅ ｔ ｉ ｅ ｌ ｇ
萄科 崖爬藤属植物 ， 主要 分布于长 江 以南 各地 ， 于 阴湿山 生 坡、 山沟或溪谷旁林 下 ， 以块根或全草人药 。具有清热解毒 、
眼球 取血后脱颈处死 ， 用眼科剪分离剥取肿瘤 ， 胸腺 及脾脏 ， 称取质量。计算各 组小 鼠抑瘤 率 、 胸腺 指数 、 指数 。抑瘤 脾
中国中医药科技 ２ １ ５月第 １ ０ ２年 ９卷第 ３期 Ｍａ ０ ２ Ｖ １１ ｏ３ ｙ２ １ ｏ ９ Ｎ ． ．
・２ ２ ９・
三 叶青 乙酸 乙酯 提取 物对 小 鼠 Ｌｗｓ 癌 移 植 性 ｅ ｉ肺 肿 瘤 的 抑 制 作 用 及 免 疫 功 能 的 影 响
李华 美 浦锦 宝 郑军 献 魏 克 民。
均瘤 重 ×１０ ； ０ ％ 胸腺 （ ） 数 ＝胸腺 （ ） （ ｇ ／ ０ 脾 指 脾 重 ｍ ） １ｇ体 重。取小 鼠静脉血 ０ ４— ．ｍ ， ． ０ ６ ｌ室温 静置后 离心取 上清液 ，
采用美国 Ｒ Ｄ公 司 提供 的试剂 盒 Ｅ ＩＡ法 检测 小 鼠血清 ＆ ＬＳ
ＩＮ — 、Ｎ Ｆ Ｔ Ｆ一仅 Ｉ ２的 含 量 ， 作 过 程 严 格 按 照试 剂 盒 说 、Ｌ一 操 明 书 进行 。
（ 浙江大学 医学院 附属儿童 医院 ・ 州 ３００ 浙江省 中医药研究 院 ・ 杭 １０ ３ 杭州 ３ ００ ） １０ ７
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
摘
要 目的 ： 观察三叶青 乙酸 乙酯提取物对小鼠 Ｌｗｓ 癌移植瘤 的抑 制作 用及免 疫功能 的影响。方 ｅ ｉ肺
法 ： 用动物移植性肿瘤 实验 法腋 下接种 Ｌｗｓ 采 ｅ ｉ 肺癌细胞制备 小鼠荷 瘤模 型。观察三 叶青 乙酸 乙酯提取
物 高、 低 剂量对瘤 重、 中、 抑瘤率 、 脾指数 、 胸腺指数的影响 ， ＬＳ Ｅ ＩＡ法检 测血 清 中细胞 因子 Ｉ ２ ＩＮ一 Ｌ一 、Ｆ 、
Ｔ Ｆ一 含量。结果 ： Ｎ 三叶青各 剂量组瘤 重均低 于模型组（ ０ ０ Ｐ＜ ．５或 Ｐ＜ ． １ ， ０ Ｏ ） 并呈 剂量依赖 性 ； 中 高、
见 表 ２ 。
各组小 鼠脾指数 、 胸腺指数 的比较 （ ４ ｎ：１ ） ． － ， ０ 组别 剂量 （／ ｇ ｇｋ ）脾指数（ ，ｌｇ 胸腺指数 （ ｓ ｌｇ ｍｒ Ｏ ） ／ ｍ ／Ｏ ）
分组 、 编号 ， 分为 ４组 ： 三叶青高剂量组 （ ０只 ） 三 叶青 中剂 １ 、 量组 （Ｏ只 ） 三 叶青 低 剂 量 组 （ ０只 ） 模 型 对 照 组 （ ０ １ 、 １ 、 １ 只） 。将 三叶青 乙酸 乙酯提取物 用无菌 蒸馏 水配 制成低 （ 相 当于生药 ０５ ／ ） 中（ 当于原药 １５ ｍ ） 高（ ． ｇｍ１ 、 相 ． １ 、 相当于原
１１ 实验药物 ．
三 叶青 ： 东医药公司中药分公司提供 。 由华
三叶青 乙酸乙酯提取 物制备 ： １ｇ三 叶青用 ８ 将 ｋ Ｌ乙酸 乙酯
提取 ３次 ， 取液回收乙酸 乙酯后 ， 于冰箱 中保存备用。 萃 置 １２ 实验动物与 瘤株 ． 小 鼠 Ｌ ｗｓ 癌细 胞株 、 ５ ＢＭ６ ｅ ｉ肺 Ｃ７ Ｉ Ｊ
荷瘤 小 鼠３只 ， 颈椎脱臼处死 ， 无菌条件下取瘤组织 ， 离血 剥 管及黏附的其它组 织 ， 在无 菌平皿 中剪碎 ， 置组织 研磨器 中 加 ４ 生理盐 水 ， ℃ 轻轻研磨 过滤 ， 成瘤 细胞悬液 ，． ％ 台 制 ０４ 盼蓝计数 ， 细胞 活力大 于 ９ ％ ， ５ 调整 细胞 为 １×１ ｍ 。消 ０／ ｌ 毒小鼠右 前腋 ， ０ ２ ｌ 取 ． ｍ 上述瘤细胞混悬液接种于小 鼠右前
祛风化痰 、 活血 止痛 的功 效。临 床多 用 于治疗 ｄ Ｊ 高热 惊 ，Ｌ 厥、 肺炎等症 ， 现研究 对肿 瘤有 防治 作用 Ｊ 。为 探讨 三叶 青抗 肿瘤作用 的机制 ， 本实验观察 了三叶青乙酸乙酯提取物
对荷瘤小 鼠免疫功能 的影响 ， 道如下。 报
１ 实 验 材 料
率（ ） （ ％ ＝ 对照组平均 瘤重 一 治疗 组平 均瘤重 ）模 型组平 ／