猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较分析

猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较1猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较1目录1

猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较3

1 目的3

2 材料与方法3

2.1 材料3

2.2方法4

2.2.1动物分组说明4

2.2.2动物分组与试验操作概表5

2.2.3免疫6

2.2.4 疫苗免疫后临床症状观察记录7

2.2.5 疫苗免疫后血清抗体及分型检测7

2.2.6 疫苗免疫后细胞免疫指标检测7

2.2.7 疫苗免疫后黏膜免疫指标检测7

2.2.8攻毒7

附录1 攻毒保护率计算9

附录2 猪支原体肺炎发病猪临床症状评判标准10附录3 动物分组记录表10

附录4 动物免疫记录表12

附录5免疫后异常临床症状观察记录表12

附录6 抗体检测记录表13

附录7 淋巴细胞增殖试验结果15

附录8 血象分析15

附录9 T淋巴细胞分类计数15

附录10 黏膜抗体检测记录表15

附录11攻毒记录单15

附录12特殊情况记录表16

附录13 攻毒后临床症状观察记录表17

附录14日增重记录18

附录15 攻毒后肺部剖检记录20

附录16攻毒后剖检记录22

附录17 攻毒后肺部病理损伤记录24

附录18 攻毒后肺部猪肺炎支原体抗原定量检测26

猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较

1 目的

猪支原体肺炎活疫苗AN306菌株与原168菌株的肺注射免疫效果比较；

猪支原体肺炎疫苗（天邦、正业、辉瑞）免疫效果比较；

2 材料与方法

2.1 材料

2.1.1待试的疫苗产品与试剂

2.1.1.1 疫苗

A.猪支原体肺炎活疫苗AN306株F321，由省农业科学院兽医所研制，规格为2×107CCU/瓶（2ml冻干），批号为20140325。有效期：______。PCR鉴定:Mhp_____，Mhr_______。

B.猪支原体肺炎活疫苗（168株），由天邦生物科技提供，规格为50头份/瓶，批号为139078-1。有效期：______。PCR鉴定:Mhp_____，Mhr_______。

C.猪支原体肺炎活疫苗（乳兔继代株），由正业生物科技提供，规格为4头份/瓶，批号为2014002。有效期：_20150110__

D.猪支原体肺炎灭活疫苗（P-5722-3株，Suvaxyn RespiFend MH），由硕腾（辉瑞）提供，规格为50头份/瓶，批号为1302777A。有效期：15/11/16_

2.1.1.2 试剂

A．猪支原体肺炎活疫苗（乳兔继代株）稀释液,批号：2014002；有效期：20170115 B．猪支原体肺炎雾化活疫苗稀释液

C．猪支原体肺炎肌注活疫苗佐剂G-1-1

2.1.2动物

选择猪肺炎支原体抗体、抗原均阴性的5-10日龄仔猪，54头.

饲养地点：省农科院兽医所

饲养员：_徐飞扬，才__

仔猪免疫状况：未打气喘病疫苗。

2.1.3 动物饲料

仔猪料:

2.1.4 设备

气雾免疫设备、滴鼻头、20（10、5、2）ml注射器、耳标、耳号钳、冰盒、相机、解剖器械、离心管。

2.1.5攻毒用强毒

猪肺炎支原体强毒JS株组织强毒，来自本所，批号20130625，-20℃保存，有效期至：2014/06/25。

2.2方法

2.2.1动物分组说明

G1:-猪支原体肺炎活疫苗168株肺免疫组。

每头猪肺注射免疫1头份（1ml）即1×107 CCU的猪支原体肺炎活疫苗168株。

免疫一次，一免后6周攻毒，攻毒后28天剖杀。

G2: -猪支原体肺炎活疫苗AN306株肺免疫组。

每头猪肺注射免疫1ml，即1×107CCU的猪支原体肺炎活疫苗AN306株。免疫一次，6周后攻毒，攻毒后28天剖杀。

G3: -猪支原体肺炎活疫苗168株气雾免疫组。

每头猪气雾免疫5×107CCU的猪支原体肺炎活疫苗168株。免疫一次，6周后攻毒，攻毒后28天剖杀。

G4:-猪支原体肺炎活疫苗168株肌注免疫组。

每头猪肌肉注射免疫5×107 CCU的猪支原体肺炎活疫苗168株。首免后两周二免，一免后6周攻毒，攻毒后28天剖杀。

G5: -猪支原体肺炎灭活疫苗肌注免疫组。

每头猪肌肉注射免疫1头份(2ml)猪支原体肺炎灭活疫苗。首后2周，加强免疫一次，首免后6周攻毒，攻毒后28天剖杀。

G6:-猪支原体肺炎乳兔活疫苗胸腔免疫组。

每头猪胸腔注射免疫1头份（5ml）猪支原体肺炎乳兔活疫苗。免疫一次，一免后6周攻毒，攻毒后28天剖杀。

G7: -猪支原体肺炎乳兔活疫苗滴鼻免疫组。

每头猪滴鼻免疫？头份猪支原体肺炎乳兔活疫苗。免疫一次，6周后攻毒，攻毒后28天剖杀。

G8: -健康对照组（不免疫，不攻毒）。

不接种疫苗。不攻毒，其它组攻毒后28天剖杀。

G9: 攻毒对照组（不免疫，只攻毒）。

不免疫疫苗，只攻毒，攻毒后28天剖杀。

2.2.2动物分组与试验操作概表

2.2.3免疫

G1—猪支原体肺炎活疫苗168株肺免疫组

用灭菌生理盐水50ml溶解168活疫苗冻干粉1瓶，使活疫苗终浓度为1

×107 CCU/ml，1头份/ml。每头猪肺免疫1ml，即1×107 CCU/头。

G2—猪支原体肺炎活疫苗AN306株肺免疫组

用灭菌生理盐水溶解AN306活疫苗冻干粉，使活疫苗终浓度为1×107

CCU/ml。每头猪肺免疫1ml，即1×107 CCU/头。

G3: -猪支原体肺炎活疫苗168株气雾免疫组。

将1瓶168株活疫苗用5ml无菌猪支原体肺炎雾化活疫苗稀释液溶解稀释成1×108CCU/ml浓度，取5ml疫苗溶液倒入喷雾器，对保温箱中的6头仔猪进行气雾免疫（0.2MPa，约10min）。

G4:-猪支原体肺炎活疫苗168株肌注免疫组。

将1瓶168株活疫苗用25ml佐剂G-1-1溶液稀释成2×107CCU/ml浓度，每头仔猪颈部肌肉注射免疫2.5ml，注射时分左右侧肌肉共2个注射点。首免后14天二免，方法同上。

G5: -猪支原体肺炎灭活疫苗肌注免疫组。

按猪支原体肺炎灭活疫苗说明书，每头猪肌肉注射免疫1头份猪支原体肺炎灭活疫苗。

G6:-猪支原体肺炎乳兔活疫苗胸腔免疫组。

按猪支原体肺炎乳兔活疫苗说明书，每头猪胸腔免疫1头份猪支原体肺炎活疫苗。

G7: -猪支原体肺炎乳兔活疫苗滴鼻免疫组。

每头猪滴鼻免疫？头份猪支原体肺炎乳兔活疫苗。免疫一次，6周后攻毒，