氨基氮含量测定法

1. 目的：对抗生素的中间体进行氨基氮的测定来进行生产的控
制。

2. 范围：车间化验室
3. 责任：车间QC化验室化验员与技术人员
4. 化验原理：含有NH4+的化合物[（NH4）2 SO4]与甲醛作用，以
等量关系产生H2SO4，以标准碱液滴定能换算出（NH4）2 SO4
含量。

5. 程序：
5.1 样品测试：吸取发酵过滤液2ml于100ml三角烧瓶中，加入10ml蒸馏
水，然后加入甲基红指示剂三滴，0.15mol/L硫酸试剂一滴，以
0.02mol/L氢氧化钠标准溶液滴至红色消失，而呈棕黄色，再加入
18%中性甲醛试剂2ml及酚酞指示剂4-5滴，后用0.02mol/L氢氧化钠标准溶液滴至呈红色终点。

5.2 氨基氮的计算：
mol/L×V×0.014
氨基氮mg/100ml=———————— ×100%
2
公式中：V：指滴定所用的氢氧化钠标准溶液体积（毫升）
mol/L：指氢氧化钠标准溶液浓度
6. 注意事项：
6.1 滴定所用的甲醛每天使用前调节至中性。

6.2 终点观察最好用白色背景。

6.3 发酵后期如果滤液颜色太深，可适量多加一些水使终点清晰。

7. 试剂配制。

7.1 18%甲醛试剂：用500ml浓甲醛加蒸馏水稀释至1000ml即可，
若有黄色沉淀，应过滤后使用，使用前用酚酞指示剂滴定至中性
（本品应易发生聚合作用而结块沉淀，故不应存放于冷冻环
境）。

7.2 0.02mol/L氢氧化钠，由质检科配制。

7.3 甲基红指示剂：取甲基红0.1克加100ml酒精混合均匀即可（变色范围
为PH4.2-6.2，由红色至黄色）。

7.4 酚酞指示剂：取酚酞1g加100酒精，混合溶解即可（变色范围PH8.3-
10.0，由无色至红色）。

7.5 0.15mol/L硫酸溶液：取4.2ml，C.P浓硫酸缓缓注入加蒸馏水
的试剂瓶中，定量至500ml，即可。