蛙心脏神经支配

蛙心脏神经支配

反射时的测定及反射弧的分析

09生物学基地班

陈西茜

【摘要】

选取只毁脑的脊蟾蜍，测量其从接受刺激到做出反应的时间，即为反应时。破坏反射弧的任意部分，如接收器，传入神经，传出神经，都会使得反射不再出现。

蟾蜍的心脏受迷走神经和心交感神经的支配。迷走神经和颈交感神经混合成迷走交感神经干、低频低强度刺激迷走交感神经干，产生迷走效应，使得心脏搏动停止。中等频率和强度的刺激会造成先迷走后交感的双重效应。阿托品可封闭迷走神经对心脏的影响，只表现出交感神经使心搏增强的效应。

【实验材料】

1.材料：蟾蜍（先毁脑，后毁髓）

2.试剂：1%阿托品，0.5%及1%的硫酸溶液，2%普鲁卡因，任氏液

3.器材：蛙类手术器械，蛙嘴夹（试管夹），滤纸片，棉花，纱布，培养皿（2个），蛙心夹

BL420E+生物机能实验系统，张力换能器，保护电极

【实验内容】

一．反射时的测定及反射弧的分析

原理：

1.反射弧是反射的结构基础和基本单位。反射是在中枢神经的参与下，机体对内外环境变化所产生的具有适应意义的规律性应答。

反射弧包括五部分：感受器，传入神经，神经中枢，传出神经，效应器。如下图：

图一：反射弧模式图

屈腿反射和搔扒反射的神经中枢都在脊髓，其效应器位于皮肤上。外界刺激的信息转变为神经的兴奋活动变化，沿传入神经传至中枢，再沿传出神经传至效应器，作出相应的反应。反射弧的任意一个部分被破坏都不能使反射反应发生。

2.普鲁卡因的作用机理：普鲁卡因是一种局部麻醉药。能使细胞膜稳定，降低其对离子的通透性，使神经冲动达到时，钠、钾离子不能进出细胞膜产生去极化和动作电位，从而产生局部麻醉作用。

方法：

1.去蟾蜍，毁脑，制备脊蟾蜍。将右侧股部皮肤剪开一个小口，分离出坐骨神经，穿线备用

2.用试管夹夹住蟾蜍下颌，悬挂于支架上。将蟾蜍的右后肢的最长趾浸入0.5%的硫酸溶液中2-3mm，立即记下时间，当出现屈反射时，则停止计时，此为屈反射时。用同样的方法测定左后肢最长趾的屈反射时。

3.用手术剪自右后肢最长趾基部环切皮肤，然后再用手术剪剥净长趾上的皮肤。用硫酸刺激去皮长趾记录结果。

4.改换有后肢有皮肤的趾，将其浸入硫酸中，测定反射时，记录结果。

5.取一浸有1%硫酸溶液的滤纸片，贴于蟾蜍右侧腹部，记录搔扒反射的反射时。

6.用一细棉条包住分离出的坐骨神经，在细棉条上滴几滴2%普鲁卡因溶液后，每隔2分钟重复步骤2（记录加药时间）。

7.当屈反射刚刚不能出现时(记录时间)，立即重复步骤4。每隔2分钟重复一次步骤4，直到搔扒不再出现为止（记录时间）。记录加药至屈反射消失的时间及加药至擦或抓反射消失的时间，并记录反射时的变化。

8.将左侧后肢最长趾再次侵入0.5%硫酸溶液中（条件不变）记录反射时有无变化。毁坏脊髓后再重复实验，记录结果。

二：蛙类心脏的神经支配：

原理：

蛙和蟾蜍的心脏受迷走神经和心交感神经的双重支配。它们的迷走神经和颈交感神经混合成一个神经干，称迷走交感神经干。在正常情况下，迷走神经兴奋时，心脏搏动减弱减慢；交感神经兴奋时，心脏搏动增强加快。由于迷走神经的兴奋性较高，因而低频低强度电刺激迷走交感干时，多产生迷走效应；高频高强度刺激时，易产生交感效应；中等频率和强度的刺激，往往表现为先迷走后交感的双重效应。若在心脏处滴加阿托品，可封闭迷走神经对心脏的影响，而表现为单纯的交感效应。

阿托品是迷走神经末梢释放的乙酰胆碱的M型乙酰胆碱受体的阻断剂，心脏组织富含的乙酰胆碱酯酶可将神经末梢释放的乙酰胆碱快速水解，使迷走神经活动停止。

步骤：

1.将上实验的蟾蜍固定在蛙板上。在一侧下颌角与前肢之间剪开皮肤，分离深度的结缔组织后，可以看到一条长形的提肩肌，切断此肌即能看到一血管神经束，其中含有皮动脉，颈静脉和迷走交感神经干，该神经干中包含出入延髓的迷走神经和从第4交感神经发出的交感神经。分开血管神经束，用玻璃解剖针提起迷走交感干，穿线备用。

2.暴露心脏，用蛙心夹夹住心尖，连接张力换能器和BL420E+。保护电极仔细安装在迷走交感神经干上。

3打开系统，描记一点正常的心搏曲线，然后用连续脉冲刺激迷走交感神经干5s左右，观察和记录心搏活动的变化。不断增强连续刺激的频率和强度，重复试验，观察心搏曲线的变化。

4.在静脉窦和心房部位加1%的阿托品溶液2-3滴。5分钟后，再刺激神经干，观察并记录心搏活动的变化。

【实验结果】

一．反射时的测定及反射弧的分析

（1）

(2）加普鲁卡因后：（加药时间记为0）

（3）毁坏脊髓后，所有反应消失。 二．心脏的神经支配

不同频率和强度的刺激下，心搏曲线如下： （1）低频刺激：只出现迷走效应

测量项目

刺激部位 反射类型

结果（s ） 0.5%硫酸刺激

右脚最长趾 屈腿反射 3.90s 左脚最长趾

2,62s 环剥皮肤后的右脚最

长趾 无反应 右脚有皮肤趾

6.23s 1%硫酸刺激

腹部右测

搔扒反射

5.63s

测量项目 时间（min ） 屈腿反射消失时间 3min40s 搔扒反射消失时间

19min40s

图二（1）-1：10Hz，3V 图二（1）-2:70Hz，9V

图二（1）-3:130Hz，15V

（2）至刺激频率150Hz，电压强度达17V时，可以观察到先迷走后交感的反应。

图二（2）：150Hz，17V

（3）滴加阿托品后，可以观察到迷走效应消失。但此时的交感作用变得不明显。