化学检测实验室的方法验证与确认

化学检测实验室的方法验证与确认

化学检验实验室主要依靠准确掌握检验方法和掌控测试结果的有效性两个方面来保障检测结果的准确性，通常对检测方法的控制要求有两个控制理念，分别为方法验证和方法确认。一部分实验室工作人员在进行检测时，不区分标准方法和非标准方法，直接使用同一种方式和操作方法进行检测，这就会在实验室检测标准技术方面出现很大的不确定度，影响检测结果的准确性。

标签：化学检测；实验室；方法验证；确认

1 方法验证和确认的定义

“方法验证”对应于英文单词“Verification”，ISO对其定义为“通过检查并提供客观证据，验证规定要求得以满足”。通过方法验证可证实方法适用于其预期目的的过程。确认包括研究性能特征，如：准确度、特异性、检出限、定量限、線性度、范围、耐用性和稳健性。“方法确认”对应于英文单词“Validation”，根据ISO，其定义为：“通过考察和提供客观证据，确认是否能满足某个特定预期用途的特殊要求”，即：方法确认需要“确认某个特定的分析方法能满足分析目的。”换句话说就是“表明一个规定的方法协议，适用于某个特定类型的测试物料，以及待测物特定的浓度水平”。通过方法确认可证实一个实验室有能力重复已确认的方法，同时方法能够达到可接受的性能水平。从方法确认和方法验证两者的定义可知，如果一个实验室希望使用某一标准方法（已通过协作研究被全面确认），则应开展方法验证。而某一实验室需要研发一个新方法或使用非标方法时，则应进行方法确认。

2 方法验证和确认的实施程序

2.1 方法验证的实施程序

一般来说，进行方法验证有以下几种情况：①采用标准方法前；②对已确认方法进行了细微改变时（例如：使用了不同厂家的相同类型的色谱柱、改变了样品稀释倍数等）。FDA实验室手册规定，对标准方法的性能验证可分为两种情况：①批量分析情况下的性能验证；②实验室首次使用标准方法前的验证。而前者更多意义上是属于内部质量控制的范畴。在方法验证过程中，需要考虑哪些关键参数，取决于方法的性质和可能遇到的样品类型。首先，应考察偏倚和精密度是否满足定量方法的最低要求。痕量分析则需要验证检出限（LimitofDetection，LOD）和定量限（LimitofQuantification，LOQ）是否满足要求。对于定性方法，必须通过方法比对，考察与现有已确认方法的相关性。理想情况下，实验室应证明所获得的方法性能数据满足方法要求。如果不能满足，则应判断该实验室是否可以应用此方法，产生真正符合预期目的的结果。

2.2 方法确认的实施程序

当需要确定一个方法的性能参数，是否满足解决特定分析问题的要求时，则需要对方法进行确认，具体情况有：①研发新方法；②修改已有方法，以满足新的分析要求；③实验室、使用的仪器或分析员与已有方法的规定不同；④比较两种方法是否等效。例如：新方法和标准方法。方法确认总是和一个特定的“分析系统”有关，因此只要分析系统里的任一构件发生变化，或者当已建立的方法体系不能充分地满足需求时，都需要对方进行“再确认”。

3 化学检测方法与参数的确认

3.1 方法的校准曲线

在进行化学检测实验室方法校准曲线过程中，校准曲线包含的工作范围至少要包含5个检测点，对于筛选方法，相关系数不应低于0.98，对于确证方法，线性回归方程相关系数不得低于0.99。

3.2 方法的回收率

回收率主要表示在检测过程中所获得测试结果的准确性程度。影响回收率试验结果的主要因素之一是被测物浓度的变化，因此，在进行实验验证过程中，对于禁用物质，回收率应在方法测定低限、两倍方法测定低限和十倍方法测定低限进行试验；对已制定的最大化学残留量，回收率应在方法测定低限、最大化学残留量、随机选点进行试验；对于未明文规定的化学残留量标准，应在方法测定低限、常见限量指标、随机选点进行试验。

3.3 方法的特异性

实验室在使用非标方法、实验室设计等方法时，仅依靠色谱分析的技术手段不能够准确的区分同一种分子量物质，因此需要使用方法特异性来进行确认。对于能够准确定量检测的方法要保证检测结果的准确性，避免对异构体结果出现误判。根据待测物的化学结构，使用分子光谱等其它检测技术，最终可以达到方法的特异性检测需求。

3.4 方法的抗干扰性和耐用性

实验室采用的非标准方法应具有一定的抗干扰性，即对外界环境及其它影响因素对检测的影响具有一定得抗干扰性能；在测试条件在一定条件及范围内发生变动时，检测方法应具有一定的容错功能，保证测试结果不出现大的波动改变。检测方法的技术设备、操作过程等应在多数环境条件下具有适用性和耐用性，不宜具有苛刻的使用要求。

在实验室检测工作中，方法确认和方法验证是开展检测工作的前提条件和基本要求，应纳入实验室质量体系范畴，即制定相应的程序文件和作业指导书。目前，关于该类工作的要求规范众多，在实际工作中，各家实验室应根据自身的特点，分析检测目的，客户的要求等，确定方法确认和验证的具体做法。本文基于

定义、实施条件、具体实施过程等，详细说明了方法验证和确认的区别，以及方法验证和确认过程中，需要考察的基本方法性能参数。

参考文献：

[1]曹剑君，赵文平.浅谈实验室检测方法及其确认[J].机电工程技术，2011（7）：147-149.