微生物的实验室培养学案(有答案

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专题二微生物的培养和应用

课题1微生物的实验室培养

【目标定位】

了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。

【自主预习】

1

2

3

(一)

1

2

3

4

(二)

1

2

并维持min

时打开锅盖，其目的是防止。

三、实验操作----大肠杆菌的纯化培养：

本实验所用的培养基是，本实验可分成和

两个阶段进行。

（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基

1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是：

、、、、。

〖思考5〗在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？

〖思考6〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？

2．倒平板：待培养基冷却至℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。

其过程是：

①在火焰旁右手拿，左手；

②使锥形瓶的瓶口；

③左手将培养皿，右手，立刻盖上皿盖。

④待平板冷却凝固后，将平板。

〖思考7〗锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？

〖思考8〗平板倒置的目的是什么？

〖思考9〗若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？

（二）纯化大肠杆菌

微生物接种：最常用的是法和法。另外还有穿刺接种和斜

四、2

推。

〖思考11〗系列稀释操作的注意事项是什么？

涂布平板操作：

⑴将浸在盛有的烧杯中。

⑵取少量（不超过），滴加到培养基表面。

⑶将的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却。

⑷用涂布器将菌液地涂布在培养基的表面。涂布时可，使菌液分布

均匀。

四、结果分析与评价

1．培养未接种培养基的作用是什么？，若有菌落形成，说明什么？

2．在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落颜色？形态？

3．培养12h和24h后的菌落大小？；菌落分布位置？原因？

〖思考12〗在某培养基上出现了3种特征不同的菌落是什么原因？

〖思考13〗频繁使用的菌种利用什么法保存？长期保存菌种的方法是什么？

【随堂检测设计】

1．下列关于微生物营养的说法，正确的是

A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B．凡是碳源都能提供能量

c．除水以外的无机物仅提供无机盐 D．无机氮源也能提供能量

2．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌

A．接种针、手、培养基 B．高压锅、手、接种针

C

3．以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是

A

B

C

D

1

A

B

C

D

2.

A．氮源和维生素

C

3

A

B．接种纯种细菌

C

D

4

A

C

5．有关倒平板的操作错误的是

A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰

C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置6．有关平板划线操作正确的是

A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌

B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞

c．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可

D．最后将平板倒置，放人培养箱中培养

7．有关稀释涂布平板法，叙述错误的是

A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释

B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面

C．再放在适宜条件下培养

D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落

8．涂布平板操作需要用到

A．接种环、滴管、酒精灯 B．接种环、移液管、酒精灯C．涂布器、移液管、酒精灯 D．涂布器、接种环、酒精灯

9．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是

A．对比观察培养基有没有被微生物利用 B．对比分析培养基是否被杂菌污染

C．没必要放人未接种的培养基 D．为了下次接种时再使用

10．菌种保藏应控制的条件是

（1）湿度（2）低温（3）干燥（4）有光（5）隔绝空气（6）适当有氧A．（1）（4）（6） B．（2）（3）（6） C．（1）（5）（6） D．（2）（3）（5）

2

3

％以上。

〗糖维生素和有机氮

2：50，锥形瓶，拔出棉塞，迅速通过火焰，打开一条缝隙，将培养基倒入培养皿，倒过来放置〖思考7〗消灭瓶口的杂菌，防止杂菌感染培养基。

〖思考8〗防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。

〖思考9〗不能。空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培养基。

〖思考10〗增大接种面积，保持通气并防止杂菌感染。

答案。二、平板划线 .稀释涂布平板

1通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线，①接种环，烧红。③，消灭试管口杂菌。

④菌液中取出一环菌种。⑥，伸入平板内划3～5条平行线，⑦，第一区划线末端开始向第二区域内，，第五区的划线与第一区划线，⑧，倒置放在培养箱中

〖思考11〗消灭接种环上的微生物，的目的是消灭接种环上残留菌种，防止高温杀死菌种；防止细菌污染环境和操作者。获得由单个细菌形成的标准菌落。

2不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，

①，9mL，灭菌。②，1。③，1

〖思考12〗操作中试管口和移液管应在离火焰1～2cm处。整个操作过程中使用了1支移液管结果分析与评价

1对照，培养基灭菌不彻底。2呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐。3大小不同；菌落

每3～6

【例1、O、N

【例2】

对实

【例3

。待培养基冷却至50

答案：

【例4】解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），所以是正确的；B是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。C 是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。答案：B

基础自测一、1．A 2．C 3．D 4．D 5．C 6．C 7．D 8．D 9．C 10．B。11D。。12。C。13。D。14。B。15。C。16。D。17。B。

二、18．恒温箱菌落生长，菌落生长 19(1)需要灭菌 (2)需要灭菌 (3)需要消毒

20(1)导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。(2)杂菌入侵，获得纯净的培养物。

21．不能因空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个