蛹虫草培育详细技术全套资料

蛹虫草培育技术全套蛹虫草生产工艺流程图

1、削茧：即把蚕蛹从蚕茧中剥离出来，并进行挑拣，去除死蛹和不良蛹。

2、菌种培养基：按照菌种生长配方配制液体培养基，分装在摇瓶中，灭菌备用。

3、菌种培养：在装有灭菌过的培养基的摇瓶中接种原母种，置于恒温环境中的摇床上，培养7天。即得菌液，用于接种（4接种）。

4、接种：将上述3得到的菌液通过接种针接种到上述1得到的优良蚕蛹体内。

5、硬化：将上诉4得到的接种后的蚕蛹，置于硬化室内，在恒温（并干燥）的环境下，硬化20天，让菌丝体布满蛹体内。

6、培养：将上述5硬化后的蚕蛹，置于培养室内，在恒温（湿度较大）的环境下培养30天，让菌体充分生长。

7、阴干：将培养生长好的菌体（连同载体蛹），置于干燥的阴干房内阴干5天，待水分降至20%以下，即转为干燥。

8、干燥：将上述7得到的半干后的菌体，置于烘房内，50度烘干至水分8%以下。

9、包装：按照上市要求，分装成若干g/袋。

9、检验：按照企业标准对产品进行检验，合格即可上市。

一、卫生要求

1、进入净化车间需穿戴鞋套、净化服、帽子及口罩，并将个人

物品放入个人衣柜内。

2、更衣完成后需洗手消毒并穿戴一次性手套。

3、严禁将食物、饮料等易造成微生物污染的物品带入净化车间

内。

4、每天下班前需整理净化车间内卫生，所有接种用具均应摆放

在指定位置，及时打扫工作台及地面卫生。

5、下班时，将鞋套、一次性手套丢入更衣室垃圾桶内，净化

服、帽子等放置在个人物品柜内，净化服不得带出车间。6、车间内垃圾、废料须每天清理，垃圾归整后统一倒入楼下垃圾箱

内。

二、生产操作标准

1、培养基制备及灭菌所有培养基配制必须按照培养基配方

所要求药品、比例配制，不得私自更改配方或药品比例。灭

菌过程必须严格按操作方法要求执行。

操作方法：

（1）称量：按培养基配方比例依次准确的称取配方药品放入烧杯中。

（2）熔化：在上述烧杯中先加入少于所需要的水量，用玻璃棒搅拌均匀，然后在石棉网上加热使其溶解。药品完全

溶解后，补充水到所需的总体积。

（3）调节PH：在为调节PH前，先用PH试纸测量培养基的原始PH，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L

NaOH,边加边搅拌，随时用PH试纸测其PH，直至PH达

到所需值。反之，用1mol/L HCl进行调节。

（4）液体分装：分装三角瓶的量根据需求而定，一般以不超过三角瓶容积的1/2为宜。

（5）加塞：在培养基分装完毕后，在三角瓶扣塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染。

（6）包扎：加塞后，在棉塞外包一层牛皮纸并用麻绳扎好，以防止灭菌时泠凝水湿润棉塞。用记号笔注明培养基名

称、组别、配制日期。

（7）灭菌：将上述培养基以0.1MPa，121℃,30min高压蒸汽灭菌。

2、菌种扩培

（1）左手持冬虫夏草菌斜面培养物，右手持接种环，按下图A方法将接种环进行火焰灼烧灭菌（烧至发红），然后

在火焰旁打开斜面培养物的试管塞，并将试管口在火焰

上烧一下（注：此过程需在超净工作台内完成）。

（2）在火焰旁，将接种环轻轻插入斜面培养物试管的上半部（此时不要接触斜面培养物），至少冷却5s后，挑起适量

培养物后，再烧一下管口，盖上管帽并将其放回试管架

中。

（3）用左手迅速拿取装有已灭菌培养基的三角瓶，在火焰旁取下瓶口棉塞，瓶口在火焰上烧一下，将沾有少量菌苔

的接种环迅速放进三角瓶中（注意：接种环不要碰到试

管口），并在三角瓶液体培养基中均匀搅拌。完成后，

同样烧一下瓶口，盖上棉塞，将接种环在火焰上灼烧后

放回原处。将接种好的三角瓶放入摇床培养。

（4）菌种扩培时摇床参数控制设置摇床温度为20-22度，摇床转速适当，遮光培养。摇床培养时间约一周。

（5）待观察到培养瓶中，培养基略微浑浊，肉眼可见大量菌球形成时，摇床培养结束即可进行接种。

3、蚕蛹接种

（1）接种蚕蛹准备：蚕蛹去除茧壳后，清水洗涤干净，晾干再使用75%酒精泡洗或用沾有75%酒精的脱脂棉擦洗杀

菌，杀菌后晾干备用。

（2）接种使用一次性注射器，接种前仔细检查蚕蛹质量，不得使用病死蛹或体质较差的蚕蛹等。接拿蚕蛹时需轻拿

轻放。

（3）接种时，左手拿蛹右手拿注射器进行注射（注射位置为蚕蛹软体部分）。注射器内预先吸取适量的菌液。

（4）接种量：接种菌液量约0.3ml ，体型较大的蚕蛹可适当增加接种量。

4、硬化

（1）接种完成后将接种好的蚕蛹放置在蚕蛹硬化框内，不得叠放、挤压放置，蚕蛹之间留有2cm-3cm间隙。一个框放满后通过传递窗传出放置到硬化室避光培养。

（2）硬化室培育温度控制为20℃左右，周期约20天。

硬化刚开始1-5天，避光，15℃-18℃，空气湿度控制

60%。6-20天提温到20℃-23℃培育。硬化期每天通风

1-2次每次20-30min。

（3）培育期，需每天填写虫草培育记录，详细填写各项环境参数以及蚕蛹硬化情况。

（4）进入硬化程序两天后，要逐一检查蚕蛹硬化情况，发现未硬化或是已经变质腐烂、病变蚕蛹，必须及时将腐

烂、病变蚕蛹挑拣出来，以防止感染其它蚕蛹。

5、培育

（1）接种后的蚕蛹经约20天硬化后转移至培育室内进行培育。转移时将蚕蛹由硬化框内取出放置在无菌盒内盖上

盖子（注意：不能叠放、挤压放置）。

（2）培育室环境因子控制：白天增加光照，打开墙面补光灯补充光照14小时，空气湿度保持在60%。晚上关灯10

小时，温度10℃。虫草长出后保持温度18℃-22℃，空

气湿度80%-90%，必要时可向地面喷水增湿。光照期间

应每隔4个小时调换内外侧无菌盒位置，并翻动蚕蛹使

其受光均匀。

（3）子实体生长期需要通风增氧，昼夜要有5℃-7℃的温差。并控制好温度、湿度等环境参数。